Применение производных плеуромутилина для трансдермального лечения бактериальных заболеваний
Предложено: применение производных плеуромутилина, а именно валнемулина и тиамулина для трансдермального лечения бактериальных заболеваний, в частности вызываемых Dichelobacfer nodosus, Fusobacterium necrophorum, Bacteriodes nodosus и Bacteriodes melamnogenicus, для производства лекарственного средства или в качестве активного ингредиента лекарственного средства того же назначения и соответствующий способ трансдермального лечения заболеваний, например копытной гнили или копытной болезни. Изобретение отличается тем, что выявлено свойство указанных антибиотиков проникать через кожу в кровь или в плазму в концентрациях, эффективных против системных бактериальных инфекций, поэтому лекарственное средство может быть выполнено в форме мази, крема, раствора, шампуня, порошка, спрея. 4 н. и з.п. ф-лы, 1 табл.
Настоящее изобретение относится к производным плеуромутилина и валнемулина. Более конкретно оно относится к приготовлению лекарственного средства для трансдермального лечения бактериальных инфекций у людей и животных, содержащего указанное ниже соединение формулы I. Такое лекарственное средство применяют для профилактики или лечения системных бактериальных инфекций, предпочтительно инфекций у копытных животных, таких как дигитальный дерматит (стабильная копытная гниль), дигитальный пододерматит (хроническое воспаление между передними частями копыта; копытная гниль) и дигитальный некробактериоз (дигитальная флегмона, копытная болезнь, clit-ill и т.д.).
Согласно одному из предпочтительных вариантов осуществления изобретения для оказания системного действия или действия на определенную область организма вводят путем нанесения на кожу соединение формулы
где R1 обозначает этил или винил;
Y обозначает одну из групп, выбранных из СООН, -CH2-R2 и
R2 обозначает Н, галоген, ОН, NH2, SCN, N3, СООН, С(S)S-[C1-С5алкил], -S-пиридил, -S-пиридил, замещенный одной или двумя гидроксильными группами, С1-С5алкилтио, С1-С5-алкилтиогруппу, замещенную одной или несколькими аминогруппами, гидроксильными или карбоксильными группами, -O-SO2-(4-метилфенил), -S-(CH2)m-X, -(CH2-Z)r-(CH2)s-Q или -S-C(CH3)2-CH2-NH-C(O)-Q; или -S-С(СН3)2-СН2-NH-С(O)-СН(NH2)-СН(СН3)2;
X обозначает насыщенное или ненасыщенное 5-6-членное гетероциклическое кольцо, связанное с -S-(СН2)m-группой с помощью атома углерода, и которое содержит одну или несколько гетерогрупп, выбранных из ряда, включающего О, S, N или -N(R3); причем гетероциклическое кольцо является незамещенным или замещено одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, включающей галоген, гидрокси, меркапто, С1-С5алкил, С1-С5алканоил, С1С5алкилсульфоксил, нитро, формил, С1-С5алкоксикарбонил и С1-С5гидроксиалкил;
R3 обозначает водород или С1-С5алкил;
Q обозначает группу -N(R4)(R5), где R4 и R5 каждый независимо друг от друга обозначает C1-С5алкил или они вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют насыщенное или ненасыщенное 5-6-членное гетероциклическое кольцо, необязательно содержащее второй гетерофрагмент, представляющий собой серу или =N-(С1-С5алкил);
Z обозначает О, S или =N(С1-С5алкил);
m равно 0, 1, 2, 3, 4 или 5; r равно 0 или 1; s равно 2, 3, 4 или 5; в виде свободного основания или в виде фармацевтически приемлемой соли для лечения вызываемых бактериальными инфекциями заболеваний человека или животных.
Следует понимать, что в контексте настоящего описания понятие "алкил" в зависимости от указанного количества атомов углерода обозначает, например, следующие группы с прямой или разветвленной цепью: метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, втор-бутил, трет-бутил, изобутил и т.д.
"Галоген" обозначает хлор, бром, фтор или йод, предпочтительно хлор, бром или фтор, более предпочтительно хлор.
Предпочтительно гетероциклические кольца представляют собой 5- и 6-членные кольца, содержащие один или несколько гетероатомов, выбранных из азота и серы. Более предпочтительно кольцо содержит по меньшей мере один атом азота.
Одна из групп таких гетероциклических колец может содержать в качестве гетероатома только азот, в частности 1, 2 или 3 атома азота в качестве гетероатомов. Пригодные 5- или 6-членные гетероциклические кольца, содержащие один атом азота, включают пиридин, пиррол и 4,5-дигидро-3Н-пиррол. Пригодные 5- или 6-членные кольца, содержащие 2 атома азота, включают имидазол, пиридазин, пиримидин. Такие кольца могут быть сконденсированы, например, с одним или несколькими бензольными кольцами, например, с образованием бензимидазола или перимидина. Пригодные 5- или 6-членные гетероциклические кольца, содержащие 3 атома азота, включают 1,2,4-триазол.
Другая группа гетероциклических колец может содержать 1 атом азота и 1 атом серы, представителями этой группы являются, например, тиазол, 4,5-дигидротиазол и бензотиазол. Еще одна группа гетероциклических колец содержит 2 атома азота и 1 атом серы, представителем этой группы является, например, 1,3,4-тиадиазол.
В контексте настоящего изобретения более предпочтительным является применение соединений формулы I, где R1 обозначает этил или винил; R2 обозначает группу -S-C(CH3)2-CH2-NH-C(O)-Q; в которой Q обозначает группу -N(R4)(R5), где R4 и R5 каждый независимо друг от друга обозначает C1-C5алкил или они вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют насыщенное или ненасыщенное 5-6-членное гетероциклическое кольцо, необязательно содержащее второй гетерофрагмент, выбранный из группы, включающей серу или =N-(С1-С5алкил); в форме свободного основания или в форме фармацевтически приемлемой соли.
Еще более предпочтительным является применение соединений формулы I, где R2 обозначает группу -S-С(СН3)2-СН2-NH-С(O)-СН(NH2)-СН(СН3)2; в форме свободного основания или в форме фармацевтически приемлемой соли.
Предпочтительным является также применение соединений формулы I, где R1 обозначает этил или винил; и Y обозначает группу -(CH2-Z)r-(CH2)s-Q, в которой Z обозначает серу; r равно 1; s равно 2; Q обозначает группу -N(R4)(R5), где R4 и R3 каждый независимо друг от друга обозначает С1-С5алкил или они вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют насыщенное или ненасыщенное 5-6-членное гетероциклическое кольцо, необязательно содержащее второй гетерофрагмент, выбранный из группы, включающей серу или =N-(С1-С5алкил), где R4 и R5 наиболее предпочтительно обозначают этил; в форме свободного основания или в форме фармацевтически приемлемой соли.
Наиболее предпочтительными соединениями являются валнемулин и тиамулин; прежде всего валнемулин; в форме свободного основания или в форме фармацевтически приемлемой соли.
Наиболее известным антибиотиком среди соединений формулы I является плеуромутилин (X обозначает ОН и R1 обозначает винил), который был выделен в 1951 Kavanagh с сотрудниками [Proc. Natl. Acad. Soc. 37, 570-574 (1951)]. Другое производное плеуромутилина формулы (I), где R1 обозначает винил и Х обозначает β,D-ксилопранозильную группу, описано в US-4247542. Наиболее типичными соединениями формулы I являются валнемулин и тиамулин.
Валнемулин выпускается под товарным знаком Econor®, а тиамулин - под товарным знаком Tiamutin®. Они имеют следующие химические структуры
Валнемулин в форме свободного основания или в форме физиологически приемлемой соли описан, например, в ЕР-0153277, прежде всего в примере 12, и в WO 98/01127. Тиамулин и его производные, а также другие производные плеуромутилина в форме свободного основания или в форме физиологически приемлемой соли описаны, например, в US-4032530, US-4148890, US-5578585, US-4428953, 4060542, WO 98/01127 и ЕР-0153277.
В WO 99/51219 описано применение плеуромутилина или определенных его фармацевтически приемлемых производных для приготовления лекарственного средства, приспособленного для введения в носоглотку в качестве профилактического средства для лечения инфекций, вызываемых бактериями, колонизирующими носоглотку. Таким образом указанный метод основан на поглощении действующего вещества мембраной слизистой оболочки верхней части носоглотки. В противоположность этому настоящее изобретение основано на трансдермальном поглощении действующего вещества, которое наносят локально на кожу (эпидермис) пациента или кожу или шерсть животного.
Спектр активности валнемулина, тиамулина, а также других производных плеуромутилина хорошо известен и описан в приведенных выше в качестве ссылки патентах и многочисленных научных статьях.
Как следует из процитированных источников, соединения формулы I обладают антибактериальной активностью при их пероральном или парентеральном введении. Лечение путем перорального введения, при котором происходит поглощение действующего вещества через слизистую мембрану пищеварительного тракта, включает в себя профилактику и терапию бактериальных инфекций. В области ветеринарии действующие вещества предпочтительно вводят домашним животным вместе с кормом или с питьевой водой.
При создании изобретения неожиданно было установлено, что соединения формулы I обладают способностью проникать через кожу, что в контексте настоящего описания означает проникать через эпидермис, не подвергаясь метаболизму и не теряя своей активности. Было абсолютно невозможно предсказать, что антибиотик, имеющий такую сложную химическую структуру, может проходить через кожный барьер и проникать в ткань, причем при этом могут достигаться концентрации в крови и плазме, достаточные для эффективной борьбы с бактериальными инфекциями. Указанные бактериальные инфекции включают системные инфекции, при которых бактерии колонизируют клетки, ткани или органы кишечника, и несистемные инфекции, при которых бактерии колонизируют небольшой или имеющий большие размеры участок кожи. Это представляет собой один из исключительных случаев, когда для лечения системных инфекций антибиотик можно наносить на кожу, а не применять с помощью обычных системных путей введения, таких как пероральный или чрескожный. Такое новое применение не следует путать с применением, заключающимся в нанесении антибиотика на кожу для дезинфекции участков кожи, зараженных патогеном. Неожиданным является тот факт, что соединения формулы I обладают способностью проникать через кожу и уничтожать патогены внутри организма животного и в пределах всего организма.
Представителями теплокровных животных-хозяев, которых можно лечить с помощью способа по настоящему изобретению, являются люди, а также предпочтительно домашние животные, такие как крупный рогатый скот, лошади, овцы, козы, домашняя птица, свиньи, собаки, кошки и животные, содержащиеся в зоопарке.
Это открывает новые возможности лечения бактериальных инфекций и прежде всего системных бактериальных инфекций. Такие новые подходы могут быть более удобными и менее трудоемкими для фермеров и ветеринаров по сравнению с методами лечения, основанными на использовании таблеток, болюсов или инъекций.
Таким образом, в настоящем изобретении предложен новый способ борьбы с бактериальными инфекциями у животных, который заключается в том, что на кожу животного наносят определенное количество антибиотика формулы I, причем соединение абсорбируется через кожу (эпидермис) в организм животного.
Способ по настоящему изобретению предпочтительно применяют для лечения млекопитающих, которые предпочтительно представляют собой домашних или сельскохозяйственных животных, таких как овцы, свиньи, коровы или крупный рогатый скот, лошади, козы, собаки и кошки. Способ можно применять и для лечения людей. Его можно применять также для животных, используемых в лабораторных опытах, таких как крысы, мыши и морские свинки. Соединение можно применять для предупреждения или ингибирования инфекции или для лечения уже возникшей инфекции.
В способе по настоящему изобретению соединение абсорбируется в организм животного через кожу. Соединение обычно применяют в составе композиции, содержащей физиологически приемлемый носитель. Можно использовать многочисленные пригодные для данной цели носители. Композиция может представлять собой крем. Однако особенно удобно использовать жидкую композицию, для которой легче отмерять определенные дозы и которая более легко абсорбируется через кожу. Поэтому предпочтительными являются раствор или суспензия соединения в жидком носителе. Растворы наиболее эффективны в отношении проникновения соединения через кожу и поэтому они являются наиболее предпочтительными.
Соединения формулы I, предназначенные для нанесения на кожу/местного применения при использовании в ветеринарии и медицине, можно включать в состав таких препаративных форм, как мази, кремы, лосьоны, шампуни, порошки, спреи (например, распыляемые вручную или с помощью установки для обработки целой партии животных), растворов для пропитки (например, растворов для пропитки в ванне), аэрозолей, капель (например, глазных капель или капель для носа), препаратов для обработки путем полива/точечного нанесения или нанесения ручным способом (например, путем ручной пропитки). Для обработки сельскохозяйственных животных или домашних животных, таких как коровы, лошади, ослы, верблюды, собаки, кошки, домашняя птица, овцы, козы и т.д., наиболее предпочтительны так называемые композиции для "обработки путем полива" или "точечного нанесения"; такие жидкие или полужидкие композиции обладают тем преимуществом, что их можно наносить на небольшие участки шерсти или оперения, и, благодаря свойствам масел, обусловливающим распределение, или свойствам других добавок, обусловливающим распределение, они сами распространяются по большой площади, что приводит к усилению их через эпидермисом.
Мази и кремы можно приготавливать, например, на водной или масляной основе с добавлением пригодных загустителей и/или желирующих агентов. Мази для введения в глаз можно приготавливать в стерильных условиях с использованием стерильных компонентов. Например, препаративные формы для "обработки путем полива" или "точечного нанесения" для применения в ветиринарии можно, например, приготавливать с использованием масел, содержащих органические растворители, необязательно в сочетании с вспомогательными веществами для композиции, например, стабилизаторами или солюбилизирующими агентами. Лосьоны можно приготавливать на водной или масляной основе и они, как правило, содержат один или несколько эмульгаторов, стабилизаторов, разрыхлителей, суспендирующих агентов, загустителей или красителей. Порошки можно приготавливать с использованием любой приемлемой порошкообразной основы. Капли можно приготавливать на водной или неводной основе, которая содержит также один или несколько диспергаторов, стабилизаторов, солюбилизирующих агентов или суспендирующих агентов. Они могут содержать также консерванты.
Предпочтительным вариантом осуществления настоящего изобретения являются композиции, предназначенные для "обработки путем полива" или "точечного нанесения". Они отличаются тем, что действующее вещество растворяют, эмульгируют или суспендируют в пригодном растворителе или смеси растворителей, которые являются переносимыми для кожи, необязательно с добавлением других вспомогательных веществ, причем их наносят с помощью пригодного устройства, например с помощью мерной чашки или емкости для распыления, на кожу животного, подлежащего обработке.
Методы "обработки путем полива" или "точечного нанесения" хорошо известны в ветеринарии, но они применяются в основном для борьбы с экто- или эндопаразитами.
Очевидно, что профилактическое или лечебное действие может быть достигнуто также путем ингаляции лекарственного средства. С этой целью в медицине и ветеринарии действующие вещества по изобретению можно вводить в форме аэрозоля или с помощью инсуффлятора.
Помимо соединения формулы I и носителя, способствующего эффективному проникновению соединения через кожу, композиция может содержать также добавки, которые, например, облегчают применение для животных. Например, композиция может содержать добавки, предназначенные для облегчения контакта с кожей животного, защиты кожи от нежелательного действия, например от раздражения, которое в противном случае вызывает носитель, или для улучшения способности композиции удерживаться на теле животного.
Вязкость жидкой композиции можно повысить по сравнению с присущей ей исходной вязкостью путем добавления загустителей, повышающих вязкость. Это может оказаться желательным для того, чтобы замедлять или предотвращать отекание композиции с тела животного.
Добавки могут включать, например, поверхностно-активное вещество, жир животного происхождения или воск, например ланолин, минеральное масло, например вазелиновое масло, растительное масло, например арахисовое масло, оливковое масло, кукурузное масло или касторовое масло, или полимер, например, углеводородный полимер, такой как полиизобутен.
Поверхностно-активные вещества могут представлять собой анионогенные вещества, например, мыла, жирные сульфатные эфиры, такие как додецилсульфат натрия, жирные ароматические сульфонаты, такие как алкилбензолсульфонаты или бутилнафталинсульфонаты, более сложные жирные сульфонаты, такие как амидные продукты конденсации олеиновой кислоты и N-метилтаурина, или диоктилсукцинат сульфоната натрия.
По сравнению с обработкой путем перорального введения или путем инъекции композиции, предназначенные для "обработки путем полива" или "точечного нанесения", обладают дополнительными преимуществами, имеющими большое значение в ветеринарной практике. Можно отметить следующие общие преимущества:
1) большая простота применения;
2) легкость обработки всех животных в стаде;
3) меньшая опасность в отношении нанесения травм животным и человеку, осуществляющему обработку;
4) существенно меньшая опасность заражения болезнями, передаваемыми путем инъекции;
5) симптомы местной непереносимости проявляются существенно в меньшей степени, чем в случае инъекций; и
6) расходы на производственное оборудование являются более низкими.
Обычно действие композиций, вводимых перорально или путем инъекции, является более выраженным, чем в случае соответствующей обработки путем полива или точечного нанесения. Однако перечисленные выше преимущества могут компенсировать такое менее выраженное действие. Для достижения эффективности, сопоставимой с эффективностью, достигаемой при пероральном или чрескожном введении, можно увеличивать общее количество действующего вещества формулы I, и это не сопровождается вредными побочными действиями.
В контексте настоящего изобретения тиамулин и прежде всего валнемулин представляют собой наиболее предпочтительные действующие вещества для антибиотических композиций, предназначенных для обработки путем полива или точечного нанесения с целью профилактики или лечения бактериальных и предпочтительно системных бактериальных инфекций, что предусматривает проникновение через кожу (эпидермис) обладающего бактерицидной эффективностью количества соединения формулы I.
Для расширения спектра действия соединения формулы I можно вводить также в сочетании с другими приемлемыми действующими веществами, обладающими фармацевтической активностью. Суммарная доза для одного и того же действующего вещества может варьироваться от одного вида животного к другому, а также в пределах одного вида животного, поскольку она зависит среди прочего от веса и конституции животного. Суммарные суточные дозы соединений по изобретению, которые можно применять как в ветеринарии, так и в медицине, составляют 0,01-2000 мг/кг веса тела, предпочтительно от 0,1 до 1000 мг/кг веса тела, более предпочтительно от 1 до 100 мг/кг веса тела, при этом их можно применять в виде однократных или разделенных доз. При этом их можно применять с интервалом в одну неделю, один месяц или даже с большими интервалами. В таких случаях доза должна намного превышать суточную дозу и она должна быть выбрана с учетом формы введения, веса тела и конкретных показаний. Соответствующую дозу можно определять с помощью тестов на моделях, предпочтительно на моделях с использованием животных. Наиболее приемлемые интервалы времени для введения лекарственного средства можно определять на основе эксперимента в каждом конкретном случае.
Как правило, такие композиции содержат соединение в сочетании с приемлемым носителем или разбавителем. Указанные носители могут быть жидкими или твердыми, они предназначены для обеспечения более эффективного применения соединения, что заключается в том, что либо они способствуют тому, что соединение диспергируется в той области, на которую его требуется нанести, либо они позволяют получать композицию, из которой потребитель может получать диспергируемый препарат. Такие композиции хорошо известны в данной области и их можно приготавливать обычными методами, например путем смешения и/или размалывания действующих(его) веществ(а) в сочетании с носителем или разбавителем, например с твердым носителем, растворителем или поверхностно-активным веществом.
Твердые носители, которые можно применять в таких композициях, как дусты, гранулы и порошки, могут быть выбраны, например, из природных минеральных наполнителей, таких как диатомит, тальк, каолин, монтмориллонит, профиллит или аттапульгит. При необходимости в композицию можно включать высоко дисперсную кислоту или высоко дисперсные полимерные абсорбенты. Гранулированные абсорбирующие носители, которые можно вводить в состав композиции, могут быть пористыми (такими как пемза, измельченный кирпич, сепиолит или бентонит) или непористыми (такими как кальцит или песок). Пригодные предварительно гранулированные материалы, которые можно использовать, могут быть органическими или неорганическими, они включают доломит и измельченные остатки растений. Пригодные в качестве носителей или разбавителей растворители включают (но не ограничиваясь ими) ароматические углеводороды, алифатические углеводороды, спирты и гликоли или их простые эфиры, сложные эфиры, кетоны, амиды кислот, высокополярные растворители, необязательно эпоксидированные растительные масла и воду. В состав композиций можно включать индивидуально или в сочетании друг с другом неионогенные, катионогенные или анионогенные поверхностно-активные вещества, например этоксилированные алкилфенолы и спирты, соли щелочных металлов или щелочноземельных металлов и алкилбензолсульфоновых кислот, лигносульфоновых кислот или сульфоянтарных кислот или сульфонаты полимерных фенолов, обладающие хорошими эмульгирующими, диспергирующими и/или смачивающими свойствами.
При необходимости в композиции можно включать стабилизаторы, агенты, препятствующие слеживанию, противовспениватели, регуляторы вязкости, связующие вещества и адгезивы, фотостабилизаторы, а также удобрения, вещества, повышающие аппетит, или другие действующие вещества. Соединения по изобретению можно включать в препаративную форму в смеси с другими обладающими терапевтической активностью веществами. Как правило, концентрация действующего вещества в композициях составляет от 0,01 до 99 мас.%, более предпочтительно от 0,01 до 40 мас.%. Поступающие в продажу продукты обычно представляют собой концентрированные композиции, которые перед применением необходимо разбавлять до соответствующей концентрации, например до 0,1-0,01 мас.%.
При создании изобретения неожиданно было установлено, что соединения формулы I в форме свободного основания или в форме фармацевтически приемлемой соли обладают выраженной активностью в отношении дигитального дерматита (стабильная копытная гниль), который часто встречается у селькохозяйственных животных, таких как овцы, козы, лошади, прежде всего у молочных коров и мясного скота. Они обладают также выраженной активностью в отношении дигитального пододерматита или копытной гнили, встречающейся главным образом у овец, которая обычно представляет собой хроническое воспаление кожи в области между передними частями копыта на ногах (дигитальная щель). Эта инфекция вызывается бактерией Dichelobacter nodosus. Кожа в области дигитальной щели становится отекшей, на ней возникают сухие выделения, что приводит к образованию струпа. Это состояние может иногда вызывать хромоту или появление трещин в пятке копыта/эрозию пятки копыта и обычно приводит к изменению походки животного. Обычно происходит вторичное заражение Fusobacterium necrophorum, которое приводит к тому, что копыто не может полноценно использоваться при беге, в результате чего появляется серьезная хромота.
Дигитальный некробациллоз (дигитальная флегмона, копытная болезнь, clit-ill и т.д.) представляет собой острое инфекционное заболевание копытных животных, прежде всего крупного рогатого скота. Это заболевание характеризуется опуханием и хромотой одной или нескольких ног. Если лечение не производится или запаздывает, то заболевание становится хроническим. Оно вызывается бактерией Fusobacterium necrophorum. В развитии заболевания могут участвовать также другие организмы, такие как Bacteroides melaninogenicus. Оба организма представляют собой не обладающие способностью самостоятельно передвигаться анаэробные грамотрицательные бактерии, которые обычно размножаются в областях повреждений. При этом Fusobacterium necrophorum может самостоятельно вызывать копытную гниль, если эти бактерии в экспериментальных целях инъецируют в дигитальную область. В развитии болезни может также участвовать Bacteroides nodosus, агент, вызывающий копытную гниль у овец. Дигитальный некробациллоз характеризуется внезапным наступлением хромоты от средней до серьезной тяжести, сопровождающейся отеком в области копытного венчика и в дигитальной области. Дигитальная область часто является некротической и в ней имеются трещины, из нее исходит характерный гнойный запах, однако в ней присутствует небольшое количество выделений. Температура тела часто бывает повышена, аппетит понижен и упитанность снижена. У заболевших животных часто отсутствует аппетит и у пастбищных животных снижается внимание. Племенные быки теряют свои способности, особенно в том случае, если повреждена задняя нога.
Дигитальный дерматит, прежде всего у молочного скота, представляет собой заболевание, выявленное в последние годы. Его этиология неизвестна, однако существует предположение о том, что оно вызывается спирохетой, возможно в сочетании с другими бактериями. Оно характеризуется поверхностным воспалением кожи в дигитальной области, прежде всего в области копыта, что приводит к хромоте и снижению удоев молока.
Такие инфекционные заболевания копыт широко распространены в большинстве стран мира и они являются наиболее частой причиной хромоты. Заболеваемость варьируется от одного-двух животных на стадо или загон до очень большого уровня при внезапных вспышках. Заболевания возникают в любое время года. Заболеванию подвержены животные в любом возрасте, однако наиболее часто заболевания проявляются у животных в период отъема и в более старшем возрасте. Одни и те же животные могут заражаться повторно. В прошлом дигитальный дерматит, дигитальный пододерматит и дигитальный некробациллоз ошибочно называли интердигитальным дерматитом, интердигитальным пододерматитом и интердигитальным некробациллозом.
При создании настоящего изобретения неожиданно было установлено, что введение соединения формулы (I) в форме свободного основания или в форме фармацевтически приемлемой соли приводит к быстрой реакции на обработку и к быстрому излечению, при этом оно не оказывает какого-либо вредного воздействия на молоко. В легких случаях достаточно произвести одну обработку. В более серьезных случаях, когда микроорганизм проникает в соседние сухожильные влагалища, суставные капсулы и/или костную ткань, может оказаться необходимым осуществлять повторную обработку. Можно легко осуществлять превентивные меры с помощью ножных ванн, в состав которых входят одно или несколько соединений формулы I в форме свободного основания или в форме фармацевтически приемлемой соли.
Таким образом, еще одним объектом настоящего изобретения является антибактериальная композиция, предназначенная для предупреждения или лечения инфекционных заболеваний ног, предпочтительно заболеваний, вызываемых одним или несколькими видами бактерий из группы, включающей Dichelobacter nodosus, Fusobacterium necrophorum, Bacteroides nodosus и Bacteroides melaninogenicus, причем композиция содержит в качестве действующего вещества соединения формулы I в форме свободного основания или в форме фармацевтически приемлемой соли и физиологически приемлемый носитель. Композиция и способ по настоящему изобретению обладают эффективностью в отношении широкого разнообразия состояний, при этом их можно применять в различных разбавлениях. Композиции по настоящему изобретению могут включать также другие добавки, которые могут представлять собой любые соединения, улучшающие характеристики композиции, повышая растворимость или диспергирующую способность других компонентов, усиливают адгезию композиции к пораженной области копыта, позволяют регулировать характеристики смачиваемости и повышают стабильность, что может быть связано среди прочего с такими характеристиками, как поверхностное натяжение и вязкость. Композиция по настоящему изобретению может включать также красители, позволяющие получать хорошо различимую композицию, что гарантирует ее адекватное и полное использование.
Соединения формулы I в форме свободного основания или в форме фармацевтически приемлемой соли можно вводить различными путями, например наносить на кожу или вводить системно. Наиболее предпочтительным является нанесение на кожу. В соответствии с этим под объем настоящего изобретения подпадает способ предупреждения или лечения инфекционных заболеваний копыт у животных, заключающийся в том, что антибактериальную композицию по настоящему изобретению наносят на кожу предпочтительно вблизи зараженной области. Более предпочтительно композицию применяют для лечения копытной гнили. Композицию можно наносить путем полива, с помощью струи, путем промывки, обтирания губкой или опрыскивания зараженной или расположенной рядом области или путем внесения в материал для обертки ног. В предпочтительном варианте осуществления композиции по настоящему изобретению наносят путем опрыскивания. В альтернативном варианте обработку копыт животного производят путем мытья композицией по изобретению, путем погружения или окунания в нее.
Из представленного выше описания специалисту в данной области должны быть понятны основные характеристики изобретения и он может без отклонения от сущности и объема изобретения осуществлять различные изменения и модификации изобретения с целью его адапгации к различным задачам и условиям. Таким образом, другие варианты осуществления также подпадают под объем изобретения.
Предполагается, что специалист в данной области на основе данного описания без дополнительных исследований может воплотить на практике настоящее изобретение в его полном объеме. Поэтому приведенный ниже конкретный пример следует рассматривать только в качестве иллюстрации, он никоим образом не ограничивает объем изобретения. Перечисленные выше публикации включены в настоящее описание в качестве ссылки.
Приведенные ниже примеры получения и применения служат для пояснения изобретения, при этом конкретные аспекты этих примеров не ограничивают объем изобретения.
Примеры композиций
Дусты:
| валнемулин: | от 0,1 до 10%, предпочтительно от 0,1 to 1% |
| твердый носитель: | от 99,9 до 90%, предпочтительно от 99,9 до 99% |
Суспензионные концентраты:
| валнемулин: | от 5 до 75%, предпочтительно от 10 до 50% |
| вода: | от 94 до 24%, предпочтительно от 88 до 30% |
| поверхностно-активное вещество: | от 1 до 40%, предпочтительно от 2 до 30% |
Композиция с замедленным высвобождением:
| валнемулин: | 0,1-1,0 г |
| арахисовое масло: | до 100 мл |
или
| валнемулин: | 0,1-1,0 г |
| кунжутное масло: | до 100 мл |
Получение: Действующее вещество частично растворяют в масле при перемешивании и при необходимости при слабом нагревании, после чего доводят до требуемого объема и стерилизуют фильтрацией через пригодный мембранный фильтр с размером пор 0,22 мкм.
Растворы:
15% валнемулина в 2,2-диметил-4-гидроксиметил-1,3-диоксолане
10% валнемутил в моноэтиловом эфире диэтиленгликоля
10% валнемутил в полиэтиленгликоле (мол. масса 300)
5% валнемулин в глицерине
Композиция для обработки путем полива/точечного нанесения:
| (i) | (ii) | (ii) | (iv) | |
| валнемулин | 10,65 г | 10,65 г | 10,65 г | 21,00 г |
| вазелиновое масло с высокой вязкостью | -- | 10,00 г | -- | -- |
| растительное масло | -- | -- | -- | 30 мл |
| изопропилмиристат | -- | -- | 10,00 г | -- |
| триметилбензолы | -- | -- | -- | 10,00 г |
| изопропанол | до 100 мл | до 100 мл | до 100 мл | до 100 мл |
Биологические примеры
1. Предварительный тест: Оценка трансдермального введения на свиньях
Опытные животные: свиньи (животное №1 и животное 2)
Тестируемая композиция для животного №1: водный раствор, содержащий 10% валнемулина
Тестируемая композиция для животного №2: 40%-ный раствор этанола в воде, содержащий 10% валнемулина
Тестируемая доза: 2×25 мг/кг веса тела
Тестируемый раствор наносят на кожу животного и определяют концентрацию в печени, легком, в коже, желчи и плазме. Результаты представлены в таблице 1.
| Таблица 1 | Животное №1 | Животное №2 |
| Печень | 0,175 | 0,132 |
| Легкое | 0,916 | 0,353 |
| Кожа | 39,056 | 6,965 |
| Желчь | 0,155 | <предела обнаружения |
| Плазма, через 3 ч после 1-го введения | <предела обнаружения | <предела обнаружения |
| Плазма, через 6 ч после 1-го введения | <предела обнаружения | 0,07 |
Для определения концентраций (мкг/в мл плазмы или в мкг/г ткани) используют калибровочную кривую концентрации валнемулина в плазме. Такие исследования не предназначены для определения точных значений, они позволяют лишь получить ответ типа да-нет. Они служат для иллюстрации способности тестируемого продукта проникать через кожу.
2. Оценка системной абсорбции соединений типа валнемулина при нанесении на кожу крупного рогатого скота
Заболевание: копытная гниль
Способ применения: ножная ванна или непосредственное нанесение в форме спрея
Протокол испытаний: Исследование проводили на четырех взрослых дающих молоко коровах, имеющих клинические симптомы бычьего дигитального дерматита. Образцы крови и молока отбирали перед опытом и с определенными интервалами после нанесения водно-этанольного раствора, содержащего 10% валнемулина, либо с помощью ножной ванны, либо путем непосредственного опрыскивания ног.
Тестируемая композиция: водно-этанольный раствор, содержащий 10% валнемулина
| валнемулин | 10,65 г* |
| пропиловый эфир пара-гидроксибензойной кислоты | 0,02 г |
| метиловый эфир пара-гидроксибензойной кислоты | 0,18 г |
| этанол | 5,00 г |
| вода (очищенная) | до 100 мл |
*исходная масса для продукта, содержащего 93,9% валнемулина (в форме основания)
Растворы для ножных ванн приготавливают заново в каждый день обработки. Рассчитанное количество тестируемого продукта добавляют к определенному количеству воды, которое заранее наливают в ножную ванну.
Каждую из коров индивидуально заводят в ножную ванну и заставляют стоять в покрывающем ноги растворе для ножной ванны в течение 2 мин. Опрыскивание ног производят с помощью ручного опрыскивателя, в который вносят 100 мл тестируемого продукта. Эти 100 мл продукта распыляют по ногам каждой коровы, нанося непосредственно на нижние части ног и вокруг и на низ каждого копыта.
Содержание валнемулина в образцах определяют с помощью широко известного метода высокоэффективной жидкостной хроматографии (ЖХВР). В день 1 до полудня отбирают образцы молока (50 мл/образец) перед проведением первой обработки, эти данные служат в качестве контроля. В течение опыта у каждой коровы девять раз берут образцы крови (20 мл/образец) из копчиковой вены.
График обработки (D = день) (а.m. = утром; р.m. = после полудня)
День (D) 1 Индивидуальная обработка с помощью ножной ванны объемом 150-200 л, содержащей 10%-ный раствор валнемулина в соотношении 3 л на 100 л воды.
День (D) 3 Индивидуальная обработка с помощью ножной ванны объемом 150-200 л, содержащей 10%-ный раствор валнемулина в соотношении 3 л на 100 л воды.
День (D) 5 Пораженные и здоровые ноги опрыскивают 25 мл водного 10%-ного раствора валнемулина.
Образцы крови берут перед первой обработкой и через определенные промежутки времени после последующих обработок. Образцы молока берут во время обработки и во время последующих доений.
Неожиданно было выявлено присутствие валнемулина в большинстве образцов молока и крови. Очевидно, что соединение обладает способностью проникать через кожу. Не было установлено корреляции между серьезностью повреждений и концентрациями вещества в крови или молоке. Через одну неделю ни у одной из обработанных коров не было обнаружено симптомов копытной гнили.
Дополнительные эксперименты на свиньях и крупном рогатом скоте позволили установить, что после местного точечного нанесения валнемулина довольно значительные количества действующих веществ обнаруживаются во многих тканях, например в головном мозге, печени, мышцах, селезенке и легком.
1. Применение соединения формулы I
где R1 обозначает винил;
Y обозначает -CH2-S-(CH2)2-N(C2H5)2 или -СН2-S-С(СН3)2-СН2-СН(NH2)-СН(СН3)2,
в виде свободного основания или в виде фармацевтически приемлемой соли для приготовления лекарственного средства для трансдермального лечения бактериальных инфекций у людей и животных.
2. Применение по п.1, где лекарственное средство предназначено для нанесения путем полива, для точечного нанесения, для нанесения путем погружения или опрыскиванием.
3. Применение по п.1 или 2, где бактериальные инфекции представляют собой инфекционные заболевания ног копытного животного.
4. Применение по п.1, где лекарственное средство после нанесения на кожу обеспечивает проникновение соединения формулы I через кожу.
5. Применение соединения формулы I, охарактеризованной в п.1, в качестве активного компонента фармацевтической композиции, предназначенной для трансдермального лечения бактериальных инфекций у людей и животных.
6. Применение по п.3, где инфекционное заболевание ног копытного животного вызывается одним или несколькими видами бактерий из группы, включающей Dichelobacter nodosus, Fusobacterium necrophorum, Bacteriodes nodosus и Bacteriodes melaninogenicus.
7. Применение по п.3, где инфекционное заболевание ног копытного животного представляет собой интердигитальный дерматит, интердигитальный пододерматит или интердигитальный некробациллоз.
8. Способ трансдермального лечения бактериальных инфекций у людей, включающий нанесение терапевтически эффективного количества соединения формулы I по п.1 на кожу или шерсть.
9. Применение соединения формулы I, охарактеризованной в п.1, для трансдермального лечения бактериальных инфекций у людей и животных.
