Лекарственное средство на основе производных тиазола или тиадиазола, производные тиазола или тиадиазола и фармацевтическая композиция

 

Изобретение относится к лекарственному средству на основе производных тиазола или тиадиазола формулы I, где А обозначает линейную или разветвленную C₁-C₁₈-алкиленовую группу, которая может содержать по крайней мере одну группу, выбираемую из группы, состоящей из: О, S, NR³, СОNR³, NR³СО, СОО, ОСО или двойной или тройной связи; В обозначает радикал формулы II, R¹ обозначает Н, галоген СN, СО₂R², NR²R³, ОR³, СF₃ или C₁-C₈-алкил, который является незамещенным или замещенным ОН, ОС₁-C₈-алкилом или галогеном; R² обозначает Н, C₁-C₈-алкил, который является незамещенным или замещен ОН, ОС₁-C₈-алкилом или галогеном, или фенил-C₁-C₈-алкил; R³ имеет значения, приведенные для R², или обозначают СОR² или СО₂R²; Х обозначает N или СR⁴, где R⁴ обозначает Н, C₁-C₈-алкил, который не замещен или замещен ОН, ОС₁-C₈-алкилом или галогеном, или обозначает фенил, который не замещен или замещен галогеном, СF₃, C₁-C₈-алкилом или C₁-C₈-алкокси; Ar обозначает фенил, пиридил, пиримидил или триазинил, где Ar может иметь от одного до четырех заместителей. Лекарственное средство предназначено для лечения заболеваний, связанных с допамин-Д₃-рецепторными антагонистами или агонистами, и может быть использовано для лечения нарушения центральной нервной системы. Описаны также новые производные тиазола или тиадиазола и фармацевтическая композиция на их основе. 3 с. и 9 з.п.ф-лы, 9 табл.

Изобретение относится к соединениям тиазола и тиадиазола, лекарственному средству и фармацевтической композиции на их основе. Указанные соединения обладают ценными терапевтическими свойствами и могут использованы для лечения заболеваний, связанных с допамин-D₃-рецепторными лигандами.

Соединения указанного типа описаны как обладающие физиологической активностью. Так, патент США-A-4074049 описывает аминоалкилтиотиадиазолы, действующие как фунгициды и ингибиторы агрегации тромбоцитов крови. Патент Японии -A-2153276 описывает аналогичные соединения, полезные при лечении заболеваний печени.

Патент Великобритании -A-1053085 описывает аминоалкилтиадиазолы, оказывающие противокашлевое, анальгезирующее, жаропонижающее и гипогликемическое воздействия. Патент США -A-3717651 описывает 5-меркапто-замещенные тиазолы, обладающие гербицидными свойствами.

WO 89/11476 описывает замещенные 2-аминотиазолы как допаминергические средства, которые могут быть использованы, помимо прочего, для лечения психоза и нарушений центральной нервной системы.

WO 92/22540 описывает аминоалкил-замещенные 5-меркапто-тиазолы формулы где R¹ обозначает H, C₁-C₅-алкил, незамещенный или замещенный фенил или тиенил; n равно 2-6, и A обозначает или где Ar обозначает фенил, незамещенный или однократно замещенный C₁-C₅-алкилом, C₁-C₅-алкокси, амино, галогеном, нитро, гидроксилом, трифторметилом или циано, или пиридилом, пиримидинилом или тиенилом. Эти соединения могут быть использованы для лечения заболеваний центральной нервной системы, например болезни Паркинсона, шизофрении и нарушений, связанных с повышенным кровяным давлением.

WO 92/22542 описывает соответствующие производные 2-амино-5-меркапто-1,3,4-тиадиазола, которые также могут быть использованы для лечения нарушений центральной нервной системы и нарушений, связанных с повышенным кровяным давлением.

WO 92/22541 описывает соответствующие 2-амино-1,3,4-тиадиазольные производные, где алкиленовая цепь связана непосредственно, а не через атом серы, с тиадиазольным остатком. Эти соединения могут также быть использованы для лечения нарушений центральной нервной системы и нарушений, связанных с повышенным кровяным давлением.

WO 93/21179 описывает соединения 1-арил-4-(ω-амидо-1- алкил и ω -имидо-1-алкил)пиперазина. Эти соединения являются антагонистами допамин-D₂-рецептора и веществами, обладающими сродством к 5-НТ_1A-рецептору. Они могут быть использованы в качестве противопсихотических средств, например, для лечения шизофрении.

Нервные волокна получают свою информацию, помимо прочего, через G-протеин-связанные рецепторы. Существует множество соединений, которые проявляют свое воздействие через эти рецепторы. Одним из них является допамин.

Опубликованы результаты, подтверждающие наличие допамина и его физиологическое воздействие в качестве нейромедиатора. Реагирующие на допамин клетки связаны с этиологией шизофрении и болезни Паркинсона. Эти и другие расстройства лечат лекарственными препаратами, взаимодействующими с допаминовыми рецепторами.

К 1990 г. фармакологически отчетливо были распознаны два подкласса допаминовых рецепторов, а именно D₁- и D₂-рецепторы.

Соколов и др. Nature 1990, 347: 146-151, обнаружили третий подкласс, а именно D₃-рецепторы. В основном они выражены в лимбической системе. D₃-рецепторы отличаются структурно от D₁- и D₂-рецепторов приблизительно половиной аминокислотных остатков.

Действие нейролептиков обычно приписывают их сродству к D₂-рецепторам. Это подтверждают последние исследования рецепторного связывания. Согласно им, большинство допаминовых антагонистов, таких как нейролептики, обладают высоким сродством к D₂-рецепторам, но исключительно низким сродством к D₃-рецепторам.

Описанные выше соединения, известные из уровня техники, являются такими веществами, обладающими сродством к D₂-pецептору или антагонистами.

Неожиданно обнаружено, что соединения по данному изобретению обладают высоким сродством к допамин-D₃-рецептору и исключительно низким сродством к D₂-рецептору. Таким образом, они являются селективными D₃-лигандами.

Поэтому данное изобретение относится к соединениям тиазола и тиадиазола формулы I:
где A обозначает линейную или разветвленную C₁-C₁₈-алкиленовую группу, которая может содержать по крайней мере одну группу, выбираемую из группы, состоящей из: O, S, NR³, CONR³, NR³CO, COO, OCO или двойной или тройной связи;
В обозначает радикал формулы:


или

R¹ обозначает H, галоген, CN, CO₂R², NR²R³, OR³, CF₃ или C₁-C₈-алкил, который незамещен или замещен OH, OC₁-C₈-алкилом или галогеном;
R² обозначает H, C₁-C₈-алкил, который незамещен или замещен OH, OC₁-C₈-алкилом или галогеном, или фенил-C₁-C₈-алкил;
R³ имеет значения, приведенные для R², или обозначает COR² или CO₂R²;
X обозначает N или CR⁴, где R⁴ обозначает H, C₁-C₈-алкил, который незамещен или замещен OH, OC₁-C₈-алкилом или галогеном, или обозначает фенил, который незамещен или замещен галогеном, CF₃, C₁-C₈-алкилом или C₁-C₈-алкокси;
Ar обозначает фенил, пиридил, пиримидил или триазинил, где Ar может иметь от одного до четырех заместителей, которые выбирают, независимо друг от друга, из: H, OR³, C₁-C₈-алкила, C₂-C₈-алкенила, C₂-C₈-алкинила, галогена, CN, CO₂R², NO₂, SO₂R², SO₃R³, NR²R³, SO₂NR²R³, SR², CF₃, CHF, 5- или 6-членного ароматического или неароматического карбоцикла и 5- или 6-членного ароматического или неароматического гетероцикла, имеющего от 1 до 3 гетероатомов, выбираемых из O, S и N, где карбоцикл или гетероцикл является незамещенным или замещенным C₁-C₈-алкилом, галогеном, OC₁-C₈-алкилом, OH, NO₂ или CF₃, и где Ar также может быть конденсирован до карбоцикла или гетероцикла указанного выше типа, и их солей с физиологически приемлемыми кислотами для получения фармацевтической композиции для лечения нарушений, реагирующих на допамин-D₃-рецепторные антагонисты или агонисты.

Применяемые по данному изобретению соединения являются селективными лигандами допамин-D₃-рецептора, которые региоселективно вмешиваются в лимбическую систему и, вследствие их низкого сродства к D₂-рецептору, обладают меньшими побочными эффектами, чем классические нейролептики. Поэтому, соединения могут быть использованы для лечения заболеваний, связанных с допамин-D₃-рецепторными антагонистами или агонистами, например, для лечения заболеваний центральной нервной системы, в частности шизофрении, депрессии, невроза и психоза. Кроме того, они могут быть использованы для лечения расстройств сна и в качестве антигистаминов.

В отношении данного изобретения приведенные ниже термины означают следующее:
Алкил (также в радикалах, таких как алкокси, алкиламино и т.д.) обозначает линейную или разветвленную алкильную группу с 1-8 углеродными атомами, желательно с 1-6 углеродными атомами и, особенно, с 1-4 углеродными атомами. Алкильная группа может иметь один или более заместителей, которые выбирают независимо друг от друга из OH и OC₁-C₈-алкила.

Примерами алкильных групп служат: метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, трет-бутил и т.д.

Алкилен обозначает линейные или разветвленные радикалы с предпочтительно 2-14 углеродными атомами, более желательно 3-12 углеродными атомами и особенно 7-12 углеродными атомами.

Алкиленовые группы могут содержать по крайней мере одну из вышеупомянутых групп. Она может быть - так же, как вышеупомянутая двойная или тройная связь, - расположена в любой точке или в конце алкиленовой цепи, таким образом, что она соединяет цепь с тиазольным или тиадиазольным остатком. Последнее предпочтительно. Когда алкиленовая группа включает двойную или тройную связь, она содержит по крайней мере три углеродных атома в цепи.

Галогенами служат F, Cl, Br, I и, в частности, F, Cl, Br.

R¹ обозначает предпочтительно H, OR³ или NR²R³, где R² и R³, независимо друг от друга, представляют H или C₁-C₈-алкил.

Ar может иметь один, два, три или четыре заместителя. Их предпочтительно выбирают, независимо друг от друга, из H, C₁-C₈-алкила, который незамещен или замещен OH, OC₁-C₈-алкилом или галогеном, или фенила, нафтила, C₃-C₈-циклоалкила, 5- или 6-членного гетероциклического ароматического или неароматического радикала с 1-3 гетероатомами, которые выбирают из O, N и S, CHF₂, CF₃, галогена, NO₂, CN, OR³ или SR², где R² и R³ имеют вышеупомянутые значения.

Если один из заместителей Ar обозначает C₁-C₈-алкил, предпочтителен разветвленный радикал, в частности, изопро-пил или трет-бутил.

Ar преимущественно имеет по крайней мере один заместитель и представляет, в частности:

где D¹, D² и D³ обозначают, независимо друг от друга, CR или N, a R, Y и Z обозначают H или имеют выше- или нижеприведенные значения.

Ar обозначает преимущественно незамещенный или замещенный фенил, 2-, 3- или 4-пиридинил или 2-, 4(6)- или 5-пиримидинил.

Когда один из заместителей Ar обозначает 5- или 6-членный гетероцикл, примеры включают радикал пирролидина, пиперидина, морфолина, пиперазина, пиридина, пиримидина, триазина, пиррола, тиофена, тиазола, имидазола, оксазола, изоксазола, пиразола или тиадиазола.

Когда один из заместителей Ar обозначает карбоциклический радикал, то им служит, в частности, фенил, циклопентил или циклогексил.

Когда Ar конденсирован до карбоциклического или гетероциклического радикала, Ar обозначает, в частности, радикал нафталина, ди- или тетрагидронафталина, хинолина, ди- или тетрагидрохинолина, индола, дигидроиндола, бензимидазола, бензотиазола, бензотиадиазола, бензопиррола или бензотриазола.

Предпочтительный вариант воплощения включает соединения формулы I, где A обозначает C₃-C₁₄-алкилен, в частности, C₃-C₁₂-алкилен, который может содержать по крайней мере одну группу, выбираемую из O, S, NR³ и двойную или тройную связь.

Другой предпочтительный вариант воплощения включает применение соединений формулы I, где
R¹ обозначает H, OR³ или NR²R³, где R² и R³ независимо друг от друга представляют H, C₁-C₈-алкил или фенил-C₁-C₈-алкил;
R⁴ обозначает H или C₁-C₈-алкил, где X обозначает CR⁴;
A обозначает C₃-C₁₂-алкилен, который может включать по крайней мере одну группу, выбираемую из O, S, NR³ и двойную или тройную связь;
Ar обозначает фенил, пиримидил или пиридил, который может иметь один, два, три или четыре заместителя, выбираемые, независимо друг от друга, из H, C₁-C₈-алкила, замещенного или незамещенного OH, OC₁-C₈-алкилом или галогеном, или фенила, нафтила, C₃-C₈-циклоалкила, 5- или 6-членного гетероциклического ароматического или неароматического радикала с 1-3 гетероатомами, выбираемыми из O, N и S, CHF₂, CF₃, галогена, NO₂, CN, OR³ или SR², где R² и R³ имеют вышеуказанные значения.

В этом варианте особенно предпочтительны соединения формулы I, где
B обозначает или
Другим предпочтительным вариантом воплощения служит применение соединений формулы I, где
Ar обозначает фенил, имеющий один, два, три или четыре заместителя, выбираемые независимо друг от друга из H, C₁-C₈-алкила, фенила, нафтила, пирролила, CHF₂, CF₃ галогена, NO₂, CN, OH, OC₁-C₈-алкила, SH и SC₁-C₈-алкила.

Особенно желательно Ar является фенилом с одним или двумя заместителями в положении 3 или положениях 3, 5.

Другим предпочтительным вариантом воплощения служит применение соединений формулы I, где Ar обозначает пиримидинил, имеющий от одного до трех заместителей, выбираемых независимо друг от друга из H, C₁-C₈-алкила, C₃-C₈-циклоалкила, фенила, нафтила, пирролила, OH, OC₁-C₈-алкила, CHF₂, CF₃ и галогена, или где Ar обозначает пиридинил, имеющий от одного до четырех заместителей, выбираемых независимо друг от друга из H, C₁-C₈-алкила, C₂-C₈-алкенила, C₂-C₈-алкинила, фенила, нафтила, пирролила, OH, OC₁-C₈-алкила, CHF₂, CF₃, CN и галогена.

Изобретение относится также к соединениям формулы I, где A обозначает линейную или разветвленную C₇-C₁₈-алкиленовую группу, которая может включать группу, выбираемую из O, S, NR³, CONR³, NR³CO, COO, OCO или двойной или тройной связи, a R¹, R², B и Ar имеют вышеуказанные значения.

Изобретение включает также соли кислотного присоединения соединений формулы I с физиологически приемлемыми кислотами. Примерами подходящих физиологически приемлемых органических и неорганических кислот служат хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, фосфорная кислота, серная кислота, щавелевая кислота, малеиновая кислота, фумаровая кислота, молочная кислота, винная кислота, адипиновая кислота или бензойная кислота. Другие кислоты, которые могут быть использованы, описаны в Fortschritte der Arzneimittelforschung, Volume 10, стр. 224 и последующ., Birkhauser Verlag, Basel and Stuttgart 1966.

Соединения формулы I могут иметь один или более центров асимметрии. Поэтому изобретение включает не только рацематы, но также соответствующие энантиомеры и диастереоизомеры. Изобретение также включает в каждом случае таутомерные формы.

Соединения формулы I могут быть получены способами, аналогичными общепринятым способам, описанным, например, в Houben Weyl, "Handbuch der Organishen Chemie", Ernst Schaumann (Ed.), 4th Ed. Thieme Verlag, Stuttgart 1994, Volume E8/d, стр. 189 и последующ.; A.R. Katritzky, C.W. Rees (ed.) "Comprehensive Heterocyclic Chemistry", Ist Ed. и в приведенной здесь в качестве ссылок литературе. Способы получения соединений включают:
i) взаимодействие соединений общей формулы II:

где Y¹ обозначает стандартную отщепляемую группу, с соединением общей формулы III:
H-B-Ar,
ii) с целью получения соединения формулы I, где A содержит кислород или атом серы, или NR³:
а) взаимодействие соединения общей формулы IV:

где Z¹ обозначает O, S или NR³, а A¹ обозначает C₀-C₁₈-алкилен, с соединением общей формулы VI:
Y¹-A²-B-Ar
где Y¹ имеет вышеуказанные значения и A² обозначает C₁-C₁₈-алкилен, где A¹ и A² вместе содержат 7-18 углеродных атомов;
iii) с целью получения соединения формулы I, где A включает группу COO или CONR³:
а) взаимодействие соединения общей формулы VII:

где Y² обозначает OH, OC₁-C₄-алкил, Cl или вместе с CO обозначает активированную карбоксильную группу, и A¹ имеет вышеуказанные значения, с соединением формулы VIII:
Z¹-A²-B-Ar,
где A² имеет вышеуказанные значения и Z¹ обозначает OH или NHR³;
iv) с целью получения соединения формулы I, где A включает OCO или NR³CO группу:
а) взаимодействие соединения формулы IV:

где Z¹ обозначает O или NR³, с соединением формулы X:
Y²CO-A²-B-Ar,
где A² и Y² имеют указанные выше значения, и где
R¹, R², A, B и Ar имеют вышеуказанные значения.

Для лечения вышеупомянутых нарушений, соединения по данному изобретению вводят общепринятым способом перрорально или парентерально (подкожно, внутривенно, внутримышечно, внутрибрюшинно). Возможно также введение с парами или путем распыления через носоглотку.

Доза зависит от возраста, состояния и веса пациента и от способа введения. Как правило, суточная доза активного соединения составляет приблизительно от 10 до 1000 мг в день при перроральном введении и приблизительно от 1 до 500 мг в день при парентеральном введении.

Изобретение относится также к фармацевтическим композициям, содержащим соединения по данному изобретению. Эти композиции существуют обычно в твердых или жидких фармацевтических лечебных формах, например в виде таблеток, покрытых пленкой таблеток, капсул, порошков, гранул, покрытых сахаром таблеток, суппозиториев, растворов или в распыленных формах. В этих случаях активные соединения могут быть переработаны с общепринятыми фармацевтическими добавками, такими как связывающие вещества для таблеток, наполнители, консерванты, дисинтегранты, регуляторы текучести, пластификаторы, смачивающие агенты, диспергаторы, эмульгаторы, растворители, агенты, замедляющие высвобождение, антиоксиданты и/или движущие газы (cf. H. Sucker et al., Pharmazeutische Technologie, Thieme-Verlag, Stuttgart, 1978). Полученные таким путем лекарственные формы содержат от 1 до 99% по весу активного соединения.

Следующие далее примеры служат для разъяснения изобретения, но не в целях ограничения.

ПРИМЕР 1

а) 2-Амино-5-(6-хлоргексилмеркапто)-1,3,4-тиадиазол
5 г 2-амино-5-меркапто-1,3,4-тиадиазола, 7.5 г 1,6-бромхлоргексана [sic] и 4.07 г триэтиламина нагревают при кипячении с обратным холодильником в 100 мл тетрагидрофурана в течение 1 часа. Смесь фильтруют с отсасыванием, фильтрат концентрируют и остаток промывают водой и сушат. Остается 8.2 г продукта (= 91% выход).

b) 2-Амино-5-(6-(3, 5-дихлорфенилпиперазинил)гексилмеркапто)- 1,3,4-тиадиазол) [sic]
2.2 г продукта из стадии 1а), 2.08 г 3,5-дихлорфенилпиперазина и 1 г триэтиламина в 4 мл ДМФ нагревают при 100^oC 1 час. К смеси добавляют воды и затем трижды экстрагируют метиленхлоридом, высушенный над MgSO₄ и сконцентрированный остаток чистят хроматографически (подвижная фаза: CH₂Cl/CH₃OH [sic] = 9/1). Получают 1.0 г (=25% выход) продукта. Температура плавления 130^oC.

ПРИМЕР 2

а) 5-Амино-2-(6-бромгексил)-1,3,4-тиадиазол
5 г 7-бромгептановой кислоты и 2.17 г тиосемикарбазида вносят в 50 мл диоксана при 90^oC и при этой температуре добавляют по каплям 4.0 г POCl₃. Затем смесь перемешивают при 90^oC 1 час. К смеси добавляют воды и трижды экстрагируют метиленхлоридом, сушат над MgSO₄ и концентрируют. Получают в остатке 6.1 г (= 96% выход) продукта.

b) 2.5 г продукта 2а), 2.18 г м-трифторметилфенилпиперазина и 1.92 г триэтиламина в 3 мл ДМФ перемешивают 1 час при 100^oC. Обрабатывают как в способе 1b). Получают 1.4 г (= 36% выход) продукта. Температура плавления: 134-136^oC.

Соединения, приведенные ниже в таблицах 1-3, получают аналогичным способом.

Соединения, перечисленные в таблицах 4-8, также могут быть получены аналогичным способом.

ПРИМЕРЫ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ ФОРМ
A) Таблетки
Таблетки следующей композиции прессуют в таблетирующей машине общепринятым способом:
40 мг вещества из примера 1
120 мг кукурузного крахмала
13.5 мг желатина
45 мг лактозы
2.25 мг Аэросила ( Aerosil® ) (химически чистая двуокись кремния в субмикроскопически тонкой дисперсии)
6.75 мг картофельного крахмала (паста 6% концентрации)
B) Таблетки с сахарным покрытием
20 мг соединения из примера 4
60 мг композиции ядра
70 мг композиции сахарного покрытия
Композиция ядра включает 9 частей кукурузного крахмала, 3 части лактозы и 1 часть винилпирролидон/винилацетатного 60:40 сополимера. Композиция сахарного покрытия включает 5 частей сахарозы, части кукурузного крахмала, 2 части карбоната кальция и 1 часть талька. Полученные таким путем покрытые сахаром таблетки снабжают впоследствии энтеросолюбильной оболочкой.

БИОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ - ИЗУЧЕНИЯ РЕЦЕПТОРНОГО СВЯЗЫВАНИЯ
1) Испытания по D₃-связыванию
Клонированные мышиные фибропласты CCL 1.3, экспрессирующие человеческий D₃-рецептор, получают от from Res. Biochemical Internat. Для изучения связывания используют соответствующие фибропласты Strathmore Rd. , Natick MA 01760-2148 USA.

Приготовление клеток
D₃-экспрессирующие клетки выращивают в RPMI-1640, содержащей 10% сыворотку плода коровы (GIBCO N 041-32400N); 100 ед/мл пенициллина и 0.2% стрептомицин (GIBCO BRL, Gaithersburg, MD, USA). Через 48 часов клетки промывают PBS (фосфатно-солевым буферным раствором) и инкубируют с 0.05% трипсин-содержащего PBS в течение 5 минут. Затем среду субстрат нейтрализуют и клетки собирают центрифугированием при 300 об/мин. Для лизирования клеток осадок после центрифугирования промывают кратковременно лизирующим буфером (5 мМ трис-HCl, pH 7.4, с 10% глицерина) и затем инкубируют при концентрации лизирующего буфера 10⁷ клетки/мл при 4^oC, в течение 30 мин. Клетки центрифугируют при 200 об/мин 10 мин и осадок после центрифугирования хранят в жидком азоте.

Испытания по связыванию
Для испытания по D₃-рецепторному связыванию мембраны суспендируют в инкубационном буфере (50 мМ трис-HCl, pH 7.4, со 120 мМ NaCl, 5 мМ KCl, 2 мМ CaCl₂, 2 мМ MgCl₂, 10 мкМ хинолина, 0.1% аскорбиновой кислотой и 0.1% BSA (альбумина бычьей сыворотки)) при концентрации около 10⁶ клетки/250 мкл испытуемой смеси и инкубируют при 30^oC с 0.1 нМ ¹²⁵иод-сульпиридом в присутствии или отсутствии испытуемого соединения. Неспецифическое связывание измеряют, используя 10^-6 М спиперон.

Через 60 мин свободный и связанный радиолиганд разделяют фильтрацией через GF/B фильтры из стекловолокна (Whatman, England) на сборнике клеток (Skatron, Lier, Norway) и фильтры промывают охлажденным льдом трис-HCl-буферным раствором, pH 7.4. Собранную на фильтрах радиоактивность измеряют, используя жидкий сцинтилляционный счетчик Packard 2200 CA.

Значения K_i определяют путем анализа по методу нелинейной регрессии, используя LIGAND-программу.

2) Испытание по D₂-связыванию
Приготовление мембран
а) Каудатус ядер (бычьи)
Каудатус ядер выделяют из головного мозга быка и промывают охлаждаемым льдом 0.32 М раствором сахарозы. После взвешивания материал растирают в порошок и гомогенизируют в 5-10 объемах раствора сахарозы, используя гомогенизатор Potter-Evehjem'a (500 об/мин). Гомогенат центрифугируют при 3000 об/мин в течение 15 минут (4^oC) и полученный супернатант снова центрифугируют 15 минут при 40000 об/мин. Затем остаток промывают дважды, ресуспендируя и центрифугируя, с 50 мМ трис-HCl, pH 7.4. Мембраны до использования хранят в жидком азоте.

b) Стриатум (крыс)
Стриатумы Spraque-Dawley крыс промывают охлаждаемым льдом 0.32 М раствором сахарозы. После взвешивания, участки головного мозга гомогенизируют в 5-10 объемах раствора сахарозы, используя Potter-Elvehjem-гомогенизатор (500 об/мин). Гомогенат центрифугируют при 40000 об/мин в течение 10 минут (4^oC) и затем остаток промывают несколько раз, ресуспендируя и центрифугируя, с 50 мМ трис-HCl, 0.1 мМ EDTA (этилендиаминтетрауксусной кислотой) и 0.01% аскорбиновой кислотой (pH 7.4). Промытый остаток ресуспендируют в вышеупомянутом буфере и инкубируют при 37^oC 20 минут (чтобы разрушить эндогенный допамин). Затем мембраны дважды промывают буфером и порции замораживают в жидком азоте. Мембранный препарат хранится максимум одну неделю.

Испытание по связыванию
а) ³H-Спиперон (D_2ниж.)
Мембраны ядерных каудатусов растворяют в инкубационном буфере (мМ: трис-HCl 50, NaCl 120, KCl 5, MgCl₂ 1, CaCl₂ 2, pH 7.4). Готовят различные смеси, каждую по 1 мл:
- Общее связывание: 400 мг мембран + 0.2 нмоль/л ³H-спиперона (Du Pont de Nemours, NET-565).

- Неспецифическое связывание: те же смеси, что для общего связывания + 10 мкМ (+)-бутакламола.

- Испытуемое соединение: те же смеси, что для общего связывания + возрастающие концентрации испытуемого соединения.

После инкубации при 25^oC в течение 60 минут смеси фильтруют через GF/B фильтры из стекловолокна (Whatman, England) на сборнике клеток Skatron'a (от Zinsser, Frankfurt) и фильтры промывают охлажденным льдом 50 мМ трис-HCl буфером, pH 7.4. Собранную на фильтрах радиоактивность измеряют, используя жидкий сцинтилляционный счетчик Packard'а 2200 CA.

Значения K_i определяют путем анализа по методу нелинейной регрессии, используя LIGAND-программу или преобразованием IC₅₀ значений, используя формулу Cheng'a и Prusoff'a.

b) ³H-ADTN (D_{2 выс.})
Мембраны стриатумов растворяют в инкубационном буфере (50 мМ трис-HCl, pH 7.4, 1 мМ MnCl₂ и 0.1% аскорбиновая кислота).

Готовят различные смеси, каждой по 1 мл.

- Общее связывание: 300 мкг влажного веса + 1 нМ ³H-ADTN (Du Font de Nemours синтез на заказ) + 100 нМ SCH 23390 (содержащего D₁-рецепторы).

- Неспецифическое связывание: те же смеси, что для общего связывания + 50 нМ спиперона.

- Испытуемое соединение: те же смеси, что для общего связывания + возрастающие концентрации испытуемого соединения.

После инкубации при 25^oC в течение 60 минут, смеси фильтруют через GF/B фильтры из стекловолокна (Whatman, England) на сборнике клеток Skatron'a (от Zinsser, Frankfurt) и фильтры промывают охлажденным льдом 50 нМ трис-HCl буфером, pH 7.7. Собранную на фильтрах радиоактивность измеряют, используя жидкий сцинтилляционный счетчик Packard'a 2200 CA.

Оценку производят аналогично пункту а), приведенному выше.

В этих испытаниях соединения по данному изобретению проявляют очень хорошее сродство и высокую селективность в отношении D₃-рецептора. Полученные для представленных соединений результаты собраны в следующую далее таблицу 9.

Формула изобретения

1. Лекарственное средство, предназначенное для лечения заболеваний, связанных с допамин-Д₃-рецепторными антагонистами или агонистами, отличающееся тем, что оно включает, по крайней мере, одно соединение формулы I

где А обозначает линейную или разветвленную C₁-C₁₈-алкиленовую группу, которая может содержать по крайней мере одну группу, выбираемую из группы, состоящей из O, S, NR³, CONR³, NR³CO, COO, OCO или двойной или тройной связи;
В означает радикал формулы


или

R¹ означает Н, галоген CN, CO₂R², NR²R³, OR³, CF₃ или C₁-C₈-алкил, который является незамещенным или замещенным OH, OC₁-C₈-алкилом или галогеном;
R² обозначает Н, C₁-C₈-алкил, который является незамещенным или замещен ОН, ОC₁-C₈-алкилом или галогеном, или фенил-C₁-C₈-алкил;
R³ имеет значения, приведенные для R², или обозначает COR² или CO₂R²;
Х обозначает N или CR⁴, где R⁴ обозначает Н, C₁-C₈-алкил, который не замещен или замещен ОН, ОC₁-C₈-алкилом, или галоген или обозначает фенил, который не замещен или замещен галогеном, CF₃, C₁-C₈-алкилом или C₁-C₈-алкокси;
Ar обозначает фенил, пиридил, пиримидил или триазинил, где Ar может иметь от одного до четырех заместителей, которые выбирают, независимо друг от друга, из Н, OR³, C₁-C₈-алкила, C₂-C₈-алкенила, C₂-C₈-алкинила, галогена, CN, CO₂R², NO₂, SO₂R², SO₃R², NR²R³, SO₂NR²R³, SR², CF₃, CHF₂, фенила, 5- или 6-членного ароматического или неароматического карбоцикла и 5- или 6-членного ароматического или неароматического гетероцикла, имеющего от 1 до 3 гетероатомов, выбираемых из O, S и N, где карбоцикл или гетероцикл является незамещенным или замещенным C₁-C₈-алкилом, галогеном, ОC₁-C₈-алкилом, ОН, NO₂ или CF₃, и где Ar также может быть конденсирован до карбоцикла или гетероцикла указанного выше типа, и их солей с физиологически приемлемыми кислотами.

2. Лекарственное средство по п.1, в котором в соединении формулы I R¹ обозначает Н, галоген CN, CO₂R², NR²R³, ОR³, CF₃ или C₁-C₈-алкил, который является незамещенным или замещенным OH, OC₁-C₈-алкилом или галогеном; R² обозначает Н, C₁-C₈-алкил, который является незамещенным или замещен ОН, ОC₁-C₈-алкилом или галогеном, или фенил-C₁-C₈-алкил; Ar обозначает фенил, пиридил, пиримидил или триазинил, где Ar может иметь один или два заместителя, которые выбирают, независимо друг от друга, из Н, OR³, C₁-C₈-алкила, галогена, CN, CO₂R², NO₂, SO₂R², SO₃R², NR²R³, SO₂NR²R³, SR², CF₃, CHF₂, фенила, 5- или 6-членного ароматического или неароматического карбоцикла и 5- или 6-членного ароматического или неароматического гетероцикла, имеющего 1-3 гетероатома, выбираемых из O, S и N, где карбоцикл или гетероцикл не замещен или замещен C₁-C₈-алкилом, галогеном, ОC₁-C₈-алкилом, ОН, NO₂ или CF₃, и где Ar также может быть конденсированным до карбоцикла или гетероцикла указанного выше типа, а A, B, R¹, R² и Х имеют значения по п.1.

3. Лекарственное средство по п.1 или 2, в котором в соединении формулы 1 А обозначает C₃-C₁₄-алкилен, который может содержать по крайней мере одну группу, выбираемую из O, S, NR³, и двойную или тройную связь.

4. Лекарственное средство по пп.1-3, в котором в соединении формулы I R¹ обозначает H, OR³ или NR²R³, где R² и R³ обозначают, независимо друг от друга, Н, C₁-C₈-алкил или фенил-C₁-C₈-алкил; R⁴ обозначает Н или C₁-C₈-алкил, где Х обозначает CR⁴; А обозначает C₃-C₁₂-алкилен, который может содержать по крайней мере одну группу, выбираемую из O, S, NR³, и двойную или тройную связь; Ar обозначает фенил, пиримидил или пиридил, который может иметь один, два, три или четыре заместителя, выбираемых независимо друг от друга из Н, C₁-C₈-алкила, незамещенного или замещенного ОН, ОC₁-C₈-алкилом или галогеном, или фенила, нафтила, C₃-C₈-циклоалкила, 5- или 6-членного гетероциклического ароматического или неароматического радикала с 1-3 гетероатомами, которые выбирают из O, N и S, CF₃, CHF₂, галогена, NO₂, CN, OR³ или SR², где R² и R³ имеют указанные выше значения.

5. Лекарственное средство по п.4, в котором в соединении формулы I В обозначает

или

6. Лекарственное средство по любому из предшествующих пунктов, в котором в соединении формулы I Ar обозначает фенил, имеющий один, два, три или четыре заместителя, которые выбирают независимо друг от друга из H, C₁-C₈-алкила, фенила, нафтила, пирролила, СHF₂, CF₃, галогена, NO₂, CN, OH, OC₁-C₈-алкила, SH и SC₁-C₈-алкила.

7. Лекарственное средство по п.6, в котором в соединении формулы I А имеет один или два заместителя в положении 3 или в положении 3 и 5.

8. Лекарственное средство по любому из пп.1-5, в котором в соединении формулы I Ar обозначает пиримидинил, имеющий от одного до трех заместителей, которые выбирают независимо друг от друга из Н, C₁-C₈-алкила, C₃-C₈-циклоалкила, фенила, нафтила, пирролила, ОН, ОC₁-C₈-алкила, CHF₂, CF₃ и галогена.

9. Лекарственное средство по пп.1-5, в котором в соединении формулы I Ar обозначает пиридинил, имеющий от одного до четырех заместителей, которые выбирают независимо друг от друга из Н, C₁-C₈-алкила, C₂-C₈-алкенила, C₂-C₈-алкинила, фенила, нафтила, пирролила, ОН, ОC₁-C₈-алкила, CHF₂, CF₃, CN и галогена.

10. Лекарственное средство по любому из предшествующих пунктов, в котором в соединении формулы I X обозначает N.

11. Производные тиазола или тиадиазола общей формулы I

где А обозначает линейную или разветвленную C₇-C₁₈-алкиленовую группу, которая может включать такую группу, как -S-;
В обозначает радикал формулы


R¹ обозначает водород или NR²R³;
R² обозначает водород или C₁-C₈-алкил;
R³ обозначает водород или C₁-C₈-алкил;
Х обозначает N или CR⁴, где R⁴ - водород;
Ar обозначает фенил, пиридил, пиримидил, где Ar может иметь от одного до четырех заместителей, которые выбирают независимо друг от друга из водорода, галогена, CN, C₁-C₈-алкила, CF₃, CHF₂, OR³, SR², NO₂.

12. Фармацевтическая композиция, предназначенная для лечения заболеваний, связанных с допамин-Д₃-рецепторными антагонистами или агонистами, отличающаяся тем, что она содержит соединение формулы I по п.11 при необходимости в присутствии физиологически приемлемых фармацевтических добавок.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5, Рисунок 6, Рисунок 7, Рисунок 8, Рисунок 9, Рисунок 10, Рисунок 11, Рисунок 12, Рисунок 13, Рисунок 14, Рисунок 15, Рисунок 16, Рисунок 17, Рисунок 18, Рисунок 19, Рисунок 20, Рисунок 21, Рисунок 22, Рисунок 23, Рисунок 24, Рисунок 25, Рисунок 26