Акарицидный состав для лечения чесотки домашних животных

 

Использование: относится к ветеринарии и может быть использовано при лечении паразитарных болезней кожи животных, вызванных чесоточными клещами.

Сущность изобретения заключается в том, что используют состав, включающий смесь 4-нитро- и 6-нитро-5,7-дихлорбензофуроксанов в соотношении соответственно 70 - 20:30 - 80 - 0,25 - 1,0%, поверхностно-активное вещество - 0,5 - 2,0% и разбавитель - остальное, причем в качестве разбавителя используют дистиллированную воду или жидкие минеральные или растительные масла. Данный состав обладает раздражающим, аллергизирующим, кожно-резоpбтивным и кумулятивным действием. 1 з.п. ф-лы, 10 табл.

Изобретение относится к области сельского хозяйства, в частности к ветеринарии, и может быть использовано при лечении паразитарных болезней кожи животных, вызванных чесоточными клещами (чесотка), а именно ушной чесотки (отодектоз, псороптоз), железницы (демодекоз).

Чесотка домашних животных, пушных зверей и оленей весьма распространена и приносит значительный экономический ущерб.

Известно широкое применение ветеринарной службой с профилактической и лечебной целью акарицидов на основе фосфорорганических препаратов (например, хлорофос) и производных гамма-изомера гексахлорана. Использование указанных препаратов до настоящего времени обосновано только отсутствием других высокоэффективных средств.

Недостатками известных препаратов являются высокая токсичность для животных и людей, возникновение отдаленных последствий после их применения. Кроме того, в настоящее время применение гекса-хлорансодержащих и многих фосфорорганических препаратов ограничено в связи с наличием у них мутагенных свойств. Это привело к недостатку в ветеринарной практике доступных акарицидных средств.

Известно, что 4-нитро-5,7-дихлорбензофуроксан I (шифр АС-296) и 6-нитро-5,7-дихлорбензофуроксан II (шифр АС-292) обладают фунгицидной активностью.

Данные о лечении паразитарных болезней кожи животных, а именно чесотки средствами на основе 4-нитро- и 6-нитро-5,7-дихлорбензофуроксанов (I и II) в литературе отсутствуют.

Задачей данного изобретения является разработка акарицидного состава для лечения паразитарных болезней кожи животных, вызванных чесоточными клещами (чесотка).

Поставленная задача решается тем, что акарицидный состав для лечения паразитарных болезней кожи животных содержит смесь 4-нитро- и 6-нитро-5,7-дихлорбензофуроксанов (Д. в. III, шифр АС-284), эмульгатор (ПАВ) и разбавитель (Р) в следующих соотношениях компонентов (табл. 1), мас.

Д.в. 0,25 1,00 ПАВ 0,50 1,50 Р 97,00 99,25 В качестве эмульгаторов применяются неионогенные поверхностно-активные вещества (ПАВ): ОП 7, ОП 10 моноалкилфениловые эфиры полиэтиленгликоля на основе полимердистиллята; неонол натрий алкилполиоксиэтиленсульфат; стеарокс-6 полиэтиленгликоль моностеарат.

В качестве разбавителя применяются дистиллированная вода или жидкие масла (минеральные или растительные).

Полученный состав на основе смеси 4-нитро- и 6-нитро-5,7-дихлорбензофуроксанов (III), ПАВ и разбавителя позволяет получить новое лечебное средство, а именно состав, обладающий более высоким акарицидным и лечебным действием и превосходящий по своему лечебному эффекту применяемые в настоящее время средства.

Для лучшего понимания изобретения ниже приводятся примеры.

Пример 1. Приготовление смеси 4-нитро- и 6-нитро-5,7-дихлорбензофуроксанов (Д.в. III).

III готовят путем механического смешивания компонентов 4-нитро-5,7-дихлорбензофуроксана (I) и 6-нитро-5,7-дихлорбензофуроксана (II) в соотношении I:II соответственно 70 20:30 80 (мас.).

Пример 2. Получение акарицидного состава.

В фарфоровую ступку помещают 0,50 г III, тщательно растирают при помощи пестика. Затем в ступку добавляют 1,00 г ПАВ и растирают при комнатной температуре до получения однородной консистенции. После чего порциями при тщательном перемешивании добавляют 98,50 г разбавителя до получения однородной массы.

Рецептура остальных составов приведена в табл. 1.

Пример 3. Активность в отношении возбудителей псороптоза и лечение псороптоза кроликов.

Акарицидность смеси III, а также индивидуальных соединений I и II определяют на изолированных клещах-накожниках Psoroptes cuniculi в лабораторных условиях и при лечении больных псороптозом кроликов. Опыты на изолированных клещах проводят с использованием известной методики. В день постановки опыта готовят спиртовые или водные растворы в трех шести концентрациях (по Д.в.) от 0,01 до 1,00% В опытах используют по 10 имаго клещей, выделенных из соскобов ушных раковин кроликов, которых помещают на тканевую салфетку (10 х 10 см), пропитанную 1 мл испытуемого рабочего раствора препарата. Салфетки с клещами выдерживают в термостате при температуре 27^oC и относительной влажности 75% В качестве эталона для сравнения используют хлорофос. Контролем служат клещи, обработанные спиртом и водой. Повторность 3-кратная. Учет результатов опытов проводят через 24 час. Критерием оценки акарицидной активности препаратов служит величина СК₅₀ для клещей. Результаты исследований приведены в табл. 2.

Для изучения лечебной эффективности препаратов при чесотке кроликов приготовляют водные суспензии составов в концентрации 0,05 1,00% Опыты проводят на больных псороптозом кроликах со средней и сильной степенью поражения. Животных разделяют на 22 группы (по 3 животных в каждой). 18 групп обрабатывают двукратно соответственно 0,05, 0,10, 0,25, 0,50, 0,75, 1,00%-ными суспензиями препаратов с интервалом 7 дней. 3 группы животных обрабатывают двукратно 1% 2% и 3%-ными водными растворами хлорофоса. Одну группу кроликов обрабатывают двукратно водой с ПАВ (контроль). Учет результатов опытов проводят путем осмотра ушной раковины и исследованием соскобов, взятых из внутренней поверхности ушных раковин, на наличие живых клещей. Учет проводят через 1, 3, 5 и 7 дней после первой обработки и через 7, 14 и 30 дней после вторичного нанесения препаратов. Результаты исследований приведены в табл. 3.

Пример 4. Отодектоз (ушная чесотка) животных.

Лечению составами на основе смеси III в концентрациях от 0,10 до 0,75% подвергают собак и кошек, больных отодектозом, вызванным возбудителем Otodectos cynotis, паразитирующим на внутренней поверхности кожи ушной раковины и в наружном слуховом проходе. Перед применением акарицидный состав подогревают до 30 35^oC и тщательно взбалтывают. Обработку проводят путем втирания средств в ушные раковины и наружный слуховой проход, где локализуются возбудители болезни. Кратность обработки 2 раза: составы на воде ежедневно с интервалом 5 6 дней, составы на масле с интервалом 5 7 дней. В качестве эталона для сравнения используют хлорофос (двукратно). Учет результатов опытов проводят путем осмотра поверхности ушной раковины и слухового прохода и исследованием соскобов на наличие живых клещей. Результаты опытов представлены в табл. 4 и 5.

Пример 5. Демодекоз (железница) животных.

Лечению составами на основе III в концентрациях от 0,10 до 1,00% подвергают собак, больных демодекозом, вызванного возбудителем кожным паразитом Demodex canis. При незначительном поражении животных демодекозом втирают акарицидный состав в пораженные места по направлению от хвоста к голове. При сильном поражении состав применяют в виде водных ванн при температуре рабочей жидкости 30 32^oC. Животного погружают в жидкость, оставляя на поверхности только голову. Волосяной покров при купании массажируют поглаживанием по направлению от хвоста к голове, а на конечностях снизу вверх, с тем, что жидкость на всех участках туловища достигала поверхности кожи животного. Сильно пораженные участки кожи обрабатывают щеткой, купают собак 1 2 мин. После чего волосяной покров у животного отжимают и высаживают в теплое (22 25^oC), заранее продезинфицированное помещение. Результаты исследований представлены в табл. 6. В качестве эталона для сравнения используют хлорофос и дистиллированную воду с ПАВ в качестве контроля.

Пример 6. Токсикологические исследования смеси 4-нитро- и 6-нитро-5,7-дихлорбензофуроксанов (Д.в. III).

1. Исследование токсичности при введении в желудок.

При однократном введении III в желудок определяют параметры токсичности и изучают симптомы острого отравления. Острую токсичность изучают на белых крысах весом 170 200 г. Смесь III вводят в желудок в виде водной суспензии. В качестве эмульгаторов используют ОП-7 или ОП-10. Животным контрольной группы вводят в соответствующих количествах эмульсию, содержащую только эмульгатор. Учитывают следующие показатели: внешний вид и поведение животных, состояние шерстного покрова и видимых слизистых оболочек, отношение к корму, подвижность, ритм и частоту дыхания, время возникновения и характер интоксикации, ее тяжесть, обратимость, сроки гибели животных или их выздоровления. Наблюдения за клиническим состоянием животных проводят в течение 14 дней. Для оценки токсичности определяют максимально переносимую дозу МПД; дозу, вызывающую гибель 50% животных, ЛД₅₀ и абсолютно смертельную дозу ЛД₁₀₀. ЛД₅₀ и ее доверительные границы вычисляют по методу Литчфилда и Уилкоксона. Результаты исследований приведены в табл. 7.

2. Исследование токсичности при нанесении на кожу.

При однократном нанесении смеси III на кожу определяют параметры токсичности и симптомы острого отравления. На предварительно выстриженный участок кожи крыс (на спине) размером 2 х 2 см наносят смесь III в дозах от 500 до 5000 мг/кг. Наблюдения за клиническим состоянием животных проводят в течение 14 дней. Результаты исследований представлены в табл. 7.

Местное действие III исследуют на белых крысах массой 120 160 г по известным методикам. Для изучения раздражающего действия смеси III опытных крыс делят на 8 групп. Первой группе животных наносят ежедневно однократные аппликации водных суспензий III в концентрациях 0,25% 0,50% 1,00% 5,00% на наружную поверхность ушной раковины. Второй группе животных водные суспензии в тех же концентрациях наносят на предварительно выстриженный участок кожи спины размером 2 х 2 см. Животным контрольных групп наносят дистиллированную воду с ПАВ. Обработку крыс всех групп проводят в течение 10 дней. По истечении указанного времени берут кровь из хвоста для определения количества эритроцитов и лейкоцитов в камере Горяева, гемоглобина, выведения лейкоцитарной формулы по общепринятым методикам. Учитывают следующие показатели: появление на месте аппликации гиперемии, отека, утолщения кожной складки и расчесов. Полученные данные обрабатывают статистически. При исследовании местного действия на слизистые оболочки III в виде водной суспензии в тех же концентрациях вносят однократно в конъюнктивный мешок кролика в количестве 1 2 капель в течение 7 дней. При внесении оттягивают внутренний угол конъюнктивального мешка, затем в течение 1 мин прижимают слезно-носовой канал. Отмечают появление и выраженность гиперемии, отечность, инъекцию сосудов склеры и роговицы, измеряют ширину зрачка. Обращают внимание на состояние век. Оценивают влияние III на слизистую оболочку по характеру конъюнктивита (поверхностный, глубокий), кератита.

Количественную оценку кожно-резорбтивного действия III проводят на крысах. Животных фиксируют, выстригают на спине шерсть и препарат в виде суспензии наносят на выстриженные участки. Проводят учет клинических признаков отравления от разных доз III. Результаты исследований приведены в табл. 8, 9 и 10.

3. Изучение аллергенных свойств.

Исследование сенсибилизирующих свойств проводят по методике на белых крысах массой 120 160 г и кроликах массой 2 2,5 кг, Перед опытом оценивают первично-раздражающее действие III на крысах путем накожных аппликаций в виде водной суспензии в концентрациях 0,25% 0,50% 1,00% 5,00% и 10,00% У животных предварительно выстригают волосы на участке спины размером 2 х 2 см у крыс, 5 х 5 см у кроликов. Крысам аппликации делают в направлении от задней трети спины к голове, кроликам в направлении от шеи к хвосту. Опытных крыс делят в равных количествах на 8 групп. Первым трем группам на поверхность кожи наносят и втирают однократно соответственно 0,25% 0,50% 1,00% суспензии в течение 15 дней; вторым трем группам двукратно в день в течение того же времени. Контрольным группам по той же схеме применяют разбавитель (д/вода) с эмульгатором. Всего животным наносят на один и тот же участок кожи 10 30 аппликаций. Через 10 дней после нанесения последней аппликации на кожу свежевыстриженного участка спины наносят разрешающие дозы смеси III в тех же концентрациях.

Опытным кроликам выстригают два участка кожи с двух сторон от позвоночного столба, обрабатывают 70% спиртом и наносят скарификатором царапины. Затем на одну сторону наносят 0,01% раствор гистамина гидрохлорида, а на другую соответственно исследуемые концентрации 0,25% 0,50% и 1,00% суспензии смеси III. Наблюдения за состоянием кожи животных проводят через 30 мин, 24, 48 и 72 час. Учитывают возникновение эритем, инфильтрации, изъязвления, некроза ткани. Результаты исследований приведены в табл. 9 и 10.

4. Изучение кожно-резорбтивного действия.

Исследование кожно-резорбтивного действия смеси III проводят по известной методике. Реакцию организма крыс изучают в концентрациях 0,25% 0,50% и 1,00% путем часовой экспозиции хвоста крыс в пробирках с суспензией III при температуре 28^oC. Хвосты контрольных животных помещают в пробирки с водой и ПАВ. Все пробирки находятся в водяной бане. О кожно-резорбтивном действии III судят по ежедневному наблюдению за физиологическим состоянием крыс в течение 14 дней.

5. Изучение кумулятивных свойств смеси III.

Кумулятивные свойства III изучают на белых крысах массой 120 160 г с использованием теста субхронической токсичности. Смесь III в дозе от ранее установленной однократной ЛД₅₀ (составляющей 0,1), наносят накожно животным опытной группы первые 4 дня. Затем каждые последующие 4 дня дозу III повышают в 1,5 раза и наносят животным. Длительность опыта 24 ± 4 дня. К конце опыта нанесенная доза достигает 8,5 ЛД₅₀. Оценивают результаты исследования по отношению к средним эффективным дозам острого и подострого действия. В течение опыта наблюдают за животными, учитывают состояние (возбуждение, угнетение), характер и степень активности и координацию движений, реакцию животного на ориентировочные, тактильные и болевые раздражения, наличие тремора, судорог, парезов, параличей, выделений из глаз, носа, изменение цвета кожных покровов, изменение массы тела, пищевая возбудимость.

Как видно из данных табл. 2 и 3, предлагаемые составы обладают высокой акарицидной активностью как в отношении изолированных клещей, так и при лечении больных псороптозом кроликов. Наибольшей активностью обладает 6-нитро-5,7-дихлорбензофуроксан (II), наименьшей - 4-нитро-5,7-дихлорбензофуроксан (I). CK₅₀ II и смеси 4-нитро- и 6-нитро-5,7-дихлорбензофуроксанов (III) превосходят по активности эталонный акарицид хлорофос (данные для сравнения приведены в табл. 2). Из данных табл. 3 видно, что состав на основе II оказал 100% -ный лечебный эффект при псороптозе кроликов в 0,25%-ной концентрации, состав на основе III в 0,50%-ной, а хлорофос только в 3%-ной концентрации.

Таким образом, акарицидный состав, содержащий смесь III, эмульгатор и разбавитель, обладает высоким акарицидным эффектом и по данному показателю превосходит эталон. При лечении не отмечено никаких отклонений физиологического состояния животных.

Лечение животных, больных отодектозом (табл. 4), как водными (табл. 1, составы 2 и 3), так и масляными (табл. 1, составы 6 и 7) составами привело к полному выздоровлению всех животных. Уменьшение Д.в. во всех составах до 0,25% снизило эффективность (33,3 66,6%). Аналогичный эффект показал и эталонный препарат, но только в 3%-ной концентрации.

Компоненты водных и масляных составов, взятые в качестве контроля, не оказали никакого лечебного действия (табл. 5).

Таким образом, предлагаемые составы обладают высоким акарицидным действием при лечении больных отодектозом животных и по данному показателю превосходят эталон.

При лечении не отмечено никаких отклонений физиологического состояния животных.

Данные по лечению больных демодекозом собак (табл. 6) показывают, что изученные составы при концентрации Д.в. в них 0,50 1,00% обладают высоким лечебным действием и по данному показателю превосходят эталонный акарицид хлорофос.

Таким образом, акарицидный состав, в котором в качестве Д.в. применяется смесь 4-нитро- и 6-нитро-5,7-дихлорбензофуроксанов (III) обладает высоким акарицидным действием при чесотке животных и по данному показателю превосходит применяемые в настоящее время средства.

Проведенные токсикологические исследования показали, что смесь 4-нитро и 6-нитро-5,7-дихлорбензофуроксанов (III) имеет следующие параметры токсичности (табл. 7). При нанесении однократно на кожу опытным крысам смесь III в дозах 500, 1000, 2500 и 5000 мг/кг не вызывает гибели животных.

Полученные данные позволяют отнести изучаемую смесь III к третьему классу умеренно опасных веществ при внутреннем введении и к четвертому классу малоопасных веществ при наружном применении.

Как видно из полученных данных табл. 8, смесь III в концентрациях 0,25% 0,50% и 1,00% не оказывает на кожу раздражающего действия и не изменяет физиологическое состояние крыс.

Изучение аллергенных свойств смеси III показало отсутствие контактного дерматита у крыс от концентраций 0,25 1,00% Кожа крыс оставалась в течение 72 час гладкой и блестящей. Показателем силы аллергенного воздействия, кроме местной реакции кожи, является общая реакция организма, проявляющаяся в увеличении числа эозинофилов в периферической крови. Как видно из табл. 9 и 10, даже 30%-ные концентрации смеси III не вызвали повышения количества эозинофилов в периферической крови и оставались на уровне контрольных показателей. Количество эритроцитов и лейкоцитов, гемоглобин остаются в пределах нормы контроля от применения 5 и 10%-ных концентраций III.

В опытах по определению аллергической реакции организма кроликов в ответ на 0,25 0,50%-ные концентрации смеси III не наблюдалось реакции. После аппликаций 1,00% -ной концентрации III через 24 часа появился незначительный валик (уплотнение) по ходу царапины, который через 24 часа исчез.

Проведенные исследования показывают, что смесь III в концентрациях 0,25
0,50% не обладает аллергизирующим действием. Увеличение концентрации III до 1,00% может вызвать незначительную реакцию организма.

Как показали результаты по изучению кожно-резорбтивного действия, исследуемая смесь III в концентрациях 0,25% 0,50% и 1,00% не оказала токсического действия на физиологическое состояние животных. На коже хвостов не отмечено отека, покраснений, шелушения, подкожной инфильтрации, деструктивных явлений.

Однократное накожное применение смеси III даже в дозе 5000 мг/кг не вызывает гибели крыс. Местное действие характеризовалось гиперемией, шелушением кожи и выпадением волос.

В опытах по определению кумулятивных свойств смеси III при накожном применении не удалось вызвать гибели ни одной крысы, хотя каждое животное получило III суммарно в дозе 3813 мг/кг.

Таким образом, смесь 4-нитро- и 6-нитро-5,7-дихлорбензофуроксанов (III) в исследованных концентрациях и дозах не обладает раздражающим, аллергизирующим, кожно-резоpбтивным и кумулятивным действием. Следовательно, акарицидный состав, основным действующим веществом которого является смесь 4-нитро- и 6-нитро-5,7-дихлорбензофуроксанов, не обладает раздражающим, аллергизирующим, кожно-резорбтивным и кумулятивным действием. ТТТ1 ТТТ2 ТТТ3 ТТТ4

Формула изобретения

1. Акарицидный состав для лечения чесотки домашних животных, включающий активно-действующее вещество (АДВ), отличающийся тем, что в качестве АДВ он содержит смесь 4-нитро- и 6-нитро-5,7-дихлорбенэофуроксанов соответственно 70 20 30 80 и дополнительно поверхностно-активное вещество и разбавитель при следующем соотношении компонентов, мас.

Смесь 4-нитро-и 6-нитро-5,7-дихлорбензофуроксанов 0,25 1,0
Поверхностно-активное вещество 0,50 2,0
Разбавитель Остальное
2. Состав по п.1, отличающийся тем, что в качестве разбавителя используют дистиллированную воду или жидкие минеральные или растительные масла.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5, Рисунок 6