Вакцина против эшерихиоза животных

Изобретение относится к области ветеринарии. Вакцина включает инактивированные адгезивные антигены E.coli K88, E.coli K99, E.coli F-41, E.coli 987P и адъювант - гидроксид алюминия. В качестве инактивированных адгезивных антигенов E.coli используют инактивированные фимбриальные адгезивные антигены E.coli K88 ab, E.coli K88 ас, E.coli K88 ad, E.coli K99, E.coli F-41, E.coli Att-25, E.coli 987P с уровнем активности в реакции пассивной гемагглютинации, равной как 1:2048-4096; 1:1024-2048; 1:256-512; 1:1024-2056; 1:1024-2056; 1:32-64; 1:256-512 соответственно, при следующем соотношении компонентов, мас.%: инактивированные фимбриальные адгезивные антигены E.coli K88 ab, E.coli K88 ас, E.coli K88 ad, E.coli K99, E.coli F-41, E.coli Att-25, E.coli 987P, взятые в массовых соотношениях 1:(0,8-1,2):(0,8-1,2):(0,8-1,2):(0,8-1,2):(0,8-1,2):(0,8-1,2) соответственно 55-65, 5,8-6,2%-ный гидроксид алюминия - остальное. Вакцина позволяет повысить сохранность поголовья сельскохозяйственных животных. 1 з.п. ф-лы, 1 табл.

 

Изобретение относится к ветеринарной микробиологии и биотехнологии, может быть использовано при разработке средств специфической профилактики, и, в частности, средств для борьбы с эшерихиозом животных.

Известна вакцина против эшерихиоза животных, включающая адгезивные антигены Е.coli K88, Е.coli K99, Е.coli F-41, Е.coli 987P и адъювант - гидроксид алюминия (Патент РФ №2043771, «Вакцина против эшерихиоза животных», Бюл. №26, 20.09.1995, МКИ А61K 39/108). Кроме того, известная вакцина содержит термостабильный и термолабильный анатоксины, соматические антигены и полисахаридные капсульные антигены в виде суспензии клеток эшерихий, бульон Хоттингера и фосфатно-мочевинный буфер. Вакцину используют двухкратным внутримышечным введением с интервалами 14-20 дней по 5 см³ на инъекцию.

Недостатками известной вакцины является низкое качество целевого продукта, выявляемое с низкой антигенной и иммуногенной активностью штаммов эшерихий, а также - отсутствие иммунитета из-за неполноты антигенного состава штаммов Е.coli с адгезивным антигеном, входящих в состав вакцины. Кроме того, известная вакцина имеет повышенную реактогенность за счет содержания высокотоксичных штаммов серогрупп O78, O141, предназначенных для создания иммунитета к O-антигенам и введения этой вакцины в большой дозе - 10 см³ на одно животное (дважды по 5 см³), что обуславливает сенсибилизацию организма животного.

Задачей заявленного технического решения является повышение качества целевого продукта за счет расширения его антигенного спектра и обогащения его основными протективными адгезивными антигенами, повышения их антигенной и иммуногенной активности, а также снижения неспецифической нагрузки на иммунную систему животных и соответственно снижения реактогенности.

Поставленная задача решается в вакцине против эшерихиоза животных, включающей инактивированные адгезивные антигены Е.coli K88, Е.coli K99, Е.coli F-41, Е.coli 987P и адъювант - гидроксид алюминия, тем, что в качестве инактивированных адгезивных антигенов Е.coli используют инактивированные фимбриальные адгезивные антигены Е.coli K88 ab, Е.coli K88 ас, Е.coli K88 ad, Е.coli K99, Е.coli F-41, Е.coli Att-25, Е.coli 987P с уровнем активности в реакции пассивной гемагглютинации, равной как 1:2048-4096; 1:1024-2048; 1:256-512; 1:1024-2056; 1:1024-2056; 1:32-64; 1:256-512 соответственно, при следующем соотношении компонентов, мас.%:

инактивированные фимбриальные
адгезивные антигены Е.coli K88 ab,
Е.coli K88 ас, Е.coli K88 ad,
Е.coli K99, Е.
coli F-41, Е.coli Att-25,
Е.coli 987P, взятые в массовых
соотношениях
1:(0,8-1,2):(0,8-1,2):(0,8-1,2):(0,8-
1,2):(0,8-1,2):(0,8-1,2) соответственно	55-65
6%-ный гидроксид алюминия	остальное

Поставленная задача решается также в вакцине против эшерихиоза животных тем, что дополнительно содержит формалин в конечной концентрации 0,12-0,15%.

Известно получение и использование фимбриальных адгезинов для получения антисывороток (патент США №4769240, кл. А61K 39/02, 1988, патент РФ №2077337, А61K 39/02, Бюл. 11, 20.04.1997).

В патентной и научно-технической литературе не известны технические решения, содержащие признаки, аналогичные заявляемым, т.е. предложение соответствует критерию «новизна».

Предложение осуществимо в лабораторных и промышленных условиях, направлено на решение реальной технической задачи, т.е. предложение «промышленно применимо».

Существующие вакцины против эшерихиоза животных изготавливают из бактериальной массы эшерихий, выращенной без учета протективной характеристики компонентов клетки возбудителя, функционально относящихся к факторам патогенности. Реакторное культивирование эшерихий до стационарной фазы роста бактерий проводится без учета определения максимального уровня специфической активности, сохранения этой активности и распределения в среде роста протективных фимбриальных адгезинов. Процесс культивирования проводится в не контролируемом по факторам патогенности режиме. Нами впервые установлено, что при получении максимального выхода биомассы, как это в настоящее время принято при промышленном производстве вакцины против эшерихиоза животных, снижается качество антигенного материала, т.к. по достижении определенной фазы развития культуры под действием собственных ферментов клетки в процессе старения ее происходят деструктивные изменения части компонентов фимбриальных адгезинов, что приводит к потере иммунологически активного материала и недопустимо при производстве эффективной вакцины против эшерихиоза животных. Кроме того, нами установлено, что культивирование эшерихий, содержащих адгезивные антигены K88 ab, K88 ас, K88 ad, K99, F-41, Att-25, 987Р, позволяют получить вакцину, именно совпадающую с эпизоотическими штаммами возбудителя колибактериоза животных.

Впервые предложен способ получения вакцины против эшерихиоза животных, в котором вместо определения критерия количества клеток эшерихий по физико-химическим и биологическим показателям, а также по оценке содержания адгезивных антигенов, максимальный уровень производства антигенов определяют по уровню активности фимбриальных адгезинов эшерихий в реакции пассивной гемагглютинации в культуральной жидкости, освобожденной от клеточной бакмассы, что позволяет получить неочевидный положительный эффект - повышение качества целевого продукта и ускорение способа, т.е. предложение соответствует критериям «новизна» и «изобретательский уровень».

Способ иллюстрируется на следующих примерах.

Пример 1.

Для получения вакцины против эшерихиоза животных отобраны семь производственных штаммов E.coli, содержащих адгезивные антигены K88 ab, K88 ас, K88 ad, K99, F-41, Att-25, 987Р (штаммы №№729, 661/16, 798, 957, 688/19, 4 и 745), которые выращивают в бульоне Хоттингера, содержащем аминный азот - 150 мг%, триптофан - 50 мг%, при рН 7,8. Каждый штамм выращивают отдельно. В каждой культуре в процессе ее роста определяют максимальную активность фимбриальных адгезинов эшерихий, для чего в пробе культуры с помощью центрифугирования при 3000 об/мин в течение 20 мин отделяют культуральную жидкость от бактериальной массы. Бактериальную массу ресуспензируют в 2 М фосфатно-мочевинном буфере с рН 7,4, концентрацию клеток доводят до 100 млрд. микробных тел в 1 мл и прогревают при температуре 60°С в течение 20 минут. Далее взвесь микробных тел охлаждают до 5°С и центрифугируют при 13000 об/мин в течение 20 мин. Полученный супернатант используют для определения активности фимбриальных адгезинов в реакции пассивной гемагглютинации. Через 5 час культивирования при максимальном значении титров адгезинов эшерихий, содержащих фимбриальные адгезивные антигены K88 ab, K88 ас, K88 ad, K99, F-41, Att-25, 987P, равные как 1:2048; 1:1024; 1:256; 1:1024; 1:1024; 1:32; 1:256 соответственно, культивирование вышеуказанных штаммов прекращают. Отделяют бактериальную массу центрифугированием при 3000 об/мин в течение 20 мин, которую ресуспензируют в 2 М фосфатно-мочевинном буфере с рН 7,4, концентрацию клеток доводят до 100 млрд. микробных тел в 1 мл и прогревают при температуре 60°С в течение 20 минут. Далее взвесь микробных тел охлаждают до 5°С и центрифугируют при 10000 об/мин в течение 20 мин. Полученные супернатанты каждого штамма консервируют формалином в конечной концентрации 0,3%, далее концентрируют в 3 раза и смешивают в массовых соотношениях 1:0,8:0,8:0,8:0,8:0,8:0,8 соответственно. Далее к 55 г смеси инактивированных фимбриальных адгезивных антигенов Е.coli K88 ab, Е.coli K88 ас, Е.coli K88 ad, Е.coli K99, Е.coli F-41, Е.coli Att-25, Е.coli 987P добавляют 45 г 5,8%-ный гидроксида алюминия, получая состав 1, при следующем соотношении компонентов, мас.%:

инактивированные фимбриальные
адгезивные антигены Е.coli K88 ab, Е.coli K88 ас,
Е.coli K88 ad, Е.coli K99, Е.coli F-41,
Е.coli Att-25, Е.coli 987P,
взятые в массовых соотношениях
1:0,8:0,8:0,8:0,8:0,8:0,8 соответственно	55
5,8%-ный гидроксид алюминия	остальное

Пример 2.

Для получения вакцины против эшерихиоза животных отобраны семь производственных штаммов Е.coli, содержащих адгезивные антигены K88 ab, K88 ас, K88 ad, K99, F-41, Att-25, 987P (штаммы №№729, 661/16, 798, 957, 688/19, 4 и 745), которые выращивают в бульоне Хоттингера, содержащем аминный азот - 150 мг%, триптофан - 50 мг%, при рН 7,8. Каждый штамм выращивают отдельно. В каждой культуре в процессе ее роста определяют активность фимбриальных адгезинов эшерихий, для чего в пробе культуры с помощью центрифугирования при 3000 об/мин в течение 20 мин отделяют культуральную жидкость от бактериальной массы. Бактериальную массу ресуспензируют в 2,1 М фосфатно-мочевинном буфере с рН 7,3, концентрацию клеток доводят до 120 млрд. микробных тел в 1 мл и прогревают при температуре 65°С в течение 25 мин. Далее взвесь микробных тел охлаждают до 4°С и центрифугируют при 15000 об/мин в течение 25 мин. Полученный супернатант используют для определения активности фимбриальных адгезинов в реакции пассивной гемагглютинации. Через 6 час культивирования при максимальном значении титров фимбриальных адгезинов эшерихий, содержащих адгезивные антигены K88 ab, K88 ас, K88 ad, K99, F-41, Att-25, 987P, равные как 1:4096; 1:2048; 1:512; 1:2056; 1:2056; 1:64; 1:512 соответственно, культивирование вышеуказанных штаммов прекращают. Отделяют бактериальную массу центрифугированием при 3000 об/мин в течение 20 мин, которую ресуспензируют в 2,1 М фосфатно-мочевинном буфере с рН 7,3, концентрацию клеток доводят до 120 млрд. микробных тел в 1 мл и прогревают при температуре 65°С в течение 25 минут. Далее взвесь микробных тел охлаждают до 4°С и центрифугируют при 15000 об/мин в течение 25 мин. Полученные супернатанты каждого штамма консервируют формалином в конечной концентрации 0,5%, далее концентрируют в 4 раза и смешивают в массовых соотношениях 1:1,0:1,0:1,0:1,0:1,0:1,0 соответственно. Далее к 60 г смеси инактивированных фимбриальных адгезивных антигенов Е.coli К 88 ab, E.coli К 88 ас, Е.coli К 88 ad, E.coli К99, Е.coli F-41, E.coli Att-25, E.coli 987P добавляют 40 г 6%-ный гидроксида алюминия, получая состав 2, при следующем соотношении компонентов, мас.%:

инактивированные фимбриальные адгезивные
антигены Е.coli К 88 ab, Е. coli К 88 ас,
Е. coli К 88 ad, E.coli К99, Е.coli F-41,
Е. coli Att-25, Е. coli 987P, взятые в массовых
соотношениях 1:1,0:1,0:1,0:1,0:1,0:1,0 соответственно	60
6%-ный гидроксид алюминия	остальное

Пример 3.

Для получения вакцины против эшерихиоза животных отобраны семь производственных штаммов Е.coli, содержащих адгезивные антигены К 88 ab, К 88 ас, К 88 ad, К99, F-41, Att-25, 987P (штаммы №№729, 661/16, 798, 957, 688/19, 4 и 745), которые выращивают в бульоне Хоттингера, содержащем аминный азот - 150 мг%, триптофан - 50 мг%, при рН 7,8. Каждый штамм выращивают отдельно. В каждой культуре в процессе ее роста определяют активность фимбриальных адгезинов эшерихий, для чего в пробе культуры с помощью центрифугирования при 3000 об/мин в течение 20 мин отделяют культуральную жидкость от бактериальной массы. Бактериальную массу ресуспензируют в 2,05 М фосфатно-мочевинном буфере с рН 7,35, концентрацию клеток доводят до 110 млрд. микробных тел в 1 мл и прогревают при температуре 62,5°С в течение 22,5 мин. Далее взвесь микробных тел охлаждают до 3°С и центрифугируют при 10000 об/мин в течение 22 мин. Полученный супернатант используют для определения активности фимбриальных адгезинов в реакции пассивной гемагглютинации. Через 6 часов культивирования при максимальном значении титров фимбриальных адгезинов эшерихий, содержащих адгезивные антигены K88 ab, K88 ас, K88 ad, K99, F-41, Att-25, 987P, равные как 1:4096; 1:2048; 1:512; 1:2056; 1:2056; 1:64; 1:512 соответственно, культивирование вышеуказанных штаммов прекращают. Отделяют бактериальную массу центрифугированием при 3000 об/мин в течение 20 мин, которую ресуспензируют в 1,9 М фосфатно-мочевинном буфере с рН 7,35, концентрацию клеток доводят до 110 млрд. микробных тел в 1 мл и прогревают при температуре 62°С в течение 22 минут. Далее взвесь микробных тел охлаждают до 3°С и центрифугируют при 13000 об/мин в течение 20 мин. Полученные супернатанты каждого штамма консервируют формалином в конечной концентрации 0,3%, далее концентрируют в 5 раз и смешивают в массовых соотношениях 1:1,2:1,2:1,2:1,2:1,2:1,2 соответственно. Далее к 65 г смеси инактивированных фимбриальных адгезивных антигенов Е.coli K88 ab, E.coli K88 ас, Е.coli K88 ad, E.coli K99, Е.coli F-41, Е.coli Att-25, Е.coli 987P добавляют 35 г 6,2%-ный гидроксида алюминия, получая состав 3, при следующем соотношении компонентов, мас.%:

инактивированные фимбриальные адгезивные
антигены Е.coli K88 ab, Е.coli K88 ас,
Е.coli K88 ad, E.coli K99, Е.coli F-41,
Е.coli Att-25, Е.coli 987P, взятые в массовых
соотношениях 1:1,2:1,2:1,2:1,2:1,2:1,2 соответственно	65
6,2%-ный гидроксид алюминия	остальное

Пример 4.

Для получения вакцины против эшерихиоза животных отобраны семь производственных штаммов Е.coli, содержащих адгезивные антигены K88 ab, K88 ас, K88 ad, K99, F-41, Att-25, 987P (штаммы №№729, 661/16, 798, 957, 688/19, 4 и 745), которые выращивают в бульоне Хоттингера, содержащем аминный азот - 150 мг%, триптофан - 50 мг%, при рН 7,8. Каждый штамм выращивают отдельно. В каждой культуре в процессе ее роста определяют максимальную активность фимбриальных адгезинов эшерихий, для чего в пробе культуры с помощью центрифугирования при 3000 об/мин в течение 20 мин отделяют культуральную жидкость от бактериальной массы. Бактериальную массу ресуспензируют в 2 М фосфатно-мочевинном буфере с рН 7,4, концентрацию клеток доводят до 100 млрд. микробных тел в 1 мл и прогревают при температуре 60°С в течение 20 минут. Далее взвесь микробных тел охлаждают до 5°С и центрифугируют при 13000 об/мин в течение 20 мин. Полученный супернатант используют для определения активности фимбриальных адгезинов в реакции пассивной гемагглютинации. Через 5 час культивирования при максимальном значении титров адгезинов эшерихий, содержащих фимбриальные адгезивные антигены K88 ab, K88 ас, K88 ad, K99, F-41, Att-25, 987P, равные как 1:2048; 1:1024; 1:256; 1:1024; 1:1024; 1:32; 1:256 соответственно, культивирование вышеуказанных штаммов прекращают. Отделяют бактериальную массу центрифугированием при 3000 об/мин в течение 20 мин, которую ресуспензируют в 2 М фосфатно-мочевинном буфере с рН 7,4, концентрацию клеток доводят до 100 млрд. микробных тел в 1 мл и прогревают при температуре 60°С в течение 20 минут. Далее взвесь микробных тел охлаждают до 5°С и центрифугируют при 10000 об/мин в течение 20 мин. Полученные супернатанты каждого штамма консервируют формалином в конечной концентрации 0,3%, далее концентрируют в 3 раза и смешивают в массовых соотношениях 1:0,8:0,8:0,8:0,8:0,8:0,8 соответственно. Далее к 55 г смеси инактивированных фимбриальных адгезивных антигенов Е.coli K88 ab, Е.coli K88 ас, Е.coli K88 ad, Е.coli K99, Е.coli F-41, Е.coli Att-25, Е.coli 987Р добавляют 45 г 5,8%-ный гидроксида алюминия, получая состав, при следующем соотношении компонентов, мас.%:

инактивированные фимбриальные адгезивные
антигены Е.coli K88 ab, Е.coli K88 ас,
Е.coli K88 ad, E.coli K99, Е.coli F-41, Е.coli Att-25,
E.coli 987Р, взятые в массовых
соотношениях 1:0,8:0,8:0,8:0,8:0,8:0,8 соответственно	55
5,8%-ный гидроксид алюминия	остальное

Далее добавляют формалин в конечной концентрации 0,12%, получая состав 4.

Пример 5.

Для получения вакцины против эшерихиоза животных отобраны семь производственных штаммов Е.coli, содержащих адгезивные антигены K88 ab, K88 ас, K88 ad, K99, F-41, Att-25, 987Р (штаммы №№729, 661/16, 798, 957, 688/19, 4 и 745), которые выращивают в бульоне Хоттингера, содержащем аминный азот - 150 мг%, триптофан - 50 мг%, при рН 7,8. Каждый штамм выращивают отдельно. В каждой культуре в процессе ее роста определяют активность фимбриальных адгезинов эшерихий, для чего в пробе культуры с помощью центрифугирования при 3000 об/мин в течение 20 мин отделяют культуральную жидкость от бактериальной массы. Бактериальную массу ресуспензируют в 2,1 М фосфатно-мочевинном буфере с рН 7,3, концентрацию клеток доводят до 120 млрд. микробных тел в 1 мл и прогревают при температуре 65°С в течение 25 мин. Далее взвесь микробных тел охлаждают до 4°С и центрифугируют при 15000 об/мин в течение 25 мин. Полученный супернатант используют для определения активности фимбриальных адгезинов в реакции пассивной гемагглютинации. Через 6 час культивирования при максимальном значении титров фимбриальных адгезинов эшерихий, содержащих адгезивные антигены K88 ab, K88 ас, K88 ad, K99, F-41, Att-25, 987P, равные как 1:4096; 1:2048; 1:512; 1:2056; 1:2056; 1:64; 1:512 соответственно, культивирование вышеуказанных штаммов прекращают. Отделяют бактериальную массу центрифугированием при 3000 об/мин в течение 20 мин, которую ресуспензируют в 2,1 М фосфатно-мочевинном буфере с рН 7,3, концентрацию клеток доводят до 120 млрд. микробных тел в 1 мл и прогревают при температуре 65°С в течение 25 минут. Далее взвесь микробных тел охлаждают до 4°С и центрифугируют при 15000 об/мин в течение 25 мин. Полученные супернатанты каждого штамма консервируют формалином в конечной концентрации 0,5%, далее концентрируют в 4 раза и смешивают в массовых соотношениях 1:1,0:1,0:1,0:1,0:1,0:1,0 соответственно. Далее к 60 г смеси инактивированных фимбриальных адгезивных антигенов Е.coli K88 ab, E.coli K88 ас, Е.coli K88 ad, E.coli K99, Е.coli F-41, Е.coli Att-25, Е.coli 987P добавляют 40 г 6%-ный гидроксида алюминия, получая состав, при следующем соотношении компонентов, мас.%:

инактивированные фимбриальные адгезивные
антигены Е.coli K88 ab, Е.coli K88 ас,
Е.coli K88 ad, E.coli K99, Е.coli F-41,
Е.coli Att-25, Е.coli 987P,
взятые в массовых соотношениях
1:1,0:1,0:1,0:1,0:1,0:1,0 соответственно	60
6%-ный гидроксид алюминия	остальное

Далее добавляют формалин в конечной концентрации 0,135%, получая состав 5.

Пример 6.

Для получения вакцины против эшерихиоза животных отобраны семь производственных штаммов Е.coli, содержащих адгезивные антигены K88 ab, K88 ас, K88 ad, K99, F-41, Att-25, 987P (штаммы №№729, 661/16, 798, 957, 688/19, 4 и 745), которые выращивают в бульоне Хоттингера, содержащем аминный азот - 150 мг%, триптофан - 50 мг%, при рН 7,8. Каждый штамм выращивают отдельно. В каждой культуре в процессе ее роста определяют активность фимбриальных адгезинов эшерихий, для чего в пробе культуры с помощью центрифугирования при 3000 об/мин в течение 20 мин отделяют культуральную жидкость от бактериальной массы. Бактериальную массу ресуспензируют в 2,05 М фосфатно-мочевинном буфере с рН 7,35, концентрацию клеток доводят до 110 млрд. микробных тел в 1 мл и прогревают при температуре 62,5°С в течение 22,5 мин. Далее взвесь микробных тел охлаждают до 3°С и центрифугируют при 10000 об/мин в течение 22 мин. Полученный супернатант используют для определения активности фимбриальных адгезинов в реакции пассивной гемагглютинации. Через 6 часов культивирования при максимальном значении титров фимбриальных адгезинов эшерихий, содержащих адгезивные антигены K88 ab, K88 ас, K88 ad, K99, F-41, Att-25, 987P, равные как 1:4096; 1:2048; 1:512; 1:2056; 1:2056; 1:64; 1:512 соответственно, культивирование вышеуказанных штаммов прекращают. Отделяют бактериальную массу центрифугированием при 3000 об/мин в течение 20 мин, которую ресуспензируют в 1,9 М фосфатно-мочевинном буфере с рН 7,35, концентрацию клеток доводят до 110 млрд. микробных тел в 1 мл и прогревают при температуре 62°С в течение 22 минут. Далее взвесь микробных тел охлаждают до 3°С и центрифугируют при 13000 об/мин в течение 20 мин. Полученные супернатанты каждого штамма консервируют формалином в конечной концентрации 0,3%, далее концентрируют в 5 раз и смешивают в массовых соотношениях 1:0,8:0,8:0,8:0,8:0,8:0,8 соответственно. Далее к 65 г смеси инактивированных фимбриальных адгезивных антигенов Е.coli K88 ab, Е.соИ K88 ас, Е.coli K88 ad, E.coli K99, Е.coli F-41, Е.coli Att-25, Е.coli 987P добавляют 35 г 6,2%-ный гидроксида алюминия, получая состав, при следующем соотношении компонентов, мас.%:

инактивированные фимбриальные
адгезивные антигены Е.coli K88 ab,
Е.coli K88 ас, Е.coli K88 ad,
Е.coli K99, Е.coli F-41,Е.coli Att-25, Е.coli 987P,
взятые в массовых соотношениях
1:0,8:0,8:0,8:0,8:0,8:0,8 соответственно	65
6,2%-ный гидроксид алюминия	остальное

Далее добавляют формалин в конечной концентрации 0,15%, получая состав 6.

Пример 7.

Использовали полученные составы следующим образом. Формируют 4 группы по 100 супоросных свиноматок, подобранных по принципу аналогов. В таблице 1 приводятся технические данные вакцин, полученных согласно известному (прототип) и предлагаемому (составы 1-6, полученные согласно примерам 1-6) техническим решениям.

Как показали результаты экспериментальных исследований, предлагаемая вакцина против эшерихиоза животных позволяет повысить сохранность поголовья сельскохозяйственных животных 29,5-29,8%.

Пример 8.

Использовали полученные составы следующим образом. Формируют 4 группы по 50 стельных коров, подобранных по принципу аналогов. В таблице 2 приводятся технические данные вакцин, полученных согласно известному (прототип) и предлагаемому (составы 1-6, полученные согласно примерам 1-6) техническим решениям.

Как показали результаты экспериментальных исследований, предлагаемая вакцина против эшерихиоза животных позволяет повысить сохранность поголовья сельскохозяйственных животных 6,8-11,3%.

Как показали результаты экспериментальных исследований, предлагаемая вакцина против эшерихиоза животных позволяет повысить сохранность поголовья сельскохозяйственных животных, а также сокращает сроки получения вакцины против эшерихиоза животных на 18-42 часа, поскольку длительность культивирования согласно известному способу составляет 24-48 часов (в предлагаемом способе - 5-6 часов).

Таблица 1.
Показатели	Состав 1	Состав 2	Состав 3	Состав 4	Состав 5	Состав 6	Прототип
Вакцинировано супоросных свиноматок	100	100	100	100	100	100	100
Количество поросят, полученных от супоросных свиноматок	1250	1280	1286	1264	1275	1309	1230
Количество поросят, заболевших эшерихиозом	156	135	164	172	152	142	386
Количество поросят, павших от эшерихиоза	30	28	32	34	28	32	85
Сохранность поголовья	97,6	97,8	97,5	97,3	97,8	97,6	68
Таблица 2.
Показатели	Состав 1	Состав 2	Состав 3	Состав 4	Состав 5	Состав 6	Прототип
Вакцинировано стельных коров	50	50	50	50	50	50	50
Количество телят, полученных от стельных коров	47	46	48	46	45	48	45
Количество телят, заболевших эшерихиозом	10	9	10	8	9	8	21
Количество телят, павших от эшерихиоза	3	3	2	2	2	1	6
Сохранность поголовья	93,6	93,4	95,8	95,6	95,5	97,9	86,6

1. Вакцина против эшерихиоза животных, включающая инактивированные адгезивные антигены E.coli K88, E.coli K99, E.coli F-41, E.coli 987P и адьювант - гидроксид алюминия, отличающаяся тем, что в качестве инактивированных адгезивных антигенов E.coli использованы инактивированные фимбриальные адгезивные антигены E.coli K88 ab, E.coli K88 ас, E.coli K88 ad, E.coli K99, E.coli F-41, E.coli Att-25, E.coli 987P с уровнем активности в реакции пассивной гемагглютинации, равной как 1:2048-4096; 1:1024-2048; 1:256-512; 1:1024-2056; 1:1024-2056; 1:32-64; 1:256-512, соответственно, при следующем соотношении компонентов, мас.%:

инактивированные фимбриальные адгезивные антигены
E.coli K88 ab, E.coli K88 ас, E.coli K88 ad, E.coli K99,
E.coli F-41, E.coli Att-25, E.coli 987P
взятые в массовых соотношениях
1:(0,8-1,2):(0,8-1,2):(0,8-1,2):(0,8-1,2):
(0,8-1,2):(0,8-1,2), соответственно	55-65
5,8-6,2%-ный гидроксид алюминия	остальное

2. Вакцина против эшерихиоза животных по п.1, отличающаяся тем, что дополнительно содержит формалин в конечной концентрации 0,12-0,15 мас.%.