Способ прогнозирования развития гипоксии у беременных в третьем триместре гестации, перенесших вспышку герпес-вирусной инфекции
Владельцы патента RU 2415438:
Учреждение Российской академии медицинских наук Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания Сибирского отделения РАМН (RU)
Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторным методам диагностики. Для прогнозирования развития гипоксии у беременной в третьем триместре гестации определяют содержание оксигемоглобина (НbO2) и содержание 2,3 дифосфоглицерат-фофсфатазы (2,3ДФГ) в периферической крови. Вычисляют дискриминантную функцию (Д) по формуле Д=+17,072·2,3ДФГ+(-0,041·HbO2), 2,3ДФГ - концентрация, в моль/л, НbO2 - количество, в %. При значении Д 97,09-112,37 прогнозируют угрозу гипоксии у беременной, перенесшей обострение герпес-вирусной инфекции. Использование способа позволяет своевременно выявить группу риска и точно спрогнозировать развитие гипоксии.
Цель исследования - изучить характер нарушения оксигениции гемоглобина в эритроцитах периферической крови беременных после вспышки герпес-вирусной инфекции на третьем триместре гестации, приводящей к избыточному включению в гемоглобин 2,3ДФГ, снижающему формирование HbO2.
Установлено, что сродство Hb к О2 будет меняться, если лиганд по-разному взаимодействует с 2 формами гемоглобина. Лиганд, который уменьшает сродство Hb к О2, должен присоединяться к деокси-Hb (Wyman I., 1948; Федоров Н.А., 1976). Специфический эффект на сродство Hb к О2 связан, как показали исследования, с присоединением к Hb в диоксиформе 2·3 ДФГ. Константы равновесия для присоединения первых 3 молекул О2 уменьшаются в присутствии 2,3ДФГ (Rorth M., 1972; Rorth M., Astrup P., 1972).
Считают, что 2,3ДФГ увеличивает константу скорости отщепления O2 и уменьшает константу скорости его присоединения к Hb (Baner Ch., 1969).
Неспецифический эффект 2,3ДФГ на сродство Hb к О2 в случае увеличения 2,3ДФГ выше физиологического уровня (5 мл моль/л) в интактных эритроцитах приводит к уменьшению присоединения Hb к О2 и увеличивает константу скорости отщепления О2, связанного с Hb.
На эти процессы могут повлиять многие факторы: уменьшение внутриэритроцитарного рН, накопление большого количества электроотрицательных ионов или продуктов метаболизма, изменяющих электростатическое равновесие в гемоглобиновой системе (Rorth M., Astrup Р., 1972; Perutz M., Mazzarella L., 1963).
Таким образом, если коэффициент включения 2,3ДФГ будет увеличен при вспышке герпес-вирусной инфекции, когда вирусный антиген интенсивно увеличивается, то гемоглобин не будет принимать кислород и концентрация HbO2 в эритроцитах начнет понижаться.
В качестве прототипа использованы данные, полученные И.А.Андриевской (2008), в которых отмечается, что при нарастании титра антител к вирусу герпеса во время гестации снижается содержание в крови HbO2. Однако автор не указывает причину, приводящую к снижению процентного содержания HbO2 при нарастании в крови беременной титра антител к вирусу герпеса.
В настоящем исследовании приводятся данные, указывающие, что причиной гипоксии является увеличение в крови 2,3ДФГ, который блокирует гемоглобин для связи с кислородом.
Изучая литературу, авторы не могли найти сведений, показывающих, что присутствие антигена вируса герпеса в крови беременных воздействует на эритроциты периферической крови, в результате чего происходит избыточное присоединение 2,3ДФГ к молекулам Hb, что приводит к снижению в крови концентрации HbO2.
Заявленный способ имеет следующие приемы.
1. Исследовали периферическую кровь беременных, перенесших в третьем триместре вспышку герпес-вирусной инфекции, и 20 беременных, не болевших в течение всего периода гестации (контроль). Исследования проводились на базе стационара акушерского отделения клиники Дальневосточного научного центра физиологии и патологии дыхания СО РАМН. Все исследования были проведены с учетом требований Хельсинской декларации Всемирной ассоциации "Этические принципы проведения научных медицинских исследований с учетом человека" с поправками 2000 г. и "Правилами клинической практики в Российской Федерации", утвержденными Приказом Минздрава РФ от 19.06.2003 г. №266.
2. Содержание Hb2 в эритроцитах периферической крови беременных определяли на спектрофотометре "Stat-Fax-2100x" (USA) по М.С.Кушаковскому (1968).
3. Титр антитител к вирусу герпеса определяли иммуноферментным методом на спектрофотометре "Stat-Fax-2100х" (USA).
4. Содержание 2,3ДФГ (2,3 дифосфоглицерат-фосфатазы) в эритроцитах периферической крови беременных определяли на спектрофотометре "Stat-Fax-1900+" по методу И.Л.Виноградовой, С.Ю.Багрянцевой и Г.В.Дервиз (1980).
5. Анализ содержания 2,3ДФГ и HbO2 при титре антител к вирусу герпеса в крови беременных обрабатывался статистическим методом дискриминантного анализа.
Исследования показали, что при вспышке герпес-вирусной инфекции у беременных в третьем триместре в эритроцитах периферической крови увеличивается концентрация 2,3ДФГ. При титре антител к вирусу герпеса 1:12800 концентрация 2,3ДФГ увеличивается до 6,81±0,15 ммоль/л (контроль - 4,9±0,02 ммоль/л). Одновременно в эритроцитах периферической крови у этих же беременных снижалось содержание HbO2 до 95,87±2,6% (контроль - 99,5±2,0%).
Дискриминантный анализ показывает:
Д=+17,072·2,3ДФГ+(-0,041·HbO2)
Д=+17,072·6,81+(-0,041·95,87)
Д=+116,30+(-3,93)=112,37
В пределах дискриминантной функции 112,37 и граничного значения 97,09 появляется угроза формирования гипоксии у беременных.
Пример 1
Беременная К. поступила на 30 неделе беременности с обострением герпес-вирусной инфекции с титром антител к возбудителю 1:12800.
В периферической крови содержалось 6,5 ммоль/л 2,3ДФГ. Количество оксигемоглобина составляло - 95,1%.
Составляя дискриминантное уравнение, получаем:
Д=17,072·6,5+(-0,041·95,1)=107,07
Дискриминантная функция выше граничного значения:
Д(107,07)>97,09 (граничное значение)
У беременной прогнозируется развитие гипоксии.
Пример 2
Беременная А. поступила на 33 неделе беременности. В течение всего периода гестации признаков герпес-вирусной инфекции не отмечалось.
В периферической крови содержалось 99,6% HbO2 и 5,2 мкмоль/л 2,3ДФГ.
Составляя дискриминантное уравнение с этим показателем, находим, что дискриминантная функция при таких показателях составляет:
Д=17,072·5,2+(-0,041·99,6)=84,69
Д=88,77+(-4,08)=84,69
Дискриминантная функция (84,69) у беременной А., не болевшей герпесом, меньше граничного значения (97,09).
Следовательно, угрозы развития гипоксии у нее не прогнозируется.
Литература
1. Андриевская И.А. Дыхательная функция крови у беременных с герпес-вирусной инфекцией / Бюллетень СО РАМН. - 2008. - №3. - с.56-65.
2. Виноградова И.А., Багрянцева С.Ю., Девиз Г.В. Метод одновременного определения 2,3ДФГ И АТФ в эритроцитах / Лабораторное дело. - 1980. - №7. - с.424-426.
3. Кушаковский М.С. Клинические формы повреждения гемоглобина // Лен. Отделение: Медицина, 1968. - 324 с.
4. Федоров Н.А. Нормальное кроветворение и его регуляция. - М.: Медицина, 1976. - 543 с.
5. Baner Ch. Antogonistic influence of CO2 and 2,3-α-diphosphoglicerate on the Bohr effect of human haemoglobin // «Life Shi.», 1969, v.8, p.1041.
6. Perutz М., Mazzerella L. Preliminary X-ray analysis of haemoglobin H. - «Nature», 1963, v.199, p.639.
7. Rorth М. Haemoglobin inteactions and red cell metabolism // «Ser. Haematol», 1972, v. p.1.
8. Rorth М., Astrup P. Oxygen affinity of haemoglobin and red cell acidbase status // Copenhagen, 1972, 371 с.
Способ прогнозирования развития гипоксии у беременной в третьем триместре гестации, перенесших обострение герпес-вирусной инфекции, включающий определение содержания оксигемоглобина в периферической крови, отличающийся тем, что дополнительно определяют содержание 2,3 ДФГ (2,3 дифосфоглицерат-фосфатазы), вычисляют дискриминантную функцию (Д) по формуле Д=+17,072·2,3ДФГ+(-0,041·НbО2), где 2,3ДФГ - концентрация, моль/л, НbО2 - количество, %, и при значении Д 97,09-112,37 прогнозируют угрозу гипоксии у беременной, перенесшей обострение герпес-вирусной инфекции.
