Способ подготовки препарата биологической ткани к исследованию в сканирующем электронном микроскопе

 

Изобретение относится к медицине , а именно к гистологии. Целью изобретения является более полное выявление поверхности клеток. Цель достигается тем, что при инкубации ткани в диссоциирующем растворе ее проводят до появления первых клеток в раств.оре. При этом в качестве диссоциирующего раствора используют 30%-ный водный раствор гидроокиси калия и 96° этилового спирта, взятых в соотношении 1:1. Способ позволяет получить качественные препараты клеток.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (51) G 01 N 1/28

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4851577I14 (22) 16,07.90 (46) 15.07,93. Бюл. ЬЬ 26 (71) Ивановский государственный медицинский институт им. А.С.Бубнова (72) M.Ä.Ðåxòåð, В.А,Колпаков и А.А,Миронов (56) Поляк О.Х„Ван Норден С. — Введение в иммунохимию, Современные методы, M.;

Мир, 1987, 76. (54) СПОСОБ ПОДГОТОВКИ ПРЕПАРАТА

БИОЛОГИЧЕСКОЙ ТКАНИ К ИССЛЕДОВАНИЮ В СКАНИРУЮЩЕМ ЭЛЕКТРОННОМ

МИКРОСКОПЕ

Изобретение относится к медицине, в именно к гистологии и патологической анатомии.

Исследование трехмерной организации органов и тканей имеет важное значение для гистологии и патологической анатомии, т.к. позволяет исследовать межклеточные взаимодействия, взаимодействия между клетками и межклеточным матриксом и их нарушения при патологических состояниях.

Целью изобретения является более полное выявление поверхности и сокращение времени подготовки препарата.

Способ осуществляется следующим образом.

Фиксированные сосуды различного времени фиксации (5 мин. 1 сутки) и с разл ич ной выражен н остью склеротическогб процесса (внешне неизмененный сосуд, атеросклеротическая бляшка) инкубировали в растворе зтоксида калия под микроско„„Яц „„1827566 А1 (57) Изобретение относится к медицине, а именно к гистологии. Целью изобретения является более полное выявление поверхности клеток. Цель достигается тем, что при инкубации ткани в диссоциирующем растворе ее проводят до появления первых клеток в раств.оре. При этом в качестве диссоциирующего раствора используют

30 ф-ный водный раствор гидроокиси калия и 96 этилового спирта, взятых в соотношении 1: 1. Способ позволяет получить качественные препараты клеток. пическим контролем диссоциирующей жилкости. Диссоциация каждого образца прекращалась при появлении клеток в диссоциирующем растворе. Затем образцы отмывались, готовились для сканирующей электронной микроскопии по общепринятой методике и просматривались в электронном микроскопе. .Пример 1. Бионтатинтимы и медии артерий человека в норме и при атеросклерозе (в липидной полосе, липофиброзной и фиброзной бляшке) обработан с использованием заявляемого способа в течение недели, качество препаратов было хорошим.

Используется простой информативный параметр (определение времени появления первых клеток в диссоциирующем растворе), который позвблит в каждом конкретном случае остановить процесс диссоциации в нужный момент. В свою очередь, данный информативный параметр возможен только

182756б

Заявляемый способ позволяет исследовать трехмерную организацию клеток в составе органов и тканей.

Формула изобретения

Составитель Л. Стебаева

Техред M,Mîðãåíòàë Корректор Л. Пилипенко

Редактор

Заказ 2354 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открыиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5 в

Производственно-издательский комбинат "Патент". г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 при исг1ользовании предлагаемого раствора, т.к. концентрированная соляная кислота очень быстро растворяет отщепившимися клетки и не позволяет наблюдать их в фазо.во-контрастном микроскопе в составе диссоциирующего раствора. Этоксид калия неспецифически растворяет все компоненты внеклеточного матрикса, тогда как коллагенеза удаляет лишь коллагеновые волокна, оставляя сравнительно интактными другие компоненты матрикса-эластическце вблокна и основное вещество, состоящее преимущественно из гликозаминогликанов, Таким образом, предложенный раствор и информативный параметр позволяют достичь поставленной цели, поскольку прием диссоциации в растворе зтоксида калия до отщепления первых клеток применен нами.

Способ подготовки препарата биологической ткани к исследованию в сканирующем. электронном микроскопе путем инкубации в диссоциирующем растворе с последующим напылением поверхности клеток, от л и ч а ю щи и с я тем, что. с целью более полного выявления поверхности, диссоциацию проводят до появления первых клеток в растворе, при этом в качестве диссоциирующего раствора используют 30 4ный водный раствор гидроокиси калия и 960 этиловый спирт в соотношении 1; 1,