Способ оценки устойчивости томатов к альтернариозу

 

Использование: сельское хозяйство, овощеводство, фитопатология. Сущность изобретения: устойчивость томатов к альтернариозу определяют по относительному проценту длин пыльцевых трубок в опыте и контроле, при этом определение ведут путем проращивания пыльцы на питательной среде, содержащей экстракт культуральной жидкости патогена. 2 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)з А 01 Н 1/04

ГОСУДАРСТВЕН1ОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4918657/13 (22) 25.01.91 (46) 3().06.93. Бюл. N. 24 (71) Институт экологической генетики АН

ССРМ и Молдавский научно-исследователь ский институт овощеводства (72) Л.Г.Мелиян, Е.И.Садыкина, Н.Н.Балашовэ. Е.С.Демидов и О.Б.Дараков (56) Дорожким Н.А, и др. Селекция ма иммунитет. // Проблемы иммунитета сельскохозяйственных растений к болезмям. Минск:

Наука и техмика, 1988, с. 136-195.

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в честности к селекции растений на иммунитет к фитопатогенам, Цель изобретения — ускорение и упрощение оценки при сохранении селекционного материала.

Способ заключается в том, что пыльцу растений томатов проращивают на питательной среде в присутствии экстракта культуральной жидкости гриба alternarla solani u устойчивость определяют по относительному проценту длин пыльцевых трубок в опыте и контроле, при этом при значении данного показателя 60ф, и выше исследуемые генотипы оценивайт как устойчивые, при значении 30-60 — как умеренно пораженные и при значении менее 30 — как восприимчивые, Пример. Для получения препарата токсичных метаболитов гриб выращивают в погруженной культуре на среде Чапека-Докса. Для этого в колбы Эрленмейера емко„„ЯЦ „„ 1824112 А1 (54) СПОСОБ ОЦЕНКИ УСТОЙЧИВОСТИ

ТОМАТОВ К АЛЬТЕРНАРИОЗУ (57) Использование: сельское хозяйство. овощеводство, фитопатология, Сущность изобретения: устойчивость томатов к альтернариозу определяют по относительному проценту длин пыльцевых трубок в опыте и контроле, при этом определение ведут путем проращивания пыльцы на питательной среде, содержащей экстракт культуральной жидкости патогена. 2 табл. стью 300 мл наливают по 150 мл среды, автоклавируют 40 мин при 0,5-0,6 атм. избыточного давления, затем после охлаждения инокулируют мицелиальными дисками диаметром 10 мм. Диски вырезают у краев

7-10 суточных колоний на агайизованной среде Чапека-Докса. Колбы с грибом помещают на роторные встряхиватели при 90120 об/мин. Спустя 12 суток инкубации при комнатной температуре, отфильтровывают культуральную жидкость, подкисляют до рН

3,0 — 3.5 и эксрагируют равным обьемом хлороформа. После отгонки хлороформа на роторном испарителе при температуре

30 — 40 С получают неочищенный препарат токсинов А,Solanl. Осадок растворяют в дистиллированной воде, готовят необходимые концентрации культурального экстракта. который используют при осуществлении способа.

Исследования проводили на двух сортах томатов Sub.arctic Мах!и Персей, а ткже на линиях, полученных методом гибридиза1824112 ции: Л 738/84, Л 738/84, Л 778/84, ЛК

30/86. К 30/86. SPF, F1 Союэ4 Л 738/84.

Способ осуществляют следующим образом, С каждого растения выборки (10 образцов) срывают по 1 цветку на одной стадии развития (первый день раскрытия). Отделяют тычиночные колонки от других частей цветка и помещают в пакет из пергаментной бумаги для каждого образца. Пакеты остав- 10 ляют а комнатных условиях для сушки в течение суток, по истечении которых пакеты встряхивают таким образом, чтобы на дно осыпалась пыльца. Пыльцу каждого образца препаровальной иглой высевают на искус- 15 ственную питательную среду, содержащую

15 -ную концентрацию сахэрозы и

0,003 JL-ную концентрацию борной кислоты в дистиллированной воде (контроль) и на среду аналогичного состава, содержащую 20

0,006 -ную концентрацию экстракта культуральной жидкости (опыт), Пыльцу проращивают в термостате при температуре 28 С в течение трех часов. Затем измеряют длину у 100 случайно выбранных пыльцевых тру- 25 бок в опытном и контрольном вариантах.

Определяют среднее значение длин пыль- . цевых трубок для каждого образца в опыте, и контроле, затем вычйсляют относительный процент длины пыльцевых трубок в ЗО опыте по отношению к контролю.

Относительный процент длин пыльцевых трубок определяют следующим обрезам: например, средняя длина пыльцееых трубок линии К ЗО/86 составляет е контроле 35

543,09 мкм а в опыте 217,01 мкм.

riÀÒ 217,0 100 39 96

543,09

Сопоставляют полученное значение и средний балл порожаемости листьев и про- 40 цент больных плодов для всех образцов.

Рассчитывают коэффициент корреляции.

Данные представлены в табл 1 и 2.

Из табл.1 видно, что с увеличением поражаемости растений снижается относи- 45 тельный процент длин пыльцевых трубок, Таким образом, у более устойчивых образцов рост пыльцевых трубок менее подвержен угнетению токсичным метаболитом фитойатогена. О тесной взаимосвязи при- 50 знаков свидетельствует высокий коэффициент корреляции r - -0.84 (при критическом уровне показателя для данной выборки

0,65), т.к. фактически найденная величина превосходит этот уровень, установленная 55 связь достоверна на 57ь-ном уровне значимости, что доказывает возможность использования предлагаемого способа для диагностики устойчивости томатов. Иэ данных таблицы видно также, что если относительный процент роста пыльцееых трубок составляет менее 30 (, то это соответствует сильному поражению образцов, 30-507,— умеренному поражению. а выше 60;(, — устойчивым образцам.

Иэ данных табл.2 видно, что обнаруженная тесная связь признаков (z = -0,78 при критическом уровне показателя 0,68) свидетельствует о высокой точности способа, т.к. порэжэемость плодов является дополнительной характеристикой устойчивости томатов к альтернариоэу.

Использование способа обеспечивает по сравнению с известными способами следующие преимущества.

Ускоряется процесс оценки устойчивости томатов к альтернариоэу, т.к. используется пыльца, а не взрослое растение с 3-х летней оценкой на искусственном инфекционном фоне, Отпадает необходимость применения живых патогенов е полевых условиях, что устраняет опасность распространения болезни. При длительном культивировании на искусственной питательной среде патоген часто утрачивает вирулентные свойства, е то время, как культуральный экстракт является более стабильным.

Создается воэможность оценивать селекцибнный материал до завязывания плодов, не повреждая era. Кроме того, пыльца является самой чувствительной стадией развития растений, при этом экономится время, снижается трудоемкость, т.к. создается воэможность использования выборок порядка

10 -10

Формула изобретения

Способ оценки устойчивости томатов к альтернариоэу, включающий воздействие латогеном на растительный материал и определение устойчивости исследования реакции на патоген по сравнению с контролем, отличающийся тем, что, с целью ускорения и упрощения оценки при сохранении селекционного материала, в качестве растительного материала используют пыльцу, воздействие патогеном осуществляют путем проращиеания пыльцы на питательной среде е присутствии 0,0050,007 мас. экстракта культуральной жидкости гриба Alternarla solani и устойчивость определяют по относительному проценту длин пыльцееых трубок е опыте и контроле, при этом при значении данного показателя 607 и выше исследуемые генотипы оценивают как устойчивые. при Значении

30-60 — как умеренно порэжаемые и при значении мене 30 — как восприимчивые.

1824112

Таблица1

Сравнение устойчивости пыльцы к культуральному экстракту по длине пыльцевых трубок с полевой оценкой устойчивости растений томатов к фитопатогену А.Solanl на искусственном инфекционном фоне по пятибальной шкале, Таблица2

Сравнение устойчивости пыльцы к культуральному экстракту по длине пыльцевых трубок с полевой оценкой поражаемости плодов томатов альтернариозом на искусственном инфекционном фоне

Составитель Л.Мелиян

Техред М,Моргентал Корректор М.Керецман

Редактор З,Ходакова

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород. ул.Гагарина. 101

Заказ 2200 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5