Способ терапевтического или профилактического лечения стрептококковых инфекций (варианты) и композиция, предназначенная для использования в нем (варианты), лизиновый фермент, ассоциированный с фагом стрептококков группы с,- активный агент фармацевтической композиции

 

Данное изобретение касается композиции, содержащей лизиновый фермент, ассоциированный с фагом стрептококков группы С, и носитель для доставки лизинового фермента, ассоциированного с фагом стрептококков группы С, в рот, горло или носовые проходы млекопитающего. Композиция является особенно эффективной для профилактического и терапевтического лечения стрептококковых инфекций, включая инфекцию, обычно известную как стрептококковый фарингит. Изобретение позволяет проводить лечение или профилактику не только инфекций стрептококков группы А, но и инфекций группы С и Е с высокой эффективностью. 9 н. и 48 з.п.ф-лы, 3 табл.

Область техники, к которой относится изобретение

Данное изобретение касается композиции, содержащей лизиновый фермент, ассоциированный с фагом стрептококков группы С, и носитель для доставки лизинового фермента, ассоциированного с фагом стрептококков группы С, в рот, горло или носовые проходы млекопитающего. Композиция является особенно эффективной для профилактического и терапевтического лечения стрептококковых инфекций, включая инфекцию, обычно известную как стрептококковый фарингит.

Уровень техники

Было показано, что стрептококки группы А являются важным патогеном, способным существовать как в состоянии носителя у субъекта с асимптоматическим заболеванием, так и у субъекта с симптоматическим заболеванием с симптомами заболеваний, выбранных из ряда слабый фарингит, тонзиллит или импетиго. При отсутствии лечения данные стрептококковые инфекции могут привести к гломерулонефриту, ревматической лихорадке и, возможно, долговременной ревматической болезни сердца. С появлением антимикробных агентов, в частности, антибиотиков - производных пенициллина, организм-возбудитель может быть легко элиминирован, следуя предписанной схеме соответствующей антибиотикотерапии.

Тот факт, что инфицированный субъект (обычно дети и молодые люди) может передавать организмы стрептококков группы А другим субъектам, в особенности в детских садах и школах, вызывает необходимость изоляции известного инфицированного субъекта из данных мест на по меньшей мере 24-72 часа после начала антимикробной терапии. В исследованиях с использованием контроля было показано, что раннее выявление и соответствующее лечение приводят в результате к снижению общего характера циклической передачи проблемного патогена, а также к снижению или устранению осложнений инфекций группы А (ревматоидной лихорадки или нефрита).

В Патенте США 5604109, выданном Fischetti и соавт., описана быстрая и чувствительная детекция антигенов стрептококков группы А посредством диагностического анализа с использованием лизинового

фермента, ассоциированного с фагом стрептококков группы С. Данный анализ может помочь в быстром выявлении инфицированных субъектов, которые затем могут получить принятую антибиотикотерапию.

Однако проблема эффективной борьбы со стрептококковыми инфекциями не перестает быть проблемой. Пациенты со стрептококковым фарингитом являются высокоинфекционными и способны переносить организм близко контактирующим субъектам, приводя к эпидемии стрептококкового фарингита. Это является определенной проблемой в школах и в армии, где люди находятся в тесной близости друг с другом. Более того, существует необходимость профилактических способов предупреждения стрептококковых инфекций, поскольку профилактически применять антибиотики в общем не советуют по многим причинам.

Сущность изобретения

Данное изобретение (которое включает Патент США 5604109 во всей его полноте в виде ссылки) представляет композиции, содержащие лизиновый фермент, ассоциированный с фагом стрептококков группы С, и носитель для доставки лизинового фермента, ассоциированного с фагом стрептококков группы С, в рот, горло или носовой проход животного, такого как человек. Данные композиции могут быть особенно эффективными либо для профилактического лечения для предупреждения инфекции после контакта с другими субъектами, которые являются инфицированными, либо для терапевтического лечения инфекций горла стрептококками группы А у тех субъектов, которые уже являются инфицированными, ослабляя таким образом инфекцию.

Присутствие лизина в полости рта или носа во время внедрения туда стрептококков от инфицированного субъекта приводит к уничтожению по меньшей мере некоторых из занесенных стрептококков и таким образом обеспечивает профилактический эффекта путем предупреждения инфекции. Данная быстрая и специфическая (летальная) активность лизинового фермента в отношении существующей стрептококковой инфекции будет иметь терапевтический эффект за счет снижения инфекции и содействия в уменьшении распространения стрептококков другим субъектам.

В одном варианте осуществления изобретения лизиновый фермент вводят в форме леденца, жевательной резинки, лепешки, пастилки, таблетки, порошка, аэрозоля, жидкости (например, раствора для полоскания) или жидкого спрея. В другом варианте изобретения лизиновый фермент вводят в форме спрея для носа.

Способ лечения воздействия Streptococcus группы А предусматривает нанесение эффективной дозы фармацевтически приемлемого количества лизинового фермента, ассоциированного с фагами стрептококков группы С, на слизистые рта или носа млекопитающего, нуждающегося в лечении, позволяя лизиновому ферменту оставаться в контакте со слизистой рта в течение периода времени, которое необходимо для того, чтобы лизиновый фермент насытил слизистые полости рта, и нанесение дополнительных доз данного лизинового фермента аналогичным образом до окончания лечения. Фермент может быть введен или нанесен на слизистую оболочку горла или носа при инфекции в зависимости от носителя, содержащего лизиновый фермент.

Хотя данная композиция подобным образом является эффективной в отношении инфекций стрептококков группы А, она может быть использована также против инфекций группы С. Подобным образом фермент является эффективным в отношении стрептококков группы Е.

Сведения, подтверждающие возможность осуществления изобретения

Было показано, что присутствие лизина в полости рта в то время, когда стрептококки занесены от инфицированного субъекта, приводит к уничтожению занесенных стрептококков, предупреждая таким образом инфекцию и обеспечивая профилактическое лечение с целью предупреждения стрептококковой инфекции. Данная быстрая и специфическая (летальная) активность лизинового фермента в отношении Streptococcus дает также терапевтический эффект у инфицированных субъектов путем снижения инфекции и уменьшения распространения стрептококков среди других субъектов.

Муралитический (лизиновый) фермент амидазу, образуемый организмами стрептококков группы С после инфицирования их определенным бактериофагом (идентифицированным как С1), выделяют и собирают, как описано в Патентной заявке США 5604109. Данный фермент стрептококков группы С (известный также как лизиновый фермент), который обладает уникальной специфичностью по отношению к клеточной стенке стрептококков групп А, С и Е, может быть альтернативно выделен и собран с помощью любых других известных средств.

Композиция, которая может быть использована для профилактического и терапевтического лечения стрептококковой инфекции, включает в себя лизиновый фермент и средства для нанесения (такие как система носителя или способ доставки в рот) на слизистое содержимое полости рта или носа.

Перед внесением фермента в систему носителя или средство для доставки в рот или во время внесения предпочтительно, чтобы фермент находился в среде стабилизирующего буфера для поддержания рН в интервале между приблизительно 4,0 и приблизительно 8,0, более предпочтительно между приблизительно 5,5 и приблизительно 7,5 и наиболее предпочтительно при приблизительно 6,1.

Стабилизирующий буфер должен обеспечивать оптимум активности лизинового фермента. Буфер может быть представлен восстанавливающим агентом, таким как дитиотреитол. Стабилизирующий буфер может быть также представлен или влючать в себя металл-хелатирующий агент, такой как динатриевую соль этилендиаминтетрауксусной кислоты, или может также содержать фосфатный или цитратно-фосфатный буфер.

Для предотвращения порчи стабилизирующий буфер может, кроме того, содержать бактерицидный или бактериостатический агент в качестве консерванта, такой как бензоат натрия, в небольшом количестве.

Средства применения включают без ограничения перечисленных прямое, опосредованное, носитель и специальные средства или любую комбинацию средств. Прямое нанесение лизинового фермента на носовые оболочки может осуществляться с помощью спреев для носа, капель для носа, мазей для носа, растворов для промывания носа, назальных инъекций, тампонов для носа или посредством использования мазей, которые наносят на ноздри носа, переносицу или лицо, или с помощью любой комбинации данных и подобных им способов нанесения, или с помощью других известных носителей для носа. Применение во рту и горле может быть осуществлено с использованием лепешек для горла или с использованием полосканий для рта, полосканий для горла, растворов, спреев, леденцов, жевательной резинки и т.п. Таким образом, формы, в которых может быть введен лизиновый фермент, включают без ограничения перечисленных лепешки, пастилки, леденцы, инъекционные формы, жевательные резинки, таблетки, порошки, спреи, жидкости, мази и аэрозоли.

Лепешка, таблетка или жевательная резинка, в которые добавлен лизиновый фермент, могут содержать сахар, кукурузный сироп, ряд красителей, отличные от сахара подсластители, вкусовые добавки и связующие компоненты или их комбинации. Аналогичным образом, любые продукты на основе жевательной резинки могут содержать акацию, карнаубский воск, лимонную кислоту, кукурузный крахмал, пищевые красители, вкусовые добавки, отличные от сахара подсластители, желатин, глюкозу, глицерин, основу жевательной резинки, шеллак, натриевый сахарин, сахар, воду, белый воск, целлюлозу, другие связующие компоненты и их комбинации.

Лепешки могут, кроме того, содержать сахарозу, кукурузный крахмал, акацию, камедь трагаканта, анетол, семя льна, живицу, минеральное масло и целлюлозу, другие связующие компоненты и их комбинации. В другом варианте осуществления изобретения используют заменители сахара вместо декстрозы, сахарозы или других сахаров.

Фермент может быть также внесен в спрей для носа, где спрей для носа является носителем. Спрей для носа может быть спреем с пролонгированным действием или с задержанным выходом и может быть изготовлен способами, хорошо известными в области техники.

Любой носитель для лизинового фермента может быть приготовлен с помощью обычных средств. Однако предпочтительно, чтобы любое полоскание для рта или продукты подобного типа не содержали спирт для предотвращения денатурации фермента. Аналогично, когда лизиновый фермент вносят в капли, жевательную резинку или лепешку от кашля в процессе изготовления, данное внесение должно проводиться до отверждения лепешки или леденца, но после охлаждения капель или леденца от кашля до определенной степени с целью избежания тепловой денатурации фермента.

Фермент может быть добавлен в данные субстанции в жидкой форме или в лиофилизированном состоянии, поскольку от будет солюбилизироваться при контакте с жидкостью. Фермент может также находиться, например, в мицелле, или липосоме, или какой-либо другой инкапсулированной форме или вводиться в виде пролекарственной формы или в форме с задержанным выходом, с целью обеспечения длительного хранения и/или эффекта доставки.

Эффективные уровни дозировки и количества лизинового фермента для лечения инфекции будут зависеть отчасти от того, будет ли лизин использован терапевтически или профилактически, продолжительности контакта реципиента со стрептококками и/или природы инфекции, размера и массы субъекта и т.п. Определение подходящих уровней дозировки будет находиться в компетенции практикующего специалиста. Продолжительность применения композиции, содержащей фермент, также зависит от того, является ли это применением с профилактическими целями, при котором применение может быть, например, ежедневным или еженедельным в течение определенного периода времени, например в течение недели, месяца или более длительного периода, или это будет применением с терапевтическими целями, при котором, вероятно, должен использоваться режим более интенсивного введения композиции в течение, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 10 или 14 дней или более длительно. Так, терапевтическое лечение могло бы продолжаться несколько дней или недель, применяемое на основе ежедневного введения и, возможно, при введении с множеством интервалов в течение дня.

Для того чтобы быть эффективным, фермент должен присутствовать в количестве, достаточном для обеспечения эффективного числа единиц фермента в контакте со ртом, горлом или носовым проходом. При наличии слишком маленького количества единиц фермента в контакте со ртом, горлом или носовым проходом даже в течение длительного периода времени нельзя получить такой благоприятный эффект, как желательно. Следовательно, используемая лекарственная форма должна обеспечивать приблизительно максимальное число единиц в период времени, в течение которого доза будет выделять фермент в рот, горло или носовой проход. Концентрация активных единиц фермента, которая, как считают, обеспечивает эффективное количество или дозу фермента, может находиться в интервале от приблизительно 100 единиц до приблизительно 100000 единиц в среде носового и орального проходов. Считают, что внутри данного расширенного интервала дозы от приблизительно 100 единиц до приблизительно 10000 единиц являются приемлемыми. Данные единицы могут содержаться в небольших объемах носителя, такого как жидкость или слюна, например 1 мл или меньше (например, в случае лепешки), или могут содержаться в объемах с большей дозировкой, таких как полоскание для рта, представленных несколькими мл. Вследствие этого в целом для больших объемов носителя будет требоваться большее общее число единиц для достижения эффективной концентрации активного фермента. Следовательно, приемлемые концентрации могут составлять от приблизительно 100 единиц/мл до приблизительно 100000 единиц/мл жидкости в среде носового и орального проходов. Внутри данного интервала концентрации от приблизительно 100 единиц/мл до приблизительно 10000 единиц/мл являются приемлемыми.

Вследствие этого на практике время воздействия единиц активного фермента, вероятно, будет влиять на желаемую концентрацию единиц активного фермента, используемую в дозе/мл. Например, носители, которые, как предполагают, обеспечивают пролонгированый выход (некоторые спреи для носа, лепешки и инкапсулированный фермент), могли бы создавать более низкие концентрации единиц активного фермента/мл, но в течение более длительного периода времени. Напротив, средство для лечения более короткой продолжительности действия (например, полоскание для горла) могло бы обеспечивать высокую концентрацию единиц активного фермента/мл. Любая лекарственная доза, обеспечивающая достаточно лизинового фермента для создания эффективных концентраций активного фермента в области инфекции или создания достаточного профилактического эффекта, хорошо согласуется с рутинными экспериментами и, вследствие этого, входит в объем данного изобретения.

Композиции, соответствующие данному изобретению, кроме того, могут содержать по меньшей мере один другой дополнительный агент, эффективный для применения либо при терапевтическом, либо при профилактическом лечении стрептококковых инфекций или для облегчения их симптомов. Агент может, кроме того, быть эффективным в плане дополнительного терапевтического и/или профилактического действия, например облегчения боли. Некоторые агенты могут быть активными при наружном или системном применении и могут включать антибиотики или болеутоляющие лекарственные средства, в том числе антисептики для наружного применения, например, при фарингите. Альтернативно данные агенты можно принимать перед лечением данными композициями или после него. Дозы антибиотиков должны быть эффективными для терапевтического или профилактического лечения стрептококковых инфекций или для лечения симптомов данных инфекций.

Хотя данное лечение можно использовать для любых видов животных или млекопитающих, предпочтительно применение данного продукта для человека.

Каждую дозу лизинсодержащего носителя поддерживают в контакте со слизистой рта столь долго, сколько это необходимо для получения предусмотренного терапевтического или профилактического эффекта. Введение лизинового фермента в слизистую оболочку рта может быть осуществлено с помощью любых средств, таких как полоскания для горла, полоскания для рта, лепешки, пастилки, жевательные резинки, леденцы, порошки и спреи для носа и рта, в течение такого длительного периода, который является безопасным и обеспечивает предусмотренный профилактический или терапевтический эффект. Компетентные специалисты могут оценить другие возможные способы и композиции для доставки лизинового фермента в соответствии с данным изобретением.

Пример 1

Лизиновый фермент фага группы С готовят следующим образом. Штамм стрептококка группы С 26RP66 (АТСС (Американская коллекция типовых культур) №21597) или любой другой штамм стрептококка группы С выращивают в среде Todd Hewitt при 37°С до достижения OD (оптической плотности) 0,23 при 650 нм в пробирке диаметром 18 мм. Бактериофаг группы С (С1) (АТСС №21597-В1) при титре 5×10⁶ добавляют в соотношении 1 часть фага на 4 части клеток. Смесь оставляют при 37°С на 18 мин, через данный период времени инфицированные клетки выливают на кубики льда для снижения температуры раствора до ниже 15°С. Затем инфицированные клетки собирают в центрифуге с холодильником и суспендируют в 1/300 исходного объема 0,1 М фосфатного буфера, рН 6,1, который содержит 5×10^-3 М дитиотреитола и 10 мкг ДНКазы. Клетки лизируются, высвобождая фаг и лизиновый фермент. После центрифугирования при 100000 х g в течение 5 ч для удаления большей части клеточного дебриса и фага раствор фермента делят на аликвоты и тестируют на способность лизировать стрептококки группы А.

Число единиц/мл в образце фермента определяют как обратное наибольшему разведению фермента, которое необходимо для снижения OD₆₅₀ суспензии стрептококков группы А с OD 0,3 до 0,15 в течение 15 мин. При типичном приготовлении фермента получают 4×10⁵-4×10⁶ единиц в одной 12-литровой загрузке.

При применении фермента требуется минимальное число единиц лизинового фермента/тест в зависимости от необходимых периодов времени инкубирования. Фермент разводят в стабилизирующем буфере, представляющем подходящие условия для стабильности и максимума ферментативной активности. Предпочтительным вариантом осуществления является применение лиофилизированного лизинового фермента. Стабилизирующий буфер может содержать восстанавливающий агент, который может быть представлен дитиотреитолом в концентрации от 0,001 М до 1,0 М, предпочтительно 0,005 М. Стабилизирующий буфер может содержать металл-хелатирующий реагент, который может быть представлен динатриевой солью этилендиаминтетрауксусной кислоты в концентрации от 0,00001 М до 1,0 М, предпочтительно 0,005 М. Стабилизирующий буфер может содержать цитратно-фосфатный буфер в концентрации от 0,001 М до 1,0 М, предпочтительно 0,05 М. Стабилизирующий буфер может иметь значение рН в интервале от приблизительно 4,0 до 8,0, предпочтительно 6,1.

Стабилизирующий буфер может содержать бактерицидный или бактериостатический реагент в качестве консерванта. Данный консервант может быть азидом натрия в концентрации от 0,001% до 0,1%, предпочтительно 0,02%.

Приготовление биомассы фага для получения лизина является такой же процедурой, как описана выше для инфекции фага и Streptococcus группы С при получении лизинового фермента. Однако вместо выливания инфицированных клеток на лед инкубирование при 37°С продолжают в общей сложности в течение 1 ч для обеспечения лизиса и выхода фага, а также фермента в общий объем. Для того чтобы использовать фаг для последующей продукции лизина, остаточный фермент должен быть инактивирован или удален, с целью предотвращения лизиса клеток группы С в большей мере, чем от инфекции фага.

Пример 2

Фермент, приготовленный в соответствии с Примером 1, разводят до концентрации 100 единиц/мл в буфере, состоящем из 0,05 М цитратно-фосфатного буфера с рН 6,1, который содержит 0,1% иммуноглобулина кролика, 0,005 М динатриевой соли (этилендинитрило)тетрауксусной кислоты (EDTA), 0,005 М дитиотреитола, 0,02% азида натрия, 0,01% N-ацетилглюкозамина. Одну часть золя коллоидного золота, меченного антителом против стрептококков группы А (OD52o 1.5), суспендированного в 0,02 М трис-буфере с рН 8,2, 1% бычьего сывороточного альбумина, 0,02% азида натрия, 300К единиц гепарина добавляют к трем частям реагента на основе фермента, перемешивают, фильтруют через фильтр 0,22 мк, делают аликвоты по 200 мкл/пробирку и лиофилизируют. Данный лиофилизированный фермент является стабильным при повышенных температурах (т.е. 45°С) в условиях ускоренного хранения (т.е. в течение 2 недель) и длительного хранения при комнатных температурах (>1 года).

Пример 3

Способ.

1. 500 мкл суточной культуры штамма стрептококка группы A S43/192/39R (устойчивого к стрептомицину) (из замороженного кровяного бульона) инокулируют 500 мл бульона Todd Hewitt (TH), содержащего 1% дрожжевого экстракта и 100 мкл стрептомицина/мл.

2. Выращивают до достижения OD₆₅₀ 0,59.

3. Центрифугируют в течение 15 мин при 3000 об/мин для осаждения бактерий.

4. Ресуспендируют организмы в объеме 1 мл TH w/o с антибиотиками (3×10 ⁵/100 мкл, как определяют при подсчете на чашках).

5. Добавляют 0,5 мл данных концентрированных клеток к 0,5 мл фосфатного буфера рН 6,1 в качестве контроля.

6. За пять минут до введения мышам 0,5 мл концентрированной суспензии клеток смешивают с 0,5 мл раствора фагового лизина, предварительно разведенного до концентрации 10000 единиц/мл в фосфатном буфере рН 6,1.

Пять мышей получают 60 мкл "контрольного" раствора, который вводят в равных долях перорально и интраназально.

Пять мышей получают 60 мкл лизина и смеси бактерий, который вводят в равных долях перорально и интраназально.

Мазки из горла помещают на чашки с агаризованными 5% овечьей кровью и протеозным пептоном, содержащими 500 мкг/мл стрептомицина. Чашки инкубируют в течение ночи при 37°С. Результаты представлны в Таблице 1.

Данные результаты показывают, что контакт фагового лизина со стрептококками группы А в течение такого короткого периода, как пять минут, препятствует колонизации стрептококками верхних дыхательных путей у мышей в системе данной модели.

Пример 4

Для воспроизведения того, что могло бы происходить, когда лизин присутствует в полости рта (т.е. при высвобождении из лепешки) до того, как стрептококки проникают в данную среду, животных, бактерии и лизин готовят таким же образом, как описано в Примере 3 (пункты 1-5), за исключением того, что в данном эксперименте животных лечат следующим образом.

Лизин: 5 мышей получают по 25 мкл лизина, и сразу после этого они получают по 50 мкл бактериальной суспензии.

Контроль: 5 мышей получают по 25 мкл буфера, и сразу после этого они получают по 50 мкл бактериальной суспензии.

Результат: при добавлении стрептококков колонизация происходит у 0/5 животных, содержащих лизин в полости рта, тогда как колонизация происходит у 3/5 животных, которые получают буфер, а затем стрептококки.

Таким образом, лизин, если он присутствует перед введением стрептококков группы А, способен предотвращать колонизацию.

Пример 5

Стрептококки типа 6 группы А М выращивают при 37°С в течение ночи в среде Todd Hewitt. Организмы однократно промывают в стерильном буфере для лизина (50 мл фосфатного буфера с рН 6,1). Осадок клеток затем суспендируют в 5 мл того же буфера.

Фаговый лизин разводят в буфере для лизина, содержащем 5 мМ DTT, до концентрации 2х, соответствующее количество единиц и смесь фильтруют в стерильных условиях.

1,0 мл бактериальной суспензии добавляют к 1,0 мл соответствующего разведения лизина и инкубируют смесь при 37°С. Образцы отбирают через определенные интервалы времени, разводят соответствующим образом и помещают на чашки с кровяным агаром для определения числа бактерий.

Контрольные образцы, состоящие из 1,0 мл суспензии бактерий, добавляют к 1,0 мл чистого буфера для лизина. Отбирают аликвоту и делают 10-кратные разведения и помещают аликвоту на чашки с кровяным агаром для определения числа бактерий.

В свете представленного выше описания являются возможными многие модификации и варианты данного изобретения. Поэтому следует понимать, что объем изобретения может включать и другие варианты выполнения, кроме приведенных в данном описании в качестве примера.

Формула изобретения

1. Композиция, предназначенная для использования в терапевтическом или профилактическом лечении инфекции, вызванной стрептококком группы А, отличающаяся тем, что она содержит эффективное количество лизинового фермента, специфичного в отношении клеточной стенки стрептококков группы А, С и Е, обладающего способностью к ее разрушению и полученного посредством инфицирования стрептококка группы С бактериофагом С1, генетически кодирующим указанный лизиновый фермент, а также средство доставки указанного лизинового фермента в рот, горло или носовой проход.

2. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что средство доставки лизинового фермента выбрано из группы, состоящей из леденца, жевательной резинки, лепешки, пастилки, таблетки, порошка, аэрозоля, жидкости, жидкого спрея, спрея для носа и мази для носа.

3. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что она дополнительно содержит буфер для поддержания рН композиции между приблизительно 4,0 и приблизительно 9,0.

4. Композиция по п.3, отличающаяся тем, что указанный буфер поддерживает рН композиции между приблизительно 5,5 и приблизительно 7,5.

5. Композиция по п.3, отличающаяся тем, что указанный буфер содержит восстанавливающий агент.

6. Композиция по п.5, отличающаяся тем, что указанный восстанавливающий агент представлен дитиотреитолом.

7. Композиция по п.3, отличающаяся тем, что указанный буфер содержит металлхелатирующий агент.

8. Композиция по п.7, отличающаяся тем, что указанный металл-хелатирующий агент представлен динатриевой солью этилендиаминтетрауксусной кислоты.

9. Композиция по п.3, отличающаяся тем, что указанный буфер представлен цитратно-фосфатным буфером.

10. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что она дополнительно содержит бактерицидный или бактериостатический агент в качестве консерванта.

11. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что указанный лизиновый фермент является лиофилизированным.

12. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что средство доставки лизинового фермента дополнительно содержит подсластитель.

13. Композиция по п.12, отличающаяся тем, что средство доставки лизинового фермента обеспечивает концентрацию от приблизительно 100 до приблизительно 100000 единиц активного фермента/мл жидкости в среде носового или орального прохода.

14. Композиция по п.13, отличающаяся тем, что указанная концентрация составляет от приблизительно 100 до приблизительно 100 единиц активного фермента/мл жидкости в среде носового или орального прохода.

15. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что она предназначена для использования в терапевтическом лечении стрептококковых инфекций.

16. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что она предназначена для использования в профилактическом лечении стрептококковых инфекций.

17. Композиция по п.15, отличающаяся тем, что указанная стрептококковая инфекция представляет собой стрептококковую инфекцию горла.

18. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что средство доставки лизинового фермента представлено леденцом.

19. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что средство доставки лизинового фермента представлено жевательной резинкой.

20. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что средство доставки лизинового фермента представлено лепешкой.

21. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что средство доставки лизинового фермента представлено пастилкой.

22. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что средство доставки лизинового фермента представлено порошком.

23. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что средство доставки лизинового фермента представлено аэрозолем.

24. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что средство доставки лизинового фермента представлено жидким спреем.

25. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что средство доставки лизинового фермента представлено спреем для носа.

26. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что она предназначена для использования в терапевтическом или профилактическом лечении млекопитающего, представленного человеком.

27. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что средство доставки лизинового фермента является пригодным для доставки указанного лизинового фермента в рот или горло.

28. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что средство доставки лизинового фермента является пригодным для доставки указанного лизинового фермента в носовой проход.

29. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что она дополнительно содержит по меньшей мере один агент, эффективный для терапевтического или профилактического лечения стрептококковых инфекций или облегчения их симптомов.

30. Способ терапевтического или профилактического лечения стрептококковых инфекций, отличающийся тем, что вводят композицию по любому из пп.1-29 нуждающемуся в этом млекопитающему.

31. Применение лизинового фермента, полученного из клеток стрептококка группы С путем обработки бактериофагом (штамм АТСС № 21597-В1), в качестве противострептококкового агента.

32. Способ терапевтического или профилактического лечения инфекций, вызванных стрептококком группы А, отличающийся тем, что вводят нуждающемуся в этом млекопитающему композицию, содержащую эффективное количество лизинового фермента, специфичного в отношении клеточной стенки стрептококков группы А, С и Е, обладающего способностью к ее разрушению и полученного посредством инфицирования стрептококка группы С бактериофагом С1, генетически кодирующим указанный лизиновый фермент, а также средство доставки указанного лизинового фермента в рот, горло или носовой проход.

33. Композиция, предназначенная для терапевтического или профилактического лечения инфекции, вызванной стрептококком группы А, отличающаяся тем, что она содержит эффективное количество лизинового фермента, специфичного в отношении клеточной стенки стрептококков групп А, С и Е, обладающего способностью к ее разрушению и полученного посредством инфицирования стрептококка группы С бактериофагом С1, генетически кодирующим указанный лизиновый фермент, а также средство доставки указанного лизинового фермента в рот, горло или носовой проход, выбранное из группы, состоящей из леденца, жевательной резинки, лепешки, пастилки, таблетки, порошка, аэрозоля, жидкости, жидкого спрея, спрея для носа и мази для носа.

34. Композиция по п.33, отличающаяся тем, что средство доставки лизинового фермента представлено леденцом.

35. Композиция по п.33, отличающаяся тем, что средство доставки лизинового фермента представлено жевательной резинкой.

36. Композиция по п.33, отличающаяся тем, что средство доставки лизинового фермента представлено лепешкой.

37. Композиция по п.33, отличающаяся тем, что средство доставки лизинового фермента представлено пастилкой.

38. Композиция по п.33, отличающаяся тем, что средство доставки лизинового фермента представлено порошком.

39. Композиция по п.33, отличающаяся тем, что средство доставки лизинового фермента представлено аэрозолем.

40. Композиция по п.33, отличающаяся тем, что средство доставки лизинового фермента представлено жидким спреем.

41. Композиция по п.33, отличающаяся тем, что средство доставки лизинового фермента представлено спреем для носа.

42. Композиция, предназначенная для использования в терапевтическом или профилактическом лечении инфекции, вызванной стрептококком группы А, отличающаяся тем, что она содержит эффективное количество лизинового фермента, генетически кодируемого бактериофагом, а также средство доставки указанного лизинового фермента в рот, горло или носовой проход, причем указанный лизиновый фермент является специфичным в отношении клеточной стенки стрептококков групп А, С и Е и обладает способностью к ее разрушению.

43. Композиция по п.42, отличающаяся тем, что она дополнительно содержит буфер для поддержания рН композиции между приблизительно 4,0 и приблизительно 9,0.

44. Композиция по п.43, отличающаяся тем, что указанный буфер содержит восстанавливающий агент, в частности дитиотреитол.

45. Композиция по п.43, отличающаяся тем, что указанный буфер содержит металлхелатирующий агент, в частности динатриевую соль этилендиаминтетрауксусной кислоты.

46. Композиция по п.43, отличающаяся тем, что указанный буфер представлен цитратно-фосфатным буфером.

47. Способ терапевтического или профилактического лечения инфекций, вызванных стрептококком группы А, отличающийся тем, что вводят нуждающемуся в этом млекопитающему композицию, содержащую эффективное количество лизинового фермента, генетически кодируемого бактериофагом, а также средство доставки указанного лизинового фермента в рот, горло или носовой проход, причем указанный лизиновый фермент является специфичным в отношении клеточной стенки стрептококков групп А, С и Е и обладает способностью к ее разрушению.

48. Композиция, предназначенная для терапевтического или профилактического лечения инфекции, вызванной стрептококком группы А, отличающаяся тем, что она содержит эффективное количество лизинового фермента, генетически кодируемого бактериофагом, а также средство доставки указанного лизинового фермента в рот, горло или носовой проход, выбранное из группы, состоящей из леденца, жевательной резинки, лепешки, пастилки, таблетки, порошка, аэрозоля, жидкости, жидкого спрея, спрея для носа и мази для носа, причем указанный лизиновый фермент является специфичным в отношении клеточной стенки стрептококков групп А, С и Е и обладает способностью к ее разрушению.

49. Композиция по п.48, отличающаяся тем, что она дополнительно содержит буфер для поддержания рН композиции между приблизительно 4,0 и приблизительно 9,0.

50. Композиция по п.49, отличающаяся тем, что указанный буфер содержит восстанавливающий агент, в частности дитиотреитол.

51. Композиция по п.49, отличающаяся тем, что указанный буфер содержит металлхелатирующий агент, в частности динатриевую соль этилендиаминтетрауксусной кислоты.

52. Композиция по п.49, отличающаяся тем, что указанный буфер представлен цитратно-фосфатным буфером.

53. Композиция, предназначенная для терапевтического или профилактического лечения инфекций, вызванных стрептококком группы А, отличающаяся тем, что она содержит эффективное количество лизинового фермента, генетически кодируемого бактериофагом, а также средство доставки, выбранное из группы, состоящей из леденца, жевательной резинки, лепешки, пастилки, таблетки и порошка, причем указанный лизиновый фермент является специфичным в отношении клеточной стенки стрептококков групп А, С и Е и обладает способностью к ее разрушению.

54. Композиция по п.53, отличающаяся тем, что она дополнительно содержит буфер для поддержания рН композиции в интервале между приблизительно 4,0 и приблизительно 9,0.

55. Композиция по п.54, отличающаяся тем, что указанный буфер содержит восстанавливающий агент, в частности дитиотреитол.

56. Композиция по п.54, отличающаяся тем, что указанный буфер содержит металл-хелатирующий агент, в частности динатриевую соль этилендиаминтетрауксусной кислоты.

57. Композиция по п.54, отличающаяся тем, что указанный буфер представлен цитратно-фосфатным буфером.

TK4A - Поправки к публикациям сведений об изобретениях в бюллетенях "Изобретения (заявки и патенты)" и "Изобретения. Полезные модели"

Страница: 305

Напечатано: 14. …до приблизительно 100 единиц…

Следует читать: 14. …до приблизительно 10 000 единиц…

Номер и год публикации бюллетеня: 31-2004

Код раздела: FG4A

Извещение опубликовано: 20.02.2005        БИ: 05/2005

TZ4A - Поправки к описаниям изобретений

Часть описания, где обнаружена ошибка: Текст опис.,Кол.11, стр. 46

Напечатано: стрептококков A(OD52o 1.5),

Следует читать: стрептококков A(OD₅₂₀ 1.5),

Номер и год публикации бюллетеня: 31-2004

Извещение опубликовано: 20.02.2005        БИ: 05/2005