Способ получения 3,28-дисульфата бетулина

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и касается способа получения 3,28-дисульфата бетулина - биологически активного вещества, являющегося ингибитором комплемента и представляющего большой интерес для медицины. Сульфатирование бетулина проводят в N,N-диметилформамиде комплексом SO₃-диметилформамид при температуре 30-50°С в течение 3-4 часов, затем реакционную смесь охлаждают до 10-15°С, разбавляют 2-х кратным объемом 75% водно-этанольного раствора, содержащего 4% гидроксида натрия, отделяют неорганическую часть, а дисульфат бетулина выделяют в виде натриевой соли после упаривания маточного раствора, затем перекристаллизовывают из этанола. Технический результат изобретения - улучшение экологичности способа за счет замены токсичных реагентов. 1 пр.

 

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и касается способа получения 3,28-дисульфата бетулина формулы (I), используемого в медицине в качестве ингибитора комплемента.

Дисульфат бетулина - биологически активное вещество, является ингибитором комплемента и представляет большой интерес для медицины и конкретно иммунологии [Bureeva S., Andia-Pravdivy J., Symon A., Bichucher A., Moskaleva V., Popenko V., Shpak A., Shvets V., Kozlov L., Kaplun A. "Selective inhibition of the interaction of C1q with immunoglobulins and the classical pathway of the complement activation by steroids and triterpenoids sulfates" // J. Bioorganic and medicinal chemistry. - 2007. - Vol.15, №10. - P.3489-3498].

Наиболее близким по назначению к предлагаемому изобретению является способ получения дисульфата бетулина, описанный в патенте RU 2243233, опубл. 27.12.2004. К смеси серной кислоты и уксусного ангидрида в пиридине при температуре от 18 до 90°С прибавляют бетулин и перемешивают в течение 30-60 минут. Затем реакционную смесь нейтрализуют, осадок неорганических солей отфильтровывают, раствор упаривают досуха. Полученные кристаллы промывают водой и сушат. Выход продуктов 90-97%.

К недостаткам данного способа следует отнести использование токсичных реагентов: пиридина и труднодоступного уксусного ангидрида.

Задача изобретения - расширение арсенала сульфатирующих реагентов для синтеза дисульфата бетулина.

Технический результат изобретения - улучшение экологичности способа за счет замены токсичных реагентов пиридина и уксусного ангидрида одним менее токсичным реагентом.

Технический результат достигается тем, что в способе получения 3,28-дисульфата бетулина сульфатирование бетулина проводят в N,N-диметилформамиде комплексом SO₃-диметилформамид при температуре 30-50°С в течение 3-4 часов, затем реакционную смесь охлаждают до 10-20°С, разбавляют 2-кратным объемом 75% водно-этанольного раствора, содержащего 4% гидроксида натрия, отделяют неорганическую часть, а дисуфат бетулина выделяют в виде натриевой соли после упаривания маточного раствора.

Способ осуществляют следующим образом.

Сначала готовят сульфатирующий комплекс: SO₃-диметилформамид. К N,N-диметилформамиду при интенсивном перемешивании и охлаждении до температуры -5-0°С прибавляют по каплям хлорсульфоновую кислоту. Далее в сульфатирующий комплекс медленно прибавляют бетулин, смесь нагревают до 30-50°С и перемешивают при этой температуре в течение 3-4 часов. Затем реакционную массу охлаждают до температуры 10-20°С и при перемешивании выливают в 2-кратный объем 75% водно-этанольного раствора, содержащего 4% гидроксида натрия. Выпавшую в осадок неорганическую соль отделяют фильтрованием. Оставшийся раствор концентрируют под вакуумом до полного удаления растворителя и получают дисульфат бетулина в виде натриевой соли. Выход продукта составляет 6,1 г (95%).

Структурная формула и состав натриевой соли 3,28-дисульфата бетулина подтверждены с использованием элементного анализа, ИК и ЯМР-спектроскопии. В ИК-спектре, снятом в KBr в области 1221 см^-1, наблюдается интенсивная полоса поглощения, характерная валентным колебаниям S=O. В ЯМР ¹Н (CD₃OD) спектре 3,28-дисульфата бетулина в области 3,95 м.д. присутствуют сигналы протона при С₃ атоме углерода, а в области 4,25 м.д. сигналы двух протонов при С₂₈ атоме углерода, в области 4,72 м.д. и 4,60 м.д. присутствуют сигналы двух протонов концевой двойной связи при С₂₉ атоме углерода.

Способ сульфатирования подтверждается конкретным примером.

В трехгорлую колбу объемом 100 мл, снабженную мешалкой, термометром и капельной воронкой, загружают 50 мл N,N-диметилформамида и при интенсивном перемешивании и охлаждении при температуре -5-0°С прибавляют по каплям 2 мл хлорсульфоновой кислоты. После того как вся хлорсульфоновая кислота прибавлена, при перемешивании медленно порциями загружают 4,42 г (0,01 моль) бетулина, нагревают колбу на водяной бане до 30°С и поддерживают эту температуру в течение 4-х часов. Затем реакционную массу охлаждают до температуры 10-15°С и при перемешивании выливают в стакан, содержащий 100 мл 75%-ного водно-этанольного раствора, содержащего 4% гидроксида натрия. Наблюдается выпадение в осадок неорганической соли, ее отделяют фильтрованием, а оставшийся раствор концентрируют под вакуумом до полного удаления растворителя, получают дисульфат бетулина в виде натриевой соли и перекристаллизовывают из этанола. Выход продукта составляет 6,0 г (93%).

Способ получения 3,28-дисульфата бетулина формулы:

характеризующийся тем, что сульфатирование бетулина проводят в N,N-диметилформамиде комплексом SO₃-диметилформамид при температуре 30-50°С в течение 3-4 ч, затем реакционную смесь охлаждают до 10-15°С, разбавляют 2-х кратным объемом 75% водно-этанольного раствора, содержащего 4% гидроксида натрия, отделяют неорганическую часть, а дисуфат бетулина выделяют в виде натриевой соли после упаривания маточного раствора.