Производные мочевины, способ их получения (варианты) и лекарственное средство

 

Изобретение относится к производным мочевины общей формулы I, в которой R¹ обозначает водород или низший алкил, R² - водород или галоген и R³ - водород или низший алкокси, и их физиологически совместимым кислотно-аддитивным солям. Описаны также способ получения соединений в двух вариантах и лекарственное средство. Производные мочевины обладают антагонистическими свойствами по отношению к рецепторам нейрокинина и обладают профилем действия, благоприятным для лечения функциональных и воспалительных расстройств желудочно-кишечного тракта высших млекопитающих. 4 с. и 1 з.п. ф-лы, 3 табл.

Изобретение относится к новым производным мочевины, в которых один атом азота является составной частью пиперазинового кольца, а другой замещен бензиламиноэтильным остатком. Эти новые производные мочевины отличаются антагонистическими свойствами по отношению к рецепторам нейрокинина и обладают профилем действия, благоприятным для лечения функциональных и воспалительных расстройств желудочно-кишечного тракта высших млекопитающих, в частности человека. Далее изобретение относится к содержащим эти новые соединения лекарственным средствам, а также к способу получения этих соединений.

В основу изобретения была положена задача разработать новые активные вещества для лечения функциональных и воспалительных расстройств желудочно-кишечного тракта.

Из заявки на Европейский патент, публикация 655442, уже известны производные пиперазина с антагонистическими свойствами по отношению к рецепторам нейрокинина.

Было найдено, что группа новых производных пиперазина, замещенных в 2-положении индолилметильным остатком, в которых азот в 4-положении пиперазинового кольца является частью несущего бензиламиноэтильный заместитель мочевинного остова, обладают профилем действия, который делает их пригодными для лечения функциональных и воспалительных расстройств желудочно-кишечного тракта. Эта предлагаемая согласно изобретению группа веществ отличается далее хорошей переносимостью и хорошей оральной биодоступностью.

Предметом изобретения являются поэтому новые производные мочевины формулы I в которой R¹ обозначает водород или низший алкил, R² обозначает водород или галоген и R³ обозначает водород или низший алкокси, и их физиологически совместимые кислотно-аддитивные соли, а также получаемые из этих соединений лекарственные средства.

Поскольку в соединениях формулы I заместители обозначают или содержат низший алкил, последний может быть линейным или разветвленным и содержать от 1 до 4, предпочтительно от 1 до 2 атомов углерода.

Если R¹ обозначает низший алкил, предпочтителен метил.

Если R² обозначает галоген, предпочтителен фтор.

Если R³ обозначает низший алкокси, предпочтителен метокси.

Предпочтительны соединения формулы I, в которых R² обозначает водород, а R³ метокси или соединения формулы I, в которых R² обозначает фтор, а R³ - водород.

1Н-индол-3-ил-метильный остаток предпочтительно расположен в 2R-положении пиперазинового кольца.

Эти соединения могут быть получены известным образом.

Оптимальный способ получения соединений формулы I состоит в том, что а) соединение формулы II подвергают взаимодействию с реакционноспособным карбонильным соединением общей формулы III
в которой Y обозначает вытесняемую в результате нуклеофильной атаки первичного или вторичного амина летучую группу с образованием карбамоильного соединения общей формулы 1V.

в которой Y имеет вышеуказанное значение, к полученному соединению формулы IV прибавляют ненуклеофильное органическое основание, поскольку в результате отщепления летучей группы Y из полученного соединения формулы IV может образоваться кислота, и затем подвергают соединение формулы IV взаимодействию соединением общей формулы V

в которой R¹⁰¹ обозначает низший алкил или аминозащитную группу, a R² и R³ имеют вышеуказанные значения, и затем снова отщепляют возможную защитную группу R¹⁰¹, или
б) соединение формулы II подвергают взаимодействию с соединением общей формулы VI

в которой R¹⁰¹, R² и R³ имеют вышеуказанные значения, и затем снова отщепляют возможную защитную группу R¹⁰¹, и, при желании, полученные соединения формулы I, в которой R¹ обозначают водород, алкилируют до образования соединения формулы I, в которой R¹ обозначает низший алкил, и полученные соединения формулы I, при желании, переводят в их кислотно-аддитивные' соли или переводят кислотно-аддитивные соли в свободные соединения формулы I.

Согласно варианту а) способа, соединение формулы II целесообразно подвергать взаимодействию с реакционноспособным карбонильным соединением формулы III до образования карбамоильного соединения формулы IV, которое непосредственно in situ, при необходимости при добавлении ненуклеофильного органического основания может быть подвергнуто взаимодействию с амином формулы V. В качестве летучих групп Y в соединениях формулы III пригодны, например, галогены, предпочтительно хлор, тригалометоксигруппы, предпочтительно трихлорметоксигруппы, или же имидазолильные группы. Предпочтительно в качестве реакционных карбонильных соединений формулы III могут быть использованы фосген: бис-(трихлорметил)-карбонат(трифосген), трихлорметиловый эфир хлормуравьиной кислоты (дифосген) или карбонилдиимидазол. При взаимодействии амина формулы V с карбамоильным соединением формулы IV летучая группа Y вытесняется из соединения формулы IV. Поскольку из высвободившейся при этом группы Y может образоваться кислота, целесообразно прибавлять к соединению формулы IV перед его взаимодействием с соединением формулы V ненуклеофильное органическое основание. Поскольку Y обозначает, например, хлор, то образующаяся при отщеплении Y хлористоводородная кислота может быть связана добавлением вышеназванного основания. В качестве ненуклеофильных оснований пригодны растворимые в реакционной смеси органические основания, такие как третичные азотные основания, например азотсодержащие N-алкилированные гетероциклы, такие как N-низший алкил-морфолин или N-низший алкил-пиперидин или третичные низшие алкиламины и пиридины, такие как, например, триэтиламин, трипропиламин, диизопропилэтиламин, пиридин, 4-диметиламинопиридин, 4-диэтиламинопиридин или 4-пирролидинопиридин. Применяемые в избытке основания также могут использоваться в качестве растворителей. Серия реакций может проводиться как одноаппаратная реакция в полярном апротонном растворителе, таком как частично галогенированный низший углеводород, например дихлорметан, при температурах от -20^oС до комнатной температуры, предпочтительно при комнатной температуре.

Взаимодействие соединения формулы II с изоцианатом формулы VI согласно варианту б) способа может происходить само по себе известным образом. Соединения формулы VI могут быть получены, например, из аминов формулы V путем взаимодействия с подходящими реакционноспособными карбонильными соединениями. В качестве реакционноспособных карбонильных соединений пригодны, например, соединения формулы III. Из амина формулы V сначала целесообразно получают изоцианат формулы VI, который затем непосредственно in situ подвергают взаимодействию с соединением формулы II. Серия реакций может проводиться при условиях, указанных выше для получения соединений формулы I согласно варианту а) способа как одноаппаратная реакция. В реакционную смесь целесообразно может быть добавлен кислотосвязывающий реагент. В качестве кислотосвязывающих реагентов пригодны вышеуказанные ненуклеофильные основания.

В качестве аминозащитных групп R¹⁰¹ приемлемы известные, например, из химии пептидов, аминозащитные группы, которые можно вводить и снова отщеплять известными методами. Соответствующие защитные группы известны, например, из публикаций J.A.W.McOmie "Protective Groups in Organic Chemistry", Plenum Press, 1973, или Т.W.Green and P.G.M.Wuts "Protective Groups in Organic Chemistry", Wiley and Sons 1991.

Пригодны, например, в качестве аминозащитных групп R¹⁰¹ весьма стойкие в кислой и щелочной среде группы, которые могут быть отщеплены при гидрогенолитических условиях. К ним относятся, например, фенил низший алкилокси карбонильные группы, такие как бензилоксикарбонильная группа (обозначаемые ниже как СbО). Предпочтительно в качестве амиозащитной группы R¹⁰¹ может быть использована бензилоксикарбонильная группа, которая может быть отщеплена известным образом, например путем каталитического гидрирования, для получения соединений формулы I, в которой R¹ обозначает водород. Отщепление защитной группы может происходить в инертном в условиях реакции органическом растворителе, таком как низший алифатический эфир, например тетрагидрофуран (обозначаемый ниже как THF) или диэтиловый эфир, низшие спирты, например метанол или этанол, или органические кислоты, например низшие алифатические карбоновые кислоты, такие как уксусная кислота, или в смесях этих растворителей и в присутствии катализатора гидрирования. В качестве катализаторов гидрирования пригодны, например, катализаторы на основе благородного металла, такого как платина, на активированном угле. Реакцию целесообразно проводить при комнатной температуре. Необходимое для гидрирования давление водорода составляет от 2 до 7 бар, предпочтительно от 3 до 5 бар.

Соединения формулы I, в которой R¹ обозначает водород, могут быть при необходимости переведены известными методами, применяемыми для алкилирования аминов, в соединения формулы I, в которой R¹ обозначает низший алкил. С этой целью соединения формулы I могут быть алкилированы восстановительно, например, путем взаимодействия с низшими алифатическими альдегидами, такими как формальдегид. Взаимодействие может проводиться в обычных для восстановительного алкилирования аминов условиях, например в условиях каталитического гидрирования. В качестве подходящих катализаторов гидрирования могут рассматриваться металлические катализаторы, такие как никель Ренея. В качестве растворителей предпочтительно могут быть использованы низшие спирты. Каталитическое гидрирование может проводиться в условиях, описанных выше для гидрогенолитического отщепления аминозащитных групп R¹⁰¹.

Другая возможность алкилирования состоит во взаимодействии соединений формулы I, в которой R¹ обозначает водород, с низшими алифатическими алкилгалогенидами, такими как алкилбромиды или алкилиодиды, предпочтительно метилиодид, алкилсульфатами или эфирами алкилсульфоновых кислот, при обычных для реакций нуклеофильного замещения условиях. Реакция может проводиться в полярном апротонном растворителе, таком как диметилформамид (обозначаемый ниже как DMF), диметилсульфоксид (обозначаемый ниже как DMSO) или ацетонитрил при температурах от -20 до 100^oС, предпочтительно от 60 до 90^oС, и с применением кислотосвязывающего реагента. В качестве кислотосвязывающих реагентов приемлемы, например, органические основания, указанные выше для взаимодействия соединений формулы IV с соединениями формулы V.

В качестве физиологически приемлемых солей соединений формулы I могут рассматриваться их соли с неорганическими кислотами, например серной кислотой, фосфорной кислотой или галогенводородными кислотами, предпочтительно хлористоводородной кислотой, или с органическими кислотами, например низшими алифатическими моно-, ди- или трикарбоновыми кислотами, такими как малеиновая, фумаровая, винная, лимонная кислоты, или с сульфоновыми кислотами, например низшими алкансульфоновыми кислотами, такими как метансульфоновая кислота, или в случае необходимости замещенными в бензольном кольце галогеном или низшим алкилом бензолсульфоновыми кислотами, такими как п-толуол-сульфоновая кислота.

Соединения формулы I могут быть выделены и очищены известным образом из реакционной смеси. Кислотно-аддитивные соли могут быть переведены обычным способом в свободные основания, а последние известным образом могут быть переведены в фармакологически приемлемые кислотно-аддитивные соли.

Соединения формулы I содержат хиральный атом углерода, а именно несущий 1H-индол-3-ил-метильный остаток атом углерода в 2-положении пиперазинового основного остова. Тем самым соединения формулы I могут существовать в нескольких стереоизомерных формах. Настоящее изобретение охватывает как смеси оптических изомеров, так и изомерно-чистые соединения формулы I. Предпочтительны соединения формулы I, в которой индолилметильный остаток расположен в 2R-положении пиперазинового кольца.

В том случае, если при синтезе соединений формулы I применяются смеси оптических изомеров исходного соединения формулы II, то и соединения формулы I получаются в виде смесей оптических изомеров. Исходя из стереохимически единых форм исходного соединения, могут быть получены также стереохимически единые соединения формулы I. Стереохимически единые соединения формулы I могут быть получены из смесей оптических изомеров известным образом, например путем хроматографического разделения на хиральных разделительных материалах или путем взаимодействия с подходящими оптически активными кислотами, например с винной кислотой или камфорно-10-сульфоновой кислотой, с последующим разделением на оптически активные антиподы путем фракционированной кристаллизации полученных диастереомерных солей.

Оба возможных энантиомера соединения формулы II известны из ЕР-А 655422 и могут быть получены описанным в этой патентной заявке способом или аналогично этому способу.

Амины формулы V могут быть получены из дважды аминозащищенных диаминосоединений общей формулы VII.

в которой R¹⁰¹, R² и R³ имеют вышеуказанные значения и R¹⁰¹ обозначает аминозащитную группу, путем селективного отщепления известным образом от соединений формулы VII аминозащитной группы R⁴⁰¹.

В качестве аминозащитных групп R⁴⁰¹ приемлемы общеизвестные, например из химии пептидов, аминозащитные группы, описанные в вышеуказанных литературных источниках. Например, пригодны в качестве аминозащитных групп R⁴⁰¹, в по меньшей мере умеренно кислой среде, селективно отщепляемые путем добавления п-толуолсульфоновой кислоты, трифторуксусной кислоты или газообразной или растворенной в растворителях соляной кислоты группы, практически устойчивые в гидрогенолитических и щелочных условиях. К ним относятся, например, разветвленные низшие алкилоксикарбонильные группы, такие как трет-бутилоксикарбонильная группа (обозначаемая ниже как BОС). Предпочтительно R⁴⁰¹ может обозначать трет-бутилоксикарбонильную группу.

Соединения формулы VII могут быть получены известным образом, например путем восстановления амидов общей формулы VIII,

в которой R¹, R², R³ и R⁴⁰¹ имеют вышеуказанные значения, и, поскольку R¹ обозначает водород, путем последующего введения защитной группы R¹⁰¹. Восстановление может проводиться с помощью комплексных гидридов щелочных металлов, таких как литийалюминийгидрид, в качестве восстановителей. В качестве растворителей приемлемы инертные в условиях реакции органические растворители, такие как низшие алифатические эфиры, например диоксан, THF или диэтиловый эфир или смеси этих растворителей. Подходящим температурным интервалом является интервал от -20^oС до температуры кипения реакционной смеси. Восстановление предпочтительно можно проводить при комнатной температуре.

Дмиды формулы VIII могут быть получены путем взаимодействия аминозащищенных ω-аминокарбоновых кислот общей формулы IX,

в которой R⁴⁰¹ имеет вышеуказанное значение, с аминами общей формулы X,

в которой R¹, R² и R³ имеют вышеуказанные значения, методами, обычными для образования амидных группировок, путем аминоацилирования. В качестве ацилирующего средства могут быть использованы кислоты формулы IX или их реакционноспособные производные. В качестве реакционноспособных производных могут рассматриваться, в частности, смешанные ангидриды и хлорангидриды или бромангидриды кислот формулы IX или смешанные сложные эфиры кислот формулы IX с хлормуравьиной кислотой или с органическими сульфоновыми кислотами, например ароматическими сульфоновыми кислотами, такими как замещенные низшим алкилом или галогеном бензолсульфоновые кислоты, например п-толуолсульфоновая кислота. Ацилирование может происходить в инертном в условиях реакции органическом растворителе при температурах от -20^oС до комнатной температуры, предпочтительно при комнатной температуре. Подходящими растворителями являются ароматические углеводороды, такие как бензол или толуол, алифатические эфиры, такие как диэтиловый эфир, THF или диоксан или смеси этих растворителей.

Ацилирование может проводиться целесообразно, особенно если в качестве ацилирующего агента применяют галогенангидрид кислот формулы IX, в присутствии кислотосвязываещего реагента. В качестве кислотосвязывающего реагента пригодны ненуклеофильные органические основания, указанные выше для взаимодействия карбамоильных соединений формулы IV с соединениями формулы V.

В том случае, если в качестве ацилирующих агентов применяют сами кислоты формулы IX, взаимодействие аминов формулы Х с кислотами формулы IX может целесообразно проводиться также в присутствии известного из химии пептидов в качестве подходящего для амидообразования известного реагента связывания. В качестве примера реагентов связывания, которые способствуют образованию амида со свободными кислотами тем, что реагируют с кислотой in situ с образованием реакционноспособного производного кислоты, могут быть, в частности, названы: алкилкарбодиимиды, например циклоалкилкарбодиимиды, такие как дициклогексилкарбодиимид или 1-этил-3-[(диметиламино)-пропил]-карбодиимид, диизопропилкарбодиимид или карбонилдиимидазол. Взаимодействие в присутствии реагента связывания может проводиться целесообразно при температурах от -30 до +50^oС в растворителях, таких как галогенированные углеводороды и/или ароматические углеводороды, такие как в случае необходимости замещенные бензолы, и при необходимости в присутствии кислотосвязывающего органического соединения, например вышеописанного ненуклеофильного азотного основания. Кислоты формулы IX представляют собой аминозащищенные производные производных 2-аминоуксусной кислоты, которая известна в незащищенной форме и которая известными методами может быть переведена в аминозащищенные производные.

Соединения формулы Х известны или могут быть получены известным образом из известных соединений.

Соединения формулы I и их кислотно-аддитивные соли обладают антагонистическими свойствами по отношению к рецепторам нейрокинина (=NK) и пригодны для лечения болезненных состояний, при которых нейрокинины участвуют в качестве веществ-переносчиков. Предлагаемая согласно изобретению группа соединений отличается при этом особенно благоприятным избирательным профилем действия, который характеризуется высоким сродством к NK-1 рецепторам при меньшем в сравнении с ним сродстве к NK-1 рецепторам. Далее соединения проявляют высокую оральную биодоступность.

Предлагаемая согласно изобретению группа веществ на основе ее профиля действия пригодна, в частности, для лечения процессов, в которых нейрокинины, связывающиеся с NK-1 рецепторами, участвуют как вещество Р. Тем самым вещества согласно изобретению избирательно пригодны для лечения болезненных состояний, в которых участвует вещество Р. Вещество Р, например, играет роль в переносе боли, при рвоте, нейрогенных воспалениях, воспалениях мочевого пузыря, воспалительных заболеваниях суставов и астматических жалобах. Благодаря оптимальной направленности их профиля действия на желудочно-кишечный тракт вещества согласно изобретению пригодны для лечения функциональных и воспалительных расстройств желудочно-кишечного тракта. Далее в отношении соединений, имеющих наряду с высоким сродством к NK-1 рецепторам также и некоторое сродство к NK-2 рецепторам, в общем предполагается, что обе эти составляющие действия оказывают благоприятное синергетическое влияние на механизмы, принимающие участие в формировании самой картины болезни. К функциональным расстройствам, которые можно лечить с помощью соединений согласно изобретению, относятся, в частности, так называемый синдром раздраженной толстой кишки (IBS =irritable bowel syndrome) или известные как синдром раздраженной толстой кишки расстройства нижних частей кишечника. Основными симптомами синдрома раздраженной толстой кишки являются боли в нижней области живота, которые, по всей видимости, вызываются повышенной чувствительностью висцеральной эфферентной нервной системы, и аномалии стула, в частности аномально ускоренное прохождение кала в толстой кишке. Повышенная висцеральная болевая чувствительность к механическим или химическим раздражениям в кишечном тракте приводит к тому, что пациенты с синдромом раздраженной толстой кишки уже при физиологических, обусловленных перевариванием пищи, небольших растяжениях толстой кишки, например, уже при небольшом газообразовании и легких вспучиваниях, которые здоровые люди едва ли замечают, испытывают сильные висцеральные боли. К воспалительным расстройствам желудочно-кишечного тракта, на которые можно благоприятно влиять с помощью соединений, предлагаемых согласно изобретению, относятся охватываемые понятием IBD (=inflammatory bowel disease) воспалительные расстройства в области тонкой и толстой кишок, в частности неспецифический язвенный колит и болезнь Крона. Профиль действия веществ благодаря хорошей оральной биодоступности отличается благоприятной избирательностью антагонистических действий по отношению к рецепторам нейрокинина в смысле нежелательных побочных действий. Так, в опытах по изучению фармакологических свойств не было установлено в пределах доз, которые блокируют NK-1 рецептор, никакого кардиоваскулярного кальцийантагонистического действия.

Указанные номера примеров относятся к описываемым ниже примерам получения.

ОПИСАНИЕ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИХ ТЕСТ-МЕТОДОВ
1. Определение способности тестируемых веществ к связыванию с NK-1 рецепторами in vitro
Измеряется сродство тестируемых веществ к человеческим NK-1 рецепторам in vitro. Определяется торможение связывания физиологического нейрокинина (вещество Р) с рецепторами нейрокинина-1.

Опыты по изучению связывания с рецептором проводятся с применением [³H] -вещества Р в качестве лиганда. Для исследования связывания берут различные пробы мембранного препарата СНО-клеток (chinese hamster oocytes = овоциты китайского хомячка), экспрессирующие человеческий NK-1 рецептор, инкубируют в растворе меченого лиганда, причем инкубационные растворы не содержат испытуемого вещества или добавок различных концентраций испытуемого вещества. Затем производят разделение связанного и свободного лиганда в пробах с помощью фильтрации на стекловолокнистом фильтре. Остающуюся на фильтре фракцию несколько раз промывают буферным раствором и затем измеряют радиоактивность оставшейся в фильтре фракции бета-сцинцилляционным счетчиком. За величину IC₅₀ испытуемого вещества принимают ту концентрацию, которая вызывает 50%-ное (=haibmaximale "полумаксимальное") вытеснение связанного лиганда. Из нее рассчитывают соответствующую константу ингибирования (величина K₁) испытуемого вещества. В этой тест-модели вещество примера 1 показало значение величины К₁ для сродства к человеческим NK-1 рецепторам, равное 2,1 нмоль/л.

2. Определение способности к связыванию тестируемых веществ с NK-1 рецепторам in vitro
Измеряется сродство тестируемых веществ к человеческим NK-2 рецепторам in vitro. Определяется торможение связывания соединения SR-48968 с NK-2 рецепторами. SR-48968 представляет собой синтетически получаемое соединение, известное как специфический NK-2-антагонист.

Опыты по изучению связывания с рецептором проводятся с применением соединения SR-48968 в качестве лиганда. Методика проведения опыта соответствует методике, применявшейся при фармакологическом исследовании с целью определения способности испытуемых веществ к связыванию с NK-1 рецепторами in vitro. Однако в отличие от нее в данном опыте берут различные пробы мембранного препарата СНО-клеток, экспрессирующие человеческий NK-2 рецептор. В таблице 1 приводятся значения величины K₁ для сродства к человеческим NK-2 рецепторам, показанные в этой тест-модели испытуемыми веществами примеров 1-3.

3. Определение функционального NK-1 антагонизма тестируемых веществ на изолированной ткани морской свинки in vitro
Измеряется NK-1 рецептор - антагонизирующее действие тестируемых веществ in vitro на изолированных, выдерживаемых в обогащенном кислородом питательном растворе, кольцевых аортных препаратах морских свинок породы Pirbright-White. Определяется торможение тестируемыми веществами релаксации тонуса аортных препаратов, вызываемой после стимулирования NK-1 агонистом веществом Р.

Для измерения сокращения сосудистой мускулатуры препараты закрепляют на крючке, соединяют ниткой с динамометром и регистрируют сокращение на самопишущем приборе. Аортные препараты тонизируют с помощью фенилэфрина. Затем стимулируют NK-1 рецепторы препаратов до и после введения испытуемого вещества с помощью 0,01 мкмоля вещества Р, вызывая релаксацию тонуса. Количественно релаксацию определяют в процентах до и после введения тестируемого вещества. В качестве характеристической величины рассчитывают концентрацию 50%-ного (=hatbmaximale "полумаксимальное") торможения (=IC₅₀), которая определяет ту концентрацию, при которой наступает 50%-ное торможение релаксации тонуса.

В таблице 2 приводятся значения величины IС₅₀ для 50%-ного торможения, показанные в этой тест-модели тестируемыми веществами примеров 1-3.

4. Определение антагонистического действия тестируемых веществ по отношению к веществу Р in vivo
Для доказательства антагонистического действия тестируемых веществ по отношению к веществу Р применяли в качестве стандартной тест-модели для индуцированных веществом Р фармакологических эффектов гипотензию у морских свинок, вызываемую введением вещества Р. Определяли тормозящее действие тестируемых веществ по отношению к вызываемому веществом Р понижению кровяного давления после внутривенного (= i.v.) и интрадуоденального (=i.d. "внутрь двенадцатиперстной кишки") введения испытуемых веществ.

Самцам морских свинок под наркозом (кетамин 67 мг/кг, ксилазин 13 мг/кг) вживляют катетер в общую сонную артерию (Arteria Carotis Communis) и в яремную вену (Vena Jugu-laris). Артериальный катетер служит для измерения кровяного давления. Измерение производят с помощью датчика давления Statham 23d/B. По венозному каналу вводят вещество Р, а при внутривенном введении также и испытуемое вещество. После фазы уравновешивания в течение 20 мин вводят внутривенно (i.v.) вещество Р в количестве 50 пмоль на животное в виде шарика. Затем вводят тестируемое вещество. При исследовании с внутривенным (i. v. ) введением тестируемое вещество вводят внутривенно группе из 4-6 животных в дозировках соответственно 0,1; 0,46 и 1,0 мкмоль/кг. Контрольная группа получает соответствующее количество физиологического раствора поваренной соли. Через одну, 15,30, 45 и 60 мин после введения тестируемого вещества вводят внутривенно вещество Р соответственно в количестве 50 пмоль. В отличие от вышеописанной процедуры, в опытах с интрадуоденальным (i.d.) введением вещества подопытным животным дополнительно вживляют катетер в двенадцатиперстную кишку. Через этот катетер 3-6 животным вводят тестируемые вещества в дозировках соответственно 0,046; 0,1; 0,46; 1,0; 4,6 и 10,0 мкмоль/кг. Лекарственной основой в этих опытах служит тилоза. Измеряют среднее артериальное кровяное давление до и приблизительно через одну минуту после первого введения вещества Р (до введения испытуемого вещества) и из этого определяют вызываемое веществом Р максимальное понижение кровяного давления. Через 60 мин сравнивают средние значения артериального кровяного давления контрольных животных, которым давали только вещество Р, и животных, которым давали вещество P и тестируемое вещество, и по разности результатов рассчитывают обусловленное соответствующей дозой тестируемого вещества торможение вызываемого веществом Р понижения кровяного давления в процентах, в пересчете на максимальное понижение кровяного давления. За величину ED₅₀ принимают дозу, при которой имеет место 50%-ное торможение вызванного веществом Р понижения кровяного давления.

В этой тест-модели вещество примера 1 после внутривенного (i.v.) введения показало значение ED₅₀, равное 0,2 мкмоль/кг, и после введения в двенадцатиперстную кишку (i.d.) значение ED₅₀, равное 0,08 мкмоль/кг. Отношение эффективностей при внутривенном введении и при введении в двенадцатиперстную кишку (i. d./i.v) может быть использовано как показатель того, что вещество хорошо пригодно для орального применения и что его действие предпочтительно начинается в желудочно-кишечном тракте.

В такой тест-модели испытуемые вещества исследуются также на их действие по понижению кровяного давления, основанное на кальций-антагонистических свойствах. С этой целью группам контрольных животных вводят лишь испытуемые вещества без вещества Р. Вещество примера 1 в исследованном интервале доз (i. v. дозы до 1 мкмоль/кг и i.d. - дозы до 10 мкмоль/кг) не показало значительного снижения кровяного давления. Это является указанием на то, что в этом интервале доз не наблюдается кальций-антагонистических побочных действий. Неожиданно небольшие кальций-антагонистические побочные действия предлагаемых согласно изобретению соединений могут быть доказаны также на стандартных in-vitro-моделях, например на изолированной аортовой ткани морских свинок.

Вещества могут вводиться пациенту в виде обычных фармацевтических препаратов. Применяемые дозы могут быть индивидуально различны и естественно варьируют в зависимости от вида заболевания и применяемого вещества. В принципе, однако, для введения человеку и высшим млекопитающим пригодны лекарственные формы с содержанием действующего вещества от 0,1 до 80 мг, в частности от 1 до 10 мг на разовую дозу.

Вещества согласно изобретению могут содержаться вместе с обычными фармацевтическими вспомогательными веществами и/или носителями в твердых или жидких фармацевтических препаратах. В качестве примеров твердых препаратов следует назвать принимаемые орально препараты, такие как таблетки, драже, капсулы, порошки или грануляты, или также суппозитории. Эти препараты могут содержать обычные в фармацевтике неорганические и/или органические вещества-носители, такие как, например, тальк, молочный сахар или крахмал, наряду с обычными вспомогательными веществами, например мягчителями или взрывчатыми веществами для таблеток. Жидкие препараты, такие как суспензии или эмульсии действующих веществ, могут содержать обычные разбавители, такие как вода, масла и/или суспендирующие агенты, например полиэтиленгликоли и тому подобное. Кроме того, также могут быть добавлены и другие вспомогательные вещества, например консерванты, вкусовые добавки и тому подобное.

Действующие вещества могут быть известным образом смешаны согласно рецептуре с фармацевтическими вспомогательными веществами и/или веществами-носителями. Для получения твердых лекарственных форм действующие вещества могут быть обычным образом смешаны, например, с вспомогательными веществами и/или веществами-носителями и подвергнуты мокрой или сухой грануляции. Гранулят или порошок может быть непосредственно расфасован в капсулы или спрессован обычным образом в таблеточные ядра. Последние могут быть известным образом переведены в драже.

Ниже изобретение подробнее поясняется на примерах его осуществления, не ограничивая его объема.

Пример 1
(2R)-1-[3,5-бис (трифторметил)бензоил]-2-(1H-индол-3-илметил)-4-{2-[N-(2-метоксибензил) аминоэтил]аминокарбонил}пиперазин
А) 101,5 г трет-бутилоксикарбонилглицина растворяют в атмосфере азота в 800 мл дихлорметана и смешивают с 96,5 мл триэтиламина. Охлаждая льдом, медленно по каплям добавляют 58 мл этилового эфира хлормуравьиной кислоты, перемешивают полученную смесь еще в течение двух часов при комнатной температуре и затем по каплям добавляют раствор 79,8 г 2-метоксибензиламина в 400 мл дихлорметане. Оставляют на ночь перемешиваться, затем добавляют 1400 мл 15%-ного водного раствора винной кислоты и снова перемешивают в течение 30 мин. Затем органическую фазу отделяют, сушат над сульфатом натрия и упаривают под пониженным давлением. Остаток после упаривания кристаллизуют из смеси диэтиловый эфир/дихлорметан и сушат в высоком вакууме. Получают 88,9 гN-BOC-C-(2-метокси)-бензиламиноглицина в виде белого порошка. Т_пл= 97 - 97,7^oС.

Б) 40,0 г полученного выше продукта растворяют в атмосфере азота в 600 мл смеси из толуола и THF (1:1) и по каплям вводят в охлаждаемую льдом емкость, содержащую 21,0 г LiAIN₄ в 500 мл THF. Смесь оставляют на ночь перемешиваться при комнатной температуре, после чего последовательно добавляют по каплям смесь из 20 мл воды и 150 мл THF при охлаждении льдом и затем при комнатной температуре сначала 20 мл 15%-ного водного раствора едкого натра и, наконец, 60 мл воды. Образовавшийся осадок отфильтровывают под вакуумом от раствора, а фильтрат упаривают при пониженном давлении. Остаток растворяют в 240 мл 7,5%-ного водного раствора винной кислоты и водную фазу экстрагируют дихлорметаном. Затем рН водной фазы доводят до значения 10, добавлением 200 мл 10%-ного водного раствора едкого натра и еще три раза экстрагируют дихлорметаном. Объединенные дихлорметановые фазы сушат над сульфатом натрия, упаривают при пониженном давлении и сушат в высоком вакууме. Получают 28,0 г маслянистого N-BOC-N'-(2-метокси)-бензил-1,2-диаминоэтана, который без очистки используют в дальнейших реакциях.

В) 5,0 г полученного выше продукта растворяют в атмосфере азота в 50 мл THF. В полученный раствор добавляют 20 мл 1н. водного раствора едкого натра. Охлаждая льдом, к полученной реакционной смеси одновременно по каплям прибавляют бензиловый эфир хлормуравьиной кислоты и 1н. водный раствор едкого натра (всего 3,05 г) так, чтобы рН не снижался ниже значения 10. По окончании добавления указанных реагентов смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. После этого добавляют 150 мл метил-трет-бутилового эфира, отделяют водную фазу и последовательно промывают органическую фазу дважды водой, беря ее каждый раз в количестве 50 мл, однократно 15%-ным водным раствором винной кислоты в количестве 50 мл и снова дважды водой (также по 50 мл). Органическую фазу сушат затем над сульфатом натрия, упаривают при пониженном давлении и сушат в высоком вакууме. Получают 4,9 г N-BOC-N'-(2-метокси)-бензил-N'-СbО-1,2-диаминоэтана, который без очистки используют в дальнейших реакциях.

Г) 4,8 г полученного выше продукта растворяют в 50 мл дихлорметана. В полученный раствор добавляют 4,4 г толуолсульфоновой кислоты и реакционную смесь оставляют на ночь перемешиваться. Затем добавляют раствор 7,5 г NaOH в 75 мл воды. Органическую фазу отделяют, однократно промывают в 75 мл воды и сушат над сульфатом натрия. Растворитель испаряют при пониженном давлении и продукт сушат в высоком вакууме. Получают 3,5 г маслянистого N-(2-метокси)-бензил-N-СbО-1,2-диаминоэтана, который без очистки используют в дальнейших реакциях.

Д) 2,0 г (2R)-1-[3,5-бис (трифторметил)бензоил] -2-(1Н-индол-3-илметил)-пиперазина растворяют в 100 мл дихлорметана. В полученный раствор последовательно добавляют 0,6 г трифосгена, растворенного в 20 мл дихлорметана, и 12,0 мл диизопропилэтиламина, растворенного в 20 мл дихлорметана. Полученную реакционную смесь перемешивают в течение одного часа при комнатной температуре и затем по каплям добавляют 2,8 г полученного выше аминосоединения, растворенного в 20 мл дихлорметана. Реакционную смесь перемешивают еще в течение 18 ч и после этого последовательно промывают 10%-ным водным раствором гидросульфата калия, водой и затем насыщенным раствором гидрокарбоната натрия. После этого дихлорметановую фазу сушат над сульфатом натрия и упаривают при пониженном давлении. Остаток хроматографируют на силикагеле (растворитель: дихлорметан/метанол 3: 1) и получают 2,5 г маслянистого (2R)-1-[3,5-бис (трифторметил)бензоил]-2-(1H-индол-3-илметил)-4-{2-[N-(2-метоксибензил)-N-СbО-аминоэтил] амино-карбонил}пиперазина, который без очистки применяют в дальнейших реакциях.

Е) 2,5 г полученного выше продукта растворяют в 400 мл этанола и смешивают с 0,5 г 10%-ного палладиевого катализатора на активированном угле. Затем в течение 6 ч гидрируют при давлении водорода 4 бар. Катализатор отфильтровывают и растворитель упаривают при пониженном давлении. Хроматографируют на силикагеле (растворитель: дихлорметан/метанол 9:1) и получают 1,0 г указанного в заголовке неочищенного соединения, которое путем обработки HCl-насыщенным диэтиловым эфиром переводят в гирохлорид, Т_пл =138 - 140^oС.

Вышеописанные методы позволяют получать также приведенные в следующей таблице 3 соединения формулы I:
Пример 2
Получение таблеток, содержащих (2R)-1-[3,5-бис(трифторметил)бензоил]-2-(1H-индол-3-илметил)-4-{2-[N-(2-метоксибензил)аминоэтил]аминокарбонил}пиперазин
Получают таблетки следующего состава на одну таблетку, мг:
2R)-1-[3,5-бис (трифторметил) бензоил] -2-(1H-индол-3-ил-метил)-4-{2-[N-(2-метоксибензил)аминоэтил]аминокарбонил}пиперазингидрохлорид - 20
Кукурузный крахмал - 60
Молочный сахар - 135
Желатин (в виде 10%-ного раствора) - 6
Действующее вещество, кукурузный крахмал и молочный сахар сгущают с помощью 10%-ного раствора желатины. Пасту измельчают и полученный гранулят помещают на подходящее металлическое сито и сушат при 45^oС. Высушенный гранулят направляют в измельчающую машину и смешивают в смесителе с указанными ниже вспомогательными веществами, мг:
Тальк - 5
Стеарат магния - 5
Кукурузный крахмал - 9
и затем прессуют в таблетки весом 240 мг.

Формула изобретения

1. Производные мочевины общей формулы I

в которой R¹ обозначает водород или низший алкил;
R² обозначает водород или галоген;
R³ обозначает водород или низший алкокси,
а также их физиологически совместимые кислотно-аддитивные соли.

2. (2R)-1-[3,5-бис(трифторметил)бензоил] -2-(lH-индол-3-илметил)-4{2-[N-(2-метоксибензил)аминоэтил] аминокарбонил)пиперазин и его физиологически совместимые кислотно-аддитивные соли по п.1.

3. Лекарственное средство, обладающее антагонистическими свойствами по отношению к рецепторам нейрокинина, содержащее фармакологически эффективное количество соединения по п. 1 и фармацевтические вспомогательные вещества и/или носители.

4. Способ получения производных мочевины общей формулы I

в которой R¹ обозначает водород или низший алкил;
R² обозначает водород или галоген;
R³ обозначает водород или низший алкокси,
а также их физиологически совместимых кислотно-аддитивных солей, отличающийся тем, что соединение формулы II

подвергают взаимодействию с реакционноспособным карбонильным соединением общей формулы III

в которой Y обозначает вытесняемую в результате. нуклеофильной атаки первичного или вторичного амина летучую группу,
с образованием карбамоильного соединения общей формулы IV

в которой Y имеет вышеуказанное значение,
к полученному соединению формулы IV прибавляют ненуклеофильное органическое основание, поскольку в результате отщепления летучей группы Y из полученного соединения формулы IV может образоваться кислота, и затем подвергают соединение формулы IV взаимодействию с соединением общей формулы V

в которой R¹⁰¹ обозначает низший алкил или аминозащитную группу;
R² и R³ имеют вышеуказанные значения,
и затем снова отщепляют возможную защитную группу R¹⁰¹.

5. Способ получения производных мочевины общей формулы I

в которой R¹ обозначает водород или низший алкил;
R² обозначает водород или галоген;
R³ обозначает водород или низший алкокси;
а также их физиологически совместимых кислотно-аддитивных солей, отличающийся тем, что соединение формулы II подвергают взаимодействию с соединением общей формулы VI

в которой R¹⁰¹, R² и R³ имеют вышеуказанные значения,
и затем снова отщепляют возможную защитную группу R¹⁰¹, и, при необходимости, алкилируют полученное соединение формулы I, в которой R¹ обозначает водород, до образования соединений формулы I, в которой R¹ обозначает низший алкил, и полученное соединение формулы I, при желании, переводят в его кислотно-аддитивную соль или переводят кислотно-аддитивную соль в свободное соединение формулы I.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3