4-замещенные антрациклиноны и гликозид антрациклина

 

Использование: в медицине в качестве противоопухолевых средств. Сущность изобретения: продукт - 4-замещенные антрациклиноны ф-лы 1. Гликозид антрациклина ф-лы 2. Реагент 1: 4-деметил-4-сульфонил-13-диоксоланилдауномицинон. Реагент 2: ненасыщенные соединения ф-лы H-R'' , где R'' - алкенил, алкинил. Реагент 3: металлоорганическое соединение ф-лы MR_nY_m, где M-атом металла, R-линейный или разветвленный алкенил или алкинил, содержащий до 4 атомов углерода. Условия реакции: каталитическое количество соединения ф-лы 3: , где M' -атом переходного металла, L,L' -анион или нейтральная молекула; p и q - значения от 0 до 4. 2 с. и 2 з.п. ф-лы. 1 табл. Структура соединения ф-лы 1 и 2 (чертеж) .

Изобретение относится к 4-замещенным антрациклинонам, используемым в качестве промежуточных соединений и получаемым из них антрациклингликозиды.

4-Замещенные антрациклиноны имеют формулу I в которой R представляет алкенильную или алкинильную группу с прямой или разветвленной цепью, имеющую до 4 атомов углерода.

Антрациклиноны формулы I представляют промежуточные соединения при получении противоопухолевых ант- рациклингликозидов. В изобретении прдеусматриваестя антрациклингликозидом формулы IХ где R имеет указанные значения; R₁ - атом водорода или гидроксильная группа, и их фармацевтически приемлемые солей. Предпочтительными кислыми аддитивными солями являются хлористоводородные соли.

Предпочтительными группами, которые могут быть выражены символом R, являются винильная (этильная), аллильная (пропенильная, например, 2' -пропенил) группа.

Предпочтительные соединения формулы I выбирают из группы, включающей 4-деметокси-4-этенил-дауномицинон, 4-диметокси-4-(2-пропенил)-дауномицинон. Предпочтительными соединениями формулы IХ являются 4-деметокси-4-этенил-дауномицин и его хлористоводородная соль.

Соединения общей формулы I получают из 4-сульфонилантрациклинов формулы II в которой R представляет алкильную группу, имеющую 1-10 атомов углерода, которая произвольно азмещена одним или несколькими атомами галогена или арильной группой, произвольно замещенной атомом галогена, алкильной, алкоксильной или нитрогруппой. Предпочтительными группами, которые могут быть выражены символами R ', являются трифторметил, 4-фторфенил и 4-толил. Соединения формулы I получают путем введения атома углерода или углеродной цеп в положение у атома С-4 в мягких условиях, которые в противном случае можно получить только в результате полного химического синтеза. Кроме того необходимо отметить, что ни одна из оставшихся функциональных групп не подвергается воздействию в ходе осуществления этой реакции и полностью сохраняется стереохимия в положениях у атомов С-7 и С-9.

Способ получения 4-замещенного антрациклинона формулы I, включает взаимодействие 4-диметил-4-сульфони-13-диоксиланил-дауно- мицинона формулы II с: (I) ненасыщенным соединением формулы IIIа Н-R" в которой R" представляет алкенильную или алкинильную группу, имеющую до 16 атомов углерода, произвольно замещенную указанной группой от (а) до (е), или (II) металлоорганическим соединением общей формулы III b М R_nY_m, где М - атом металла; R имеет указанные значения; n и m могут иметь различные значения от 0 до 4, но не является О и Y может представлять атом галогена или алкильную группу с прямой или разветвленной цепью, имеющую 1-6 атомов углерода, в присутствии каталитического количества соединения формулы (IV) (далее определяется как катализатор): М' L_рL'_q (IV) в котором М ' представляет атом переходного металла, L и L' которые могут иметь одинаковые или различные значения, представляют такой анион, как Сl^- или СН₃СОО^- , или такую нейтральную молекулу, как молекула растворителя, моно- или дифосфин, фосфит или диамин, а р и q могут иметь различные значения от 0 до 4, что позволяет получить соединение формулы VI
где R имеет указанные значения, и удаление защитной 13-оксогруппы с помощью кислотного гидролиза.

В соединении формулы IV предпочтительными атомами переходного металла, которые могут быть выражены символом М' , являются атомы палладия или никеля. Предпочтительными группами, которые могут быть выражены символами L и/или L' , являются хелатообразующие дифосфины, такие как 1,3-дифенилфосфинопропан, 1,1' -бис-(дифенилфосфино)ферроцен и 1,2-бис[N-(1-фенилэтил), N-(дифенилфосфино)амино]этан. Обычно сумма m+n равняется по крайней мере 1, например 1,2,3 или 4. Поэтому соединение формулы IV представляет комплекс переходного металла, который включает атом прееходного металла, предпочтительно такой как атом палладия или никеля, и хелатообразователь, указанный выше. Молярное отношение атома переходного металла к хелатному лиганду обычно составляет от 1:1 до 1:4.

Соединения формулы (IIIа) представляют ненасыщенные соединения, способные вступать в реакцию Хека. Предпочтительными ненасыщенными молекулами, которые можно использовать при осуществлении этого способа, являютcя, молекулы, вступающие в реакцию Хека, в частности триметилсилилацетилен, фенилацетилен, алкилакрилаты и винилтриметилсилан.

Для соединений формулы (IIIb) предпочтительными атомами металлов, которые могут быть выражены символом М, являются атомы олова, цинка, кадмия и магния. Обычно n равняется 1,2,3 или 4, в то время как m может равняться 0,1,2,3 или 4. Сумма m и n зависит от валентности элемента М. Если y является атомом галогена, он может представлять атом хрома, брома или йода. Если y является алкильной группой, он может представлять метил.

Соединения формулы II можно получить из природного дауномицинона V
Таким образом настоящее соединение позволяет синтезировать соединения формулы I с хорошим выходом и высокой оптической и химической чистотой непосредственно из дауномицинона, как это суммируется в схеме реакции 1.

Способ по изобретению может быть осуществлен следующим образом.

Соединения формулы II растворяют в соответствующем полярном растворителе и добавляют в инертной атмосфере к раствору катализатора, который готовят заранее или "на месте" из соответствующих исходных веществ в присутствии ненасыщенного соединения IIIа, способного вступать в реакцию Хека, или металлорганического соединения формулы IIIb и вариантно в присутствии соответствующего основания, такого как триалкиламин. Температура реакции составляет 0-150^оС, предпочтительно 30-100^оС, и катализатор используется в молярном отношении к соединению II от 1:1 до 1:10000, предпочтительно от 1: 20 до 1:1000.

Полученные таким образом соединения общей формулы VI легко превращаются в конечные продукты I посредством кислотного гидролиза защитной группы у С-13 карбонила, например, с помощью трифторуксусной кислоты при 0^оС в течение 45 мин. Сырое соединение формулы 1 можно очищать при помощи хроматографии на колонке из силикагеля с использованием в качестве системы для элюирования смеси хлороформа и ацетона (с процентным соотношением объемов 95: 5).

_____→ H
Давно известен процесс арилирования ненасыщенных соединений на палладиевом катализаторе (реакция Хека) с использованием арилгалогенидов, и по этому вопросу было опубликовано много статей и патентов, касающихся применения этого процесса в органической химии.

В научной литературе сообщается о гороздо меньшем числе работ, посвященных применению арилсульфонатов в качестве арилирующих соединений. В течение несколькаих лет также известны способы сочетания с применением палладиевых или никелевых катализаторов арилгалогенидов или сульфонатов с металлорганическими соединениями.

Однако нигде не сообщалось о применении реакции обоих типов в химии антрациклинов, вероятно из-за наличия других интерферирующих функциональных групп. Проблемы, возникающие из-за наличия указанных групп, а именно ароматизация кольца А, образованные 7-деоксипроизводных, гидролиз 4-сульфонильных производных и/или модицикации хиноновой части, можно устранить в условиях осуществления настоящего изобретения.

Способ получения антрациклингликозида формулы IХ или его фармацевтически приемлевой соли, включает:
I взаимодействие 4-замещенного антрациклинона формулы I с галоидзамещенным сахаром формулы Х:
в которой Наl представляет атом галогена, 3" -аминогруппа является защищенной или незащищенной и 4" -гидроксильная группа является защищенной или незащищенной, и в случае необходимости удаление каждой защитной группы из полученного таким образом продукта, в результате чего достигается получение антрациклингликозида формулы (IХ), в которой R₁представляет атом водорода,
(II) превращение при желании полученного таким образом указанного гликозида офрмулы (IХ) в его фармацевтически приемлемую соль,
(III) бромирование при желании указанного гликозида формулы (IХ) или его фармацевтически приемлемых солей и гидролиз полученного таким образом 14-бромзамещенного производного с образованием соответствующего гликозида формулы (IХ), в которой R₁ представляет гидроксильную группу и,
IV превращение при желании указанного гидрогликозида формулы IХ, в которой R₁ представляет гидроксильную группу, в его фармацевтически приемлемую соль.

Антрациклинон формулы I предпочтительно подвергают взаимодействию с галоидзамещенным сахаром формулы Х на стадии I в инертном органическом растворителе в инертной атмосфере при 5-30^оС и в присутствии трифторметансульфоната серебра, полученный антрациклингликозид при желании выделяют на стадии II в виде его хлористоводородной соли путем обработки раствором хлороводорода в метаноле, при желании осуществляют стадию III, в процессе которой производится бромирование и гидролиз полученного 14-бромзамещенного производного, после чего при желании образующийся антрацикликозид выделяют на стадии IV в виде его хлористоводородной соли путем обработки раствором хлористоводорода в метаноле.

Антрацикликозид формулы IХ, в которой R₁ представляет атом водорода, получают в результате взаимодействия антрациклинона формулы I с галоидзамещенным сахаром формулы Х В формуле Х Наl обычно означает атом хлора. Если 3" -аминогруппа защищена, то защитной группой может быть трифторацетильная группа. Если 4" -гидроксильная группа защищена, то защитной группой также может быть трифторацетильная группа. Конденсация антрациклинона формулы I и галоидзамещенного сахара формулы Х обычно происходит в присутствии трифторметансульфоната серебра (трифлат).

Антрациклинон может растворяться в инертном органическом раствореле, таком, как метилендихлорид, при этом реакция осуществляется в инертной атмосфере, такой как раргон, при темпераутре 5-30^оС, обычно при комнатной температуре. Любые защитные группы можно удалить с помощью мягкого щелочного гидролиза, например, путем обработки 0,1 н. водным раствором гидроокиси натрия. Антрациклингликозид предпочтительно выделяют в виде его хлористоводородной соли путем обработки свободного основания с помощью раствора хлороводорода с метаноле.

Антрациклингликозид формулы IХ, в которой R₁ представляет атом водорода, или одну из его солей можно превратить в соответствующее доксорубициновое производное, в котором R₁ представляет гидроксильную группу, путем бромирования в положении у 14-го атома и гидролиза 14-бромзамещенного производного водным растором формиата натрия.

В частности, гликозид формулы IХ, в которой R₁ представляет атом водорода, или одну из его солей можно подвергать взаимодействию с бромом в хлороформе, что позволяет получить 14-бромзамещенное производное, из которого после гидролиза, осуществляемого при комнатной температуре, в течение 48 ч в атмосфере азота при использовании водного раствора формиата натрия, можно получить соединение формулы IХ, в которой R₁представляет гидроксильную группу, в виде свободного основания, а затем выделить в виде его хлористоводородной соли путем обработки раствором НСl в безводном метаноле.

Соединения по изобретению являются полезными при терапевтическом лечении людей или животных. Они оказываются эффективными в качестве противоопухолевых средств. Больному вводится эффективное в терапевтическом отношении количество препарата. Можно вводить количество препарата, достаточное для ингибирования роста опухоли. Опухоль может представлять аденокарциному Колона или лейкоз Гросса.

П р и м е р 1. 4-Деметокси-4-этенилдауномицинон [(1), R=СН=СН₂].

К раствору 1 г 4-диметил-4-трифторметансульфонил-13-диоксоланилдауномици-нона ((II), R =СF₃) (1,78 ммоля) в 50 мл диоксана в инертной атмосфере последовательно добавляли 1,55 мл диизопропилэтиламина, 0,3 мл уксусной кислоты, 55 мг 1,1' -бис-(дифенилфосфино)-ферроцена (0,097 ммоля), 20 мг ацетата палладия (0,089 ммоля) и 3,52 г винилтриметил-силана (35,2 ммоля). Реакционную смесь перемешивали при 60^оС в течение ночи, затем охлаждали до 0^оС, подкисляли 10%-ной хлористоводородной кислотой и экстрагировали метиленхлоридом. Органическую фазу выпаривали до сухого состояния, в результате чего был получен сырой 4-диметокси-4-(2' -триметилсилил)-этенил-13-диоксоланилдавуномицинон [(VI), R=СН=СН-Si-(СН₃)₃)].

Спектр Н-ЯМР 300 МГц (в CDCl₃): δ=0,24(9Н, с), 1,47 (3Н, с), 1,95 (1Н, двойной дублет, J= 5,0, 14,6 Гц), 2,44 (1Н, д J=14,6 Гц), 2,73 (1Н, д, J= 18,9), 3,18 (1Н, двойной дублет, J=2,5; 18,9), 3,29 (1Н, с), 3,8 (1Н, д, J= 6,6 Гц), 4,08 (4Н, С), 5,2 (1Н, т, J==-5,0 Гц), 6,32 (1Н, д, J=18,9 Гц), 7,69 (1Н, т J=7,7 Гц), 7,80 (1Н, двойной дублет J=1,0, 7,7 Гц), 7,96 (1Н, д, J= 18,9 Гц), 8,24 (1Н, двойной дублет, J=1,3, 7,7 Гц), 13,24 (1Н, с), 13,75 (1Н, с).

Ультрафиолетовый спектр (в этиловом спирте): λ =526,492, 359, 256, 214 нм, λ_макс=256 нм.

Инфракрасный спектр (гранула КВr): ν=3480, 1612, 1585, 1575 см^-1.

[α ]²⁰_D (с=0,1 в диоксане) = +179
Масс-спектр m/Z=510 (М⁺, основной пик).

Тонкослойная хроматография на пластине из кизельгеля F 254 (Мерк) с использованием смеси хлороформа и ацетона (9:1 по объему) R_f=0,72.

Сырой продукт [(VI), R=СН=СН-Si(СН₃)₃] перемешивали при температуре 0^оС в 6 мл трифторуксусной кислоты и 0,4 мл воды в течение 45 минут. Реакционную смесь разбавляли 150 мл воды и экстрагировали метиленхлоридом. Органический слой промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия и водой до достижения нейтрального состояния высушивали над сульфатом натрия и выпаривали до сухого состояния. Остаток хроматогафировали на силикагеле (с использованием смеси хлороформа и ацетона с объемным соотношением 95:5 в качестве элюента), что позволило получить 0,45 г [64% от соединения (II) R' = СF₃] , 4-деметокси-4-этенилдауномицинона [(1), R=СН=СН₂), высокоэффективная жидкостная хроматография 97,8%.

Анализ с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии:
Колонка: Мерк RР 18/7 мкм (250х4,2 мм)
Подвижная фаза:
А-0,01 М раствор гептансульфоната натрия и 0,02 М раствор фосфорной кислоты 6
Ацетонитрил 4
В-Метанол 7
Ацетонитрил 3
Градиент: от 20% В до 70% В в течение 25 минут.

Скорость растяжения: 1,5 мл/мин.

Детектор: ультрафиолетовый с длиной волны 254 нм.

Спектр ¹Н - ЯМР 300 МГц (в СDСl₃): δ=2,15/1Н, двойной дублет, J=4,8, 14,5 Гц), 2,35 (1Н, двойной триплет, J=2,0 14,5 Гц), 2,42 (3Н, с), 2,95 (1Н, д J=18,6 Гц), 3,20 (1Н, двойной дублет, J=2,0 18,6 Гц), 3,75 (1Н, д J= 5,7 Гц), 4,53 (1Н, с) 5,32 (1Н, м), 5,51 (1Н, двойной дублет, J=1,4, 11,0 Гц) 5,64 (1Н, двойной дублет, J=1,4 17,3 Гц) 7,74-7,92 (3Н, м), 8,37 (1Н, двойной дублет, J=2,0, 7,5 Гц), 13,28 (1Н, с), 13,71 (1Н, с).

Ультрафиолетовый спектр (в этиловом спирте): λ =525491, 356, 256, 212 нм, λ_макс =256 нм.

Инфракрасный спектр (гранула КВr): ν=3480, 1712, 1610, 1575 см^-1[α ] ²⁰_D/с=0,1 в диоксане)= +190. Масс-спектр m/Z=394 (М⁺, основной пик).

Тонкослойная хроматография на пластине из кизельгеля F254 (Мерк) с использованием смеси хлороформа и ацетона (9:1) по объему R_f=0,67.

П р и м е р 2. 4-Деметокси-4-этинилдауномицинон [(1), R=СН=СН₂].

Эту реакцию осуществляли так же, как в примере 1, за исключением того, что в качестве лиганда для палладия использовали дифенилфосфинпропан (40 мг, 0,097 ммоля), что позволило получить сырой 4-деметокси-4-(2' -триметилсилил)этенил-13-диоксоланилдауномицинон (VI) R=СН=СН-Si(СН₃)₃].

Сырое соединение [(VI), R=СН-СН-Si(СН₃)₃], обрабатывали трифторуксусной кислотой, как это описывалось в примере 1, в результате чего после хроматографии на силикагеле (в качестве элюента использовали смесь хлороформа и ацетона с соотношением объемов 95:5) было получено 0,41 г [58,3% от соединения(II), R' =CF₃]4-деметокси-4-этенилдауномицинона [(1), R=СН-СН₂] высокоэффективная жидкостная хроматография 98,2%.

П р и м е р 3. 4-Деметокси-4-(2-метоксикарбонил)этенилдауномицинон [(1), R=СН-СН-СООСН₃].

Эту реакцию осуществляли, так, как описывалось в примере 16, за исключением того, что в качестве реагента использовали метилакрилат (3,17 мл, 35,2 ммоля), что позволило получить сырой 4-деметокси-4-(2' -метоксикарбонил)этенил-13-диоксоланил дауномицинон [(VI) R=СН-СН₁-СООСН₃].

Спектр ¹Н - ЯМР 300 МГц (В СDСl₃): δ=1,48 (3Н, с), 1,98 (1Н: двойной дублет, J= 5,1 14,7 Гц), 2,46 (1Н, двойной триплет, J=2,0, 14,7 Гц), 2,79 (1Н, д, J=18,9 Гц), 3,24 (1Н; двойной дублет, J=2,1, 18,9, Гц), 3,24 (1Н; двойной дублет, J=2,1 18,9 Гц), 3,34 (1Н, с), 3,87 (4Н; с), 4,08 (4Н, с), 5,26 (1Н, двойной дублет, J=1,5; 4,9 Гц), 6,24 (1Н, д, J=15,9 Гц) 7,75-7,80 (2Н, м), 8,36-8,44 (1Н, м), 8,72 (1Н, д, J=15,9 Гц) 13,35 (1Н, с), 13,54 (1Н, с).

Ультрафиолетовый спектр (в этиловом спирте): λ=527, 492, 347, 264, 213 нм, λ_макс=264 нм.

Инфракрасный спектр (гранула КВr): ν=3470, 1716, 1610, 1575 см^-1.

[α ]²⁰_D/с=0,1 в диоксане)=+195.

Масс-спектр m/Z=496 (М⁺, основной пик).

Тонкослойная хроматография на пластине из кизельгеля F=254 (Мерк) с использование смеси хлороформа и ацетона (9:1 по объему), R_f=0,44.

Сырое соединение VI (R=СН=СН-СООСН₃) обрабатывали трифторуксусной кислотой так, как описывалось в примере 1, в результате чего после хроматографии на силикагеле (в качестве элюента использовалась смесь хлороформа и ацетона с соотношением объемов 95:5) было получено 0,41 г (50,8% от соединения (II), R' =СF₃ (4-деметокси-4-)2' -метоксикарбонил)этенилдауномицинона [(1), R=СН=СН-СООСН₃]= (высокоэффективная жидкостная хроматография 97,8%).

Спектр ¹Н-ЯМР 300 МГц (в (СDCl₃): δ=2,16 (1Н, двойной дублет, J=5,0, 14,8 Гц), 2,36 (1Н, двойной триплет, J=2,2, 14,8 Гц) 2,43 (3Н, с), 2,96 (1Н, д, J=18,8 Гц), 3,21 (1Н, двойной дублет J=2,2, 18,8 Гц), 3,75 (1Н, д J= 1,2 Гц), 3,87 (3Н, с), 4,55 (1Н, с), 5,34 (1Н, широкий синглет), 6,26 (1Н, д, J=15,8 Гц) 7,80-7,90 (2Н, м), 8,46 (1Н, двойной дублет, J=2,9, 6,2 Гц) 8,75 (1Н, д, J=15,8 Гц), 13,24 (1Н, с), 13,53 (1Н, с).

Ультрафиолетовый спектр (в этиловом спирте): λ=493, 348, 265, 214 нм, λ_макс=265 нм.

Инфракрасный спектр (гранула КВr): ν 3390, 1713, 1690, 1615, 1575 см-1.

[ α]²⁰_D (с=0,1 в диоксане)= +188.

Масс-спектр m/Z=452/ М⁺, основной пик.

Тонкослойная хроматография на пластине из кизельгеля = D 254 (Мерк) с использованием смеси хлороформа и ацетона (9:1 по объему) R_f=0,61.

П р и м е р 4. 4-Деметокси-4-(2' -метоксикарбонил)этенилдауномицинон [(1), R=СН=СН-СООСН₃].

Эту реакцию осуществляли так, как описывалось в примере 3, за исключением того, что в качестве растворителя использовали диметилформамид (50 мл) и в качестве лиганда для палладия использовали 1,2-бис-[N-(1-фенилэтил), N-(дифенилфосфи- но)амино]этан (62 мг, 0,097 ммоля), в результате чего после хроматографии на силикагеле (в качестве элюента использовали смесь хлороформа и ацетона с соотношением объемов 95:5 (было получено 0,34 г [42% от соединения (II) R '=CF₃] 4-деметокси 4-(2' - метоксикарбонил)этенилдауномицинона (I), R= СН-СН-СООСН³(высокоэффективная жидкостная хроматография 98,2%).

П р и м е р 5. 4-Деметокси-4-триметилсилилэтинилдауномицинон [(I), R=С= С-Si(СН₃)₃].

Эту реакцию осуществляли так, как описывалось в примере 1, за исключением того, что в качестве реагента использовали триметилсилилацетилен (5,9 мл 35,2 ммоля), что позволило получить сырой 4-деметокси-4-триметилсилилэтинил-13-диоколанилдаун- омицинон (VI) R=С=С-Si-(СН₃)₃.

Спектр ¹Н-ЯМР 300 Гц (в СDCl3): δ =0,35 (9Н, с), 1,48 (3Н, с), 1,99 (1Н, двойной дублет, J=5,0 14,6 Гц) 2,47 (1Н, д, J=14,6 Гц), 2,78 (1Н, д, J= 19,0), 3,15 (1Н, широкий синглет), 3,23 (1Н, двойной дублет, J=2,0, 19,0 Гц), 3,82 (1Н, широкий синглет), 4,08 (4Н, с), 5,28 (1Н, д, J=3,7 Гц), 7,72 (1Н, т. J=7,7 гц), 7,94 (1Н, двойной дублет J=1,4, 7,7 Гц) 8,34 (1Н, двойной дублет, J=7,7 Гц), 13,22 (1Н, с), 13,80 (1Н, с).

Ультрафиолетовый спектр (в этиловом спирте); λ=528, 494, 363, 269, 247, 214 нм, λ_макс=269 нм.

Инфракрасный спектр (гранула КВr): ν=3540, 3470, 1615, 1565 см-1.

[ α]²⁰_D (с=0,1, в диоксане) = +183.

Масс-спектр m/Z=508 (М⁺, основной пик).

Тонкослойная хроматография на пластине из кизельгеля F 254 (Мерк) с использованием смеси хлороформа и ацетона (9:1 по объему) R_f=0,65.

Сырое соединение [(VI), R=СН=С-Si(СН₃)₃ обрабатывали трифторуксусной кислотой, как описывалось в примере 1, в результате чего после хроматографии на силикагеле (в качестве элюента использовали смесь хлороформа и ацетона с соотношением объемов 95:5) было получено 0,12 г [15% от соединения (II), R' =СF₃] 4-деметокси-4-триметилсилилэтинилдауномицинона [(I), R=С= СSi(СН₃)₃], высокоэффективная жидкостная хроматография 96,4%.

Спектр ¹ Н-ЯМР 300 МГц (в СDCl₃): δ=0,30 (9Н, с), 2,04 (1Н, двойной дублет, J=4,8, 14,6 Гц) 2,25 (1Н, д, J=14,6 Гц), 2,34 (3Н, с), 2,69 (1Н, д, J= 18,7 Гц) 2,91 (1Н, двойной дублет, J=1,4, 18,7 Гц), 4,06 (1Н, д, J=5,6), 4,71 (1Н, с), 5,11 (1Н, т, J=4,2 Гц), 7,60 (1Н, т, J=7,8 Гц), 7,80 (1Н, двойной дублет, J= 1,3, 7,7 Гц) 8,03 (1Н, двойной дублет J=1,3, 7,7 Гц) 12,82 (1Н, с), 13,29 (1Н, с).

Ультрафиолетовый спектр (в этиловом спирте): λ=493, 366, 269, 246, 222, 204 нм, λ_макс=269 нм.

Инфракрасный спектр (гранула КВr: ν=3490, 1715, 1615, 1565 см^-1.

Масс-спектр m/Z=464 (М⁺, основной пик).

Тонкослойная хроматография на пластине из кизельгеля F254 (Мерк) с использованием смеси хлороформа и ацетона (9:1 по объему) R_f=0,44.

П р и м е р 6. 4-Деметокси-4-(2 -пропенил)дауномицинон [(I), R=СН₂-СН= СН₂].

К раствору 1 г 4-диметил-4-трифторметансульфонил-13-диоксоланилдауномици-нона [(II), R' =CF₃] 1,78 ммоля) в 50 мл диоксана в инертной атмосфере последовательно добавляли 55 мг (0,097 ммоля) 1,1 -бис(дифенилфосфино)ферроцена, 20 мг (0,089 ммоля) ацетата палладия и 1,1 мл (3,56 ммоля) аллилтриметилолова. Реакционную смесь перемешивали при температуре 70^оС в течение ночи, затем охлаждали до 0^оС и обрабатывали так, как описывалось в примере 1, что позволило получить сырой 4-деметокси-4-(2-пропенил)-13-диоксоланилдау- номицинон VI (R=СН₂-СН=СН₂).

Спектр ¹Н-ЯМР 300 МГц (в CDCl₃): δ=1,47 (3Н, с), 1,98 (1Н, двойной дублет, J=5,0 14,7 Гц), 2,45 (1Н, двойной триплет, J=2,0; 14,7 Гц) 2,74 (1Н, д, J=18,9 Гц) 3,14 (1Н, с), 3,24 (1Н, двойной дублет, J=2,2; 18,9 Гц) 3,78 (1Н, д, J=6,8 Гц) 4,06-4,12 (6Н, м), 5,00-5,21 (2Н, м), 5,23-5,30 (1Н, м), 6,00-6,18 (1Н, м), 7,60-7,75 (2Н, м), 8,31 (1Н, двойной дублет, J=1,9, 7,4 Гц) 13,36 (1Н, с), 13,85 (1Н, с).

Ультрафиолетовый спектр (в этиловом спирте): λ=523, 489, 339, 287, 254, 207 нм, λ_макс=254 нм.

Инфракрасный спектр (гранула КВr): 3470, 335, 1615, 1575 см-1 [ α]₂₀^D (с=0,1 в диоксане)= +115.

Масс-спектр m/Z=452/М⁺, основной пик).

Тонкослойная хроматография на пластине из кизельгеля F 254 (Мерк) с использованием смеси хлороформа и ацетона (9:1 по объему) R_f=0,68.

Сырое соединение VI (R=СН₂-СН=СН₂) обрабатывали трифторуксусной кислоты так, как описывалось в примере 1, в результате чего после хроматографии на силикагеле (в качестве элюента использовали смесь хлороформа и ацетона с соотношением объемов 95:5) было получено 0,51 г [70% от соединения II, R' = CF₃] 4-деметокси-4-(2' -пропенил)дауномицинона [(I), RF= СН₂-СН= СН₂] (высокоэффективная жидкостная хроматография 97,9%).

Спектр Н-ЯМР 300 МГц (в СDCl₃):S 2,17(1Н, двойной дублет, J=4,8, 14,5 Гц), 2,35 (1Н, двойной триплет, J=2,0, 14,5 Гц) 2,43 (3Н, с), 2,94 (1Н, д, J= 18,7 Гц), 3,19 (1Н, двойной дублет, J=2,2, 18,7 Гц)= 3,77 (1Н, шир. синглет, (4,08-4,12) 2Н, м), 4,55 (1Н, широкий синглет), 5,02-5,13 (2Н, м, 5,30-5,35 (1Н, м) 6,04-6,19 (1Н, м), 7,65 (1Н, двойной дублет, J=1,8, 7,7 Гц) 7,74 (1Н, т, J=7,7 Гц), 8,33 (1Н, двойной дублет, J=1,8, 7,4 Гц) 13,28 (1Н, с), 13,82 (1Н, с).

Ультрафиолетовый спектр (в этиловом спирте): λ=489, 339, 286, 254, 208 нм, λ_макс=254 нм.

Инфракрасный спектр (гранула КВr): ν=3410, 1710, 1618, 1575 см^-1.

[α]²⁰_D (с=0,1 в диоксане)= +152.

Масс-спектр m/Z=408 (М⁺, основной пик).

Тонкослойная хроматография на пластине из кизельгеля F 254 (Мерк) с использованием смеси хлороформа и ацетона (9:1 по объему) R_f=0,78.

П р и м е р 7. Получение хлористоводородной соли 4-этенил-(4-деметокси)-дауномицина.

К перемешанному раствору 4-этенил-(4-деметокси)дауномицинона (0,468 г, 1,2 ммоля) в СН₂Сl₂ 80 мл при комнатной температуре в атмосфере аргона в течение десяти минут одновременно добавляли раствора хлордауносаммина (0,536 г, 1,5 ммоля), в СН₂Сl₂ 10 мл) и раствор АgCF₃SO₃ (0,398 г, 1,5 ммоля) в простом этиловом эфире (12 мл). Через 30 мин добавляли 0,144 мл пиридина, после чего реакционную смесь фильтровали на дикалите. Этот раствор последовательно промывали 1%-ным раствором НCl, водой, сушили (Na₂SO₄) и выпаривали в условиях вакуума.

Остаток растворяли в ацетоне (20 мл), охлаждали до 0^оС и обрабатывали 0,075 М раствором NаОН (100 мл). Через час добавляли СН₂Сl₂и воду, при этом показатель рН доводили до 4 с помощью 3% НСl. Водную фазу отделяли, обрабатывали 1% раствором NН₄ОН до достижения показателя рН 8 и экстрагировали СН₂Сl₂ (3х100). Собранные органические фазы сушили над Nа₂SO₄ и выпаривали в условиях вакуума. Полученный продукт очищали посредством хроматографии на колонке из SiО₂(СН₂Сl₂/МеОН/СН₃СООН/Н₂O= =180/25/2/3). Собранные фракции разбавляли водой и показатель рН доводили до 8 с помощью 1% раствора NН₄ОН. Органическую фазу отделяли, сушили и выпаривали в условиях вакуума, что позволило получить 0,175 г свободного основания.

К раствору свободного основания в минимальном количестве СНСl₃добавляли 0,11 мл 3 н. раствора НСl и метилового спирта. Осадок фильтровали, промывали простым эфиром и сушили с образованием 0,170 г целевого соединения. (Высокоэффективная жидкостная хроматография = 96,17%).

Спектр ³Н-ЯМР 200 МГц (ДМСО-d6/: δ/ частей на миллион (1,16) 3Н, д. J= 6,6 Гц), 1,81 (2Н, м), 2,12 (2Н, м), 2,27 (3Н, с), 2,95 (2Н, широкий синглет)= 3,39 (1Н, м), 3,58 (1Н, широкий синглет), 4,21 (1Н, кв. J=6,6 Гц) 4,92 (1Н, широкий синглет), 5,30 (1Н, широкий синглет), 5,52 (3Н, м), 5,73 (1Н, д. J=17,265 Гц), 7,85 (3Н, м), 8,28 (1Н, двойной дублет, J=7,05 Г ц, J=1,87 Гц), 13,40 (2Н, широкий синглет).

Ультрафиолетовый спектр (этиловый спирт): λ=523,6, 489,6, 354,8, 258,4, 213,2 нм, λ_макс=258,4 нм.

Тонкослойная хроматография на пластине из кизельгеля F 254 (Мерк) с использованием смеси СН₂l₂((МеОН)СН₃СООН/Н₂О (8:2:0,7:0,3 по объему) R_f= 0,83.

П р и м е р 8. Получение хлористоводородной соли 4-этенил-4-(деметокси)доксорубицина.

Целевое соединение можно получить из хлористоводородной соли 4-этенил-4-(деметокси)-дауномицина, 0,2 г хлористоводородной соли 4-этенил-4-((деметокси)-дауномицина растворяли в смеси безводного метанола и диоксана. Добавляли раствор 1 г брома в 10 мл метиленхлорида, в результате чего было получено 14-бромзамещенное производное. 14-Бромзамещенное производное гидролизовали при комнатной температуре в течение 48 часов в атмосфере азота водным раствором формиата натрия. Таким образом получали 4-этил-4-(деметокси)доксорубицин, который в результате обработки хлороводородом в безводном метаноле выделяли в виде его хлористоводородной соли.

Данные о цитотоксичности.

Цитотоксический эффект оценивался на линии клеток типа Лово (LоVо) (аденокарцинома толстой кишки человека), рост колонии оценивался после четырехчасового воздействия вещества на колонию и последующего выращивания культуры в течение 8 дней. Для исследуемого соединения 4-деметокси-4-этенил-даунорубицина и двух сравниваемых с ним веществ: 4-деметоксидаунорубицина и даунорубицина, производилась оценка концентрации вещества, требуемой для 50%-ного подавления роста колонии (IС₅₀) по сравнению с контрольной. Данные приведены в таблице.

Низкое значение концентрации IС₅₀ для предлагаемого в настоящем изобретении соединения показывает его эффективность по сравнению с остальными исследованными соединениями.

Формула изобретения

1. 4-Замещенные антрациклиноны общей формулы

где R - линейная, или разветвленная алкенильная, или алкинильная группа, содержащая до 4 атомов углерода.

2. Соединение по п.1, отличающееся тем, что R - винильная или аллильная группа.

3. Соединение по п.1, отличающееся тем, что оно является 4-деметокси-4-этенилдауномициноном или 4-деметокси-4-(2-пропенил)-дауномициноном.

4. Гликозид антрациклина общей формулы

где R - алкенильная или алкинильная группа, содержащая до 4 атомов углерода;
R₁ - водород или гидроксигруппа,
и его фармацевтически приемлемые соли.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2