Способ диагностики степени дисплазии тазобедренных суставов у детей

Изобретение относится к области медицины. Сущность способа заключается в том, что исследуют полученные образцы проб методом иммуноферментного анализа ИФА. Выполняют определение количественных значений концентраций коллагена I типа, аггрекана, гиалуронана, васкулоэндотелиального фактора роста VEGF, фибропластического фактора роста FGF в образце пробы крови и концентрации коллагена II типа в образце пробы мочи. При значениях, нг/мл: коллагена I типа в пределе 2,71-3,03; коллагена II типа - 3,60-3,82; аггрекана - 79,17-84,35; гиалуронана - 17,31-24,11; VEGF - 326,68-360,29; FGF - 9,21-11,31 диагностируют легкую степень, коллагена I типа в пределе 3,04-3,83; коллагена II типа - 3,83-6,22; аггрекана - 84,36-105,62; гиалуронана - 24,12-32,36; VEGF - 360,30-482,14; FGF - 11,32-19,44 диагностируют среднюю степень, коллагена I типа в пределе 3,84-5,85; коллагена II типа - 6,23-7,27; аггрекана - 105,63-134,45; гиалуронана - 32,37-87,68; VEGF - 482,15-839,30; FGF - 19,45-44,19 диагностируют тяжелую степень, коллагена I типа в пределе 5,86-6,31; коллагена II типа - 7,28-7,82; аггрекана - 134,46-231,52; гиалуронана - 87,69-470,4; VEGF - 839,40-1047,19; FGF - 44,20-95,25 диагностируют крайне тяжелую степень. Изобретение позволяет повысить объективность способа диагностики степени дисплазии тазобедренных суставов у детей при увеличении точности результатов исследования. 1 пр.

 

Изобретение относится к практической медицине, клинико-лабораторной диагностике и экспериментальной медицине. Способ может быть использован в детской ортопедии при диагностике степени дисплазии тазобедренных суставов.

Известны различные способы дифференциальной диагностики дисплазии тазобедренных суставов у детей, основанные на анализе клинических проявлений патологического процесса [Волков М.В. Ортопедия и травматология детского возраста. - М.: Медицина, 1983. С.130-135]; результатов рентгенологических исследований области тазобедренного сустава [Врожденный вывих бедра: учебно-методические указания для самостоятельной работы студентов / С.И.Киричек, А.В.Белецкий. Беларусь, 1999, 14 с.], ультрасонографии [патенты RU на изобретения №2088155, 2240729], эхографии [авторское свидетельство SU на изобретение №1657151].

Однако зачастую дифференциальная диагностика характера патологического процесса затруднена вследствие не всегда отчетливых жалоб больного, клинической картины, рентгенологических проявлений заболевания и др., что в значительной мере обусловлено медленным течением изменений в тазобедренном суставе. Вместе с тем точная диагностика дисплазии тазобедренного сустава имеет важное значение, так как она определяет тактику своевременных и адекватных лечебных мероприятий.

Наиболее близким аналогом к заявляемому изобретению является способ диагностики дисплазии тазобедренных суставов у детей и подростков, в частности осложнений врожденного вывиха бедра [патент RU на изобретение №2296337]. В способе анализируют результаты клинического обследования признаков заболевания и рентгенологического обследования пациентов и дополнительно в сыворотке крови исследуют липидный профиль - определяют содержание общего холестерола, холестерола липопротеидов низкой плотности (ХС-ЛПНП), холестерола липопротеидов очень низкой плотности (ХС-ЛПОНП) и триглицеридов. Рассчитывают интегральный показатель (ИП) по формуле:

При значении ИП 6,5 ед. и ниже диагностируют врожденный вывих бедра, осложненный коксартрозом, а при ИП 6,6 ед. и выше - врожденный вывих бедра, осложненный асептическим некрозом головки бедренной кости.

Однако определение липидного профиля не учитывает потенциал ангиогенеза и вовлеченность в патологический процесс костно-хрящевых компонентов тазобедренного сустава, а следовательно данный способ не отражает степень повреждения тазобедренного сустава. С помощью данного способа можно провести диагностику только осложнений в виде коксартроза и асептического некроза.

Задачей заявляемого изобретения является повышение объективности способа диагностики степени дисплазии тазобедренных суставов у детей при его простоте и увеличении точности результатов исследования.

Сущность заявляемого изобретения характеризуется тем, что в способе диагностики степени дисплазии тазобедренных суставов у детей осуществляют забор исследуемых материалов - венозной крови и мочи, готовят их образцы проб, исследуют полученные образцы проб методом иммуноферментного анализа ИФА, выполняют определение количественных значений концентраций коллагена I типа, аггрекана, гиалуронана, васкулоэндотелиального фактора роста VEGF, фибропластического фактора роста FGF в образце пробы крови и концентрации коллагена II типа в образце пробы мочи, и при значениях, нг/мл:

коллагена I типа в пределе 2,71-3,03; коллагена II типа-3,60-3,82; аггрекана - 79,17-84,35; гиалуронана - 17,31-24,11; VEGF - 326,68-360,29; FGF - 9,21-11,31 диагностируют легкую степень,

коллагена I типа в пределе 3,04-3,83; коллагена II типа - 3,83-6,22; аггрекана - 84,36-105,62; гиалуронана - 24,12-32,36; VEGF - 360,30-482,14; FGF - 11,32-19,44 диагностируют среднюю степень,

коллагена I типа в пределе 3,84-5,85; коллагена II типа - 6,23-7,27; аггрекана - 105,63-134,45; гиалуронана - 32,37-87,68; VEGF - 482,15-839,30; FGF - 19,45-44,19 диагностируют тяжелую степень,

коллагена I типа в пределе 5,86-6,31; коллагена II типа - 7,28-7,82; аггрекана - 134,46-231,52; гиалуронана - 87,69-470,4; VEGF - 839,40-1047,19; FGF - 44,20-95,25 диагностируют крайне тяжелую степень.

Технический результат заявляемого изобретения

Заявляемый способ диагностики в сравнении с известными технологиями позволяет более объективно и точно определить степень дисплазии тазобедренных суставов за счет использования совокупности маркеров и их взаимодействия между собой. Каждый из маркеров отражает состояние одного из компонентов сустава - костного, хрящевого, потенциала ангиогенеза, степени гипоксии. Состояние костного компонента сустава отражает количественное значение концентрации коллагена I типа, а хрящевого компонента сустава - коллагена II типа в совокупности с аггреканом и гиалуронаном. Аггрекан в комплексе с гиалуронаном характеризует состояние гиалинового хряща тазобедренных суставов. Определение ростовых факторов VEGF и FGF позволяет оценить потенциал ангиогенеза. Высокие концентрации VEGF и FGF свидетельствуют о наличии гипоксии тканей тазобедренных суставов. Сочетание описанных в данной заявке маркеров ранее не использовалось для вывода о степени дисплазии тазобедренных суставов. В этом отличие способа. Подобное ранжирование названного набора выбранных маркеров по степени выраженности изменений каждого из них также ранее не использовалось, поскольку не были известны (не были выявлены) до настоящей заявки интервалы значений маркеров, сложившихся и характерных для больных с дисплазией тазобедренных суставов и вошедших в основу выводов о диагностике степени патологического процесса в данном изобретении.

Способ техничен и технологичен с первой манипуляции до, практически, последней операции - обработки полученных данных, поскольку все манипуляции: забор крови, выбор и приготовление проб, воздействие реактивами на пробы - признаки технически осуществляемого действия. Предлагаемый способ диагностики технически прост в исполнении и малоинвазивен. Его использование исключает лучевую нагрузку на больного. Маркеры, принимаемые в нашем исследовании, стандартны, выпускаются рядом фирм и используются при диагностике ряда других заболеваний, а следовательно являются общедоступными. Методика выполнения способа диагностики не требует высокой квалификации лаборантов и может быть использована в поликлиниках и детских больницах, имеющих отделение лабораторной диагностики. Способ диагностики степени дисплазии тазобедренных суставов у детей осуществляют следующим образом.

Выполняют забор исследуемых материалов - венозной крови в количестве 1,5 мл при пункции локтевой вены в объеме 5 мл натощак в утренние часы и мочи в количестве 2 мл. Готовят образцы проб исследуемых материалов. Для этого с помощью центрифугирования получают сыворотку крови и разливают по 1 мл в эпиндорф сыворотки крови и мочи. Исследуют полученные образцы проб методом иммуноферментного анализа ИФА. Осуществляют определение количественных значений концентраций коллагена I типа, аггрекана, гиалуронана, васкулоэндотелиального фактора роста VEGF, фибропластического фактора роста FGF в образце пробы крови и концентрации коллагена II типа в образце пробы мочи с использованием тест-наборов для ИФА. Продолжительность выполнения исследования составляет порядка 2-х часов. При значениях коллагена I типа в пределе 2,71-3,03 нг/мл; коллагена II типа - 3,60-3,82 нг/мл; аггрекана - 79,17-84,35 нг/мл; гиалуронана - 17,31-24,11 нг/мл; VEGF - 326,68-360,29 нг/мл; FGF - 9,21-11,31 нг/мл - диагностируют легкую степень. При значениях коллагена I типа в пределе 3,04-3,83 нг/мл; коллагена II типа - 3,83-6,22 нг/мл; аггрекана - 84,36-105,62 нг/мл; гиалуронана - 24,12-32,36 нг/мл; VEGF - 360,30-482,14 нг/мл; FGF - 11,32-19,44 нг/мл диагностируют среднюю степень. При значениях коллагена I типа в пределе 3,84-5,85 нг/мл; коллагена II типа - 6,23-7,27 нг/мл; аггрекана - 105,63-134,45 нг/мл; гиалуронана - 32,37-87,68 нг/мл; VEGF - 482,15-839,30 нг/мл; FGF - 19,45-44,19 нг/мл диагностируют тяжелую степень. При значениях коллагена I типа в пределе 5,86-6,31 нг/мл; коллагена II типа - 7,28-7,82 нг/мл; аггрекана - 134,46-231,52 нг/мл; гиалуронана - 87,69-470,4 нг/мл; VEGF - 839,40-1047,19 нг/мл; FGF -44,20-95,25 нг/мл диагностируют крайне тяжелую степень.

Пример 1

Больной С., 7 месяцев, находился на обследовании в отделении ортопедии детского возраста. При клиническом осмотре было обнаружено: асимметрия ягодичных складок, ограничение разведения в тазобедренных суставах до 60°, избыточная внутренняя ротация.

Были проведены исследования крови и мочи по описанному в данной заявке способу с применением следующих тест-наборов: PG-ELISA (аггрекан) компании BioSource Europe S.A., Бельгия; Human VEGF-А Platinum ELISA (VEGF) компании Bioscience, США; Quantikine - Human FGF basic (PGF) компании R&D Systems, США; Serum CrossLaps (коллаген I типа) компании Nordic Bioscience Diagnostics, Дания; Hualuronic acid (гиалуронан) test kit компании Chugai Diagnostics Science Co, Япония; Urine CartiLaps ELISA (коллаген II типа) компании IDS Ltd, США. Концентрация коллагена I типа составила 4,49 нг/мл; коллагена II типа - 7,27 нг/мл; аггрекана - 116,70 нг/мл; гиалуронана - 87,58 нг/мл; VEGF - 828,30 нг/мл; FGF - 25,17 нг/мл.

Таким образом, полученные данные свидетельствовали о тяжелой степени дисплазии тазобедренных суставов с преимущественным повреждением хрящевых компонентов суставов. Диагноз был подтвержден при контрольном рентгенологическом исследовании области тазобедренных суставов, а именно на рентгенограммах отмечали: вывих в тазобедренных суставах, что соответствует тяжелой степени дисплазии тазобедренных суставов.

Способ диагностики степени дисплазии тазобедренных суставов у детей, характеризующийся тем, что осуществляют забор исследуемых материалов - венозной крови и мочи, готовят их образцы проб, исследуют полученные образцы проб методом иммуноферментного анализа ИФА, выполняют определение количественных значений концентраций коллагена I типа, аггрекана, гиалуронана, васкулоэндотелиального фактора роста VEGF, фибропластического фактора роста FGF в образце пробы крови и концентрации коллагена II типа в образце пробы мочи, и при значениях, нг/мл:
коллагена I типа в пределе 2,71-3,03; коллагена II типа - 3,60-3,82; аггрекана - 79,17-84,35; гиалуронана - 17,31-24,11; VEGF - 326,68-360,29; FGF - 9,21-11,31 диагностируют легкую степень,
коллагена I типа в пределе 3,04-3,83; коллагена II типа - 3,83-6,22; аггрекана - 84,36-105,62; гиалуронана - 24,12-32,36; VEGF - 360,30-482,14; FGF - 11,32-19,44 диагностируют среднюю степень,
коллагена I типа в пределе 3,84-5,85; коллагена II типа - 6,23-7,27; аггрекана - 105,63-134,45; гиалуронана - 32,37-87,68; VEGF - 482,15-839,30; FGF - 19,45-44,19 диагностируют тяжелую степень,
коллагена I типа в пределе 5,86-6,31; коллагена II типа - 7,28-7,82; аггрекана - 134,46-231,52; гиалуронана - 87,69-470,4; VEGF - 839,40-1047,19; FGF - 44,20-95,25 диагностируют крайне тяжелую степень.