Способ получения энтомопатогенного биологического препарата

 

Использование: изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано для борьбы с колорадским жуком, озимой совкой и другими видами насекомых . Сущность: способ получения энтомопатогенного биологического препарата заключается в разведении насекомого-хозяина Agrotls segetum S. при определенных лабораторных режимах и корме, заражении гусениц нематодами Prlstlonchus unlformis и последующем приготовлении концентрированного препарата, 3 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

„„Я „„1822691 А1 (st)s А 01 К 67/00

ГОСУДАРСТВЕН.ЮЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) 4МНЯ

" .гя

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

K АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ культуры для выращивания гусениц озимой совки используют стерильную торфяную почву при температуре 26-28 С, относительной влажности воздуха 60 — 80 и длине светового дня 16-18 ч.

Пример. Способ включает поточное круглогодичное разведение озимой совки, заражение гусениц, сбор погибших насекомых и культивирование в них нематод, сбор нематодной биомассы, концентрирование, стандартизацию и хранение нематодной суспензии. В качестве садков для культивирования озимой совки используют вазоны для выращивания растений с верхним диаметром 120 и нижним диаметром 85 мм и высотой 115 мм или садки других размеров, Емкости устанавливали попарно один над другим. стыкуя широкими отверстиями, 8 нижние вазоны насыпали 50 — 200 г впажной

t5-20 стерильной почвы. на которую уста(21) 4904498/13 (22) 22.01.91 (46) 23.06.93. Бюл. N. 23 (71) Научно-исследовательский институт картофельного хозяйства (72) Л.Я. Костина, Н.В. Жевайкина. П,П, Макаров. Ю.А. Масюк и И.Н. Жиляева (56) Использование нематод в борьбе с колорадским жуком.

Информационный бюллетень ВПС

МОБ Б — Международная органиэация по биологической борьбе с вредными животными и растениями. 1987, l4 18, Ленинград, с.

52-54.

Изобретение относится к микробиологической промышленности и может быть использовамо при борьбе с колорадским жуком, озимой совкой и другими видами вредителей.

Целью изобретемия является повышение выходе продукта и снижение его себестоимости.

Способ предусматривает разведение насекомого-хозяина на искусственном корме. заражение гусениц нематодами и приготовление препарата, причем для наработки препарата при поточном круглогодичном разведении используют нематоды

Pristlonchus unlformls. которыми заражают гусениц озимой совки Agrotis segetum Sch.. а в качестве корма для гусемиц используют картофель, морковь. пшеничные отруби и воду с добавками витаминов — аскорбиновой и фолиевой кислот. в качестве субстрата (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЭНТОМОПАТОГЕННОГО БИОЛОГИЧЕСКОГО ПРЕПАРАТА (5?) Использование: изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано для борьбы с колорадским жуком, озимой совкой и другими видами насекомых, Сущность: способ получения знтомопатогенного биологического препарата эакпючаетгя в разведении насекомого-хозяина Agrotls segetum S. при определенных лабораторных режимах и корме, заражении гусениц нематодами Prlstlonchus unlformls и последующем приготовлении концентрированного препарата, 3 табл.

1822691

55 нэвливали поилку (донышко или крышку пластмассовой чашки Петри @ 40 мм), а нэ нее помещали ватный тампон, смоченный сахарным сиропом (5 -ный водный раствор). На землю помещали по 5 куколок озимой совки (2 самки — 3 самца), потемневших перед вылетом бабочек на 12-14 день инкубации. В каждую пару сэдков помещали листы фильтровальной бумаги, сложенные в виде гармошки, на которые самки откладывали яйца в течение 10 — 14 дней.

После начала откладки бабочками яиц в чистые вазоны насыпали стерильную сухую землю. Поверх земли насыпали тонкий слой сухих пшеничных отрубей (5-10 г). Туда помещали поилки-донышки. чашек Петри с ватными тампонами, смоченными раствором витаминов(0,001 аскорбиновой кислоты и

0,0001 фолиевой кислоты, растворенных в воде). В каждую пару вазонов помещали по

1 гармошке из фильтровальной бумаги с яйцами, отложенными самками в течение

1-2 суток (100-300 яиц). Отроди вшиеся гусеницы зарываются в землю и выходят питаться ночью.

По достижении гусеницами 4 — 5 возраста их рассаживают по 5-7 особей в каждую пару вазонов и выращивают до окукливания, так же и младшие возраста. Гусеницы в почве окукливаются в колыбельках из склеенных частиц почвы. Куколок вынимают иэ почвы и инкубируют в чашках Петри на влажной почве до потемнения имагинальных дисков. При массовом выращивании при температуре 26 — 28 С, относительной влажности воздуха 60-80, влажности почвы 10-15ф, и длине светового дня 16-18 ч, освещенности 1200 лк. гусеницы достигают

3 — 4 возраста (возраста наиболее пригодного и благоприятного для заражения нематодами) через 15 — 17 суток после внедрения в землю после отрождения.

Выбор основных параметров развития озимой совки осуществляли следующим образом.

Изучали влияние корма, субстрата для обитания насекомых и физических факторов при разведении озимой совки. В табл. 1 представлены результаты исследований по влиянию корма и субстрата на выход конечного продукта.

В табл. 2 представлены результаты исследований по влиянию корма, субстрата и физических факторов на активность озимой совки.

Таким образом, наиболее благоприятными из испытанных параметров можно считать сочетание следующих факторов: влажность почвы — менее 15, влажность воздуха 60-80;ь, температура воздуха 265

28 С, освещенность 1000-1200 лк и длина светового дня 16-18 ч. Освещенность необходима для беэдиапаузного развития гусениц. При изменении режима освещенности гусеницы впадают в спячку и погибают. Торфяная почва оказалась более благоприятная для содержания гусениц,чем гумусная.

Наиболее благоприятный корм — сухие пшеничные отруби с подкормкой морковью, картофелем и раствором витаминов (аскорбиновая и фолиевая кислота).

Гусениц, отобранных для заражения, инваэировали нематодами иэ расчета 50100 личинок/гусеницу. Гибель насекомых от заражения наступала на 2-3 сутки после заражения. Заражение осуществляли в чашках Петри по 10-20 особей в каждой. Инокулюм наносили в водном растворе нэ фильтровальную бумагу, которой выстилали донышки чашек Петри, прежде чем поместить туда гусениц.

Погибших насекомых, инвазировали нематодами, раскладывали на платформы иэ перевернутых (меньшего размера) чашек

Петри, обернутых фильтровальной бумагой, которые помещали в чашки большего диаметра с на дне. Воду с отловленными нематодами сливали ежедневно. Нэ каждую платформу помещали по

10-15 особей.

Суспензию нематод отстаивали в течение суток, сливали супернатан и добавляли формалин в количестве 0,01ь, после чего хранили в течение 1 — 1,5 года в холодильнике при температуре -4-6 С.

Сравнительная характеристика наработки препарата на предлагаемом объекте и личинках большого мучного хрущака представлены в табл. 3.

Формула изобретен и я

1. Способ получения энтомопатогенного биологического препарата, включающий разведение насекомого-хозяина, заражение гусениц нематодами и последующее приготовление препарата, о т л и ч а ю щ ий с я тем, что в качестве насекомого-хозяина используют Agrotls segetum S, а для заражения гусениц используют нематоды

Prlstlonchus unlformls.

2. Способ по и. 1, отличающийся тем, что при разведении Agrotls segetum S. используют в качестве корма картофель, морковь, пшеничные отруби и воду с добавлением витаминов - аскорбиновой и фолиевой кислот.

3. Способ по и. 1. отличающийся тем, что разведение гусениц Agrotfs

segetum S. осуществляют при температуре

1822691 качестве субстрата испол ьзуют стерил ьную торфяную почву.

Таблица!

26 — 28 С, относительной влажности воздуха б0-80$, длине светового дня 16-18 ч, а в

Влияние корма и субстрата на повышение выхода продукта

Выживаемость до

Выход конечного

Параметры

Количество немаВес гусениц, Г

VI возраста, продукта, Ягаровый корм (среда Борисовой) 60

69,5

Беэагаровый (6П-10) 75

101,3

105

Порошковый (беэ подкормки) 40

27,0

21,9

0,7

Порошковый + витамины

1СЗ 6 81 0

1,4

100

Порошковый М картофель + HopKc)Fb + витамины C и С, (предлагаемый) 78

117, С 91,5

113

1,5

Субстрат

Сухие г1шеничные отpyb v.

112,0 87,6

80 со оО

1 3

1,5

Таблица2

Вливние корма, субстрата и физических факторов на развитие и активность озимой совки

Паране ктилность гусениц е баллах "

Агаровый корм (среда Борисовой) 48

Безагаровый корм (БП-10) 1100

374 394

330 420

1360

Порошковый кори (отруби) без подкормки 28

730

276 310

Пороаковый корм (отруби) с подкормкой витаминами С и Вс 66

1396

3Еь 430

Гумус :. почва

Торфяная почва

Вес гусениц со

100 яиц, г

11ч,0

135,0 тод со

1СО яиц оэи мой сов ки млн!

56,3

82,1

8р

105, 5

108, 1

110,0

130,4

1822691

Продолжение табл.2

Поровковый корм (отруби) с подкормкой витаминами С и Ос+

+картофель + морковь 68

1460 405 468

Субстрат для обитания насекомых

Сухие пюеничные отру би 62

388 425

37" 425

402 462

1296

1472

Гумусная почва 66

Торфяная почва 68

Физические факторы

Олажность почвы, а

68

56

10-15

280 332

236 305

166 270

1124

15" 25 свыае 25

731

475

Олажность воздуха, Ф

20-60

208 305

326 360

318 332

54

060

60-80

102 1

80-100 о

Температура воздуха, С

1220

10-15

16-17

18-23

24«25

26 28

29-30

Освеценность, лк

335 342

343 360

332 338 менее 1000

1000"1200Р, свыюе 1200

53

63

1 114

1092

Длине дня, ч

14-16

366

396

308

424

430

921

1460

16-18

18-.20

69 ееа а

»

П р и м е ч а н и е. 1 - балл — гусеницы вялые, передвигаются с трудом, 2 ." гусеницы передвигаются медленно, при прикосновении не пытаются бежать

3 - гусеницы быстро передвигаются, при прикосновении пытаются убежать

« » остальные параметры во всех вариантах опыта:субстрат - торфяная почва; кормотруби с подкормкой витаминамн + картофель, морковь

16

23

41

68

268

472

1403

960

150 163

224 245

343 364

374 407

362 430

1 0 220

1822691

Таблица 3

Сравнительная характеристика использования разных видов насекомых для воспроизводства пристионхус

Составитель 6.Писарев

Техред М.Моргеитал Корректор Л.Филь

Редактор

Заказ 2164 Тираж Подписное

8НИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035. Москва, Ж 35, Рауиюская наб.. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина. 101