Способ эпидемиологического мониторинга объектов внешней среды, способ бактериологического контроля жидких сред, приспособление для забора, хранения и транспортировки проб (варианты), устройство для отделения магноиммуносорбента от жидкой фазы и устройство для проведения иммунохимического анализа

 

Использование: в микробиологии, может быть использовано при проведении эпидемиологического мониторинга источников питьевого и хозяйственного назначения, почв, продуктов питания с помощью магноиммуносорбентов. Сущность: мониторинг объектов внешней среды проводят селективным концентрированием микроорганизмов на поверхности магноиммуносорбентов (МИС) в магнитном поле путем их омывания в проточном корпусе потоком жидкости с последующим хранением, транспортировкой и отделением магноиммуносорбента от магнитной поверхности и от жидкости в магнитном поле с последующим направлением пробы на идентификацию возбудителя инфекции. Приспособление для забора, транспортировки и хранения проб представляет собой цилиндрический корпус для забора проб, снабженный с одной стороны конической насадкой с входными отверстиями, а с другой стороны - съемной магнитной пробкой, над которой внутренняя поверхность корпуса представляет усеченный конус и на уровне ее рабочей поверхности корпус снабжен выходными отверстиями и защитным коническим козырьком, и цилиндрический сосуд, диаметр которого соответствует диаметру магнитной пробки для затора проб. Устройство для отделения магноиммуносорбента от жидкой фазы содержит корпус из немагнитного термостойкого материала, в который помещен постоянный магнит с возможностью скольжения по внутренней поверхности, внешняя рабочая поверхность корпуса выполнена ребристой, а торцевая - в виде вогнутой полусферы. Устройство для проведения иммунохимического анализа содержит источник энергии, электрообмотку, планшет с ячейками, съемную гребенку стержней, в качестве источника энергии используется источник переменного тока, соединенный с электрообмоткой, расположенной вокруг гнезда планшета на расстоянии от него 0,01-0,05 м и обеспечивающей величину напряженности магнитного поля 800-1400 а/м, через блок управления, состоящий из узлов импульсной подачи тока на электрообмотку, размагничивания и сигнализации таймера. 6 с.п. ф-лы, 1 табл., 5 ил.

Группа изобретений относится к микробиологии и может быть использована при проведении эпидемиологического мониторинга источников питьевого и хозяйственного назначения, почв, продуктов питания с помощью магноиммуносорбентов (МИС).

Традиционные способы эпидемиологического надзора внешних сред предусматривают взятие пробы из определенных мест в стерильную посуду с непромокаемыми пробками и направление ее в лабораторию для анализа в течение строго ограниченного времени (Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования под ред. М.О.Биргера. М. Медицина, 1973, с. 387; Инструктивно-методические указания по лабораторной диагностике холеры. М. 1984, N 04-23/2 от 12.03.83).

Однако эти способы не обеспечивают надежной системы контроля и обнаружения источников инфекции, неосуществимы в полевых условиях, небезопасны для обслуживающего персонала.

В последнее время с развитием разработок по получению и использованию в иммунологических исследованиях магнитных иммуносорбентов появилась реальная возможность использования их при проведении эпидемиологического мониторинга объектов внешней среды, в том числе, и в полевых условиях.

Однако существующие в настоящее время приспособления в практике эпиднадзора либо не приспособлены для работы с магнитным материалом, либо приспособлены для работы с большими объемами и непригодны для эпидемиологов в силу специфики их работы.

Необходимы надежные и безопасные в полевых условиях приспособления для забора, хранения и транспортировки проб, для сепарации магноиммуносорбентов из жидких сред, идентификации возбудителей инфекции.

Известно использование для забора проб воды из водоемов в количестве 1 л на 1 пробу в предварительно простерилизованную посуду с непромокаемой пробкой. (Инструктивно-методические указания по лабораторной диагностике холеры. М. 1984).

Однако в реках, самотечных каналах и других проточных системах возбудитель инфекций не обязательно присутствует в данном месте и в данное время, и, следовательно, элемент случайности при однократном заборе проб воды будет скорее правилом, чем исключением.

Многократное разбавление материала, содержащего возбудитель инфекции, при попадании в крупные проточные водоемы приводит к снижению концентрации возбудителя инфекции ниже минимальной посевной зоны. Мешает проведению баканализа и наличие в воде конкурентной сапрофитовой микрофлоры.

В совокупности все эти факторы часто приводят к тому, что при наличии в воде возбудителей инфекции результат бактериологического исследования оказывается отрицательным, и эпидемиологи получают из лабораторий недостоверные данные.

Известно, что при хранении и транспортировке микробиологических сред используют пробирки с притертыми пробками. (Дж. Мейнелл. "Экспериментальная микробиология". М. Мир, 1967, с. 17).

Недостатком использования пробирок в процессе транспортировки и хранения магноиммуносорбентов является то, что магносорбент с включенным лигандом транспортируется как самостоятельное вещество и в этом случае перезарядка его в приспособление для забора проб и обратно в пробирки в полевых условиях сопровождается определенными трудностями, связанными как с условиями противоэпидемического режима, так и с дополнительными затратами времени.

Известно приспособление для отделения магноиммуносорбента из жидкой фазы, представляющее собой магнитный стержень (Dodin A. Goud B. // Bull/ Soc. Pathol. Exot. 1983, vol. 76, p. 644-651).

После контактов магноиммуносорбентов с исследуемой пробой их передают на идентификацию возбудителя инфекции.

Недостатком использования магнитного стержня является сложность отделения магноиммуносорбента с поверхности магнита, обеззараживание его, что затрудняет возможность использования его в полевых условиях и увеличивает степень риска заражения обслуживающего персонала.

Традиционным устройством для проведения иммуноферментного анализа является полистироловый планшет с ячейками для раститровки исследуемого материала. (Иммунология, под ред. У.Пола. М. Мир, 1989 г. т. 3, с. 38- 39).

Известно устройство для проведения серологических реакций, содержащее две расположенные одна над другой горизонтальные пластины с ячейками. (А.c. СССР N 1156646, A 61 B 10/00, 23.05.85, БИ N 19).

С целью повышения чувствительности реакции за счет регулирования температурного режима пластины помещены в полый корпус, который снабжен патрубками для подвода и отвода теплохладоносителя.

Недостатком этих устройств является длительность проведения анализа, необходимость дополнительного перемешивания при работе с магноиммуносорбентами, трудности при извлечении и переносе магноиммуносорбентов из одной ячейки в другую.

Наиболее близким к заявляемому способу эпидемиологического мониторинга внешних сред является способ выделения возбудителя холеры из воды (Ефременко В.И. Шапко С.А. Нарбутович Н.И. и др. Новый метод выделения возбудителя холеры из воды // Особо опасные инфекционные заболевания: диагностика, профилактика и биологические свойства возбудителей. Сб. науч. работ, Волгоград, 1990, вып. 4, c. 213-219).

Способ включает селективное концентрирование микроорганизмов на поверхности магноиммуносорбентов. Магноиммуносорбенты располагаются на поверхности постоянного магнита, расположенного в так называемой "магнитной ловушке", представляющей собой трубу, экранированную с двух сторон мелкозернистой сеткой. "Ловушку" помещают в проточной воде или водоеме на 24 ч, затем магноиммуносорбенты переносятся лопаточкой в пробирку с пептонной водой и направляются в лабораторию для идентификации возбудителя инфекции. Этот способ был опробирован при бактериологическом обследовании в периоды вспышки заболеваний холерой в Волгограде в 1986- 1987 г.

При наличии зарегистрированных больных виброносителей, которые жили в домах с канализацией, в многочисленных пробах волжской воды традиционным способом вибрион не был выделен. С помощью магнитных ловушек были обнаружены штаммы холеры не только в речной воде, но и при обследовании главного канализационного коллектора выявлен источник инфекции.

Недостатком способа является трудность его осуществления в полевых условиях, опасность заражения при переносе магноиммуносорбента из ловушки и выделении его из жидкой среды.

Наиболее близким к заявляемому приспособлению для забора, хранения и транспортировки проб из жидких сред является магнитная "ловушка" с пробирками, заполненными разводящей жидкостью. (Особо опасные инфекционные заболевания: диагностика, профилактика и биологические свойства возбудителей. Сб. научных работ, вып. 4, Волгоград, 1990, с. 213-219). Магнитная "ловушка" представляет собой железную трубу с расположенным внутри постоянным магнитом, отверстия экранированы мелкозернистой сеткой. На магните внутри трубы располагают магноиммуносорбенты (МИС), и "ловушку" на металлических тросиках погружают в исследуемые водоемы на 24 ч, затем магноиммуносорбенты с помощью лопаточки переносят в пробирки с пептонной водой и направляют в лабораторию.

Недостатком этого приспособления является то, что манипуляции, связанные с зарядкой магносорбентами "ловушки", переносом их после контактирования с исследуемой средой в пробирки, проводят непосредственно в полевых условиях.

Кроме того, не решена проблема отделения магносорбента от жидкой фазы. Все манипуляции при работе с материалом, подозрительным на заряженность особо опасными инфекциями, увеличивают степень риска заражения.

Наиболее близким к заявляемому устройству для отделения магноиммуносорбента от жидкой фазы является стеклянная трубка требуемой длины с запаянным концом, в которую на длинном штоке вдвигается постоянный или электромагнит. (Приготовление и применение магнитных сорбентов для изучения антигенов микроорганизмов. Методические рекомендации. Волгоград, 1984 г. с. 9). При этом магноиммуносорбенты прикрепляются к поверхности стеклянной трубки, после переноса которой магнит вынимают, и сорбенты отделяют от трубки.

Недостатком этого приспособления является недостаточный объем площади поверхности, из-за чего манипуляции по переносу магноиммуносорбента из одной емкости в другую приходится проводить несколько раз.

Наиболее близким к заявленному устройству для проведения иммунохимического анализа с использованием магноиммуносорбентов является устройство, состоящее из планшета с лунками, крышкой и съемным набором металлических стержней, каждый из которых содержит электрическую обмотку, через которую пропускают постоянный электрический ток источника постоянного тока (пат. США N 4272510).

Недостатком прототипа является длительность распределения магнитного поля в лунках, сложность конструкции, требующей числа магнитов, соответствующей числу стержней для переноса.

Целью изобретения является повышение эффективности эпидемиологического мониторинга объектов внешней среды с увеличением степени вероятности обнаружения инфекции, обеспечение безопасного манипулирования с пробами в полевых условиях.

Поставленная цель достигается тем, что эпидемиологический мониторинг объектов внешней среды проводится селективным концентрированием микроорганизмов на поверхности магноиммуносорбентов в магнитном поле путем их омывания в проточном корпусе при воронкообразно направленном потоке жидкости, хранение, транспортировка, отделение магноиммуносорбента от магнитной поверхности и от жидкости, проведение иммунохимического анализа осуществляется в магнитном поле.

Эпидемиологический мониторинг объектов внешней среды проводится селективным концентрированием микроорганизмов на поверхности магноиммуносорбентов в магнитном поле путем их омывания в проточном корпусе в потоке жидкости, направленном через трубопровод перпендикулярно поверхности магноиммуносорбента, хранение, транспортировка, отделение магноиммуносорбента от магнитной поверхности и от жидкости, проведение иммунохимического анализа осуществляется в магнитном поле.

Для осуществления способа необходимы приспособления для забора, транспортировки и хранения проб.

Приспособление для забора, хранения и транспортировки проб, содержащее цилиндрический корпус с расположенной на первом торце корпуса съемной магнитной пробкой с примагниченными на его поверхности магноиммуносорбентом, внутренняя поверхность над пробкой выполнена в виде усеченного конуса, со стороны противоположного торца корпус также выполнен в виде усеченного конуса, снабженного входными отверстиями, на уровне внутренней горизонтальной поверхности пробки корпус снабжен входными отверстиями и с внешней стороны корпуса защитным козырьком, приспособление также содержит герметичную емкость для хранения и транспортировки проб, которая выполнена в виде цилиндрического сосуда, диаметр которого равен внешнему диаметру магнитной пробки, при этом со стороны магнитной пробки сосуд снабжен съемным защитным колпачком.

Приспособление для забора, хранения и транспортировки проб представляет собой цилиндрический корпус для забора проб, снабженный с одной стороны съемной магнитной пробкой, входными и выходными отверстиями, выполненными в виде патрубков с размерами диаметров, соответствующих подсоединяемым шлангам, расположенных на одной оси перпендикулярно оси отверстия с магнитной пробкой, и цилиндрический сосуд с размером диаметра магнитной пробки для забора проб, герметизация которого осуществляется пробкой с пробой, при этом со стороны пробки сосуд имеет съемный защитный колпачок.

Устройство для отделения магноиммуносорбента от жидкой фазы содержит корпус из немагнитного термостойкого материала, в который помещен постоянный магнит с возможностью скольжения по внутренней поверхности, внешняя рабочая поверхность корпуса выполнена ребристой, а торцевая в виде вогнутой полусферы.

Устройство для проведения иммунохимического анализа содержит источник энергии, электрообмотку, планшет с ячейками, съемную гребенку стержней, в качестве источника энергии используется источник переменного тока, соединенный с электрообмоткой, расположенной вокруг гнезда планшета на расстоянии от него 0,01-0,05 м и обеспечивающей величину напряженности магнитного поля 40-70 тыс. А/м, через блок управления, состоящий из узлов импульсной подачи тока на электрообмотку, размагничивания и таймера.

Причинно-следственная связь заявляемых признаков способа и устройств для его осуществления с поставленной целью изобретения проявляются в следующем.

Селективное концентрирование микроорганизмов на поверхности магноиммуносорбентов в магнитном поле при воронкообразно направленном потоке жидкости в течение достаточно длительного времени обеспечивает увеличение степени вероятности обнаружения инфекции и возможность организации целенаправленного эпиднадзора с надежным обнаружением источника инфекции по сравнению с традиционными методами взятия проб.

Хранение, транспортировка проб, а также отделение магноиммуносорбента от жидкой фазы в магнитном поле исключает опасность заражения обслуживающего персонала при манипуляциях с пробами.

Селективное концентрирование микроорганизмов на поверхности магносорбентов в магнитном поле в потоке жидкости, направленном через шланги перпендикулярно поверхности магноиммуносорбента, по второму варианту обеспечивает возможность организации целенаправленного эпиднадзора с надежным обнаружением источника инфекции в бытовом и хозяйственном водоснабжении, производстве и потреблении жидких пищевых продуктов.

Приемы способа обеспечиваются конструкцией заявляемых приспособлений и устройств, что подтверждает единство изобретения.

Конструкция корпуса для взятия проб с конической насадкой с отверстиями для входа жидкости и выходными отверстиями на уровне рабочей поверхности пробки обеспечивает большую пропускную способность исследуемой жидкости, выполнение внутренней поверхности корпуса в виде усеченного конуса, обращенного к пробке, создает воронкообразный поток жидкости над магноиммуносорбентом, что увеличивает вероятность селективного концентрирования микроорганизмов на поверхности магноиммуносорбентов.

Защитный конический козырек, расположенный над выходными отверстиями, уменьшает давление встречного потока жидкости, способствуя свободному оттоку жидкости, проходящей через корпус. Создание магнитного поля за счет магнитной пробки, общей для корпуса для взятия проб и сосуда для их хранения и транспортировки, обеспечивает безопасность манипулирования с магноиммуносорбентом.

Конструкция корпуса для взятия проб по второму варианту обеспечивает селективное концентрирование микроорганизмов в трубопроводах.

Конструкция устройства для отделения магноиммуносорбента со скользящим внутри корпуса магнитом позволяет проводить манипуляции с заряженным магноиммуносорбентом без риска зараженности обслуживающего персонала. Выполнение поверхности корпуса ребристой, а торца в виде вогнутой полусферы обеспечивает увеличение рабочей площади для примагничивания магноиммуносорбента и уменьшения его сползания с каплями жидкости. Выполнение корпуса из термостойкого материала позволяет надежно стерилизовать его после работы.

Конструкция устройства для проведения иммунохимического анализа предусматривает создание магнитного поля не в съемной гребенке стержней, а в рабочем поле сорбента.

Использование источника переменного тока с промышленной частотой сети 50 Гц обеспечивает вибрацию магнитного сорбента с той же частотой в жидкой фазе ячейки, что улучшает контактирование материалов и ускоряет процесс анализа. Расположение электрообмотки вокруг гнезда планшета на заданном от него расстоянии и с определенной величиной напряженности магнитного поля обеспечивает достаточную степень намагничивания и равномерное распределение величины магнитного поля по всей рабочей поверхности планшета. Зависимость равномерности распределения величины магнитного поля на рабочей поверхности планшета и его температурного воздействия от расстояния электромагнит-планшет представлена в таблице.

Уменьшение расстояния электрообмотки от гнезда планшета менее 0,01 м приводит к повышению температуры исследуемых проб и неравномерности магнитного поля, увеличение же этого параметра более 0,05 м не обеспечивает достаточной намагниченности, из-за чего происходят потери сорбентов.

При величине магнитного поля менее 40 тыс. А/м недостаточно намагничиваются стержни гребенки при переносе магноиммуносорбентов из одной лунки в другую и снижается уровень перемешивания на этапах инкубации.

Повышение же этого параметра выше 70 тыс. А/м приводит к перегреву электрической обмотки и нарушению процесса динамики иммунохимических реакций в планшете.

Соединение источника переменного тока с электрообмоткой через блок управления, состоящий из узлов импульсной подачи тока, размагничивание и сигнализации таймера обеспечивают проведение иммунохимического анализа в автоматическом режиме.

Блок управления обеспечивает выработку импульсов тока для питания электрической обмотки при перемешивании магноиммуносорбента, осуществляет требуемую экспозицию заданного времени процессов при помощи таймера и также вырабатывает импульс размагничивания, который автоматически подается на электрическую обмотку в момент окончания импульса тока при переносе магноиммуносорбента и его перемешивании. Узел сигнализации подает звуковой сигнал по окончании заданного времени и имеет цифровое табло для контроля заданного времени и работы таймера.

Пример 1. В сосуд для хранения и транспортировки проб наливают 5-10 мл физиологического раствора. На магнитную пробку наносят с помощью дозатора 0,2 мл 10%-й суспензии магноиммуносорбента холерного, представляющего собой взвесь магнитных полиакриламидных гранул с иммобилизованными иммуноглобулином, выделенным из сыворотки гипериммунной холерной кроличьей. Магнитную пробку помещают в сосуд с физиологическим раствором и транспортируют до места забора проб. На месте постановки корпуса для затора проб магнитную пробку достают из сосуда и помещают в корпус для забора проб, на конусовидной части которого прикреплена леска нужной длины. Заряженный магноиммуносорбентом корпус помещают в исследуемый объект (водоем, канализационный сток и др. ) и фиксируют. Контакт магноиммуносорбента с исследуемым объектом поддерживают до 24 ч. По окончании этого срока корпус достают, вынимают магнитную пробку с соблюдением правил антисептики и переносят ее в сосуд с физиологическим раствором для доставки проб в лабораторию. Корпус для взятия проб помещают в герметический пенал для последующего обеззараживания (3-5%-й раствор хлорамина, 6% -й раствор перекиси водорода, 3%-й раствор лизола). Магнитно-мягкий съемный стержень закрепляют в цанговый зажим и вносят в магнитное поле постоянного магнита пробки контейнера, на которой расположены магноиммуносорбенты. При этом магноиммуносорбенты перемещаются с поверхности магнитной пробки на острие стержня, затем с помощью стержня магноиммуносорбенты переносят в физиологический раствор. Отмывку магноиммуносорбентов осуществляют путем последовательного переноса пробы в несколько пробирок (5-7) с помощью устройства для отделения магноиммуносорбента от жидкой фазы. После внесения пробы в мерную пробирку доводят объем физиологического раствора в ней до 2 мл, получая 10%-ю суспензию магноиммуносорбента. Исследуемую пробу высевают на питательные среды согласно схеме проведения бактериологического исследования. Предлагаемый способ позволил выявить источники инфекции при вспышке холеры в г. Ставрополе в 1990 г. в Дагестане в 1994 г. в Чечне в 1995 г.

Пример 2. В сосуд для хранения и транспортировки проб наливают 5-10 мл физиологического раствора. На магнитную пробку наносят с помощью дозатора 0,2 мл 10%-й суспензии магноиммуносорбента холерного, представляющего собой взвесь магнитных полиакриламидных гранул с иммобилизованным иммуноглобулином, выделенным из сыворотки гипериммунной холерной кроличьей. Магнитную пробку помещают в сосуд с физиологическим раствором и транспортируют до мест забора проб. На месте постановки корпуса для забора проб магнитную пробку достают из сосуда и помещают в корпус для забора проб. Заряженный магноиммуносорбентом корпус фиксируют в исследуемом трубопроводе с помощью резиновых шлангов и поддерживают контакт с исследуемым объектом в течение 24 ч. По окончании этого срока корпус снимают с трубопровода, вынимают магнитную пробку с соблюдением правил антисептики и переносят ее в сосуд с физиологическим раствором для доставки проб в лабораторию. Дальнейшие манипуляции осуществляют аналогично примеру 1.

На фиг. 1-5 даны предлагаемые устройства.

На фиг. 1 изображен общий вид приспособления для забора, хранения и транспортировки проб из жидких сред по первому варианту. Приспособление состоит из цилиндрического корпуса 1, выполненного из немагнитного материала, на одном конце которого расположена коническая вставка 2 с входными отверстиями 3, а с другой располагается магнитная пробка 4 с примагниченными на ее поверхности магноиммуносорбентами, на уровне рабочей поверхности которой расположены входные отверстия 5 и защитный козырек 6, над пробкой внутренняя поверхность корпуса представляет усеченный конус 7 и цилиндрический сосуд 8 с данным размером диаметра корпуса для забора проб и переноса магнитной пробки 4 с примагниченными на ее поверхности магноиммуносорбентами, со стороны пробки сосуд снабжен защитным колпачком 9.

Приспособление работает следующим образом. На месте взятия проб магнитную пробку с примагниченными магноиммуносорбентами 4 из сосуда 8 переставляют в корпус 1, затем корпус 1 с помощью лески закрепляют в месте обследования и оставляют на 24 ч. Омывая коническую вставку 2, исследуемая жидкость через входные отверстия 3 попадает во внешнюю поверхность 7, в результате чего равномерно омываются магноиммуносорбенты, расположенные на поверхности магнитной пробки 4. Через входные отверстия 5 жидкость выходит из корпуса. Защитный конический колпачок 6 уменьшает давление встречного потока жидкости, способствуя свободному оттоку жидкости, проходящей через корпус. После выдерживания корпуса 24 ч корпус вынимают и пробку с заряженными магноиммуносорбентами переносят в сосуд 8, заполненный физиологическим раствором, благодаря чему магноиммуносорбенты длительное время не высыхают и приспособление пригодно для работы в полевых условиях. Съемный защитный колпачок 9 обеспечивает безопасные условия для хранения и транспортировки проб в лабораторию.

На фиг. 2 изображен общий вид приспособления для забора, хранения и транспортировки проб из жидких сред по второму варианту.

Приспособление состоит из цилиндрического корпуса 1, выполненного из немагнитного материала, на одной стороне которого расположена магнитная пробка 2 с примагниченным на ее поверхности магноиммуносорбентом и входными и выходными отверстиями, выполненными в виде патрубков 3, расположенных на одной оси перпендикулярно оси отверстия с магнитной пробкой, и цилиндрического сосуда 4 с данным размером диаметра корпуса для забора проб и переноса магнитной пробки 2 с примагниченными на ее поверхности магноиммуносорбентами, со стороны пробки сосуд снабжен защитным колпачком 5.

Приспособление работает следующим образом. На месте взятия проб магнитную пробку 2 с примагниченными МИС из сосуда 4 переставляют в корпус 1, затем корпус 1 фиксируют в трубопроводе с помощью патрубков 3 для осуществления проточного омывания МИС. После выдерживания корпуса 1 в трубопроводе в течение 24 ч корпус вынимают и пробку 2 с заряженными МИС переносят в сосуд 4, заполненный физиологическим раствором и снабженный защитным колпачком.

На фиг. 3 изображен общий вид устройства для отделения магноиммуносорбента от жидкой фазы. Устройство состоит из корпуса 1, выполненного из немагнитного термостойкого материала, внутри которого расположен постоянный магнит 2 с возможностью скольжения вдоль корпуса, внешняя рабочая поверхность корпуса выполнена ребристой 3, а торцевая 4 в виде вогнутой полусферы.

Устройство работает следующим образом. Постоянный магнит 2, расположенный внутри корпуса 1, обеспечивает необходимое магнитное поле. Корпус с магнитом погружается в емкость, где находится смесь магноиммуносорбента с жидкостью, сорбенты примагничиваются к корпусу, причем ребристая поверхность 3 и сферический торец 4 обеспечивает увеличение рабочей поверхности и исключает скатывание сорбента с каплями жидкости. Устройство переносят в другую жидкость (при необходимости многократной промывки) и выдвигают магнит, при этом магноиммуносорбент свободно рассеивается в объеме жидкости. Происходит его отмывание. Эти манипуляции можно повторять многократно без риска заражения. Если возникает потребность в получении отпечатков, то непосредственно поверхностью корпуса осуществляют высев на чашки с агаром.

На фиг. 4 представлен общий вид устройства для иммунохимического анализа.

Устройство содержит корпус 1, в гнезде которого располагается планшет с ячейками с гидрофобным покрытием 2. Вокруг гнезда на расстоянии 0,01-0,05 м расположена электрообмока 3.

В электронном блоке 4 располагается источник переменного тока частотой 50 Гц, соединенный с электрообмоткой 3 через блок управления, состоящий из узлов импульсной подачи тока на электрообмотку, размагничивания и сигнализации и таймера. Устройство снабжено съемной гребенкой стержней 5 с пластмассовым держателем 6.

Устройство для иммунохимического анализа работает следующим образом.

Ячейка планшета 2 заполнена жидким реагентом в соответствии со схемой реакции, в первый ряд также помещают необходимые навески магноиммуносорбента.

Магноиммуносорбент с магнитных пробок, изъятых из емкости для хранения и транспортировки проб, снимают и переносят в ячейки с помощью устройства типа цангового карандаша, в котором в качестве рабочего элемента используют заостренный стержень из магнитомягкого материала. При внесении стержня в поле постоянного магнита пробки магнитные силовые линии концентрируются на его острие, после удаления из зоны магнитного поля магноиммуносорбенты удерживаются на конце стержня за счет сил поверхностного натяжения влажных магноиммуносорбентов и адгезии, после погружения в жидкость они свободно отделяются и рассеиваются в ней. Планшет 2 помещают в корпус устройства 1 и включают электрический ток на электронном блоке 4, в котором источник переменного тока через блок управления соединен с электрообмоткой 3. Под воздействием переменного поля частотой 50 Гц магноиммуносорбент совершает вибрацию с той же частотой и за счет этого перемешивается в жидкой фазе. По окончании временной инкубации в первый ряд лунок с магноиммуносорбентом вводят съемную гребенку стержней 5 с пластмассовым держателем 6, которые благодаря включенному току в обмотке 3 приобретают магнитные свойства и примагничивают на свою поверхность магноиммуносорбенты, содержащиеся в лунках. Далее, не выключая ток, гребенку стержней с прикрепленными магноиммуносорбентами переносят в следующий ряд лунок. Отключают ток. Благодаря импульсу размагничивания, автоматически проявляющемуся в момент выключения тока, магнитный сорбент свободно отделяется от поверхности стержней и переходит в лунки. Гребенку стержней удаляют. Для перемешивания вновь включают ток. Цикл повторяется.

По сравнению с традиционными иммунохимическими исследованиями, проводимыми в полистироловых планшетах с ячейками для раститровки исследуемого материала, исследование на предлагаемой установке показали более высокую чувствительность и достоверность, скорость проведения анализов.

Таким образом, заявляемая группа изобретений представляет собой систему взаимосвязанных приемов и устройств, использование которой обеспечит организацию эпидемиологического мониторинга в полевых условиях. Устройства компактны и могут транспортироваться в комплекте в удобной укладке (фиг. 5). Изготовлены опытные образцы таких комплектов под названием "Диамаг-1" (для микробиологических исследований) и "Диамаг 100" (для микробиологических исследований и экспресс-иммуноанализов), которые прошли государственные медицинские и технические испытания. Комитетом по новой медицинской технике РФ дано разрешение на серийный промышленный выпуск комплектов (решение от 29.08.95 г.)с

Формула изобретения

1. Способ эпидемиологического мониторинга объектов внешней среды, включающий селективное концентрирование микроорганизмов на поверхности магноиммуносорбента в магнитном поле путем их омывания в проточном корпусе, перенос магноиммуносорбента в герметически закрытую емкость, заполненную жидкостью для хранения и транспортировки, и направление пробы на идентификацию возбудителя инфекции, отличающийся тем, что селективное концентрирование микроорганизмов на поверхности магноиммуносорбента проводят при воронкообразно направленном потоке жидкости, а хранение, транспортировку пробы, отделение магноиммуносорбента от магнитной поверхности и от жидкости, проведение иммунохимического анализа осуществляют в магнитном поле.

2. Способ бактериологического контроля жидких сред, включающий селективное концентрирование микроорганизмов на поверхности магноиммуносорбента в магнитном поле путем их омывания в проточном корпусе, перенос магноиммуносорбента в герметически закрытую емкость, заполненную жидкостью для хранения и транспортировки, и направление пробы на идентификацию возбудителя инфекции, отличающийся тем, что селективное концентрирование микроорганизмов на поверхности магноиммуносорбента проводят в потоке жидкости, направленном через трубопровод перпендикулярно поверхности магноиммуносорбента, а хранение, транспортировку пробы, отделение магноиммуносорбента от магнитной поверхности и от жидкости, проведение иммунохимического анализа осуществляют в магнитном поле.

3. Приспособление для забора, хранения и транспортировки проб, содержащее цилиндрический корпус с расположенным внутри магнитом с примагниченным на его поверхности магноиммуносорбентом и входными и выходными отверстиями, отличающееся тем, что оно дополнительно содержит герметичную емкость для хранения и транспортировки проб, в качестве магнита использована съемная магнитная пробка, расположенная на первом торце корпуса, внутренняя поверхность корпуса над пробкой выполнена в виде усеченного конуса, со стороны противоположного торца корпус также выполнен в виде усеченного конуса, снабженного входными отверстиями, на уровне внутренней горизонтальной поверхности пробки корпус снабжен выходными отверстиями, с внешней поверхности корпус снабжен защитным коническим козырьком, а емкость выполнена в виде цилиндрического сосуда, диаметр которого равен внешнему диаметру магнитной пробки, при этом со стороны магнитной пробки сосуд снабжен съемным защитным колпачком.

4. Приспособление для забора, хранения и транспортировки проб, содержащее цилиндрический корпус для забора проб с расположенным внутри магнитом с примагниченным на его поверхности магноиммуносорбентом, причем на корпусе расположены входные и выходные отверстия, отличающееся тем, что оно дополнительно содержит герметичную емкость для хранения и транспортировки проб, в качестве магнита использована съемная магнитная пробка, расположенная с одного из торцов корпуса, входные и выходные отверстия выполнены в виде патрубков, расположенных на одной оси перпендикулярно оси отверстия со съемной магнитной пробкой, а емкость выполнена в виде цилиндрического сосуда, диаметр которого равен внешнему диаметру магнитной пробки, при этом со стороны магнитной пробки сосуд содержит съемный защитный колпачок.

5. Устройство для отделения магноиммуносорбента от жидкой фазы, включающее постоянный магнит, отличающееся тем, что постоянный магнит помещен в корпус из немагнитного термостойкого материала и выполнен с возможностью скольжения по внутренней поверхности корпуса, внешняя рабочая поверхность корпуса выполнена ребристой, а торцевая в виде вогнутой полусферы.

6. Устройство для проведения иммунохимического анализа, содержащее источник энергии, электрообмотку, планшет с ячейками, съемную гребенку стержней, отличающееся тем, что в качестве источника энергии используется источник переменного тока, соединенный с электрообмоткой, расположенной вокруг гнезда планшета на расстоянии от него 0,01 0,05 м и обеспечивающей величину напряженности магнитного поля 800 1400 А/м, через блок управления, состоящий из узлов импульсной подачи тока на электрообмотку, размагничивания и сигнализации таймера.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5, Рисунок 6



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине, ветеринарии, биотехнологии и экспериментальной иммунохимии

Изобретение относится к утилизации навоза, помета, очистки сельхозстоков, использованию растительных остатков, отходов деревообработки для выработки биометана и белково-витаминной добавки (БВД) и может быть использовано на предприятиях агропромышленного комплекса (АПК)

Изобретение относится к аппаратам выработки метана из домашних бытовых отходов и отходов приусадебного хозяйства, которое может быть использовано в индивидуальных домах, удаленных от централизованных систем тепло- и электроснабжения и канализации

Изобретение относится к анаэробной очистке стоков, а именно к биокультиватору, содержащему корпус с перегородками камер кислого, нейтрального, щелочного, метанового брожения, размещенное между патрубками загрузки и разгрузки перемешивающее устройство, перед камерой кислого брожения смонтирован диспергатор в виде цилиндрического корпуса с размещением по его оси приводным валом с винтовыми лопастями, взаимодействующими с закрепленными на внутренней боковой стенке цилиндрического корпуса под углом к винтовым лопастям винтовыми выступами, а днище цилиндрического корпуса выполнено перфорированным, сообщающимся с камерой кислого брожения, при этом камера метанового брожения сообщена с секцией сепарации биометана от воды в виде корпуса с наклонными перегородками, с патрубками отвода воды в нижней части, взрывным клапаном и патрубком отвода биометана через гидравлический затвор в верхней части корпуса

Изобретение относится к очистке стоков, утилизации продуктов жизнедеятельности животных и птицы культивированием анаэробных микроорганизмов, разлагающих целлюлозосодержащие материалы /солома, сено, опилки и т.д./ с выработкой биометана для нужд фермерских хозяйств, удаленных от централизованных сетей теплоэнергоснабжения и канализации

Изобретение относится к утилизации продуктов жизнедеятельности животных, птицы, человека и углеродсодержащих твердых бытовых отходов с выработкой биогаза для нужд отопления, освещения, приготовления пищи, нагрева воды в индивидуальных хозяйствах

Изобретение относится к микробной очистке стоков и утилизации твердых углерод-азотсодержащих отходов анаэробными микроорганизмами с выработкой биометана для бытовых нужд в домах, удаленных от тепловых и электрических сетей

Изобретение относится к медицинской и микробиологической промышленности, а именно к установкам для культивирования микроорганизмов

Изобретение относится к области биотехнической очистки газовых сред и может быть использовано в химической, нефтеперерабатывающей, деревоперерабатывающей, пищевой, сельскохозяйственной, биотехнологической промышленности для очистки отходящих газов от органических загрязнений, таких, как фенол и его производные, спирты, альдегиды, меркаптаны, ароматические соединения, а также алканы и алкены

Биофильтр // 2108380
Изобретение относится к области дезодорации и очистки газовых сред, в частности воздуха, от органических и неорганических газовых примесей и может быть использовано в нефтеперерабатывающей, химической, пищевой, сельскохозяйственной и биотехнологической промышленности при очистке отходящих газов от неорганических и органических загрязнений

Изобретение относится к области микробиологии, биотехнологии и может быть использовано при культивировании микроорганизмов в пищевой промышленности, например, дрожжей для спиртового брожения, продуцентов ферментов, антибиотиков
Наверх