Конъюгаты g-csf

Авторы патента:

АНДЕРСЕН Ким Вилбоур (DK)

МИККЕЛСЕН Ян Моллер (DK)

ШАМБЮЕ Ханс Талсгор (DK)

ХАНСЕН Христиан Карстен (DK)

НИССЕН Торбен Лауесгор (US)

C07K14/53 - фактор, стимулирующий рост колоний (ФСК)

Владельцы патента RU 2307126:

МАКСИДЖЕН ХОЛДИНГЗ ЛТД. (KY)

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой полипептидный конъюгат с активностью G-CSF, включающий полипептид с аминокислотной последовательностью, которая отличается от последовательности hG-CSF человека вплоть до 15 аминокислотных остатков, который конъюгирован с 2-6 остатками полиэтиленгликоля. Конъюгаты имеют низкую биоактивность in vitro, продолжительное время полужизни in vivo, пониженный рецептор-опосредованный клиренс. Изобретение позволяет обеспечивать более быструю стимуляцию образования лейкоцитов и нейтрофилов, чем неконъюгированный рекомбинантный G-CSF человека. 15 з.п. ф-лы, 11 ил., 4 табл.

Текст описания представлен в факсимильном виде.

1. Полипептидный конъюгат, проявляющий активность G-CSF, включающий полипептид с аминокислотной последовательностью, которая отличается на вплоть до 15 аминокислотных остатков от аминокислотной последовательности hG-CSF, приведенной в SEQ ID NO: 1, причем полипептид содержит, по меньшей мере, две замены, выбранные из группы, состоящей из K16R/Q, K34R/Q и K40R/Q, и по меньшей мере, одну замену, выбранную из группы, состоящей из Т105К и S159K, относительно SEQ ID NO: 1, причем конъюгат содержит 2-6 остатков полиэтиленгликоля с молекулярным весом около 1000-10000 Да, присоединенных к связующим группам полипептида.

2. Полипептидный конъюгат по п.1, включающий четыре или пять указанных замен.

3. Полипептидный конъюгат по любому из пп.1 или 2, включающий замену Н170К, H170Q или H170R.

4. Полипептидный конъюгат по любому из пп.1 или 2, включающий замены, выбранные из группы, состоящей из Q70K+S159K, Q70K+H170K, Q90K+S159K, Q90K+H170K, T105K+S159K, Т105К+Н170К, Q120K+S159K, Q120K+H170K, T133K+S159K, Т133К+Н170К, S159K+H170K, Q70K+Q90K+S159K, Q70K+Q90K+H170K, Q70K+T105K+S159K, Q70K+T105K+H170K, Q70K+Q120K+S159K, Q70K+Q120K+H170K, Q70K+T133K+S159K, Q70K+T133K+H170K, Q70K+S159K+H170K, Q90K+T105K+S159K, Q90K+T105K+H170K, Q90K+Q120K+S159K, Q90K+Q120K+H170K, Q90K+T133K+S159К, Q90K+T133K+H170K, Q90K+S159K+H170K, T105K+Q120K+S159K, T105K+Q120K+H170K, T105K+T133K+S159K, Т105К+Т133К+Н170К, T105K+S159K+H170K, Q120K+T133K+S159K, Q120K+T133K+H170K, Q120K+S159K+H170K, T133K+S159K+H170K, Q70K+Q90K+T105K+S159К, Q70K+Q90K+T105К+Н170К, Q70K+Q90K+Q120K+S159K, Q70K+Q90K+Q120K+H170K, Q70K+Q90K+T133K+S159К, Q70K+Q90K+T133К+Н170К, Q70K+Q90K+S159К+Н170К, Q70K+T105K+Q120K+S159К, Q70K+T105K+Q120K+H170K, Q70K+T105K+T133K+S159К, Q70K+T105К+Т133К+Н170К, Q70K+T105K+S159К+Н170К, Q70K+Q120K+T133K+S159K, Q70K+Q120K+T133K+H170K, Q70K+T133K+S159K+H170K, Q90K+T105K+Q120K+S159K, Q90K+T105K+Q120K+H170K, Q90K+T105K+T133K+S159К, Q90K+T105K+T133K+H170K, Q90K+T105K+S159К+Н170К, Q90K+Q120K+T133K+S159K, Q90K+Q120K+T133K+H170K, Q90K+Q120K+S159K+H170K, Q90K+T133K+S159К+Н170К, T105K+Q120K+T133K+S159K, T105K+Q120K+T133K+H170K, T105K+Q120K+S159K+H170K, T105K+T133K+S159K+H170K и Q120K+T133K+S159K+H170K.

5. Полипептидный конъюгат по любому из пп.1 или 2, включающий замены, выбранные из группы, состоящей из K16R+K34R, K16R+K40R, K34R+K40R, и K16R+K34R+K40R.

6. Полипептидный конъюгат по п.5, включающий замены K16R+K34R+K40R и включающий остаток лизина в положении 23.

7. Полипептидный конъюгат по любому из пп.1 или 2, в котором аминокислотная последовательность полипептида отличается на вплоть до 10 аминокислотных остатков от SEQ ID NO:1.

8. Полипептидный конъюгат по п.7, в котором аминокислотная последовательность полипептида отличается на вплоть до 8 аминокислотных остатков от SEQ ID NO: I.

9. Полипептидный конъюгат по любому из пп.1 или 2, в котором остатки полиэтиленгликоля присоединены к, по меньшей мере, одному остатку лизина и к N-концевой аминогруппе.

10. Полипептидный конъюгат по п.1, в котором полипептид содержит замены K16R, K34R, K40R, Т105К и S159K относительно аминокислотной последовательности hG-CSF, приведенной в SEQ ID NO: 1, и который содержит 2-6 остатков полиэтиленгликоля с молекулярным весом около 1000-10000 Да, присоединенных к связующим группам полипептида.

11. Полипептидный конъюгат по любому из пп.1 или 2, который гликозилирован по Т 133.

12. Полипептидный конъюгат по любому из пп.1 или 2, содержащий 3-5, 4-6,

3-4, 4-5 или 5-6 присоединенных остатков полиэтиленгликоля.

13. Полипептидный конъюгат по п.12, содержащий 3-6 присоединенных остатков полиэтиленгликоля с молекулярным весом около 5000-6000 Да.

14. Полипептидный конъюгат по п.13, содержащий 4-5 присоединенных остатков полиэтиленгликоля примерно в 5 кДа.

15. Полипептидный конъюгат по п.13, содержащий 3 присоединенных остатка полиэтиленгликоля примерно в 5 кДа.

16. Полипептидный конъюгат по любому из пп.1 или 2, обладающий биоактивностью in vitro в диапазоне около 2-30% от биоактивности неконъюгированного hG-CSF при определении методом определения активности G-CSF in vitro, описанным в настоящем изобретении.

Приоритет по пунктам:

11.07.2001 - пп.5-9, 11 и 16;

22.03.2002 - пп.13-14;

08.05.2002 - пп.1, 10, 12 и 15;

10.07.2002 - пп.2-4.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно, к выделению кроветворных стволовых клеток, и может быть использовано для трансплантации. .

Днк, белки, экспрессирующие векторы и иммуногенные, вакцинные и стимулирующие композиции, содержащие gm-csf лошади // 2279476

Изобретение относится к области молекулярной биологии. .

Модифицированный колониестимулирующий фактор гранулоцитов человека и способ его получения, днк, экспрессирующий вектор // 2232772

Изобретение относится к биотехнологии, в частности генной инженерии, и может быть использовано для получения секретируемого модифицированного колониестимулирующего фактора гранулоцитов человека (hG-CSF).

Способ получения интактной козьей зиготы, способ получения трансгенной по hg-csf козьей зиготы, предусматривающий использование указанной интактной зиготы, способ получения трансгенной по hg-csf козы, предусматривающий использование указанной трансгенной по hg-csf козьей зиготы, способ продуцирования hg-csf, предусматривающий использование указанной трансгенной по hg-csf козы, и молочная композиция, содержащая указанный hg-csf. // 2225106

Изобретение относится к биотехнологии, а в частности к способам получения трансгенных животных. .

Способ получения человеческого гранулоцитарного колониестимулирующего фактора // 2207373

Способ получения фактора некроза опухоли, человеческий фактор некроза опухоли // 2076151

Изобретение относится к цитотоксическим факторам, которые секретируются лимфатическими клетками, и к способам их получения, В-клетки, Т-клетки и макрофаги вырабатывают вещества, которые проявляют цитотоксическую активность по отношению к опухолевым клеткам, но которые являются безвредными для нормальных клеток.

Новые пептиды и их применение в терапии // 2326125

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению новых пептидов, и может быть использовано в лечении и профилактике цитокинзависимых нарушений

Способ очистки и/или выделения биологически активного гранулоцитарного колониестимулирующего фактора // 2358980

Изобретение относится к способу выделения биологически активного гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (G-CSF)

Гликопэгилированный гранулоцитарный колониестимулирующий фактор // 2400490

Генно-инженерная конструкция pgoatcasgcsf, обеспечивающая продукцию гранулоцит-колониестимулирующего фактора человека в молоко трансгенных животных // 2422529

Изобретение относится к области биотехнологии и генетической инженерии, а именно к генно-инженерной конструкции pGoatcasGCSF для экспрессии гранулоцит-колониестимулирующего фактора человека (Г-КСФ)

Новый функционально активный, высокоочищенный стабильный конъюгат гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (г-ксф) с полиэтиленгликолем с пролонгированным биологическим действием, пригодный для медицинского применения, и иммунобиологическое средство на его основе // 2446173

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению ПЭГилированного гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (Г-КСФ), и может быть использовано в медицине

Усовершенствованный способ пегилирования белков // 2472806

Изобретение относится к способу улучшения выхода реакции пегилирования r-metHuG-CSF, включающему конъюгацию r-metHuG-CSF с ПЭГ-альдегидом по свободной аминогруппе в N-конце r-metHuG-CSF в присутствии восстановителя в буферном растворе для пегилирования, включающем полиол формулы CnH2n+2O n, где n равен 3-6, или углевод, или его производное, где концентрация указанного полиола или углевода, или его производного находится в интервале 0,1%-10%, мас./мас

Способ крупномасштабного получения, выделения и очистки рекомбинантного гранулоцитарного колониестимулирующего фактора человека // 2487885

Изобретение относится к области биохимии

Аденовирусные векторы и способы и применения, связанные с ними // 2520823

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой онколитический аденовирусный вектор, клетку и фармацевтическую композицию, содержащую указанный вектор, а также применение указанных векторов в производстве лекарственного средства для лечения рака у субъекта и к способу лечения рака у субъекта. Предложенное изобретение может быть использовано при лечении рака. Онколитический аденовирусный вектор содержит остов нуклеиновой кислоты аденовируса 5-го серотипа (Ad5), делецию в 24 нуклеотида, соответствующих аминокислотам 122-129 в E1A константной области 2, и последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую человеческий колониестимулирующий фактор гранулоцитов-макрофагов (GM-CSF) на месте удаленного gp19k/6.7K в участке E3, и при необходимости капсидную модификацию. Предложенное изобретение позволяет повысить опухолеспецифический иммунный ответ у субъекта. 9 н. и 31 з.п. ф-лы, 36 ил., 10 табл., 7 пр.

Способ стимуляции выработки гранулоцитарного колониестимулирующего фактора клетками костного мозга in vitro // 2527888

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к стимуляции выработки гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (Г-КСФ) клетками костного мозга, и может быть использовано в медицине. Прилипающую фракцию миелокариоцитов культивируют в питательной среде с добавлением стимулятора - ингибитора протеинкиназы p38. Изобретение позволяет повысить выработку Г-КСФ клетками прилипающей фракции миелокариоцитов. 1 табл., 1 пр.

Способ получения рекомбинантного человеческого g-csf // 2563536

Изобретение относится к области биохимии. Заявлен G-CSF-предшественник, содержащий сигнальный пептид и G-CSF-пептид, где сигнальный пептид имеет последовательность человеческого сигнального пептида дикого типа молекулы человеческого G-CSF/b, содержащего, по меньшей мере, одну из мутаций, включающих делецию Glu29, замену His21Phe и замену Gln28Leu. Также представлены полинуклеотид, кодирующий G-CSF-предшественник, экспрессирующий вектор, трансфицированная клетка и способ получения G-CSF с помощью указанной клетки. Изобретение позволяет сделать процессинг белка-предшественника G-CSF более точным и получить G-CSF с очень маленькой степенью укорачивания по N-концу. 5 н. и 8 з.п. ф-лы, 13 ил., 10 пр.