Средство, обладающее противовоспалительным и анальгетическим действием
Владельцы патента RU 2260441:
Поветьева Татьяна Николаевна (RU)
Погодаева Наталья Николаевна (RU)
Пушкарский Сергей Витальевич (RU)
Пашинский Виталий Глебович (RU)
Горбачева Анастасия Викторовна (RU)
Научно-исследовательский институт фармакологии Томского научного центра Сибирского отделения Российской академии медицинских наук (НИИ фармакологии ТНЦ РАМН) (RU)
Климентова Дарья Александровна (RU)
Семенов Аркадий Алексеевич (RU)
Зеленская Кристина Леонидовна (RU)
Нестерова Юлия Владимировна (RU)
Гайдамович Наталья Николаевна (RU)
Аксиненко Светлана Геннадьевна (RU)
Жданов Владимир Николаевич (RU)
Изобретение относится к области создания средства, обладающего противовоспалительным и анальгетическим действием, и может быть использовано в качестве анальгезирующего и противовоспалительного средства в терапии воспалительных заболеваний. Средство, обладающее анальгетическим и противовоспалительным действием, содержит спиртовую жидкую вытяжку из травы или корней аконита северного 40% этиловым спиртом при соотношении растительного сырья и экстрагента - 1:10. Средство обладает широким спектром фармакологического действия и не токсично. 7 табл.
Изобретение относится к области медицины, конкретно к фармакологии, и касается анальгетических и противовоспалительных средств и может быть использовано в качестве анальгезирующего и противовоспалительного средства в терапии воспалительных заболеваний.
Известны синтетические препараты, оказывающие анальгетический и противовоспалительный эффект [1]. Вместе с тем данные средства токсичны в силу синтетического происхождения, и использование их для фармакологической коррекции воспалительного процесса или в качестве анальгетиков ограничено из-за плохой переносимости, возникновения различных осложнений.
Наиболее близким по положительному эффекту (базовым) является индометацин. Этот препарат обладает противовоспалительным и обезболивающим действием, но он является синтетическим препаратом и обладает рядом побочных эффектов [1].
Наиболее близким противовоспалительным средством по природе происхождения является: 10% настойка лабазника вязолистного [2], а обезболивающим средством - 10% настойка корней девясила высокого [3]. Однако не известно растительное средство, обладающее одновременно противовоспалительным и обезболивающим действием для приема внутрь. Создание нового эффективного средства, обладающего одновременно двумя свойствами, малотоксичного и не имеющего побочных эффектов, является актуальной задачей.
Задачей предлагаемого изобретения является расширение арсенала растительных нетоксичных, лишенных побочных эффектов средств, обладающих одновременно противовоспалительным и анальгетическим эффектом для приема внутрь.
Поставленная задача достигается тем, что противовоспалительное и анальгетическое средство содержит спиртовую вытяжку из высушенной и измельченной травы или корней аконита северного (Aconitum septentrionale L.) при следующем соотношении компонентов, %: трава или корень аконита северного - 10, спирт этиловый 40%-ный - 90.
Впервые показано, что спиртовая вытяжка из травы или корней аконита северного в предлагаемом соотношении оказывает эффект при различных видах воспаления и в качестве анальгетика. Авторы не нашли в проанализированной ими литературе сведений о противовоспалительном и анальгетическом действии спиртовой вытяжки из травы и корней аконита северного. Экспериментально установлены новые свойства и возможность использования спиртовой вытяжки из высушенной измельченной травы или высушенных измельченных корней аконита северного в качестве анальгезирующего и противовоспалительного средства в медицине. Таким образом, предлагаемое решение соответствует критериям изобретения \новизна\, \изобретательский уровень\, \промышленно применимо\.
Предлагаемое противовоспалительное и анальгетическое средство получают следующим образом: траву, собранную в июле, или корень, собранный в сентябре-октябре, аконита северного высушивают, измельчают до 3 мм. Взвешенное количество измельченных сухой травы или корня помещают в стеклянный, фарфоровый или эмалированный сосуд и заливают 40%-ным этиловым спиртом при следующем соотношении компонентов: травы или корня аконита северного - 10%, спирт этиловый 40%-ный - 90%), настаивают в темном прохладном месте в течение 10 дней. Затем спиртовую вытяжку из высушенной измельченной травы или корней аконита северного (настойку) процеживают, растительный остаток хорошо отжимают, 40%-ным этиловым спиртом доводят извлечение до первоначального объема, отстаивают в прохладном месте 3-е суток и затем фильтруют через обеззоленный фильтр. Хранят спиртовую вытяжку из высушенной измельченной травы или корней аконита северного (настойку) в темном прохладном месте.
Конкретные примеры выполнения способа.
Пример 1: Собранную в июле траву аконита северного высушивают, измельчают до 3 мм, 10 г измельченной травы аконита северного заливают 100 миллилитрами 40%-ного этилового спирта и настаивают в темном месте в течение 10 дней. Затем спиртовую вытяжку из высушенной измельченной травы аконита северного (настойку) процеживают, растительный остаток хорошо отжимают, 40%-ным этиловым спиртом доводят извлечение до первоначального объема (100 мл), отстаивают в прохладном месте в течение 3-х суток, затем фильтруют через обеззоленный фильтр. Хранят спиртовую вытяжку из высушенной травы аконита северного (настойку) в темном прохладном месте.
Пример 2: Собранные в сентябре корни аконита северного высушивают, измельчают до 3 мм, 10 г измельченных корней аконита северного заливают 100 миллилитрами 40%-ного этилового спирта и настаивают в темном месте в течение 10 дней. Затем спиртовую вытяжку из высушенных измельченных корней аконита северного (настойку) процеживают, растительный остаток хорошо отжимают, 40%-ным этиловым спиртом доводят извлечение до первоначального объема (100 мл), отстаивают в прохладном месте в течение 3-х суток, затем фильтруют через обеззоленный фильтр. Хранят спиртовую вытяжку из высушенных корней аконита северного (настойку) в темном прохладном месте.
Противовоспалительное и анальгетическое действие при различных видах воспаления спиртовой вытяжки из высушенной и измельченной травы или корней аконита северного при соотношении компонентов в %: трава или корень аконита северного - 10, спирт этиловый 40%-ный - 90, было найдено благодаря экспериментальным исследованиям. Для подтверждения данных свойств проведен ряд исследований: модель острого асептического воспаления [4], модель хронического пролиферативного воспаления, модель хронического иммунного воспаления, модель острого перитонита [5], модель заживления кожного повреждения [6].
Анальгетическое действие было подтверждено с помощью метода \горячей пластины\ и определения числа вокализаций. Экспериментальные животные были распределены на три группы: контрольная, сравнения, опытная. В группах сравнения в качестве препаратов сравнения использовали индометацин (6,0 мг/кг), базовый препарат, обладающий высоким положительным эффектом [1, 7]. В контрольной группе животные получали эквивалентный объем растворителя. В опытных группах животные получали предлагаемое средство из высушенных измельченной травы или корней аконита северного в разных концентрациях. Исследование противовоспалительной активности проводили в эксперименте на беспородных мышах массой 18-20 г и крысах линии Wistar массой 200-250 г. Животных содержали на обычном пищевом рационе в условиях вивария. Эвтаназию производили, соблюдая \Правила проведения работ с использованием экспериментальных животных\, утвержденных Министерством здравоохранения России.
Полученные результаты обрабатывали статистически, методами параметрической и непараметрической статистики. Различия считались достоверно значимыми при Рu<0,05 и Pt<0,05 для количественных характеристик (критерий Вилкоксона-Манна-Уитни и критерий Стьюдента соответственно); при Рϕ<0,05 - для качественных (метод углового преобразования Фишера) [8].
В экспериментальных исследованиях для изучения противовоспалительных свойств предлагаемого средства была использована модель острого воспалительного отека, вызванного каррагенином, которая широко используется при исследовании данной активности и позволяет объективно оценить противоэкссудативное действие препаратов и предсказать их клиническую эффективность [5, 7].
Опытным животным вводили средство, содержащее спиртовую вытяжку из высушенной измельченной травы или высушенных измельченных корней аконита северного при соотношении компонентов в %: трава или корень аконита северного - 10, спирт этиловый 40%-ный - 90, в дозе 0,5 мл/кг. Контрольные животные получали растворитель в эквивалентном объеме.
Пример конкретного выполнения эксперимента №1. В ходе выполнения эксперимента предлагаемое средство, содержащее спиртовую вытяжку из высушенной измельченной травы или высушенных измельченных корней аконита северного при соотношении компонентов, %: трава или корень аконита северного - 10, спирт этиловый 40%-ный - 90, в дозе 0,5 мл/кг вводили опытным животным и растворитель (в эквивалентном объеме) животным контрольной группы через зонд в желудок по схеме за 1 час до введения в лапу мыши каррагенина, одновременно с введением в лапу мыши каррагенина и через 1 час после введения в лапу мыши каррагенина. Острое асептическое воспаление вызывали введением под плантарный апоневроз левой задней лапки мыши 0,05 мл 1% раствора каррагенина на изотоническом растворе NaCl. Через 3,5 часа животных забивали, отрезали обе задние лапки по коленный сустав, взвешивали. О противовоспалительной активности эффективности препаратов судили по проценту снижения отека [4]. Непосредственно перед умерщвлением животных помещали на горячую пластину 64°С, анальгетический эффект оценивали по длительности спокойного пребывания на ней животных (до начала облизывания воспаленной и интактной конечности).
В результате проведенного исследования было показано, что средства, содержащие спиртовую вытяжку из высушенной измельченной травы или высушенных измельченных корней аконита северного при соотношении компонентов в %: трава или корень аконита северного - 10, спирт этиловый 40%-ный - 90, при всех схемах введения значительно ослабляют флогогенное действие каррагенина (табл.1). Так, введение средства, содержащее спиртовую вытяжку из высушенной измельченной травы аконита северного при соотношении компонентов в %: трава или корень аконита северного - 10, спирт этиловый 40%-ный - 90, в дозе 0,5 мл/кг при всех схемах введения привело к достоверному торможению отека более чем на 24,8, 30,5 и 39,7% соответственно по сравнению с мышами в контрольном опыте. Назначение растительного средства, содержащего спиртовую вытяжку из высушенных измельченных корней аконита северного при соотношении компонентов, в %: трава или корень аконита северного - 10, спирт этиловый 40%-ный - 90, в дозе 0,5 мл/кг при введении одновременно с каррагенином и через 1 час после введения каррагенина достоверно угнетало отек лапы на 36,6 и 37,0% соответственно по сравнению с мышами контрольной группы (табл.1). Анальгетический эффект был выражен при всех схемах введения предлагаемого нами средства, содержащего спиртовую вытяжку из высушенной измельченной травы или высушенных измельченных корней аконита северного при соотношении компонентов в %: трава или корень аконита северного - 10, спирт этиловый 40%-ный - 90, в указанной дозе (табл.1). Так, введение растительного средства, содержащего спиртовую вытяжку из высушенной и измельченной травы аконита северного при соотношении компонентов в %: трава аконита северного - 10, спирт этиловый 40%-ный - 90, за 1 час до введения каррагенина достоверно увеличивало время пребывания воспаленной конечности на горячей пластине на 89%. Введение растительного средства, содержащего спиртовую вытяжку из высушенных и измельченных корней аконита северного при соотношении компонентов в %: трава или корень аконита северного - 10, спирт этиловый 40%-ный - 90, достоверно увеличивало время пребывания воспаленной конечности на горячей пластине при введении одновременно с каррагенином и за 1 час до введения каррагеннна на 112 и 109% соответственно, а здоровой лапы при введении препарата за 1 час доведения каррагенина и через 1 час после введения каррагенина на 84 и 99% соответственно.
Сравнительная оценка антиэкссудативного действия растительных средств показала, что растительное средство, содержащее спиртовую вытяжку из высушенной и измельченной травы аконита северного при соотношении компонентов в %: трава или корень аконита северного - 10, спирт этиловый 40%-ный - 90, проявляло противовоспалительную активность, сопоставимую с действием индометацина (препарата сравнения) и в 1,1 раза превосходила по активности настойку стеблей и листьев лабазника вязолистного (прототип). Растительное средство, содержащее спиртовую вытяжку из высушенных и измельченных корней аконита северного при соотношении компонентов, в %: трава или корень аконита северного - 10, спирт этиловый 40%-ный - 90, действовало на уровне прототипа - растительного средства из лабазника вязолистного (табл.2).
Действие средства, содержащее спиртовую вытяжку из высушенной измельченной травы или высушенных измельченных корней аконита северного при соотношении компонентов в %: трава или корень аконита северного - 10, спирт этиловый 40%-ный - 90, на течение пролиферативной (хронической) фазы воспаления нами было подтверждено на модели \фетровой гранулемы\ [5]. В качестве препарата сравнения в данном эксперименте был взят индометацин.
Конкретный пример выполнения эксперимента 2. Четыре простерилизованных фетровых тампона (каждый массой 10 мг) имплантировали с помощью иглы для взятия крови крысам под кожу живота в четырех разных направлениях. Средство, содержащее спиртовую вытяжку из высушенной измельченной травы или высушенных измельченных корней аконита северного при соотношении компонентов, в %: трава или корень аконита северного - 10, спирт этиловый 40%-ный - 90, в дозе 0,2 мл/кг, индометацин в дозе 6,0 мг/кг (препарат сравнения) вводили внутрижелудочно ежедневно (со дня имплантации) в течение 7 дней. Контрольная группа животных каждый день получала эквивалентный объем растворителя. На 8-е сутки животных забивали, фетровые тампоны с образовавшейся вокруг них грануляционной тканью извлекали, взвешивали и высушивали до постоянной массы при 60°С и затем снова взвешивали в высушенном виде. Пролиферативную реакцию оценивали по разнице между массой высушенной гранулемы и исходной массой фетровых тампонов. Экссудативную реакцию оценивали по разнице между массой сырой и высушенной гранулемы. Экспериментальные данные показали, что наряду с противоэкссудативным влиянием средство, содержащее спиртовую вытяжку из высушенной и измельченной травы аконита северного и корней аконита при соотношении компонентов в %: трава или корень аконита северного - 10, спирт этиловый 40%-ный - 90, в дозе 0,2 мл/кг оказывает действие на пролиферативную фазу воспаления, замедляя развитие гранулемы (табл.3).
Так, назначение крысам растительного средства, содержащего спиртовую вытяжку из высушенной измельченной травы аконита северного, в дозе 0,2 мл/кг приводило к достоверному снижению воспалительного разрастания на 19,8%, по сравнению с контролем. Введение средства, содержащего спиртовую вытяжку из высушенных измельченных корней аконита северного при соотношении компонентов в %: трава или корень аконита северного - 10, спирт этиловый 40%-ный - 90, в этой же дозе угнетало образование грануляционной ткани у животных только на 13,4% по сравнению с животными контрольной группы. Индометацин также уменьшал изучаемый показатель на 12,6%. Однако он не имел достоверного отличия от контрольной группы крыс (табл.3). Наблюдается достоверное снижение массы экссудата гранулем в группе животных, получавших как предлагаемое средство в дозе 0,2 мл/кг, так и индометацин по сравнению с контролем (табл.3).
Для изучения действия средства, содержащего спиртовую вытяжку из высушенной измельченной травы или высушенных измельченных корней аконита северного при соотношении компонентов в %: трава или корень аконита северного - 10, спирт этиловый 40%-ный - 90, на течение иммунного воспаления был выполнен адъювантный артрит. Хроническое иммунное воспаление моделировали у крыс субплантарным введением в левую заднюю лапу 0,1 мл адъюванта Фрейнда (взвесь БЦЖ 2,5 мг/мл в вазелиновом масле). Воспалительную реакцию оценивали в динамике онкометрически. Первичную реакцию по состоянию отека на левой лапе. Вторичную иммунологическую реакцию (отек на правой лапе) оценивали на 14-й день после введения адъюванта.
Конкретный пример выполнения эксперимента №3. Средство, содержащее спиртовую вытяжку из высушенной измельченной травы или высушенных измельченных корней аконита северного при соотношении компонентов в %: трава или корень аконита северного - 10, спирт этиловый 40%-ный - 90, вводили ежедневно в течение 14 дней, начиная введение за 1 день до инъекции адъюванта. Крысам субплантарно вводили в левую заднюю лапу 0,1 мл адъюванта Фрейнда (взвесь БЦЖ 2,5 мг/мл в вазелиновом масле). Воспалительную реакцию оценивали в динамике. Первичную реакцию (отек на левой лапе) оценивали онкометрически через 3 часа, одни сутки и на восьмые сутки после инъекции адъюванта. Болевую реакцию оценивали по числу вокализаций при пассивном пятикратном сгибании пораженного артритом голеностопного сустава у контрольных и подопытных крыс. О выраженности болевой реакции судили по индексу вокализации [9]. В качестве препарата сравнения использовали индометацин в дозе 6,0 мкг/кг, вводили перорально. Контрольные животные получали растворитель в эквивалентном объеме.
Экспериментальные данные показали, что наряду с противовоспалительным эффектом выявлено анальгетическое действие средства, содержащего спиртовую вытяжку из травы или корней аконита северного при соотношении компонентов в %: трава или корень аконита северного - 10, спирт этиловый 40%-ный - 90, в дозе 0,2 мл/кг (табл.4, 5).
В результате проведенного исследования было показано, что средство, содержащее спиртовую вытяжку из высушенной измельченной травы аконита северного при соотношении компонентов, в %: трава или корень аконита северного - 10, спирт этиловый 40%-ный - 90, ослабляет флогогенное действие адъюванта (табл.4). Так, введение средства, содержащего спиртовую вытяжку из высушенной измельченной травы аконита северного при соотношении компонентов в %: трава или корень аконита северного - 10, спирт этиловый 40%-ный - 90, в дозе 0,2 мл/кг на восьмые сутки приводило к достоверному торможению отека воспаленной конечности на 44,4% по сравнению с крысами контрольной группы. Индометацин снижал развитие отека лишь на 20,9%, однако он не имел достоверного отличия от контрольной группы крыс. Торможение вторичной иммунологической реакции на 14 сутки наблюдалось при назначении средства из высушенной измельченной травы аконита северного в дозе 0,2 мл/кг, угнетение отека здоровой конечности достоверно снижалось на 51,8% по сравнению с контролем (табл.4).
Анальгетический эффект был достоверно выражен при введении средства, содержащего спиртовую вытяжку из высушенной измельченной травы или высушенных измельченных корней аконита северного при соотношении компонентов в %: трава или корень аконита северного - 10, спирт этиловый 40%-ный - 90, в дозе 0,2 мл/кг (табл.4). Так, введение растительного средства, содержащего спиртовую вытяжку из высушенной измельченной травы аконита северного при соотношении компонентов в %: трава или корень аконита северного - 10, спирт этиловый 40%-ный - 90, в указанной дозе достоверно уменьшал индекс вокализации на 4, 8 и 11 сутки на 75, 82 и 87% соответственно. Введение растительного средства, содержащего спиртовую вытяжку из высушенных измельченных корней аконита северного при соотношении компонентов в %: трава или корень аконита северного - 10, спирт этиловый 40%-ный - 90, в этой же дозе достоверно уменьшало индекс вокализации на 4 и 11 сутки на 66 и 81% соответственно. Введение индометацина также достоверно уменьшало индекс вокализации на 4, 11 и 14 сутки на 84, 100 и 100% соответственно. Введение растительного средства, содержащего спиртовую вытяжку из высушенной измельченной травы аконита северного при соотношении компонентов в %: трава или корень аконита северного - 10, спирт этиловый 40%-ный - 90, в дозе 0,2 мл/кг достоверно увеличивало время пребывания воспаленной конечности на горячей пластине на 59,7%.
Анальгетическая активность исследована и на модели репаративной регенерации: заживлении кожного повреждения. Под легким эфирным наркозом вырезали лоскут кожи размером 10×10 мм. Для моделирования более длительного заживления струп с экспериментальной раны регулярно снимали.
Конкретный пример выполнения эксперимента №4. Под легким эфирным наркозом вырезали лоскут кожи размером 10×10 мм на депиллированном участке кожи спины у мышей. Регулярно (через сутки) струп с раны снимали, при этом оценивали частоту вокализаций (по писку мышей при снятии струпа). Предлагаемые средства, содержащие спиртовую вытяжку из высушенной измельченной травы или корней аконита северного при соотношении компонентов, в %: трава или корень аконита северного - 10, спирт этиловый 40%-ный - 90, вводили ежедневно в течение всего опыта.
В результате проведенного исследования было показано, что предлагаемые нами средства, содержащие спиртовую вытяжку из высушенной измельченной травы или высушенных измельченных корней аконита северного при соотношении компонентов в %: трава или корень аконита северного - 10, спирт этиловый 40%-ный - 90, в дозах 0,2 и 0,1 мл/кг оказывают выраженный анальгетический эффект. Так, введение предлагаемого нами средства, содержащего спиртовую вытяжку из высушенной измельченной травы аконита северного при соотношении компонентов в %: трава или корень аконита северного - 10, спирт этиловый 40%-ный - 90, в дозе 0,2 и 0,1 мл/кг на 3 сутки достоверно уменьшали частоту вокализаций на 100 и 50% соответственно несмотря на то, что диаметр раны в опытных группах и контрольной не отличался. Назначение средства, содержащего спиртовую вытяжку из высушенных измельченных корней аконита северного при соотношении компонентов в %: трава или корень аконита северного - 10, спирт этиловый 40%-ный - 90, в дозе 0,2 и 0,1 мл/кг также уменьшало число вокализаций на 100 и 60% соответственно, при этом в дозе 0,2 мл/кг достоверно снижался и диаметр раны на 12% (табл.6).
Химическое болевое раздражение индуцировали уксусной кислотой. В опытах на мышах специфическую болевую реакцию - \корчи\ (характерные движения животных, включающие сокращения брюшных мышц, чередующиеся с их расслаблением, вытягиванием задних конечностей и прогибанием спины) - вызывали внутрибрюшинным введением 0,75% уксусной кислоты (0,1 мл/10 г массы тела) [5].
Конкретный пример выполнения эксперимента №5. Исследуемые средства вводили в течение 5 дней, последний раз - за час до введения альгогена. Вводили внутрибрюшинно 0,75% уксусной кислоты (0,1 мл/10 г массы тела). В течение последующих 15 мин после инъекции подсчитывали количество корчей для каждого животного. Анальгетический эффект оценивали по уменьшению количества корчей. Животных забивали и измеряли объем асцитной жидкости. Противовоспалительный эффект оценивали по уменьшению объема асцитной жидкости. В качестве препарата сравнения использовали индометацин в дозе 6,0 мг/кг. Контрольные животные получали растворитель в эквивалентном объеме.
Экспериментальные данные показали, что предлагаемые нами средства, содержащие спиртовую вытяжку из травы аконита или корней аконита северного при соотношении компонентов в %: трава или корень аконита северного - 10, спирт этиловый 40%-ный - 90, в дозе 0,5 мл/кг оказывают умеренное противовоспалительное и анальгетическое действие. Так, назначение животным предлагаемого нами растительного средства, содержащего спиртовую вытяжку из высушенной измельченной травы аконита северного при соотношении компонентов, в %: трава или корень аконита северного - 10, спирт этиловый 40%-ный - 90, в дозе 0,5 мл/кг приводило к достоверному уменьшению объема асцитной жидкости на 65% и уменьшению количества корчей на 36% по сравнению с контролем. Введение предлагаемого нами средства, содержащего спиртовую вытяжку из высушенных измельченных корней аконита северного при соотношении компонентов в %: трава или корень аконита северного - 10, спирт этиловый 40%-ный - 90, в дозах 0,5 и 0,2 мл/кг достоверно уменьшало количество корчей на 44 и 55% соответственно. Спиртовая вытяжка листьев девясила высокого (прототип) в дозе 5,0 мл/кг на 54% снижала количество уксусных корчей. Кроме того, назначение средства, содержащего спиртовую вытяжку из высушенных измельченных корней аконита северного при соотношении компонентов в %: трава или корень аконита северного - 10, спирт этиловый 40%-ный - 90, в дозах 0,2 мл/кг приводило к достоверному уменьшению объема асцитной жидкости на 65%. Введение индометацина также достоверно уменьшало объем асцитной жидкости на 70% и количество корчей на 67% (табл.7).
Таким образом, предлагаемое нами средство (спиртовые вытяжки из высушенной измельченной травы или высушенных измельченных корней аконита северного при соотношении компонентов в %: трава или корень аконита северного - 10, спирт этиловый 40%-ный - 90) обладают выраженной противовоспалительной и анальгетической активностью. При сравнении с известным противовоспалительным и анальгетическим препаратом индометацином предлагаемое средство - спиртовые вытяжки из высушенной измельченной травы или высушенных измельченных корней аконита северного при соотношении компонентов в %: трава или корень аконита северного - 10, спирт этиловый 40%-ный - 90 - не уступают по эффективности, а в ряде случаев и превосходят их. Наиболее выраженная противовоспалительная и анальгетическая активность проявилась у спиртовых вытяжек из высушенной измельченной травы или высушенных измельченных корней аконита северного при соотношении компонентов в %: трава или корень аконита северного - 10, спирт этиловый 40%-ный - 90, в дозе 0,2 мл/кг - для крыс, 0,5 мл/кг - для мышей.
Предлагаемое средство может использоваться для лечения воспалительных заболеваний с болевым синдромом (радикулит, полиартрит, герпес) в дозе 10-15 капель 3 раза в день в течение 1 месяца за 20 мин до еды.
Конкретный пример:
Больная П-ва. Диагноз - полиартрит. Возраст 70 лет. Вес 69 кг.
Назначен прием предлагаемого средства - жидкая спиртовая вытяжка высушенной, измельченной травы аконита северного 3 раза в день в дозе 10-15 капель в течение 1 месяца. После лечения боли в воспаленных суставах прекратились, воспалительный процесс приостановился.
Больная П-ая. Диагноз - радикулит. Возраст 60 лет. Вес 70 кг.
Назначен прием предлагаемого средства - жидкая спиртовая вытяжка высушенной, измельчанной травы аконита северного 3 раза в день в дозе 10-15 капель в течение 1 месяца. После 3-х дней применения боли прекратились.
Больной Г-ев. Диагноз - герпес. Возраст 20 лет. Вес 53 кг.
Назначен прием предлагаемого средства с появлением первых признаков заболевания (появление пузырька на губе с выраженным болевым ощущением). Предлагаемое средство применялось 3-5 раз в день, в дозе 10-15 капель. На следующий день герпесный пузырь начал подсыхать, болевые ощущения снизились. Через 5 дней корочка отпала.
| Таблица 1. Влияние лечебного действия настоек аконита северного (Aconitum septentrionale L) на развитие каррагенинового воспаления у беспородных мышей-самцов (n=5) | |||||||
| Группа животных | Доза, мл/кг | Время введения препарата | Число животных | % прироста отека | % снижения отека | Горячая пластина, с | |
| Интактная лапа | Воспаленная лапа | ||||||
| Контроль | - | - | 8 | 45,9±3,2 | 26,0±1,9 | 20,4±1,9 | |
| Настойка травы | 0,5 | Одновременно с каррагенином | 5 | 34,5±5,6* | 24,8 | 31,2±8,1 | 33,0±9,3 |
| Настойка корней | 0,5 | Одновременно с каррагенином | 5 | 29,1±3,2* | 36,6 | 32,6±4,2 | 43,4±9,6* |
| Настойка травы аконита | 0,5 | За 1 час до каррагенина | 5 | 31,9±4,8* | 30,5 | 34,0±8,5 | 38,6±7,1* |
| Настойка корней | 0,5 | За 1 час до каррагенина | 5 | 43,5±4,9 | 5,2 | 48,0±6,3* | 42,6±6,9* |
| Настойка травы | 0,5 | Через 1 час после каррагенина | 6 | 27,7±3,4* | 39,7 | 27,5±7,1 | 28,8±6,9 |
| Настойка корней | 0,5 | Через 1 час после каррагенина | 6 | 28,9±4,1* | 37,0 | 51,7±5,6* | 30,0±6,4 |
| ПРИМЕЧАНИЕ: * - различия достоверны в сравнении с контролем при Pt<0,05, Pu<0,05 |
| Таблица 2. Сравнительная оценка действия растительных средств на развитие каррагенинового отека у мышей | ||
| Группа животных | Доза мг/кг, мл/кг | % угнетения отека |
| Индометацин | 10,0 | 39,0* |
| Настойка из листьев и стеблей лабазника вязолитного | 5,0 | 37,4* |
| Настойка травы аконита северного | 0,5 | 39,4* |
| Настойка корней аконита северного | 0,5 | 37,0* |
| ПРИМЕЧАНИЕ: * - различия достоверны в сравнении с контролем при Рϕ<0,05 |
| Таблица 3. Влияние настойки аконита северного (Aconitum septentrionale L.) на развитие \фетровой гранулемы\ у крыс (n=6) . | |||||
| Группа животных | Доза (мг/кг, мл/кг) | Число животных | Масса сухой грануляционно-фиброзной ткани, мг | Угнетение пролиферации, % | Масса экссудата, мг |
| Контроль | - | 6 | 143,0±12,7 | - | 389,0±27,8 |
| Индометацин | 6,0 | 6 | 125,0±5,9 | 12,6 | 272,5±42,3* |
| Настойка травы | 0,2 | 6 | 114,6±3,4* | 20,3 | 321,4±9,2* |
| Настойка корней | 0,2 | 6 | 123,8±6,5* | 13,4 | 335,2±12,7 |
| ПРИМЕЧАНИЕ: * - различия достоверны в сравнении с контролем при Pt<0,05, Pu<0,05 |
| Таблица 4. Влияние лечебного курса настойки аконита северного (Aconitum septentrionale L.) на воспалительный отек, вызванный адъювантом Фрейнда у крыс (n=7)  . | ||||||||||
| Группа животных | Доза мг/кг, мл/кг | Число животных | Время после введения адъюванта Фрейнда | |||||||
| 3 часа | 1 сутки | 8 сутки | 14 сутки | |||||||
| Ср. прирост конечности | % уг. отека | Ср. прирост конечности | % уг. отека | Ср. прирост конечности | % уг. отека | Ср. прирост конечности | % уг. отека | |||
| Воспаленная лапа | ||||||||||
| Контроль | 7 | 13,39±3,03 | 27,52±5,29** | 27,39±5,65 | 30,88±8,12 | |||||
| Индометацин | 6,0 | 7 | 9,52±4,21 | 28,9 | 23,81±5,79 | 13,5 | 21,67±7,53 | 20,9 | 41,67±3,07 | -34,9 |
| Настойка травы аконита северного | 0,2 | 7 | 11,54±4,36 | 13,8 | 24,22±5,64 | 12,0 | 15,24±4,43* | 44,4 | 17,3±5,52 | 43,9 |
| Здоровая лапа | ||||||||||
| Контроль | 7 | 3,21±2,09 | 13,17±4,98** | 18,17±6,56 | 26,90±3,95 | |||||
| Индометацин | 6,0 | 7 | 3,90±3,90 | -21,5 | 5,32±3,92 | 59,6 | 14,76±5,53 | 18,8 | 29,95±3,42 | -11,3 |
| Настойка травы аконита северного | 0,2 | 7 | 0 | 100 | 1,57±1,59* | 88,1 | 6,83±3,08 | 62,4 | 12,96±4,13* | 51,8 |
| ПРИМЕЧАНИЕ: * - различия достоверны в сравнении с контролем при Pt<0,05, Pu<0,05 | ||||||||||
| ** - различия достоверны в сравнении с фоном при Pt<0,05, Pu<0,05 |
| Таблица 5. Влияние лечебного курса настойки аконита северного (Aconitum septentrionale L.) на воспалительный отек, вызванный адъювантом Фрейнда у крыс (n=7)  | ||||||||
| Группа животных | Доза (мг/кг, мл/кг) | Число животных | Индекс вокализации, % | Горячая пластина, с | ||||
| сутки после введения адъюванта Фрейнда | ||||||||
| 4 | 8 | 11 | 14 | Здоровая лапа | Больная лапа | |||
| Контроль | 7 | 94,3±3,7 | 48,6±14,4 | 45,7±13,6 | 28,6±12,2 | 20,7±5,2 | 14,9±4,3 | |
| Индометацин | 6,0 | 7 | 14,3±7,2* | 14,3±11,3 | 0* | 0* | 34,7±7,8 | 16,5±2,7 |
| Настойка травы аконита северного | 0,2 | 7 | 22,9±10,2* | 8,6±6,0* | 5,7±5,7* | 5,7±5,7 | 25,8±4,6 | 23,8±3,9* |
| Настойка корней аконита северного | 0,2 | 7 | 31,4±13,7* | 11,43±11,43 | 8,6±6,0* | 8,6±6,0 | 28,9±5,7 | 22,7±1,6 |
| ПРИМЕЧАНИЕ: * - различия достоверны в сравнении с контролем при Pt<0,05, Pu<0,05 |
| Таблица 6. Влияние настойки аконита северного (Aconitum septentrionale L.) на регенерацию у беспородных мышей-самцов (n=5)  на 3 сутки | ||||
| Группа животных | Число животных | Доза (мг/кг, мл/кг) | Средний диаметр раны (мм) | Частота вокализаций, % |
| Контроль | 7 | - | 10,7±0,4 | 100 |
| Сок алоэ | 5 | 0,2 | 10,9±0,4 | 40* |
| Настойка травы аконита северного | 6 | 0,2 | 10,4±0,6 | 0* |
| Настойка травы аконита северного | 6 | 0,1 | 10,8±0,4 | 50* |
| Настойка корней аконита северного | 5 | 0,2 | 9,4±0,6* | 0* |
| Настойка корней аконита северного | 5 | 0,1 | 10,2±0,6 | 40* |
| ПРИМЕЧАНИЕ: * - различия статистически достоверны в сравнении с контролем при Pu, t<0,05 |
| Таблица 7. Влияние настоек настойки аконита северного (Aconitum septentrionale L.) при уксусном перитоните у беспородных мышей (n=5) | ||||
| Группа животных | Доза (мг/кг, мл/кг) | Число животных | Объем асцитной жидкости, мл | Количество корчей |
| Контроль | 10 | 0,2±0,03* | 29,8±2,6* | |
| Индометацин | 6,0 | 5 | 0,06±0,04* | 9,6±3,4* |
| Настойка травы аконита северного | 0,5 | 5 | 0,07±0,03* | 19,0±4,3* |
| Настойка травы аконита северного | 0,2 | 5 | 0,10±0,05 | 23,2±6,7 |
| Настойка корней аконита северного | 0,5 | 5 | 0,14±0,04 | 16,6±2,7* |
| Настойка корней аконита северного | 0,2 | 5 | 0,07±0,02* | 13,4±2,7* |
| Контроль | - | 7 | Нд | 32,4±6,8 |
| Спиртовая вытяжка листьев девясила высокого | 5,0 | 7 | Нд | 14,8±4,2* |
| ПРИМЕЧАНИЕ: * - различия статистически достоверны в сравнении с контролем при Pu, t<0,05; нд - нет данных |
Список литературы
1. Машковский М.Д. Лекарственные средства: Т.2. - М., 2000.
2. Патент №2210380 от 20 августа 2003 г. \Противовоспалительное средство\. - Бюл. №23 от 20.08.2003.
3. Патент №2180582 от 20 марта 2002 г. \Обезболивающее средство\. - Бюл. №8 от 20.03.2002.
4. Winter С.A., Risley, Nuss G.W. Carragenininduced edema in hind paw of rat as an assay for antiinflammatory drags // Proc. Soc. Expr. Biol. and Med. - 1962. - Vol.111, № 3. - P.544-547.
5. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. - М., 2000. - 398 с.
6. Попова Л.Н. Как изменяются границы образующегося эпидермиса при заживлении ран. - Воронеж. 1942.
7. Тринус Ф.П., Клебанов Б.М., Ганджа И.М., Сейфулла Р.Д. Фармакологическая регуляция воспаления. - Киев, 1987. - 142 с.
8. Гублер Е.В. Вычислительные методы анализа и распознавания патологических процессов. - Л., 1978 - 193 с.
9. Давыдов Т.В., Фомина В.Г., Башарова Л.А., Евсеева В.А., Шонкина С.И., Миковская О.И. Влияние антител к серотонину на болевую чувствительность у крыс с адъювантным артритом // Бюлл. экспер. биол. и мед. 1997. - Т.124, №9 - С.292-295.
Средство, обладающее анальгетическим и противовоспалительным действием, содержащее спиртовую жидкую вытяжку из растительного сырья, отличающееся тем, что в качестве растительного сырья используют вытяжку из травы или корней аконита северного 40%-ным этиловым спиртом при соотношении растительного сырья и экстрагента - 1:10.
