Дигликопептид глицирризиновой кислоты с метиловым эфиром l- валина, стимулирующий первичный иммунный ответ



 

Изобретение относится к новым биологически активным соединениям, а именно к дигликопептиду глицирризиновой кислоты с метиловым эфиром L-валина формулы (I), стимулирующему первичный иммунный ответ.

Заявляемое соединение является умеренно опасным веществом и стимулирует выработку антителообразующих клеток в 2 раза по сравнению с контролем. 1 табл.

Изобретение относится к новым биологически активным соединениям, конкретно к дигликопептиду глицирризиновой кислоты с метиловым эфиром L-валина формулы (I), стимулирующему первичный иммунный ответ.

Указанное соединение и его свойства в литературе не описаны.

Задача, на решение которой направлено заявленное техническое решение, заключается в поиске новых соединений в ряду производных глицирризиновой кислоты (ГК), обладающих иммуностимулирующей активностью. В заявленном техническом решении синтезировано новое химическое соединение - дигликопептид ГК с метиловым эфиром L-валина формулы (I), стимулирующим первичный иммунный ответ (выработку антителообразующих клеток, АОК).

Способ получения предлагаемого соединения (1) заключается в том, что ГК (II) обрабатывают N-гидроксисукцинимидом (HOSu) и N1N1-дициклогексилкарбодиимидом (ДСС) в диоксане при 0 - +5С в течение 3 ч при мольном соотношении реактивов ГК: HOSu: ДСС=1:4:2 ммоль, выдерживают 8-10 ч в холодильнике при +4 - +8С, отфильтровывают осадок дииклогексилмочевины, а к фильтрату прибавляют 2,5-2,7 ммоль гидрохлорида метилового эфира L-валина и избыток третичного основания (триэтиламина) (1 мл). Смесь выдерживают при 20-22С, с периодическим перемешиванием в течение 15-20 ч, разбавляют холодной водой, подкисляют лимонной кислотой до рН-4, осадок отфильтровывают и сушат. Очистку продукта проводят хроматографией на силикагеле L (40/100 мкм, Чехия), элюируя смесью СHCl3-MeOH-H2O, 200:10:1, 100:10:1 (50:10:1) (V%). Выход дигликопептида (I) составил 60%.

Острая токсичность дигликопептида (I) определялась на белых беспородных мышах обоего пола массой 18-20 г при однократном внутрибрюшинном введении. Параметры токсичности вычислялись по Литчфильду и Уилкоксону [Беленький М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта (2-е изд., перераб. и доп.). Ленинград, 1963. С.152].

Острая токсичность (LD50) составила 1100 мг/кг. Данное соединение относится к 3-му классу умеренно-опасных веществ [Беленький М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта (2-е изд., перераб. и доп.). Ленинград, 1963. С.152].

Влияние дигликопептида (I) на первичный иммунный ответ изучали на беспородных мышах массой 18-20 г по методу Ерне и Нордина [Jerne N.K., Nordin E.A. Plaque formation in by single antibody-producing cells.//Science. 1963. V.140. P.405] в модификации Каннингема [Cunningham A.J., Czenberg A. Further improvement in the plaque technique for detecting single antibody forming cell.//Immunology. 1968. No. 2. P. 599]. Животных иммунизировали внутрибрюшинным введением 5% взвеси эритроцитов барана, через 24 часа после иммунизации внутрибрюшинно вводили гликопептид (I) в дозе 2 мг/кг. О действии изучаемого соединения на гуморальное звено иммунитета судили по количеству антителообразующих клеток (АОК) во всей селезенке, которое подсчитывали визуально по числу зон гемолиза, затем производили пересчет АОК на 106 спленоцитов. В качестве препарата сравнения использовали известный иммуностимулятор класса гликопептидов, N-ацетилмурамоилдипептид (МДП), в дозе 2 мг/кг [Л.А. Балтина, Г.А. Толстиков. Мурамилпептиды. Екатеринбург: УрО РАН, 1998. 348 с.]. Результаты опытов представлены в таблице.

Установлено, что при внутрибрюшинном введении дигликопептид (I) увеличивает количество АОК в селезенке у мышей в дозе 2 мг/кг ~ в 2 раза по сравнению с контролем. Дигликопептид (I) стимулирует гуморальное звено иммунного ответа эффективнее референс-препарата МДП при введении в равных дозах.

Влияние гликопептида (I) на выработку АОК у беспородных мышей

В отличие от МДП соединение (I) менее токсично. LD50 МДП=1000 мкг/мышь [Джексенбаев О.Ш. Биологические свойства синтетических гликопептидов-стимуляторов иммуногенеза неспецифической резистентности.//Жур. микробиол., эпидемиол., иммунол. 1981. №8. С.13]. LD50 для гликопептида (I) 1100 (7851540) мг/кг (внутрибрюшинно, мыши), данное соединение относится к III классу умеренно опасных веществ.

Сущность изобретения иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Влияние соединения (I) на первичный ответ изучали на 24 беспородных белых мышах массой 18-20 г по методу Ерне и Нордина [Jerne N.K., Nordin E.A. Plaque formation in afar by single antibody-producing cells.//Science. 1963. V.140. P.405] в модификации Каннингема [Cunningham A.J., Czenberg A. Further improvement in the plaque technique for detecting single antibody forming cell. // Immunology. 1968. No. 2. P.599]. Животных иммунизировали 5% взвесью эритроцитов барана (ЭБ) внутрибрюшинно за 4 суток до опыта. Через сутки после иммунизации животным внутрибрюшинно однократно вводили соединение (I) в дозе 2 мг/кг. Через 4 суток (на 5-е) определяли количество АОК во всей селезенке. После инкубации в термостате при t=37С в течение 2,5 ч подсчитывали визуально число зон гемолиза, соответствующее количеству АОК, и производили пересчет АОК на 106 спленоцитов.

Действие дигликопептида (I) сравнивали с влиянием МДП на выработку АОК (см. табл.) при введении в дозе 2 мг/кг.

На беспородных мышах дигликопептид (I) в дозе 2 мг/кг увеличивает количество АОК по сравнению с контролем в 2 раза. Иммуностимулирующий эффект заявляемого соединения (I) более выражен, чем у МДП.

Пример 2. 3-0-[2-0-N-(-D-глюкопиранозилуроноил)-L-валина метиловый эфир]-[N-(-D-глюкопиранозилуроноил)-L-валина метиловый эфир]-3,20)-11-оксо-30-норолеан-12-ен-3-ил-30-карбоновая кислота (I).

К раствору 0,82 г (1 ммоль) глизирризиновой кислоты в 50 мл диоксана при 0 - +5С прибавили при перемешивании 0,46 г (4 ммоль) N-гидроксисукцинимида и перемешивали при этой температуре 3 ч, выдерживали в течение ночи в холодильнике при +4-+8С. Отфильтровали осадок дициклогексилмочечины и к фильтрату, охлажденному до 0 - +5С, прибавили 0,45 г (2,7 ммоль) гидрохлорида метилового эфира L-валина и 0,5 мл (4,9 ммоль) триэтиламина.

Смесь перемешивали при 20-22С 20 ч, разбавили холодной водой, подкислили лимонной кислотой до рН ~4, осадок отфильтровали и промыли водой. Сухой осадок (1,0 г) хроматографировали на колонке с силикагелем L (40/100 мкм), элюируя смесью СНС13-МеОН-Н2О=200:0:1, 100:10:1, 50:10:1 (V%). Выход 60% (белый порошок). []20D+ 32 (с 0,04; МеОН). ИК-спектр, , см-1: 3600-3200 (ОН, NH); 1740 (СООМе); 1660 (СII=0); 154=(CONH). УФ-спектр, max МеОН (lg ):250 нм (4,95). Найдено, %: N 2,72 C54H84N2O18. Вычислено, %: N 2,67. Спектр ЯМР 13С (CD3 OD, 25С, 75,5 МГц, 8, м.д.): 40,5 (С1); 90,6 (С3); 56,7 (С5); 34,1 (С7); 63,4 (С9); 202,9 (С11); 129,2 (С12); 171,7 (С13); 46,8 (С14); 28,7 (С16); 48,4 (С18); 45,2 (С20); 39,3 (С22); 29,0 (С23); 17,2 (С24); 17,5 (С25); 19,2 (С26); 24,1 (С27); 29,2 (С28); 29,5 (С29); 180,8 (С30); 105,2 (С1’); 81,8 (С2’); 76,3 (С3’); 73,7 (С4’); 78,0 (С5’); 171,7 (С6’); 105,2 (С1”); 76,1 (С2”); 76,5 (С3”); 73,6 (С4”); 77,3 (С5”); 171,7 (С6”). Фрагменты аминокислот: С1:53,04; 52,93; С2: 173,36; 173,17; С3: 59,29; 58,70; С4: 32,55; С5: 19,73; 19,61.

Таким образом, заявляемое соединение (1) является умеренно опасным веществом, стимулирующим выработку АОК в 2 раза по сравнению с контролем. Иммуностимулирующий эффект гликопептида (I) более выражен, чем у МДП.

Формула изобретения

Дигликопептид глицирризиновой кислоты с метиловым эфиром L-валина общей формулы (I)

стимулирующий первичный иммунный ответ.

MM4A - Досрочное прекращение действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 20.05.2007

Извещение опубликовано: 27.08.2008        БИ: 24/2008



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к новому химическому веществу, конкретно к биологически активному соединению, обладающему иммуностимулирующей и противовирусной активностью (анти-ВИЧ и противогерпетической), - N'-{N-[3-оксо-20(29)-лупен-28-оил] -9-аминононаноил} -3-амино-3-фенилпропионовой кислоте формулы I

Изобретение относится к способам выделения биологически активных веществ из отходов древесины, а именно к способу выделения бетулинола из наружного слоя коры березы (бересты)

Изобретение относится к новым химическим соединениям, в частности к сапонину глицирретовой кислоты - 6',6''-ди--D-галактопиранозилкарбоксилат 3-О-[2'-O-(-D- глюкуронопиранозил)--D-глюкуронопиранозид) метилового эфира глицирретовой кислоты формулы IIб, проявляющему противоязвенную активность

Изобретение относится к новому химическому соединению, а именно к амиду глицирризиновой кислоты с 5-аминоурацилом формулы I, проявляющему анти-ВИЧ активность, в культуре клеток МТ-4, с высокой эффективностью ингибируя накопление вирусспецифического белка р24 (ID50 = 55 мкг/мл или 52,8 мкМ), суммарного вирусного антигена (ID50 = 75 мкг/мл или 72,0 мкМ), что снижает активность обратной транскриптазы (ревертазы) (RT) (ID50 = 55 мкг/мл или 52,8 мкМ)

Изобретение относится к новым химическим соединениям, конкретно к гликопептиду глицирризиновой кислоты с S-бензил-L-цистеином [I]: 3-О-{2-О-[N-(-D-глюкопиранозилуроноил)-L-цистеин(S-бензил)-N-(-D-глюкопиранозилуроноил)-L-цистеин(S-бензил)]}-(3,20)-11-оксо-олеан-12-ен-30-(N-карбонил-L-цистеин(S-бензил)-3-ил формулы (Iб), проявляющему анти-ВИЧ активность
Изобретение относится к улучшенному способу получения бетулиновой кислоты

Изобретение относится к новым комплексам включения производных 1,2,5-оксадиазол-2-оксида общей формулы I, где 1=R2=CN или вместе с соседними атомами углерода образуют аннелированный 3,6-бис(низший алкил)пиридазин-1,2-диоксидный цикл, с полициклическими производными глюкопиранозы общей формулы II, где если n= 1, то R3 - фрагмент 11-оксо-18, 20-олеан-12-ен-29-овой кислоты формулы III, R4=H, R5 --D-глюкуронопиранозил, R6=R7=H и R8= C(O)OH или, если n= 7, то R3=Н, R4 и R7 - простые связи, R5 и R6 = H или (CH2CH(CH3)O)mH, где m=1-14, и R8=CH2OH или СН2О(CH2CH(CH3)O)mH, где m=1-14, генерирующим оксид азота и активирующим растворимую форму гуанилатциклазы (рГЦ), как спазмолитическим, сосудорасширяющим и гипотензивным средствам быстрого действия и ингибиторам агрегации тромбоцитов, способу их получения и фармацевтическим композициям на их основе

Изобретение относится к способу извлечения бетулина из наружного слоя коры березы

Изобретение относится к фармацевтическим композициям, ингибирующим некроз гепатоцитов на основе производных тритерпена общей формулы I, где R1 - OH, С1-6 алкокси, С1-6 алкилкарбонилокси или бензилокси, R2 - С1-6 алкил, СН2ОR5, где R5 - H, С1-6 алкил, бензил или С1-6 алкилкарбонил, формил, СООR6, где R6 - H, или С1-6 алкил, или -СН2N(R7)R8, где R7 и R8, одинаковые или различные, - Н или С1-6 алкил, или R1 и R2 вместе образуют -О-СR9(R10)-OCH2-, где R9 и R10, одинаковые или различные, - Н, или С1-6 алкил, или фенил; R3 и R4, одинаковые или различные, - Н, ОН, С1-6 алкил, гидрокси С1-6 алкил, формил, -СООR11, где R11 - Н или OR12, где R12 - С1-6 алкил, бензил, С1-6 алкилкарбонил, фенилкарбонил, С2-6 алкенил, С2-6 алкенилкарбонил или фенилалкенилкарбонил, или R3 и R4 вместе образуют =CH2 или =O-группу; означает простую или двойную связь при условии, что когда - двойная связь, то R4 отсутствует

Изобретение относится к новому биологически активному химическому соединению, конкретно к 3,28-ди-О-никотинату бетулина (1), формулы проявляющему гепатопротекторную и анти-ВИЧ активность

Изобретение относится к медицине

Изобретение относится к N-замещенным индол-3-глиоксиламидам общей формулы I, обладающим противоастматическим, противоаллергическим и иммунодепрессивным/иммуномодуляторным действием где R означает водород, (С1-С6)алкил, причем алкильная группа необязательно содержит один фенильный заместитель, который, в свою очередь, необязательно содержит по меньшей мере один заместитель, выбранный из группы, включающей галоген, метокси, этокси, (С1-С6)алкил; R1 означает фенильный цикл, содержащий по меньшей мере один заместитель, выбранный из группы, включающей (С1-С6)алкокси, гидрокси, нитро, (С1-С6)алкоксикарбониламино или один фтор, или R1 представляет собой остаток пиридина формулы II где углеродные атомы 2, 3 и 4 остатка пиридина необязательно имеют одинаковые или различные заместители R5 и R6, причем R5 и R6 обозначают (С1-С6)алкил или галоген, или R1 представлен аллиламинокарбонил-2-метилпроп-1-ильной группой, или R и R1 вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют цикл пиперазина формулы III где R7 обозначает фенил или пиридинил; R2 означает (С1-С6)алкил, который необязательно содержит фенильный остаток, который, в свою очередь, необязательно замещен галогеном, метоксигруппой или этоксигруппой, или относящаяся к R2 (С1-С6)алкильная группа необязательно замещена 2-, 3- или 4-пиридильным остатком; R3 и R4 являются одинаковыми или различными заместителями и обозначают водород, гидрокси, (С1-С6)алкокси, (С1-С3)алкоксикарбониламино- или (С1-С3)алкоксикарбониламино(С1-С3)алкил или R3 представляет собой циклопентилоксикарбониламиногруппу; Z означает О, причем алкил, алкокси или алкиламино означают как упорядоченные неразветвленные группы, такие как метил, этил, н-пропил, н-бутил, н-гексил, так и разветвленные алкильные группы, такие как изопропил или трет-бутильные группы; галоген означает фтор, хлор, бром или йод и алкоксигруппа означает метокси, пропокси, бутокси, изопропокси, изобутокси или пентоксигруппу, а также к их фармацевтически приемлемым солям с кислотами
Изобретение относится к медицине, к фтизиатрии и торакальной хирургии и может быть использовано для послеоперационного ведения больных по поводу распространенного фиброзно-кавернозного туберкулеза легких

Изобретение относится к области медицины и касается создания средств растительного происхождения

Изобретение относится к биохимической фармакологии и может быть использовано в клинической медицине как противовоспалительное, ранозаживляющее, кровоостанавливающее, противораковое, антигельминтное и кардиотоническое средство

Изобретение относится к области медицины, в частности к полифункциональной композиции на основе производного L-лизин--оксидазы из гриба Trichoderma и способу получения этого фермента
Изобретение относится к медицине, к гинекологии и может быть использовано для лечения псевдоэрозии шейки матки с использованием локорегионарной цитокинотерапии

Изобретение относится к медицине и биологии, в частности к иммунологии, и касается индукции иммунного ответа в организме, имеющем лимфатическую систему

Изобретение относится к области ветеринарии

Изобретение относится к медицине, к венерологии, и может быть использовано для лечения серорезистентного сифилиса

© Патентный поиск, поиск патентов на изобретения - FindPatent.RU 2012-2024
Политика конфиденциальности 2013-03-23T12:09:46
Наверх