Способ моделирования острого панкреатита

 

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной хирургии, и может быть использовано для моделирования острого панкреатита у белой крысы. Способ включает блокирование выводных протоков поджелудочной железы путем установки катетера внутрь общего желчного протока через разрез его стенки. Затем накладывают 3 лигатуры поверх катетера с обеих сторон от разреза протока и перед местом разветвления общего желчного протока на долевые печеночные. Подкожно вводят прозерин, а внутрижелудочно - смесь жирного мясного бульона с этиловым спиртом, что приводит к стимуляции секреции поджелудочной железы. Способ позволяет снизить травматичность операции, повысить чистоту и точность эксперимента, исключить побочные эффекты: перитонит, механическую желтуху.

Изобретение относится к области экспериментальной хирургии и предназначено для изучения патогенеза каналикулярно-гипертензионной формы острого панкреатита, а также для апробации эффективности лекарственных препаратов при данной патологии.

Известен способ создания модели жирового панкреонекроза у крыс путем перевязки главного панкреатического протока у места впадения в двенадцатиперстную кишку и ретроградного введения в проток выше лигатуры с помощью инъекционной иглы смеси трипсина с этиловым спиртом и бриллиантовым зеленым [1].

Однако этот способ не имеет достаточного анатомического обоснования. Во-первых, авторы ошибочно принимают за главный панкреатический проток общий желчный проток, в который впадают протоки поджелудочной железы [2]. Во-вторых, недостатком данного известного способа является перевязка общего желчного протока, что приводит к механической желтухе, являющейся побочным эффектом предлагаемой модели, и значительно снижает чистоту эксперимента.

Известен способ моделирования острого панкреонекроза у крыс путем ретроградного введения таурохолевой кислоты в общий желчный проток через стенку двенадцатиперстной кишки [3].

Недостатком данного способа является то, что при этом вскрывают просвет кишечника, вследствие чего наряду с развитием острого панкреатита существует большая вероятность развития перитонита. Кроме того, из-за маленького размера (0,4 мм) устья протока, введение иглы через стенку кишки вслепую является сложной, травматичной и не всегда выполнимой манипуляцией.

Известен также способ моделирования атрофии секреторной части поджелудочной железы путем лигирования общего желчного протока на катетере, введенном в общий желчный проток через стенку двенадцатиперстной кишки [4].

Однако данный способ применяют не с целью моделирования острого панкреатита, а для создания другого вида патологии - атрофии поджелудочной железы. Кроме того, недостатками данного способа являются необходимость вскрытия просвета кишечника для проведения катетера внутрь желчного протока, что в дальнейшем требует ушивания дефекта с использованием микрохирургической техники и дорогостоящего шовного материала, и риск возникновения перитонита при несостоятельности швов, что приводит к снижению чистоты и точности эксперимента.

Целью изобретения является повышение точности и чистоты эксперимента. Это достигается тем, что катетер вводят непосредственно в общий желчный проток через разрез его стенки в дистальной части, после чего накладывают 2 лигатуры поверх катетера с обеих сторон от разреза и дополнительно 1 лигатуру перед разветвлением общего желчного протока на долевые печеночные; проводят стимуляцию секреции поджелудочной железы подкожной инъекцией прозерина и интрагастральным введением жирного мясного бульона с этиловым спиртом; исследуют биохимические показатели крови.

Способ реализуется следующим образом. За 30 минут до операции с целью хорошего заполнения протоков поджелудочной железы голодной крысе проводят стимуляцию секреции поджелудочной железы. Для этого в желудок с помощью слегка изогнутого металлического зонда вводят смесь из 2 мл жирного мясного бульона и 0,15 мл 96^o спирта и под кожу дополнительно инъецируют 0,008 мл 2% раствора прозерина.

Операционный доступ - верхнесрединная лапаротомия по белой линии живота от мечевидного отростка до уровня нижнего края печени. Для обеспечения доступа к воротам печени устанавливают ватные тампоны под правую и левую доли печени и отводят последние в стороны. Петлю двенадцатиперстной кишки выводят наружу и укладывают по левому краю операционной раны, после чего становятся хорошо видны ворота печени и общий желчный проток.

Под бинокулярной лупой передняя поверхность общего желчного протока на протяжении 2-3 мм от стенки двенадцатиперстной кишки освобождается от ткани поджелудочной железы. Стенку общего желчного протока надсекают на ¹/₂ диаметра. В проксимальном направлении в общий желчный проток через разрез вводят тонкую (0,4 мм) полихлорвиниловую трубку до места разветвления протока на долевые печеночные. Излишек трубки отсекают примерно на уровне разреза общего желчного протока, после чего трубку проводят в дистальную часть общего желчного протока и двенадцатиперстную кишку. Далее вокруг дренажа на общий желчный проток накладывают 3 лигатуры: с обеих сторон от разреза и перед разветвлением общего желчного протока на долевые протоки печени. Таким образом, все выводные протоки поджелудочной железы, открывающиеся в общий желчный проток, оказываются блокированными, а пассаж желчи не нарушается. В отличие от перечисленных выше способов просвет кишечника не вскрывается, исключается опасность развития перитонита. Операция технически не сложна.

Стимуляцию секреции поджелудочной железы проводили подкожной инъекцией 0,008 - 0,016 мл (в зависимости от веса) 2% раствора прозерина и внутрижелудочным введением смеси 0,15 мл 96^о с 2 мл жирного мясного бульона на следующий день.

Развитие панкреатита контролировали взятием проб крови на панкреатические ферменты (липазу, амилазу и антитрипсин) и морфологическим исследованием ткани поджелудочной железы на 2, 5 и 10 сутки. На 2-е сутки отмечали повышение липазы выше контрольных цифр ( р<0,01), амилазы ( р<0,01), снижение антитрипсина ( р<0,05), что является патогмоничным для острого панкреатита. Клиническую оценку течения заболевания осуществляли также путем наблюдения за поведением животных, отмечали вялость, отказ от пищи, повышенную жажду и слюноотделение, потерю блеска шерсти, умеренное вздутие живота. Во время лапаротомии на 2, 5 и 10 сутки в брюшной полости обнаруживали очаги стеатонекроза, являющиеся достоверным признаком острого панкреатита, инфильтрат в области поджелудочной железы, кровоизлияния в брюшину и другие органы, повышенную кровоточивость тканей, реже выпот. При морфологическом исследовании ткани поджелудочной железы на 2 и 5 сутки выявляли отек стромы, кровоизлияния, множественные разрывы ацинусов, снижение относительной плотности зимогенных гранул в ткани поджелудочной железы ( р<0,01). К 10-м суткам наступало стихание явлений панкреатита, показатели амилазы, липазы и антитрипсина приходили к норме, морфологически происходило замещение ткани поджелудочной железы соединительной тканью. Воспроизводимость острого панкреатита при данном способе составила 100%. Положительные эффекты модели: чистота и точность эксперимента; относительная "мягкость" течения острого панкреатита, позволяющая не только изучать механизм заболевания в динамике, но и опробовать лечебные методики; снижение травматичности операции; меньшая трудоемкость операции в сравнении с известными моделями; исключение побочных эффектов - перитонита, механической желтухи.

Источники информации 1. Большаков И.Н., Белохвостикова Т.С. Способ создания модели жирового некроза // Бюл. 35. - 23.09.86 (а.с. 1259328).

2. Гамбарян П.П., Дукельская Н.М. Крыса. - М.: "Советская наука", 1955, 254 с.

3. Aho H.J., Nevalainen T.J., Aho A.J. Experimental pancreatitis in rat, Development of pancreatic necrosis, ischemia and edema after intraductal sodium taurocholat injection // Eur. Surg. Res. - 1983. - Vol.15. - P.28 - 36.

4. Васильев В.Н., Кобелев В.В., Афанасьева А.Н. Способ моделирования атрофии секреторной части поджелудочной железы // Бюл. 10. - 15.03.92 (а.с. 1720085).

Формула изобретения

Способ моделирования острого панкреатита у белой крысы, включающий блокирование выводных протоков поджелудочной железы путем установки катетера внутрь общего желчного протока через разрез его стенки; наложение 3 лигатур поверх катетера с обеих сторон от разреза протока и перед местом разветвления общего желчного протока на долевые печеночные; стимуляцию секреции поджелудочной железы подкожной инъекцией прозерина и внутрижелудочным введением смеси жирного мясного бульона с этиловым спиртом; определение в сыворотке крови протеолитических ферментов поджелудочной железы; изучение морфологических изменений в поджелудочной железе.