Способ выявления нпвп-гастропатии в эксперименте
Владельцы патента RU 2332162:
ГОУ ВПО Смоленская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию (RU)
Изобретение относится к медицине и может быть использовано в экспериментальной медицине. Проводят биоимпедансометрию серозной оболочки в фундальной части желудка Z1cp. и области большой кривизны Z2cp. Вычисляют коэффициент К как отношение импеданса Z1cp. к Z2cp. При значении К≤1,3 судят о наличии НПВП-гастропатии. Предложенный способ является простым, объективным и позволяет надежно выявлять НПВП-гастропатии желудка. 3 табл.
Изобретение относится к медицине и может быть использовано в экспериментальной медицине для выявления гастропатии, индуцированной нестероидными противовоспалительными препаратами, в эксперименте (НПВП-гастропатии).
Известен способ выявления НПВП-гастропатии в эксперименте, при котором животное забивают, проводят гистологическое исследование слизистой желудка. Материал фиксируют 10% раствором нейтрального формалина, заливают в парафин, приготавливают ультратонкие срезы и окрашивают гематоксилином и эозином. Затем под микроскопом оценивают слизистую желудка и выявляют признаки НПВП-гастропатии, такие как фовеолярная гиперплазия поверхностного и ямочного эпителия. (Оболенцева Т.В., Хаджай Я.И, Ларьяновская Ю.Б. Влияние некоторых природных веществ на язвенное поражение желудка крыс, вызванные ацетилсалициловой кислотой // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 1974, т.77, №3, стр.39-41; Аруин Л.И., Капуллер Л.Л., Исаков В.А. Морфологическая диагностика болезней желудка и кишечника. М.: Триада-Х, 1998, - 496 с., стр.128-130.)
Метод является субъективным и трудоемким, предполагает забой лабораторных животных. Кроме того, используя вышеописанную методику, невозможно динамическое наблюдение за животным с моделированной НПВП-гастропатией.
Задачей изобретения является разработка малоинвазивного способа выявления НПВП-гастропатии в эксперименте с целью последующего исследования гастропротекторных свойств фармакологических препаратов.
Сущность предложенного способа состоит в том, что троекратно с последующим расчетом средней величины проводят биоимпедансометрию (БИМ) серозной оболочки желудка в фундальной части, Z1cp. и области большой кривизны, Z2cp., вычисляют коэффициент К как отношение импеданса Z1cp. к Z2cp. и если К≤1,3, то говорят о наличии НПВП-гастропатии.
Различия между значениями импеданса серозной оболочки большой кривизны и фундальной части имеются в норме и по нашим данным находятся в пределах 1,59≤К≥1,38, что определяется различиями в морфологии этих зон.
Пример 1. Крысе весом 190 г моделировали НПВП-гастропатию желудка, для чего в течение 3 суток в условиях голода вводили через зонд в желудок суспензию ацетилсалициловой кислоты в количестве 150 мг/кг.
Затем под эфирным рауш-наркозом производили верхнесрединную лапаротомию. При помощи игольчатых электродов проводили БИМ (частота тока 10 кГц, напряжение 1,02 В) серозной оболочки фундальной части и большой кривизны, для чего вводили электроды из инертного металла в ткань серозной оболочки на глубину 1 мм. Импеданс каждой зоны замеряли трижды в разных точках (Z1, Z2, Z3) на площади 5 мм2, затем вычисляли среднее значение (Z1cp. и Z2cp.).
В серозной оболочке фундальной части Z1=163 Ом; Z2=148.5 Ом; Z3=165.9 Ом (Z1cp.=159.1 Ом), а большой кривизны Z1=136.6 Ом; Z2=177.5 Ом; Z3=127.8 Ом (Z2cp.=147.3 Ом). Тогда коэффициент К - Z1/Z2=159.1/147.3=1.08, что меньше 1.3, следовательно можно говорить о наличии НПВП-гастропатии.
Далее животное забивали и желудок брали на гистологическое исследование. Методом микроскопии выявили наличие признаков НПВП-гастропатии желудка (фовеолярная гиперплазия поверхностного и ямочного эпителия), что подтверждало данные БИМ.
Пример 2. Крысе весом 180 г моделировали НПВП-гастропатию желудка, для чего в течение 3 суток в условиях голода вводили через зонд в желудок суспензию ацетилсалициловой кислоты в количестве 150 мг/кг и спустя 2 часа в дозе 20 мг/кг мексидол в качестве гастропротектора.
На 4 сутки под эфирным рауш-наркозом производили верхнесрединную лапаротомию. При помощи игольчатых электродов проводили БИМ (частота тока 10 кГц, напряжение 1,02 В) серозной оболочки фундальной части и большой кривизны, для чего вводили электроды из инертного металла в ткань серозной оболочки на глубину 1 мм. Импеданс каждой зоны замеряли трижды в разных точках (Z1, Z2, Z3) на площади 5 мм, затем вычисляли среднее значение (Z1cp. и Z2cp.). В серозной оболочке фундальной части Z1=290.3 Ом; Z2=376.3 Ом; Z3=298.2 Ом (Z1cp.=321.6 Ом), а большой кривизны Z1=169 Ом; Z2=168.5 Ом; Z3=160 Ом (Z2cp.=166 Ом). Тогда коэффициент К=Z1/Z2=321.6/166=1.9, что больше 1.3, следовательно говорить о наличии НПВП-гастропатии нельзя.
Далее животное забивали и желудок брали на гистологическое исследование. Методом микроскопии наличие признаков НПВП-гастропатии желудка не выявили, что подтверждало данные БИМ.
Исследовали импеданс слизистой оболочки желудка на 15 экспериментальных животных (крысы линии Wistar массой 180-220 г) Крыс разделили на 3 группы: первая - с моделированной НПВП-гастропатией, вторая контрольные животные, третья с моделированной НПВП-гастропатией на фоне гастропротектора. Всем животным проводили БИМ серозной оболочки фундальной части (Z1cp.) и большой кривизны (Z2cp.) по описанной выше схеме.
В первой группе крыс при гистологическом исследовании желудка были выявлены признаки НПВП-гастропатии. При этом значения коэффициента К были меньше 1.3 (таблица 1), а в контроле и в третьей группе крыс при гистологическом исследовании патологических изменений не обнаружено, и значения К при этом составили больше 1.3 (таблица 2, таблица 3).
Таким образом, предложенный способ выявления НПВП-гастропатии в эксперименте является простым, объективным, надежным и недорогим, может быть широко использован в экспериментальной хирургии для исследования гастропротекторных свойств фармакологических препаратов.
| Таблица 1 Способ выявления НПВП-гастропатии в эксперимента | |||
| № крысы | Средний импеданс (Ом) серозной оболочки фундальной части (Z1cp.) | Средний импеданс (Ом) серозной оболочки большой кривизны (Z2cp.) | Коэффициент К |
| 1 | 159.13 | 147.3 | 1.08 |
| 2 | 169.8 | 140 | 1.21 |
| 3 | 144.7 | 126.8 | 1.14 |
| 4 | 150.3 | 136.6 | 1.10 |
| 5 | 162.5 | 125 | 1.3 |
| Таблица 2 | |||
| № крысы | Средний импеданс (Ом) серозной оболочки фундальной части (Z1cp.) | Средний импеданс (Ом) серозной оболочки большой кривизны (Z2cp.) | Коэффициент К |
| 1 | 224.3 | 148.1 | 1.51 |
| 2 | 197.6 | 124 | 1.59 |
| 3 | 238 | 173 | 1.38 |
| 4 | 213.3 | 150.2 | 1.42 |
| 5 | 240.2 | 150.1 | 1.6 |
| Таблица 3 | |||
| № крысы | Средний импеданс (Ом) серозной оболочки фундальной части (Z1cp.) | Средний импеданс (Ом) серозной оболочки большой кривизны (Z2cp.) | Коэффициент К |
| 1 | 321.6 | 166 | 1.9 |
| 2 | 270.8 | 163.6 | 1.66 |
| 3 | 193.3 | 283.9 | 1.47 |
| 4 | 210 | 151.3 | 1.39 |
| 5 | 228.4 | 167.8 | 1.36 |
Способ выявления НПВП-гастропатии в эксперименте, отличающийся тем, что троекратно с последующим расчетом средней величины проводят биоимпедансометрию серозной оболочки в фундальной части желудка Z1cp. и области большой кривизны Z2cp., вычисляют коэффициент К как отношение импеданса Z1cp. К Z2cp., и если К≤1,3, то судят о наличии НПВП-гастропатии желудка.
