Циклические и гетероциклические n-замещенные - иминогидроксамовые и карбоновые кислоты

 

Изобретение относится к новым соединениям общей формулы I, где Q, A, R₁, n, m имеют указанные в формуле значения. Эти соединения обладают ферментативной активностью каталитических доменов стромализина человека и лейкоцитной коллагеназы. 3 з.п.ф-лы, 4 табл.

Изобретение относится к циклическим и гетероциклическим N-замещенным α-иминогидроксамовым и карбоновым кислотам, к способам их получения и к их применению в качестве лекарственных средств.

В Европейской заявке ЕР 0606046 описаны некоторые производные арилсульфонамидо-гидроксамовых кислот и их действие в качестве ингибиторов матрикс-металлопротеиназы.

В стремлении найти другие эффективные соединения для лечения заболеваний соединительной ткани теперь обнаружено, что производные иминогидроксамовых кислот согласно изобретению являются ингибиторами металлопротеиназ.

Изобретение относится к соединению I и/или в случае необходимости к стереоизомерной форме соединения формулы I, и/или к физиологически переносимой соли соединения формулы I, причем для случая i) R¹ обозначает а) остаток формулы II b) остаток формулы III с) остаток формулы IV
где Z обозначает остаток гетероцикла или замещенный гетероцикл,
1) пиррол,
2) тиазол,
3) пиразол,
4) пиридин,
5) имидазол,
6) пирролидин,
7) пиперидин,
8) тиофен,
9) оксазол,
10) изоксазол,
11) морфолин или
12) пиперазин,
d) нафтил,
e) нафтил, замещенный однократно или трехкратно через R², или
f) остаток формулы V

где Q обозначает число 1 или 2, и один из атомов углерода в кольце в случае необходимости замещенный -О- или -S-, и Q обозначает часть структурной формулы I

1) является структурной частью VI

2) является структурной частью VII

3) является структурной частью VIII

4) является структурной частью IX

или
5) является структурной частью X

где D обозначает NR⁴ или S,
R² обозначает
1) фенил или
2) фенил, замещенный однократно-трехкратно
2.1 гидрокси,
2.2 -O-R¹⁰, где R¹⁰ обозначает
1) (C₁-C₆)-алкил,
2) (C₃-C₆)-циклоалкил,
3) бензил или
4) фенил,
2.3 -COOH,
2.4 (C₁-C₆)-алкил,
2.5 (C₃-C₆)-циклоалкил-O-(C₁-C₄)-алкил,
2.6 галоген,
2.7 -CN,
2.8 -NO₂,
2.9 -CF₃,
2.10 -O-C(O)-R¹⁰ и R¹⁰, как определено выше,
2.11 -O-C(O)-фенил, замещенный однократно или двукратно R³,
2.12 -C(O)-O-R¹⁰ и R¹⁰, как определено выше,
2.13 метилендиоксо,
2.14 -C(O)-NR¹¹R¹², где
R¹¹ и R¹² могут быть одинаковыми или различными и могут означать
1) атом водорода,
2) (C₁-C₄-алкил или
3) бензил или
4) вместе с N-атомом, с которым они связаны, образуют остаток пирролидина, пиперидина, морфолина или пиперазина, или
2.15 -NR¹³R¹⁴, где
R¹³ обозначает атом водорода или (C₁-C₄-алкил и где
R¹⁴ обозначает
1) атом водорода,
2) (C₁-C₄)-алкил,
3) бензил,
4) -C(O)-R¹⁰ или
5) -C(O)-O-R¹⁰,
R³ и R⁴ одинаковые или различные и обозначают
1) атом водорода,
2) (C₁-C₅)-алкил,
3) (C₁-C₅)-алкокси,
4) галоген,
5) гидрокси,
6) -O-C(O)-R¹⁰ и R¹⁰, как определены выше, или
7) R³ и R⁴ образуют вместе остаток -O-CH₂-O-,
R⁵ обозначает
a) атом водорода,
b) (C₁-C₅)-алкил или
с) бензил, и
R⁶, R⁷ и R⁸ одинаковые или различные и обозначают
a) атом водорода, или
b) имеют значение для случая i) R² в пунктах 2.1 до 2.14,
и
n обозначает 0, 1 или 2,
m обозначает 0, 1 или 2, причем сумма n и m составляет 1, 2 или 3, или причем для случая ii)
R¹ обозначает
1) фенил или
2) фенил, замещенный однократно-трехкратно R², определен как для случая i) в пунктах 2.1 до 2.15,
Q является структурной частью X и
R⁶, R⁷ и R⁸ одинаковые или различные и определены выше,
n обозначает 1 и
m обозначает 1, или
причем для случая iii)
R¹, Q, R⁶, R⁷ и R⁸ одинаковые или различные и имеют названное для случая ii) значение,
m и n обозначают 0, 1 или 2 и причем значение m и n неодинаковое, и
X является
а) ковалентной связью,
b) -О-,
с) -S-,
d) -S(O)-,
е) -S(O)₂-,
f) -C(O)- или
g) -C(OH)-, и
Y является
a) -О- или
b) -S-, и
A является HO-NH-C(O)- или HO-C(O)- и
В является a) -(CH₂)_q-, где q обозначает 0, 1, 2, 3 или 4, или b) -CH= CH-.

Предпочтительными являются соединение формулы I и/или физиологически переносимая соль соединения формулы I и/или стереоизомерная форма, в случае необходимости, соединения формулы I, причем
R¹ для случая i) обозначает остаток формулы II или III и
Q обозначает структурную часть VI, VII, VIII или X,
R¹ для случая ii) обозначает фенил или фенил, замещенный однократно-трехкратно через метокси, и Q обозначает структурную часть X, или
R¹ для случая iii) обозначает фенил, Q обозначает структурную часть X и n обозначает 0, и m обозначает 2,
и
A обозначает HO-NH-C(O)- или HO-C(О)-,
B обозначает ковалентную связь,
X обозначает атом кислорода или ковалентную связь, и
R² обозначает фенил или фенил, замещенный через
a) гидрокси,
b) -O-R¹⁰, где R¹⁰ обозначает (C₁-C₃)-алкил или бензил,
с) (C₁-C₂)-алкил,
d) фтор или хлор,
е) -CN,
f) -CF₃ или
g) NR¹³R¹⁴, где R¹³ и R¹⁴ обозначают (C₁-C₃)-алкил,
R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ и R⁸ одинаковые или различные и обозначают
а) атом водорода,
b) метокси,
c) метилендиоксо,
d) амино или
e) гидрокси.

Особенно предпочтительными являются соединения:
R-2-(бифенилсульфонил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-гидроксамовая кислота,
R-2-(4-хлор-бифенилсульфонил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-гидроксамовая кислота,
R-2-(4-хлор-бифенилсульфонил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбоновая кислота,
R-2-(4-феноксибензолсульфонил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-гидроксамовая кислота,
R-2-(4-феноксибензолсульфонил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбоновая кислота,
R-2-(4-(4-диметиламинофенокси)-бензолсульфонил)-1,2,3,4- тетрагидроизохинолин-3-гидроксамовая кислота,
R-2-(4-диметиламинобифенилсульфонил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбоновая кислота,
R-2-(4-бензоилфенилсульфонил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-гидроксамовая кислота,
R-2-(4-метоксибензолсульфонил)-7-гидрокси-1,2,3,4-третрагидроизохинолин-3-гидроксамовая кислота,
R-2-(4-метоксибензолсульфонил)-7-нитро-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-гидроксамовая кислота,
2-(4-метоксибензолсульфонил)-6,7-пропилен- 1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-1-гидроксамовая кислота,
R-5-(4-метоксибензолсульфонил)-4,5,6,7-тетрагидро-1Н-имидазо-(4,5-с)- пиридин-6-гидроксамовая кислота,
R-2-(4-метоксибензолсульфонил)-1,2,3,4-тетрагидро-9Н-пиридо-(3,4-с)-индол- 3-гидроксамовая кислота,
R-2-(4-феноксибензолсульфонил)-1,2,3,4-тетрагидро-9Н-пиридо-(3,4-с)-индол-3-гидроксамовая кислота.

Далее, следует особенно подчеркнуть такие соединения формулы I, в которых центральный атом углерода между аминогруппой и кислотной группой существует как R-энантиомер.

Под понятием галоген подразумевают фтор, хлор, бром или йод.

Под понятием алкил или алкокси подразумевают остатки, углеродная цепь которых может быть прямой, разветвленной или циклической. Циклические остатки алкила представляют, например, 3 - 6-членные моноциклы, такие как циклопропил, циклобутил, циклопентил или циклогексил.

К гетероциклам формулы V относятся, например, тиоморфолин, пиперидин, морфолин или пиперазин.

Подходящие физиологически переносимые соли соединения формулы представляют собой, например, щелочные, щелочноземельные и аммониевые соли, включая соли органических оснований аммония или основные аминокислоты.

Изобретение относится также к способу получения соединения формулы I и/или физиологически переносимой соли соединения формулы I, и/или в случае необходимости стереоизомерной формы соединения формулы I, который отличается тем, что
а) иминокислота формулы XI

где остатки Q, а также n и m определены в формуле I, вступает в реакцию взаимодействия с (C₁-C₄)-спиртом или с бензиловым спиртом до соединения формулы XII,

где R_x обозначает (C₁-C₄)-алкил или бензил, или
b) полученное по способу а) соединение формулы XII вступает в реакцию взаимодействия с соединением формулы XIII,

где R¹ определен как в формуле I и R_z обозначает атом хлора, имидазолил или -ОН, в присутствии основания или, в случае необходимости, обезвоживающего средства до соединения формулы XIV,

где Q, R¹, n и m определены в формуле I и R_x определен в формуле XII, или
с) полученное по способу а) соединение формулы XII вступает в реакцию взаимодействия с основанием и затем с соединением формулы XIII до соединения формулы XIV, или
d) соединение формулы XI вступает в реакцию взаимодействия с соединением формулы XIII до соединения формулы XV

где Q, R¹, n и m определены в формуле I, или
e) соединение формулы XIV превращают до соединения формулы XV, или
f) полученное по способу b) или c) соединение формулы XIV вступает в реакцию взаимодействия с гидроксиламином формулы XVI,
(XVI) H₂N-OR_Y,
где R_Y обозначает атом водорода или защитную группу кислорода, до соединения формулы I и, в случае необходимости, отщепляют защитную группу кислорода, или
g) полученное по способу d) или e) соединение формулы XV вступает в реакцию взаимодействия с гидроксиламином формулы XVI до соединения формулы I, или
h) полученное по способам f) или g) соединение формулы I, которое появляется на основе своей химической структуры в энантиомерных формах, путем солеобразования с чистыми энантиомерными кислотами или основаниями, хроматографией на хиральных неподвижных фазах или в результате образования производных с помощью хиральных чистых энантиомерных соединений, таких как аминокислоты, разделением полученных диастереомеров и отщеплением хиральной вспомогательной группы разделяют на чистые энантиомеры, или
i) полученное по способам f), g) или h) соединение формулы I выделяют или в свободной форме или в случае наличия кислых или основных групп превращают, в случае необходимости в физиологически переносимые соли.

Реакцию взаимодействия согласно стадии способа а) осуществляют для случая (C₁-C₄) спиртов в присутствии газообразной HCl или хлористого тионила при обычных условиях реакции. Получение соответствующих бензиловых эфиров формулы XII происходит в бензоле или толуоле с соответствующим спиртом и кислотой, как p-толуолсульфокислота. Третичные бутиловые эфиры можно получать, например, известными способами с изобутаном и серной кислотой.

Реакцию взаимодействия согласно стадии способа b) осуществляют в присутствии основного соединения, такого как N-метилморфолин (NMM), N-этилморфолин (NEM), триэтиламин (TEA), диизопропилэтиламин (DIPEA), пиридин, коллидин, имидазол, или карбонат натрия в растворителях, как тетрагидрофуран (THF), диметилформамид (DMF), диметилацетамид, диоксан, ацетонитрил, толуол, хлороформ или хлористый метилен, или также в присутствии воды. Предпочитают применять хлорангидриды сульфокислоты формулы XIII в присутствии NMM в THF.

Реакцию взаимодействия согласно стадии способа с) осуществляют в присутствии основания, как КОН, LiOH или NaOH.

Реакцию взаимодействия согласно стадии способа d) осуществляют в водной органической системе растворителей, предпочтительно в THF и воде в присутствии основания, такого как карбонат натрия, и соединения формулы XIII. Далее, реакцию взаимодействия можно осуществлять без растворителей с основанием или без основания при пониженном давлении, которое достигают с масляным насосом.

Омыление соединения формулы XIV до соединения формулы XV (стадия способа е) осуществляют, например, с основанием, предпочтительно кислым, или в случае производных бензила через гидрогенолиз. В случае омыления с основанием необходимо высвобождать карбоновую кислоту путем обработки другой кислотой, например разбавленной соляной кислотой, из соли карбоновой кислоты.

Реакцию взаимодействия согласно стадии способа f) осуществляют при обычных для образования амидов карбоновой кислоты условиях в подходящем растворителе, например в спиртах или диметилформамиде.

При превращении согласно стадии способа g) карбоновые кислоты формулы XV активируют. Активированные карбоновые кислоты представляют собой, например, ацилгалогениды, ацилазиды, смешанные ангидриды и карбонаты. Предпочитают ацилхлориды или ацилфториды, смешанные ангидриды и карбонаты из пивалоилхлорида, этил-, изопропил- или изобутилхлороформата; активные эфиры, как цианоэтил, о- или p-нитрофенил, сукцинимидо или фталимидо, а также получаемые путем реагентов сочетания, как диизопропилкарбодиимид (DIC), карбонил-диимидазол (CDI), дициклогексилкарбодиимид (DCC) или бензо-триазолилтетраметилуроний тетрафторборат (TBTU), в случае необходимости при добавке гидроксибензотриазола (HObt) или оксогидроксибензотриазина (HOObt), полученные активированные карбоновые кислоты, предпочитают причем в качестве растворителей апротонные растворители.

Используемые исходные продукты и реактивы можно получать известными способами или покупать.

В качестве подходящих иминокислотам формулы XI, у которых n и m обозначают 1, следует назвать, например, 1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбоновую кислоту, 1,2,3,4-тетрагидро-9Н-пиридо(3,4-6)-индол-3-карбоновую кислоту или в случае необходимости 1- или 3-замещенные 4,5,6,7-тетрагидро-1Н-имидазо-(4,5-с)-пиридин-6-карбоновые кислоты. Их получение осуществляют предпочтительно циклизацией соответствующих аминокислот с формальдегидом в присутствии кислоты, такой как соляной или серной кислоты, по методу Пиктета-Шпенглера (см. W.М. Whaley, Органические реакции 6 (1951)151).

Для случая, когда у иминокислоты формулы XI n обозначает 0 и m обозначает 2, можно в качестве исходного продукта использовать, например, 1,2,3,4-тетрагидро-9Н-пиридо(3,4-6)индол-1-карбоновую кислоту и 6,7-пропилен-1,2,3,4-тетраизохинолин-1-карбоновую кислоту. Для получения последнего соединения индан алкилируют по Фриделю-Крафтсу с фенилсульфониларциридином. Циклизацию полученного 4-(2- бензолсульфонамидоэтил)индана осуществляют с глиоксалевой кислотой в HBr/ледяной уксусной кислоте; последующее отщепление остатка бензолсульфонила с йод/красным фосфором в HBr/ледяной уксусной кислоте.

Как пример для случая, когда в соединении XI n обозначает 1 и m обозначает 0, следует назвать индолин-2-карбоновую кислоту. Ее получение осуществляют, например, каталитическим гидрированием индол-2-карбоновой кислоты. Далее, следует назвать циклизацию 2- хлорфенил-аланина или 2-гидрокси-3-(2-хлорфенил)-пропионовой кислоты до иминокислот формулы XI.

Поскольку соединения формулы I допускают диастерео-изомерные или энантиомерные формы и при выбранном синтезе получаются их смеси, удается разделить на чистые стереоизомеры или хроматографией, в случае необходимости, на хиральном веществе-носителе, или, поскольку рацемическое соединение формулы I или соединение формулы XI способно к солеобразованию, дробной кристаллизацией с оптически активным основанием или кислотой с образованием диастереомерных солей в качестве вспомогательных веществ. Как хиральные стационарные фазы для разделения тонкослойной хроматографией или хроматографией на колонке энантиомеров подходят, например, модифицированные носители с силикагелем (так называемые Пиркле-фазы) и высокомолекулярные углеводы, такие как триацетилцеллюлоза. Для аналитических целей по соответствующему, известному специалисту по дериватизации используют также методы газовой хроматографии на хиральных стационарных фазах. Для разделения энантиомеров рацемических карбоновых кислот образуют с оптически активным, как правило, имеющимся в продаже основанием, как (-)-никотин, (+)- и (-)- фенилэтилаланин, основания хинина, L-лизин или L - D-аргинин, различные растворимые диастереомерные соли, труднорастворимые компоненты выделяют как твердое вещество, легкорастворимые диастереомеры осаждают из маточного раствора, и из образованных таким способом диастереомерных солей получают чистые энантиомеры. В принципе, таким же способом можно рацемические соединения формулы I, которые содержат основную группу как аминогруппу, переводить с оптически активными кислотами, как (+)-камфара-10- сульфокислота, D- и L-винная кислота, D- и L-молочная кислота, а также (+)- и (-)-миндальная кислота, в чистые энантиомеры. Хиральные соединения, которые содержат спиртовые или аминовые функции, можно также переводить с соответственно активированными или в случае необходимости N-защищенными чистыми энантиомерными аминокислотами в соответствующие эфиры или амиды, или, наоборот, хиральные карбоновые кислоты можно с карбоксизащищенными чистыми энантиомерными аминокислотами переводить в амиды или с чистыми энантиомерными гидроксикарбоновыми кислотами, такими как молочная кислота, переводить в соответствующие хиральные эфиры. Затем хиральность введенного в энантиомерно-чистой форме остатка аминокислоты или остатка спирта можно использовать для разделения изомеров, причем разделение существующих теперь диастереомеров осуществляют кристаллизацией или хроматографией на подходящих стационарных фазах и после этого имеющуюся хиральную часть молекулы снова отщепляют подходящими методами.

Кислые или основные продукты соединения формулы I могут существовать в форме их солей или в свободной форме. Предпочтительными являются фармакологически переносимые соли, например щелочные или щелочноземельные соли или гидрохлориды, гидробромиды, сульфаты, гемисульфаты, все возможные фосфаты и соли аминокислот, природные основания или карбоновые кислоты.

Гидроксиламин можно применять в свободной форме, получаемой из солей гидроксиламина и подходящего основания в растворе или в О-защищенной форме или соответственно также в форме его солей. Получение свободного гидроксиламина известно из литературы и может осуществляться, например, в спиртовом растворе. Предпочитают применять гидрохлорид вместе с алкоголятами, такими как метанолат Na, гидроокись калия или t-бутанолат калия.

O-защищенные производные гидроксиламина содержат отщепляемые предпочтительно при мягких условиях защитные группы. Здесь предпочитают особенно защитные группы типа силила, бензила и ацеталя. При этом предпочтительны особенно О-триметилсилил-, О-трет-бутилдиметилсилил-, О-бензил, O-третбутил и О-тетрагидропиранил-производное.

Исходные соединения и промежуточные продукты, которые применяют для получения соединения формулы I, можно вводить в подходящей защищенной форме, поскольку они содержат функциональные группы, такие как гидрокси, тиол, амино или карбоксил, напр. при остатках R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ и R⁸.

Введение защитных групп необходимо во всех тех случаях, в которых следует ожидать при желательной химической реакции нежелательные побочные реакции в других местах, чем в центрах реакции (Т. W. Greene, Защитные группы в органическом синтезе, Wiley, Нью-Йорк, 1991).

Введенные защитные группы можно отщеплять перед или после реакции взаимодействия соединения формулы XII до соединения формулы I.

В качестве вспомогательных веществ и оснований можно применять особенно: HObt, HOObt, N-гидроксисукцинимид (HOSu), TEA, NMM, NEM, DIPEA, имидазол. Предпочтительными растворителями для реакций являются: дихлорметан (DCM), THF, ацетонитрил, N,N-диметилацетамид (DMA), DMF и N-метилпирролидон (NMP).

Предпочтительные температуры составляют между -78^oC и +90^oC, в зависимости от температуры кипения и вида используемого растворителя. Особенно предпочтительной является область температур от -20 до +30^oC.

Получение физиологически переносимых солей из способных к солеобразованию соединений формулы I, включая их стереоизомерные формы, осуществляют известным способом. Карбоновые кислоты и гидроксамовые кислоты образуют с основными реагентами, как гидроокиси, карбонаты, гидрокарбонаты, алкоголяты, а также аммиак или органические основания, например триметил- или триэтиламин, этаноламин или триэтаноламин, или также с основными аминокислотами, например лизин, орнитин или аргинин, стабильные щелочные, щелочноземельные или, в случае необходимости, замещенные аммониевые соли. Поскольку соединения формулы I имеют основные группы, с сильными кислотами можно получать также устойчивые кислые аддитивные соли. Для этого применяют как неорганические, так и органические кислоты, как хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, фосфорная кислота, метансульфокислота, бензолсульфокислота, p-толуолсульфокислота, 4-бромбензолсульфокислота, циклогексиламидосульфокислота, трифторметилсульфокислота, уксусная кислота, щавелевая кислота, винная кислота, янтарная кислота или трифторуксусная кислота.

Изобретение относится также к лекарственным средствам, которые отличаются эффективным содержанием, по меньшей мере, соединения формулы I и/или физиологически переносимой соли соединения формулы I, и/или, в случае необходимости, стереоизомерной формы соединения формулы I вместе с фармацевтически пригодным и физиологически переносимым веществом-носителем, дополнительным веществом и/или другими активными и вспомогательными веществами.

На основе фармакологических свойств соединения согласно изобретению подходят для профилактики и терапии всех таких заболеваний, в протекании которых участвует усиленная активность расщепляемых матрицей металлопротеиназ. К ним же принадлежат артропатии такие, как остеоартрозы, спондилезы, атрофия хряща после травмы сустава или длительного положения сустава в состоянии покоя после повреждений мениска или коленной чашечки или разрывов связок. Далее, сюда относятся также заболевания соединительной ткани, такие как коллагенозы, околозубные боли, нарушения при заживлении раны и хронические заболевания двигательного аппарата, такие как воспалительные, иммунологические или обусловленные обменом веществ острые и хронические артритиды, артропатии, миалгии и нарушения обмена веществ в костях. Далее, соединения формулы I пригодны для лечения изъязвления, атеросклероза и стенозов. Далее, соединения формулы I значительно подавляют высвобождение клеточной опухоли некрозного фактора (TNFα) и применяются поэтому для лечения воспалений, раковых заболеваний, образований метастазов опухоли, истощения, отсутствия аппетита и септического шока.

Лекарственные средства согласно изобретению назначают, в общем, орально или парентерально. Возможно также ректальное применение или через кожу.

Изобретение относится также к способу получения лекарственного средства, который отличается тем, что, по меньшей мере, соединение формулы I приводят в подходящую форму введения с фармацевтически пригодным и физиологически переносимым носителем и, в случае необходимости, с другими подходящими активными веществами, добавками или вспомогательными веществами.

Подходящие твердые или галеновые лекарственные формы представляют собой, например, грануляты, порошки, драже, таблетки, (микро) капсулы, свечи, сиропы, соки, суспензии, эмульсии, капли или растворы для инъекций, а также препараты с замедленным высвобождением активного вещества, при изготовлении которых применяют обычные вспомогательные средства, такие как вещества-носители, средства взрывания, связывающие вещества, покрытия, средства набухания, смазывающие средства или втирающие средства, вкусовые средства, сахаристые вещества и агенты растворения. В качестве часто применяемых вспомогательных веществ следует назвать карбонат магния, двуокись титана, лактозу, маннит и другие сахара, тальк, белок молока, желатину, крахмал, целлюлозу и их производные, животные и растительные масла, такие как рыбий жир, подсолнечное масло, арахисовое масло или кунжутное масло, полиэтиленгликоль и растворители, такие как, например, стерильная вода и одно- или многоатомные спирты, такие как глицерин.

Предпочтительно фармацевтические препараты изготовляют и назначают в дозировочных единицах, причем единица в качестве активной составной части содержит определенную дозу соединения формулы I согласно изобретению. При твердых дозировочных единицах, таких как таблетки, капсулы, драже или свечи, эта доза может составлять приблизительно до 1000 мг, однако предпочтительно около 50 - 300 мг, и при растворах для инъекций в форме ампул приблизительно до 300 мг, а предпочтительно около 10-100 мг.

Для лечения взрослого пациента весом около 70 кг - в зависимости от эффективности соединений по формуле I - показаны суточные дозы приблизительно от 20 мг до 1000 мг активного вещества, предпочтительно около 100 мг - 500 мг. Однако при известных условиях можно применять также повышенные или пониженные дозы. Назначение суточной дозы можно осуществлять как однократным приемом в форме отдельной дозировочной единицы или же нескольких небольших дозировочных единиц, так и многократным приемом раздельных доз в определенные интервалы времени.

¹H-NMR-спектры были сняты на 200 МГц-приборе фирмы Вариан, как правило, с тетраметилсиланом (TMS) в качестве внутреннего стандарта и при комнатной температуре (RT). Соответственно указаны примененные растворители. Конечные продукты определяют, как правило, методами масс-спектроскопии (FAB-, ESI-MS). Температурные данные в градусах Цельсия, RT обозначает комнатную температуру (22-26^oC). Примененные сокращения или пояснены или соответствуют обычным конвенциям.

Примеры получения:
Получение соединений 1 - 12, 14 - 23, 27, 30 и 33 таблицы 1 осуществляли аналогично представленным в примерах 13, 24 - 26, 28, 29, 31 и 32 способам.

В примерах 4 - 9 осуществляли сначала сульфонирование с p-(примеры 4, 6, 9) или m-(примеры 5, 7, 8)- нитробензолсульфонилхлоридом, как описано в пункте "Tic- сульфирование" (см. пример 13). Затем происходит гидрирование нитрогруппы при стандартных условиях, которые известны специалисту, с водородом при нормальном давлении и с 10% Pd на активном угле в метаноле до амина.

Во всех случаях можно также применять для сульфонирования описанный в примере 13 Tic-бензиловый эфир. В этом случае при последующем гидрировании происходит одновременно отщепление бензилового эфира и восстановление до амина. Полученные в обоих случаях идентичные продукты p- или m-аминобензолсульфонил-Tic превращают затем как указано ниже.

Пример 4
Сначала осуществляют ацетилирование при стандартных условиях (Триэтиламин/DМАР/ацетангидрид); полученное с хорошим выходом N-ацетил-соединение превращают затем, как описано в примере 25, до гидроксамовой кислоты.

Примеры 5 и 6
С целью получения гидроксамовой кислоты для активирования p-аминобензолсульфонил-Tic действуют по такому же способу, как описано в примере 13, только используют удвоенное количество этилового эфира хлормуравьиной кислоты и N-метилморфолина. Происходит необратимое N-этоксикарбонилирование в стадии с активированием карбоновой кислоты.

Примеры 7, 8 и 9
Вышеописанный p- или m-аминобензолсульфонил-Tic ацилируют при известных специалисту условиях реакции Шоттена-Бауманна. Для этого используют пример 7: хлорид салициловой кислоты, пример 8: хлорид p-метоксибензойной кислоты, пример 9: бензиловый эфир хлормуравьиной кислоты. Последующее превращение до гидроксамовой кислоты осуществляют, как описано в примере 25.

Пример 13
R-2-(4-феноксибензолсульфонил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-гидроксамовая кислота.

Общее предписание:
Tic-бензиловый эфир p-толуолсульфонат.

1 моль Tic (свободная аминокислота), 10 моль бензилового спирта и 1 моль p-толуолсульфокислоты моногидрата растворяют в 1,2 л толуола или суспендируют и нагревают на водоотделителе с обратным потоком. После окончания реакции растворитель выпаривают, твердый кристаллический остаток многократно поглощают в диэтиловом эфире и отсасывают, а затем сушат в вакууме с масляным насосом.

Выход: количественный.

¹H-NMR: (200 МГц, δ в ппм, DMSO-d₆) 9,7 (s, br., 2H, прот. NH), 7,5 - 7,25 (2m, 7H, аром.), 7,1 (d, 2H, аром. p-TsOH), 5,3 (s, 2H, CH₂ бензил); 4,7 (dd, 1H, CH α); 4,4 (d, 2H, CH₂); 3,4-3,1 (m, 2H, CH₂); 2,3 (s, 1H, CH₃ p-TsOH).

Tic-сульфирование
0,1 моль Tic-раствора (свободная аминокислота 17,7 г) в 50 мл 2 н. водной NaOH смешивают при 0^oC с измельченным в порошок хлорангидридом сульфокислоты (105 ммоль) в присутствии 14,2 г (110 ммоль) диизопропилэтиламина и 50 мл ацетона или THF. Через 10 минут удаляют ледяную баню и перемешивают более или менее однородный раствор еще 6 часов при RT. Затем реакционный раствор концентрируют, смешивают с 300 мл уксусного эфира и подкисляют при помощи 4 н. HCl. Органическую фазу отделяют, водную фазу экстрагируют еще два раза по 50 мл уксусного эфира. Соединенные органические фазы встряхивают с насыщенным раствором NaCl и сушат над сульфатом натрия. После отгонки растворителя остается сульфонированная тетрагидроизохинолинкарбоновая кислота в виде маслянистого или твердого остатка, который во многих случаях можно очищать перекристаллизацией из эфира уксусной кислоты/петролейного эфира, но он также часто уже достаточно чистый для последующей реакции превращения.

13a. Метиловый эфир R-2-(4-феноксибензолсульфонил)-1,2,3,4- тетрагидроизохинолин-3-карбоновая кислота.

Раствор 1,92 г (0,01 моль) метилового эфира R-1,2,3,4- тетрагидроизохинолин-3-карбоновой кислоты и 2,7 г (0,01 моль) хлорангидрида 4-феноксибензолсульфокислоты в 50 мл абсолютного THF нагревают в присутствии 1,7 мл (0,01 моль) N-этилморфолина 8 часов при обратном потоке. После удаления растворителя остаток поглощают в дихлорметане и встряхивают по очереди с 5% лимонной кислоты, 5% раствора бикарбоната натрия и 2 раза с водой. Высушивание над сульфатом натрия и концентрирование органической фазы дает эфир, который без очистки вводят во взаимодействие дальше.

Выход: 4,0 г (95% от теории) 13a.

13b. R-2-(4-феноксибензолсульфонил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбоновая кислота.

Раствор 4,0 г (9,5 ммоль) эфира (13a) в 50 мл изо-пропанола после добавки 9,5 мл 1 н. натрового щелока перемешивают 24 часа при комнатной температуре. После этого подкисляют при помощи 1 н. соляной кислоты и смесь при пониженном давлении концентрируют досуха. Остаток поглощают в толуоле, встряхивают с 5% лимонной кислотой и после сушки органической фазы над сульфатом натрия выпаривают в вакууме.

Выход: 3,4 г карбоновой кислоты 13б (83% от теории). Точка плавления: 147^oC.

13c. R-2-(4-феноксибензолсульфонил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин- 3-карбоновая кислота.

3,4 г (8,3 ммоль) карбоновой кислоты 13b растворяют в 30 мл DMF и при -20^oC смешивают по очереди с 1,4 г (12 ммоль) N- этилморфолина и 1,13 г (8,3 ммоль) изобутилового эфира хлормуравьиной кислоты. После 30 минут активирования смешивают с 4,37 г (41,5 ммоль) О-триметилсилилгидроксиламина и перемешивают еще 4 часа при комнатной температуре. После добавки 250 мл уксусного эфира и 500 мл воды подкисляют лимонной кислотой. После отделения органической фазы и 4-кратного встряхивания водной фазы соединенные органические фазы сушат над сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Перекристаллизация из толуола/уксусного эфира (1:1) дает соединение 13, указанное в названии примера. Выход: 2,9 г (82% от теории), точка плавления: 170^oC (разложение).

Пример 17
Для сульфонирования Tic-бензилового эфира при стандартных условиях (см. пример 13) используют транс-бета-стиролсульфонилхлорид. При последующем гидрировании (H2, Pd/C) в одной стадии дебензилирования осуществляют и гидрирование двойной связи. Затем происходит образование гидроксамовой кислоты аналогично примеру 25.

Примеры 20, 21 и 22
Исходят из имеющегося в продаже 7-гидрокси-Tic. Это соединение при стандартных условиях подвергают сульфонированию аналогично варианту способа d). При этом после обычной переработки получают смесь 2- и 7-дисульфированного и только 2-сульфированного-7-гидрокси-Tic. Однако на этой стадии можно отказаться от разделения этих соединений. Непосредственно осуществляют дальнейшее превращение до гидроксамовой кислоты при стандартных условиях. Как ожидается, оно происходит при этом во время активирования до частичного этоксикарбонилирования 7-гидроксигруппы. Поэтому смесь гидроксамовой кислоты-продукта содержат все три продукта, которые можно разделять хроматографией на силикагеле 60, препаративной тонкослойной хроматографией или HPLC.

Пример 23
Для получения 7-нитро-Tic исходят из энантиомерно-чистого имеющегося в продаже (R)-Tic-OH или (S)-Tic-OH. Последний получают по E.D.Bergann, J.Am. Chem. Soc. 74, 4947 (1952) или по E. Erlenmever, A. Lipp, Liebigs Ann. Chem. 219, 218 (1983) нитрованием с нитрующей кислотой. При этом образуется смесь 6- и 7-нитроизомеров, причем в реакционной смеси также содержится, кроме того, еще ненитрированное исходное соединение. Перед разделением сначала осуществляют
сульфонирование смеси при стандартных условиях. Полученную смесь трех сульфонамидов можно хроматографировать теперь на силикагеле 60. Получают последовательно смешанные фракции, которые содержат эдукт/6-нитро- и 6-нитро-/7-нитро-(4-метоксибензолсульфонил)-Tic; наконец, извлекают чистые фракции 7-нитро-соединения. Последние можно, аналогично примеру 25, превращать дальше до гидроксамовой кислоты.

Пример 24
2-(4-метоксибензолсульфонил)-6,7-метилендиокси-1,2,3,4- тетрагидроизохинолин-3-гидроксамовая кислота.

Получение соответствующего бензилового эфира карбоновой кислоты из карбоновой кислоты соответствует общему предписанию (см. пример 13). Для сульфонирования или отщепления бензилового эфира действуют аналогично примеру 25a. Превращение свободной сульфонированной карбоновой кислоты происходит, как описано в 25b.

Продукт после обработки диэтиловым эфиром получается в кристаллической форме. Выход: 140 мг, 57% от теории; точка плавления 166^oC.

Пример 25
2-(4-метоксибензолсульфонил)-6,7,8-триметокси-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-гидроксамовая кислота.

25a. 2-(4-метоксибензолсульфонил)-6,7,8-триметокси-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбоновая кислота.

Получение бензилового эфира осуществляют по общему предписанию (см. пример 13). Для сульфирования применяют 1,2 г (3,05 ммоль) бензилового эфира. Последний растворяют в 20 мл THF и при 0^oC смешивают с 0,63 г (3,05 ммоль) хлорангидрида 4-метоксибензолсульфокислоты. После добавки 0,32 мл N-метилморфолина перемешивают в течение ночи при 0^oC до комнатной температуры. Затем смешивают с 20 мл уксусного эфира и встряхивают с 10%-ным раствором карбоната натрия и с насыщенным раствором NaCl. Органическую фазу сушат над сульфатом натрия, фильтруют и выпаривают при пониженном давлении. Остающийся остаток хроматографируют на силикагеле 60 с уксусным эфиром/петролейным эфиром/ледяной уксусной кислотой 20/10/1 под давлением. Чистые фракции продукта (600 мг) соединяют и после суживания непосредственно гидрируют с 100 мг 10%-ного Pd/C в 50 мл этанола. После окончания реакции катализатор отделяют и остающийся раствор выпаривают при пониженном давлении. Получают 330 мг (66% от теории).

25b. 2-(4-метоксибензолсульфонил)-6,7,8-триметокси-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-гидроксамовая кислота.

330 мг (0,75 ммоль) карбоновой кислоты из примера 25a растворяют в 15 мл THF и при -20^oC последовательно друг за другом смешивают с 0,07 мл (0,75 ммоль) этилового эфира хлормуравьиной кислоты и 0,15 мл (1,5 ммоль) N-метилморфолина (NММ). После 30 минут выдержки при этой температуре смешивают с 0,474 мл O-триметилсилилгидроксиламина (3,75 ммоль). После 6 часов выдержки при комнатной температуре добавляют 30 мл уксусного эфира и встряхивают с 20%-ной водной лимонной кислотой и с насыщенным раствором NaCl. После сушки органической фазы над сульфатом натрия и выпаривания при пониженном давлении остаются 290 мг светлого вязкого масла, которое путем обработки с диэтиловым эфиром делают кристаллическим.

Пример 26
2-(морфолиносульфонил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-гидроксамовая кислота.

26a. Метиловый эфир 2-(морфолиносульфонил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбоновой кислоты.

В раствор 4,8 г (0,025 моль) метилового эфира 1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбоновой кислоты и 2,9 г (0,025 моль) N-этилморфолина прикалывают при перемешивании 4,2 г (0,025 моль) морфолин-N-хлорангидрида сульфокислоты в 20 мл THF. После 2 часов перемешивания при комнатной температуре нагревают для дополнения реакции после 2 часов при обратном потоке. После обработки обогащенного CHCl₃ реакционного раствора 5%-ной лимонной кислотой, 5%-ным раствором NaHCO₃ и водой органическую фазу сушат над Na₂SO₄ и концентрируют досуха. Выход эфира (26a): 7,5 г (92% от теории).

26b. 2-(морфолиносульфонил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбоновая кислота.

Превращение 7,5 г (0,023 моль) 26a аналогично 13b.

Выход карбоновой кислоты 26b: 6,7 г (93% от теории).

26c. 2-(морфолиносульфонил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-гидроксамовая кислота.

2,3 г (7,5 ммоль) карбоновой кислоты 26b растворяют в 40 мл абсолютного THF и при -20^oC последовательно смешивают с 1,2 г (12 ммоль) N-метилморфолина и 1,1 г (7,5 ммоль) изобутилового эфира хлормуравьиной кислоты. Через 30 минут смешивают с 3,9 г (37,5 ммоль) О-триметилсилилгидроксиламина и перемешивают еще 5 часов при комнатной температуре. После добавки 200 мл воды подкисляют разбавленной HCl и встряхивают несколько раз с дихлорметаном. Собранные органические фазы сушат над Na₂SO₄ и выпаривают при пониженном давлении. Полученное масло хроматографируют на силикагеле 60 под давлением с уксусным эфиром/дихлорметаном в качестве подвижной фазы (1:1).

Перекристаллизация фракций продукта из уксусного эфира дает кристаллическую гидроксамовую кислоту 26c.

Выход: 1,4 г (55% от теории), точка плавления: 164-165^oC (разложение).

Пример 28
1-(4-метоксибензолсульфонил)-индолин-2-гидроксамовая кислота.

28a. 1-(4-метоксибензолсульфонил)-индолин-2-карбоновая кислота.

1 г (6,1 ммоль) индолин-2-карбоновой кислоты и 2,5 г (12,2 ммоль) 4-метоксибензолсульфонилхлорида оставляют при 50^oC и при 0,02 мбар на 4 часа (h) в шаровидной трубке при постоянном медленном вращении. Буроватый кристаллический продукт поглощают затем в растворе карбоната натрия и дважды встряхивают с диэтиловым эфиром. Водную фазу подкисляют при помощи 6 н. HCl и четыре раза экстрагируют уксусным эфиром. Соединенные органические фазы после встряхивания с насыщенным раствором NaCl сушат над сульфатом натрия и выпаривают при пониженном давлении. Оставшиеся остатки растворителя удаляют в вакууме с масляным насосом.

Выход: 1,34 г (65% от теории).

¹H-NMR: (DMSO-d₆) 7,8 (2d, 4H, аром. p-TsOH); 7,4 - 7,0 (m, 4H, аром.); 4,9 (dd, 1H, CH α ); 3,8 (2, 3H, OMe); 3,4 - 2,9 (2dd, 2H, CH₂).

28b. 1-(4-метоксибензолсульфонил)-индолин-2-гидроксамовая кислота.

1,3 г (3,9 ммоль) 1-(4-метоксибензолсульфонил)-индолин-2- карбоновой кислоты по примеру 28a растворяют в 10 мл N,N- диметилацетамида (DMA) и при -20^oC последовательно смешивают с 0,37 мл (1 эквивалент) этилового эфира хлормуравьиной кислоты и 0,81 мл N-метилморфолина. После 30 минут активирования смешивают с 3,8 мл (19,5 ммоль) O-триметилсилилгидроксиламина и перемешивают еще 4 часа при комнатной температуре. После разбавления этиловым эфиром уксусной кислоты подкисляют лимонной кислотой и после отделения водной фазы промывают раствором NaCl. Органическую фазу сушат над сульфатом натрия, отфильтровывают и выпаривают при пониженном давлении. Полученное масло хроматографируют на силикагеле 60 под давлением с дихлорметаном/этиловым эфиром уксусной кислоты/уксусной кислотой 5,5/3,5/1 в качестве подвижной фазы. Фракции продукта (с продолжительной реакцией хлорида железа - III) соединяют и выпаривают. Затем кристаллический продукт смешивают с диэтиловым эфиром и при пониженном давлении освобождают от остатков растворителя.

Выход: 400 мг (33% от теории), точка плавления: 142^oC.

Пример 29
Гидрохлорид R-5-(4-метоксибензолсульфонил)-4,5,6,7-тетрагидро-1H-имидазо-(4,5-с)пиридин-6-гидроксамовой кислоты.

29a. R-3,5-Du(4-метоксибензолсульфонил)-4,5,6,7-тетрагидро-1H-имидазо- (4,5-с)пиридин-6-карбоновая кислота.

К раствору 6,1 г (30 ммоль) гидрохлорида 4,5,6,7-тетрагидро-1H-имидазо-(4,5-с)пиридин-6-карбоновой кислоты в 50 мл воды добавляют при охлаждении льдом друг за другом 15 мл 2N-NaOH и 4,5 г (42 ммоль) карбоната натрия.

При перемешивании осуществляют добавление 13,7 г (67 ммоль) 4-метоксибензолсульфонилхлорида в 40 мл простого эфира. После 24 часов дальнейшего перемешивания при комнатной температуре реакционную смесь устанавливают при охлаждении льдом на значении pH 3-4 и экстрагируют с уксусным эфиром. Органические фазы получают после высушивания над сульфатом натрия, фильтрования и концентрирования для высушивания 11,9 г (78% от теории) желаемого продукта в виде масла.

29b. Гидрохлорид R-5-(4-метоксибензолсульфонил)-4,5,6,7- тетрагидро-1H-имидазо-(4,5-с)пиридин-6-карбоновой кислоты.

К раствору 11,0 г (24 ммоля) Du-сульфонированного промежуточного продукта в 300 мл метанола прикапывают при охлаждении льдом в течение 1 часа соответственно 23,5 мл 1N-NaOH при перемешивании. После 6 часов осуществляют заключительное добавление 15 мл 1N-NaOH и перемешивают дальше при комнатной температуре в течение ночи. После удаления метанола в вакууме устанавливают смесь на pH 5 с помощью 5N-HCl. Выпавшие при этом кристаллы отсасывают и высушивают в вакууме выше Р = 205.

Выход: 5,2 г (60% от теории) продукта 29b.

Температура плавления: 264-265^oC (разложение).

29c. Гидрохлорид R-5-(4-метоксибензолсульфонил)-4,5,6,7-тетрагидро-1H-имидазо-(4,5-c)-пиридин-6-гидроксамовой кислоты.

8,0 г (24 ммоль) соединения 29b в 60 мл DMF смешивают с 4,27 г (24 ммоль) гидроокиси тетраметиламмония и после этого при 0^oC с 2,7 г (24 ммоль) N-этилморфолина и порциями с 5,2 г (24 ммоль) ди-трет-бутилдикарбоната. После перемешивания в течение ночи реакционную смесь выливают на ледяную воду, устанавливают до величины pH 5 при помощи разбавленной HCl и встряхивают несколько раз с этилацетатом. Соединенная, высушенная органическая фаза после удаления растворителя 10,5 г ВОС-защищенного соединения 29b, которое прямо используют для получения гидроксамовой кислоты.

Для этого 10,5 г (23 ммоль) вышеназванного соединения растворяют в 150 мл абсолютного THF и смешивают при -20^oC с 4,4 г (38 ммоль) N-этилморфолина и 3,4 г (25 ммоль) изобутилхлорформиата. После 1 часа перемешивания осуществляют добавку 10,9 г (0,1 моль) О-триметилсилилгидроксиламина, причем температуру поддерживают более 1 часа при -20^oC. После еще 4 часов перемешивания при комнатной температуре устанавливают в реакционной смеси pH 1 при помощи 1 н. HCl, смешивают с 300 мл воды и экстрагируют несколько раз с дихлорметаном. Соединенные органические фазы сушат над сульфатом натрия и концентрируют в вакууме досуха.

Для отщепления ВОС-защитной группы 8,1 г остающегося масла поглощают 50 мл дихлорметана и прикапывают при 0^oC 25 мл трифторуксусной кислоты. После 4 часов перемешивания при комнатной температуре реакционную смесь концентрируют в вакууме. Остаток дигидрируют с дихлорметаном, после этого растворяют в 0,1 н. HCl, фильтруют и сушат вымораживанием. Выход гидроксамовой кислоты 29: 5,2 г (56% от теории).

Точка плавления: 110^oC.

Пример 31
R-2-(4-метоксибензолсульфонил)-1,2,3,4-тетрагидро-9Н-пиридо- (3,4-б)-индол-3-гидроксамовая кислота.

31a. R-2-(4-метоксибензолсульфонил)-1,2,3,4-тетрагидро-9Н- пиридо-(3,4-б)-индол-3-карбоновая кислота.

Раствор 2,16 г (10 ммоль) 1,2,3,4-тетрагидро-9Н-пиридо (3,4-6)-индол-3-карбоновой кислоты в смеси 10 мл ацетона и 10 мл воды смешивают при добавке 10,5 мл 2 н. NaOH при перемешивании с 2,06 г (10 ммоль) 4-метоксибензолсульфонилхлорида. После 18-часового перемешивания при комнатной температуре и после удаления ацетона раствор доводят до pH 1 при помощи концентрированной HCl. Образующийся при этом осадок отфильтровывают, промывают водой и сушат.

Выход: 2,7 г карбоновой кислоты 31a (85% от теории).

Точка плавления: 232 - 234^oC.

31b. R-2-(4-метоксибензолсульфонил)-1,2,3,4-тетрагидро-9Н- пиридо (3,4-б)-индол-3-гидроксамовая кислота.

2,5 г (7,4 ммоль) карбоновой кислоты примера 31a растворяют в 40 мл абсолютного DMF и при -20^oC смешивают друг за другом с 1,4 мл (12 ммоль) N-этилморфолина и 0,97 мл (7,4 ммоль) изобутилового эфира хлормуравьиной кислоты. После времени активирования в 30 минут добавляют 4,53 мл (37 ммоль) O-триметилсилилгидроксиламина и затем перемешивают 19 часов при комнатной температуре. После установления в смеси pH 3,5 при помощи лимонной кислоты экстрагируют несколько раз с уксусным эфиром. Соединенные органические фазы сушат над сульфатом натрия, концентрируют при пониженном давлении и очищают на силикагеле хроматографированием с метиленхлоридом/метанолом (95:5).

Выход: 2,4 г гидроксамовой кислоты (91,5% от теории).

Точка плавления: 87^oC.

Пример 32
R-2-(4-феноксибензолсульфонил)-1,2,3,4-тетрагидро- 9Н-пиридо(3,4-б)-индол-3-гидроксамовая кислота.

Получение аналогично примеру 31.

Точка плавления: 110 - 111^oC.

Пример 33
R-2-(4-морфолинобензолсульфонил)-1,2,3,4-тетрагидро-9Н-пиридо(3,4-б)-индол-3-гидроксамовая кислота.

Получение аналогично примеру 31.

Точка плавления: 125^oC (разложение).

Примеры 34 - 41 приведены в табл. 2.

Пример 42
R-2-[4-(4-хлорфенокси)бензолсульфонил)-1,2,3,4- тетрагидроизохинолин-3-карбоновая кислота.

8,2 г (46,4 ммоль) R-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбоновой кислоты смешивают с 46,4 мл 1 н. NaOH и 50 мл ацетона и растворяют водой. При -5^oC при перемешивании закапывают 14,1 г (46,4 ммоль) хлорангидрида 4-(4-хлорфенилокси)-бензолсульфокислоты в 50 мл THF, причем после половины добавки реакционную смесь смешивают с 6,0 г (46,4 ммоль) диизопропилэтиламина. После перемешивания более ночи отфильтровывают осадок, фильтрат доводят до pH 3 при помощи 2 н. HCl и экстрагируют несколько раз с дихлорметаном. Соединенные органические фазы после сушки над сульфатом натрия фильтруют и выпаривают при пониженном давлении. Перекристаллизация из толуола и высушивание при пониженном давлении дает соединение, указанное в названии.

Выход: 16,1 г (78% от теории).

Точка плавления: 168 - 169^oC.

Примеры 43 - 60 приведены в табл. 2.

Фармакологические примеры
Получение и определение ферментативной активности каталитических доменов стромализина человека и лейкоцитной коллагеназы.

Оба фермента были получены по Ye и др. (Биохимия 31 (1992) 11231-5). Для измерения активности фермента или тормозящего действия фермента 70 мкл буферного раствора и 10 мкл ферментного раствора инкубировали 15 минут с 10 мкл 10%-ного водного раствора (объем/объем) диметилсульфоксида, который в случае необходимости содержит ингибитор фермента. После добавки 10 мкл 10%-ного (объем/объем) водного раствора диметилсульфоксида, который содержит 1 ммоль/литр субстрата, следили за реакцией фермента при помощи флуоресценцспектроскопии (328 нм (ех)/393 нм (ем)). Активность фермента выражена как увеличение экстинкции/минуту. Приведенные в таблице 3 IC50- величины были определены как такие концентрации ингибитора, которые приводят к 50%-ному торможению фермента. Буферный раствор содержит 0,05 Брий (Сигма, Дайзенхофен, Германия) и 0,1 моль/литр трис/HCl, 0,1 моль/литр NaCl, 0,01 моль/литр CaCl₂ (pH = 7,5) для определения гидроксамовых кислот включительно до примера 33, для определения карбоновых кислот с примера 34 0,1 моль/литр пиперазин-N,N'-бис[2-этансульфокислоты], pH 6,5.

Ферментный раствор содержит 5 мкг/мл полученных ферментных доменов по Ye и др. Субстратный раствор содержит 1 ммол/литр флуорогенного субстрата (7-метоксикумарин-4- ил)ацетил-Pro-Leu-Gly-Leu-3-(2', 4'-динитрофенил)-L-2,3-диаминопропионил- Ala-Arg-NHa (Бахем, Гейдельберг, Германия).

Принцип испытания
В испытании на деградацию протеогликана измеряют степень расщепления нативного агрекана быка, самого важного протеогликана суставного хряща. Определение высвобожденных фрагментов протеогликана осуществляют при помощи моноклонального антитела 5-D-4, которое диагностирует боковые цепи кератансульфата, расположенные на конце карбокси C2-домена агрекана. Тем самым испытание включает, в первую очередь, патологически значительные расщепления, которые происходят во внутрилобулярном домене агрекана.

После добавки соединений формулы I и фермента в форме каталитических доменов стромализина-1 измеряют после расщепления остающееся количество связанного гиалуроновой кислотой агрекана. При этом чем больше обнаруживают агрекана, тем ниже остаточная активность фермента. Концентрация соединений формулы I, при которых примененная активность фермента (= 100% остаточной активности) снижается на половину (= 50% остаточной активности), представлена IC50-величинами в таблице 3.

Описание проведения опыта
Чашки 96 well-микротитровальных пластин (Nunc, Maxisorp) инкубируют соответственно с 100 мкл раствора гиалуроновой кислоты (25 мкг/мл гиалуроновой кислоты (Сигма) в PBS) в течение 12 часов при комнатной температуре. После отсасывания раствора гиалуроновой кислоты еще свободные места связывания протеина чашек насыщают каждое 100 мл 5%-ного раствора сывороточного альбумина (BSA) быка, 0,05% Твин 20 в PBS в течение 1 часа при комнатной температуре. Затем чашки покрывают протеогликаном, причем чашки инкубируют каждую 100 мкл раствора носового протеогликана быка (ICI) (200 мкг/мл в 1 х PBS, 5 мг/мл BSA, 0,05% Твин 20) в течение 1 часа при комнатной температуре. Двукратной промывкой при помощи 1 х PBS, 0,1% Твина 20 удаляют несвязанные протеогликаны. Затем для соответствующего опыта отмеривают пипеткой 60 нг очищенных каталитических доменов стромелизина-1 (Рекомбинантная экспрессия и очистка см. Ye и др. (1992) плюс соответствующие концентрации тестируемого ингибитора в 100 мкл пищеварительного буферного раствора (100 ммоль MES pH 6,0, 100 ммоль NaCl, 10 ммоль CaCl₂, 0,05% Брий) пипетируют в чашки и инкубируют 3 часа при комнатной температуре. После двукратной промывки при помощи 1 х PBS, 0,1% Твина 20 чашки инкубируют в течение 1 часа при RT с помощью 100 мкл раствора обнаруживающего антитела (моноклональное антитело Клон 5-D-4 (ICI), иммунореактивного с боковыми цепями кератансульфата протеогликана, при разбавлении 1: 1000 в 1 х PBS, 5 мг/мл BSA, 005% Твина 20). После двукратной промывки с помощью 1 х PBS, 0,1% Твина 20 проводят иммунореакцию связанных обнаруживающих антител при помощи 100 мкл на чашку раствора обнаруживающих антител (коза-анти-мышь IgC, маркированного пероксидазой (Дианова), разбавленных 1: 1000 в 1 х PBS, 5 мг/мл BSA, 0,05% Твина 20, в течение 1 часа при комнатной температуре. После новой двукратной промывки (как указано выше) начинается цветная реакция при помощи 100 мкл 2 мг/мл ABTS, активированная с помощью H₂O₂. Измерение продуктов реакции проводят в считывающем устройстве ЭЛИЗА при длине световых волн 405 мм. Результаты показаны в таблице 4.

Формула изобретения

1. Циклические и гетероциклические N-замещенные α-иминогидроксамовые и карбоновые кислоты формулы I

и/или в случае необходимости стереоизомерная форма соединения формулы I и/или физиологически переносимая соль соединения формулы I, причем для случая i) R¹ обозначает а) остаток формулы II

где X обозначает а) ковалентную связь, в) -O-, с) -S-, d) -C(O)- или e) -C(OH)-
в) остаток формулы IV

где Z представляет собой остаток гетероцикла, такой, как

c) обозначает остаток формулы V

где о обозначает число 1 или 2, и один из атомов углерода в кольце, в случае необходимости, заменен -О-, и Q как часть структурной формулы I

1) обозначает структурную часть VI

где D обозначает NR⁴;
2) структурную часть VII

R² обозначает 1) фенил или 2) фенил, замещенный однократно-трехкратно;
2.1 гидрокси,
2.2 -О-R¹⁰, где R¹⁰ обозначает 1) (C₁-C₆)-алкил, 2) бензил или 3) фенил,
2.3 (C₁-C₆)-алкил,
2.4 галоген,
2.5 NO₂,
2.6 -O-C(O)-R¹⁰ и R¹⁰, как определено выше,
2.7 метилендиоксо,
2.8 -NR¹³R¹⁴, где R¹³ обозначает атом водорода или (C₁-C₃)-алкил и
R¹⁴ обозначает: 1) атом водорода, 2) (C₁-C₄)-алкил, 3) -C(O)-R¹⁰ или 4) -C(O)-O-R¹⁰ и R¹⁰, как определено выше,
R³ и R⁴ одинаковые или различные и обозначают а) атом водорода;
R⁶, R⁷ и R⁸ одинаковые или различные и обозначают а) атом водорода или в) имеют значения для случая i) R² в пп. 2.1 - 2.8;
n обозначает 0, 1,
m обозначает 0, 1 или 2, причем сумма n и m составляет 1, 2, 3,
или для случая ii) R¹ обозначает: 1) фенил или 2) фенил, замещенный от одного до трех раз R², определенного для случая i) в пп. 2.1 - 2.8;
Q обозначает структурную часть VII и R⁶, R⁷ и R⁸ одинаковые или различные и определены выше;
n обозначает 1;
m обозначает 1,
или для случая iii) R¹, Q, R⁶, R⁷ и R⁸ одинаковые или различные и имеют названное для случая ii) значение;
n и m обозначают 0, 1 или 2 и причем значение n и m неодинаковое;
A обозначает HO-NH-C(O) или HO-C(O)-;
B обозначает а) -(CH₂)_q-, где q обозначает 0.

2. Циклические и гетероциклические N-замещенные L-иминогидроксамовые и карбоновые кислоты формулы I по п.1 и/или физиологически переносимая соль соединения формулы I и/или, в случае необходимости, стереоизомерная форма соединения формулы I, причем для случая i) R¹ обозначает остаток формулы II и Q обозначает структурную часть VI, VII; для случая ii) R¹ обозначает фенил или фенил, замещенный от одного до трех раз через метокси, и Q обозначает структурную часть X, или для случая iii) R¹ обозначает фенил, Q обозначает структурную часть X; n обозначает 0 и m обозначает 2, и A обозначает HO-NH-C-(O)- или HO-C(O)-; B обозначает ковалентную связь; X обозначает атом кислорода или ковалентную связь; R² обозначает фенил или фенил, замещенный однократно-трехкратно через а) гидрокси; b) -O-R¹⁰, где R¹⁰ обозначает (C₁-C₃)-алкил или бензил; с) (C₁-C₂)-алкил; d) фтор или хлор; е) -CN; f) -CF₃ или g) NR¹³R¹⁴, где R¹³ и R¹⁴ обозначают (C₁-C₃)-алкил, R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ и R⁸ одинаковые или различные и обозначают: а) атом водорода, b) метокси, c) метилендиоксо; d) амино или e) гидрокси.

3. Соединение формулы I по одному из п.1 или 2, представляющие собой
R-2-(бифенилсульфонил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-гидроксамовую кислоту,
R-2-(4-хлор-бифенилсульфонил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-гидроксамовую кислоту,
R-2-(4-хлор-бифенилсульфонил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбоновую кислоту,
R-2-(4-феноксибензолсульфонил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-гидроксамовую кислоту,
R-2-(4-феноксибензолсульфонил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбоновую кислоту,
R-2-(4-(4-диметиламинофенокси)-бензолсульфонил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-гидроксамовую кислоту,
R-2-(4-диметиламинобифенилсульфонил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбоновую кислоту,
R-2-(4-бензоилфенилсульфонил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-гидроксамовую кислоту,
R-2-(4-метоксибензолсульфонил)-7-гидрокси-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-гидроксамовую кислоту,
R-2-(4-метоксибензолсульфонил)-7-нитро-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-гидроксамовую кислоту,
2-(4-метоксибензолсульфонил)-6,7-пропилен-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-1-гидроксамовую кислоту,
R-5-(4-метоксибензолсульфонил)-4,5,6,7-тетрагидро-1Н-имидазо-(4,5-с)-пиридин-6-гидроксамовую кислоту,
R-2-(4-метоксибензолсульфонил)-1,2,3,4-тетрагидро-9Н-пиридо-(3,4-с)-индол-3-гидроксамовую кислоту,
R-2-(4-феноксибензолсульфонил)-1,2,3,4-тетрагидро-9Н-пиридо-(3,4-с)-индол-3-гидроксамовую кислоту.

4. Соединение формулы I по одному из пп.1 - 3, отличающееся тем, что центральный атом углерода расположен как R-энантиомер между аминогруппой и группой гидроксамовой кислоты.

Приоритеты по пунктам:
13.11.1995 - по п.1, где Q означает структурную часть формулы;
28.03.1996 - по п.1, где Q означает структурную часть формулы.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5, Рисунок 6, Рисунок 7, Рисунок 8, Рисунок 9, Рисунок 10, Рисунок 11, Рисунок 12, Рисунок 13, Рисунок 14, Рисунок 15, Рисунок 16