Способ моделирования острого гнойного холангита у экспериментальных животных

 

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для моделирования острого гнойного холангита, а также для изучения способов лечения данной патологии. С целью получения технического результата в виде оптимизации модели острого гнойного холангита и максимального приближения к клиническому течению заболевания проводится лапаротомия, общий желчный проток берут на две держалки, проксимальная при этом выполняет функцию лигатуры, и завязывают ее на игле выше места пункции общего желчного протока сразу после введения в него штамма № 195 гемолитической E.Coli в концентрации 1·10⁵ КОЕ в 1 мл физиологического раствора в дозе 0,2 мл/кг массы с последующим ушиванием брюшной полости.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для моделирования острого гнойного холангита, а также для изучения способов лечения данной патологии.

Известен способ моделирования острого гнойного холангита у экспериментальных животных (крыс), осуществляющийся посредством канюлирования общего желчного протока с выведением холедохостомы и последующим введением через нее микробной взвеси (E.Coli, штамм № 196 в концентрации 0,95·10⁵ КОЕ в 1 мл и в дозе 0,4 мл/кг массы - Ахаладзе Г.Г. Гнойный холангит: клинические формы, определение тяжести течения, дифференцированное лечение. Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук. Москва, 1994 г.)

Однако известный способ имеет существенные недостатки: невозможность выполнения модели без использования микрохирургической техники и специальных инструментов; полное поперечное пересечение общего желчного протока, что нарушает анатомическую целостность желчевыводящей системы и отступает от естественных условий течения заболевания; продолжительный период оперативного вмешательства, следствием чего является длительное токсическое действие наркоза; введение большого объема микробной взвеси, что не исключает ее вытекание в свободную брюшную полость и возможность гидравлической травматизации желчных путей; значительный интервал времени с момента операции до возникновения гнойного холангита, что не отвечает условиям клинического течения заболевания.

Задачи изобретения - оптимизация модели острого гнойного холангита, максимальное приближение к клиническому течению заболевания.

Задачи изобретения достигаются тем, что проводится лапаротомия, общий желчный проток берут на две держалки, проксимальная при этом выполняет функцию лигатуры, и завязывают ее на игле выше места пункции общего желчного протока сразу после введения в него штамма № 195 гемолитической E.Coli в концентрации 1·10⁵ КОЕ в 1 мл физиологического раствора в дозе 0,2 мл/кг массы с последующим ушиванием брюшной полости.

Способ осуществляется следующим образом.

Экспериментальное животное (крыса) под ингаляционным масочным эфирным наркозом фиксируется в станке за четыре конечности. Проводится лапаротомия и обнажается участок общего желчного протока, который берется на две держалки, проксимальная в дальнейшем выполняет функцию лигатуры. Инъекционным путем в проксимальном направлении в общий желчный проток вводится микробная взвесь, штамм № 195 гемолитической E.Coli в концентрации 1·10⁵ КОЕ в 1 мл физиологического раствора и в дозе 0,2 мл/кг массы. Сразу после введения проводится перевязка протока на игле выше места пункции. Брюшная полость ушивается послойно лавсановой нитью.

Инъекционный способ введения представляется оптимальным и легко выполнимым, позволяет проводить точное дозирование вводимой взвеси. Оптимальным сроком формирования гнойного холангита следует считать 3-и сутки от момента операции.

Экспериментальные исследования были проведены на 200 белых крысах-самках линии Вистар массой 150-200 грамм. Животных выводили из эксперимента на 3-е, 5-е и 7-е сутки с последующим гистологическим исследованием общего желчного протока и ткани печени. На 5-е сутки погибло около 25% животных, а на 7-е летальность достигла 90-100%.

Острый гнойный холангит был подтвержден при макроскопическом исследовании печени и желчевыводящих путей на момент вывода животных из эксперимента, что проявлялось дилятацией общего желчного протока до 0,6-0,8 см, отечностью ткани печени и изменением ее окраски (тусклая и бледная). Содержимым общего желчного протока являлась гнойная желчь. При микроскопическом исследовании во всех образцах обнаружено гнойное воспаление вне- и внутрипеченочных желчных путей различной степени выраженности. В воспалительном инфильтрате на 3-и сутки превалировали сегментоядерные нейтрофильные гранулоциты, на 5-е сутки главенствующее место стали занимать эозинофилы и плазмоциты, а воспалительный инфильтрат распространялся за пределы терминальной пластинки.

Таким образом, предлагаемый способ моделирования острого гнойного холангита позволяет значительно упростить технику оперативного вмешательства, сократить временной интервал операции, избежать вытекания микробной взвеси в свободную брюшную полость и гидравлической травматизации желчных путей введением большого объема взвеси, повысить выживаемость крыс в интра- и послеоперационном периоде и позволяет получить гнойный холангит в короткие сроки.

Формула изобретения

Способ моделирования острого гнойного холангита у экспериментальных животных, включающий выделение общего желчного протока, введение в него микробной взвеси E.Coli и создание препятствия для оттока желчи, отличающийся тем, что проводят лапаротомию, общий желчный проток берут на две держалки, проксимальная при этом выполняет функцию лигатуры, и завязывают ее на игле выше места пункции общего желчного протока сразу после введения в него штамма № 195 гемолитической E.Coli в концентрации 1·10⁵ КОЕ в 1 мл физиологического раствора в дозе 0,2 мл/кг массы с последующим ушиванием брюшной полости.