Антигенсвязывающие молекулы, которые связывают egfr, кодирующие их векторы и их применение

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии и иммунологии. Предложены выделенные полинуклеотиды и полипептиды для связывания человеческого EGFR в составе антитела, вектор и клетка-хозяин для экспрессии антитела, способ получения анти-EGFR антитела или фрагмента антитела, анти-ERFR антитело и фрагмент антитела. Рассмотрены композиция, содержащая анти-EGFR антитело или его фрагмент, ее применение, а также применение антитела и его фрагмента для лечения расстройств, ассоциированных с EGFR. Кроме того, описан способ детекции присутствия EGFR в образце с помощью антитела по изобретению. Настоящее изобретение относится к гуманизированным вариантам антитела крысы ICR62 и, таким образом, может найти дальнейшее применение в терапии EGFR-опосредованных заболеваний. 30 н. и 55 з.п. ф-лы, 29 ил., 38 табл., 5 пр.

 

Текст описания приведен в факсимильном виде.

1. Выделенный полинуклеотид, кодирующий вариабельную область гуманизированной тяжелой цепи, которая специфично связывает человеческий EGFR, как часть гуманизированного антитела к EGFR, причем указанное антитело включает указанную вариабельную область гуманизированной тяжелой цепи и вариабельную область гуманизированной легкой цепи, где указанная вариабельная область тяжелой цепи включает
(а) участок 1, определяющий комплементарность, тяжелой цепи (CDR1), выбранный из группы, состоящей из: SEQ ID NO:53, SEQ ID NO:55, SEQ ID NO:57, SEQ ID NO:59, SEQ ID NO:61, SEQ ID NO:63, SEQ ID NO:65, SEQ ID NO:67, SEQ ID NO:69, SEQ ID NO:71, SEQ ID NO:73, SEQ ID NO:123 и SEQ ID NO:125; и
(б) CDR2 тяжелой цепи SEQ ID NO:79; и
(в) CDR3 тяжелой цепи SEQ ID NO:107; и
где вариабельная область указанной легкой цепи включает
(г) CDR1 легкой цепи SEQ ID NO:111 или SEQ ID NO:113, и
(д) CDR2 легкой цепи SEQ ID NO:115 и
(е) CDR3 легкой цепи SEQ ID NO:117
или их комбинацию.

2. Выделенный полинуклеотид по п.1, где указанный выделенный полинуклеотид включает
(а) последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:54, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:58, SEQ ID NO:60, SEQ ID NO:62, SEQ ID NO:64, SEQ ID NO:66, SEQ ID NO:68, SEQ ID NO:70, SEQ ID NO:72, SEQ ID NO:74, SEQ ID NO:122 и SEQ ID NO:124; и
(б) последовательность SEQ ID NO:80 и
(в) последовательность SEQ ID NO:108.

3. Выделенный полинуклеотид, кодирующий вариабельную область гуманизированной тяжелой цепи, которая специфично связывает человеческий EGFR, как часть гуманизированного антитела к EGFR, причем указанное антитело включает вариабельную область гуманизированной тяжелой цепи и вариабельную область гуманизированной легкой цепи, где указанный выделенный полинуклеотид включает последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:6; SEQ ID NO:8; SEQ ID NO:10; SEQ ID NO:12; SEQ ID NO:14; SEQ ID NO:16; SEQ ID NO:18; SEQ ID NO:20; SEQ ID NO:22; SEQ ID NO:24; SEQ ID NO:26; SEQ ID NO:28; SEQ ID NO:30; SEQ ID NO:32; SEQ ID NO:34; SEQ ID NO:36; SEQ ID NO:38; SEQ ID NO:40 и SEQ ID NO:120, и где указанная вариабельная область легкой цепи включает последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:43, SEQ ID NO:45, SEQ ID NO:49 и SEQ ID NO:51.

4. Выделенный полинуклеотид, кодирующий вариабельную область гуманизированной тяжелой цепи, которая специфично связывает человеческий EGFR, как часть гуманизированного антитела к EGFR, причем указанное антитело включает вариабельную область гуманизированной тяжелой цепи и вариабельную область гуманизированной легкой цепи, где указанная вариабельная область гуманизированной легкой цепи включает последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:5; SEQ ID NO:7; SEQ ID NO:9; SEQ ID NO:11; SEQ ID NO:13; SEQ ID NO:15; SEQ ID NO:17; SEQ ID NO:19; SEQ ID NO:21; SEQ ID NO:23; SEQ ID NO:25; SEQ ID NO:27; SEQ ID NO:29; SEQ ID NO:31; SEQ ID NO:33; SEQ ID NO:35; SEQ ID NO:37; SEQ ID NO:39 и SEQ ID NO:121, и где указанная вариабельная область легкой цепи включает последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:43, SEQ ID NO:45, SEQ ID NO:49 и SEQ ID NO:51.

5. Выделенный полинуклеотид по п.1, где указанная вариабельная область тяжелой цепи включает
(а) CDR1 тяжелой цепи, выбранный из группы, состоящей из SEQ ID NO:53, SEQ ID NO:59 и SEQ ID NO:65; и
(б) CDR2 тяжелой цепи SEQ ID NO:79; и
(с) CDR3 тяжелой цепи SEQ ID NO:107.

6. Выделенный полинуклеотид по п.5, где указанная вариабельная область тяжелой цепи включает
(а) CDR1 тяжелой цепи SEQ ID NO:53; и
(б) CDR2 тяжелой цепи SEQ ID NO:79; и
(с) CDR3 тяжелой цепи SEQ ID NO:107.

7. Выделенный полинуклеотид по п.5, где указанный выделенный полинуклеотид включает
(а) последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:54, SEQ ID NO:60 и SEQ ID NO:66; и
(б) последовательность SEQ ID NO:80; и
(с) последовательность SEQ ID NO:108.

8. Выделенный полинуклеотид по п.5, где указанный выделенный полинуклеотид включает последовательность
(а) SEQ ID NO:54; и
(б) SEQ ID NO:80; и
(с) SEQ ID NO:108.

9. Выделенный полинуклеотид по п.1, где указанное антитело включает константную область тяжелой цепи или ее фрагмент из видов, отличных от крысы.

10. Выделенный полинуклеотид, кодирующий вариабельную область гуманизированной легкой цепи, которая специфично связывает человеческий EGFR, как часть гуманизированпого антитела к EGFR, причем указанное антитело включает вариабельную область гуманизированной тяжелой цепи и вариабельную область гуманизированной легкой цепи, где указанная вариабельная область тяжелой цепи включает
(a) CDR1 тяжелой цепи, выбранный из группы, состоящей из: SEQ ID NO:53, SEQ ID NO:55, SEQ ID NO:57, SEQ ID NO:59, SEQ ID NO:61, SEQ ID NO:63, SEQ ID NO:65, SEQ ID NO:67, SEQ ID NO:69, SEQ ID NO:71, SEQ ID NO:73, SEQ ID NO:123 и SEQ ID NO:125; и
(б) CDR2 тяжелой цепи, выбранный из группы, состоящей из: SEQ ID NO:75, SEQ ID NO:79, SEQ ID NO:81, SEQ ID NO:83, SEQ ID NO:85, SEQ ID NO:87, SEQ ID NO:89, SEQ ID NO:127, SEQ ID NO:91, SEQ ID NO:93, SEQ ID NO:95, SEQ ID NO:97, SEQ ID NO:101, SEQ ID NO:103 и SEQ ID NO:105; и
(в) CDR3 тяжелой цепи SEQ ID NO:107; и
где вариабельная область указанной легкой цепи включает
(а) CDR1 легкой цепи SEQ ID NO:113; и
(б) CDR2 легкой цепи SEQ ID NO:115; и
(в) CDR3 легкой цепи SEQ ID NO:117.

11. Выделенный полинуклеотид по п.10, где указанный выделенный полинуклеотид включает последовательность
(а) SEQ ID NO:114; и
(б) SEQ ID NO:116 или SEQ ID NO:118; и
(в) SEQ ID NO:119.

12. Выделенный полинуклеотид по п.11, где указанный выделенный полинуклеотид включает последовательность
(а)SEQ ID NO:114; и
(б) SEQ ID NO:118; и
(в) SEQ ID NO:119.

13. Выделенный полинуклеотид, кодирующий вариабельную область гуманизированной легкой цепи, которая специфично связывает человеческий EGFR, как часть гуманизированного антитела к EGFR, причем указанное антитело включает вариабельную область гуманизированной тяжелой цепи и указанную вариабельную область гуманизированной легкой цепи, где указанный выделенный полинуклеотид включает последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:46, SEQ ID NO:50 и SEQ ID NO:52, и где указанная вариабельная область тяжелой цепи включает последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:1; SEQ ID NO:5; SEQ ID NO:7; SEQ ID NO:9; SEQ ID NO:11; SEQ ID NO:13; SEQ ID NO:15; SEQ ID NO:17; SEQ ID NO:19; SEQ ID NO:21; SEQ ID NO:23; SEQ ID NO:25; SEQ ID NO:27; SEQ ID NO:29; SEQ ID NO:31; SEQ ID NO:33; SEQ ID NO:35; SEQ ID NO:37; SEQ ID NO:39 и SEQ ID NO:121.

14. Выделенный полинуклеотид, кодирующий вариабельную область гуманизированной легкой цепи, которая специфично связывает человеческий EGFR, как часть гуманизированного антитела к EGFR, причем указанное антитело включает вариабельную область гуманизированной тяжелой цепи и указанную вариабельную область гуманизированной легкой цепи, где указанная вариабельная область легкой цепи включает последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:45, SEQ ID NO:49 и SEQ ID NO:51, и где указанная вариабельная область тяжелой цепи включает последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:1; SEQ ID NO:5; SEQ ID NO:7; SEQ ID NO:9; SEQ ID NO:11; SEQ ID NO:13; SEQ ID NO:15; SEQ ID NO:17; SEQ ID NO:19; SEQ ID NO:21; SEQ ID NO:23; SEQ ID NO:25; SEQ ID NO:27; SEQ ID NO:29; SEQ ID NO:31; SEQ ID NO:33; SEQ ID NO:35; SEQ ID NO:37; SEQ ID NO:39 и SEQ ID NO:121.

15. Выделенный полинуклеотид по п.10, где указанное антитело включает константную область легкой цепи или ее фрагмент из видов, отличных от крысы.

16. Выделенный полинуклеотид, кодирующий вариабельную область гуманизированной тяжелой цепи и вариабельную область гуманизированной легкой цепи, которые специфично связывают человеческий EGFR, как часть гуманизированного антитела к EGFR, где указанная вариабельная область тяжелой цепи включает
(a) CDR1 тяжелой цепи, выбранный из группы, состоящей из: SEQ ID NO:53, SEQ ID NO:55, SEQ ID NO:57, SEQ ID NO:59, SEQ ID NO:61, SEQ ID NO:63, SEQ ID NO:65, SEQ ID NO:67, SEQ ID NO:69, SEQ ID NO:71, SEQ ID NO:73, SEQ ID NO:123 и SEQ ID NO:125; и
(б) CDR2 тяжелой цепи, выбранный из группы, состоящей из: SEQ ID NO:75, SEQ ID NO:79, SEQ ID NO:81, SEQ ID NO:83, SEQ ID NO:85, SEQ ID NO:87, SEQ ID NO:89, SEQ ID NO:127, SEQ ID NO:91, SEQ ID NO:93, SEQ ID NO:95, SEQ ID NO:97, SEQ ID NO:99, SEQ ID NO:101, SEQ ID NO:103 и SEQ ID NO:105; и
(в) CDR3 тяжелой цепи является SEQ ID NO:107; и
где вариабельная область указанной легкой цепи включает
(а) CDR1 легкой цепи является SEQ ID NO:113, и
(б) CDR2 легкой цепи является SEQ ID NO:115 и
(в) CDR3 легкой цепи является SEQ ID NO:117.

17. Выделенный полинуклеотид по п.16, где указанная вариабельная область тяжелой цепи включает
(а) CDR1 тяжелой цепи, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:53, SEQ ID NO:59 и SEQ ID NO:65; и
(б) CDR2 тяжелой цепи, выбранную из группы, состоящей из: SEQ ID NO:79, SEQ ID NO:91 и SEQ ID NO:97; и
(в) CDR3 тяжелой цепи SEQ ID NO:107; и
где указанная вариабельная область легкой цепи включает
(г) CDR1 легкой цепи SEQ ID NO:113; и
(д) CDR2 легкой цепи SEQ ID NO:115; и
(е) CDR3 легкой цепи SEQ ID NO:117.

18. Выделенный полинуклеотид по п.17, где указанная вариабельная область тяжелой цепи включает
(а) CDR1 тяжелой цепи SEQ ID NO:53; и
(б) CDR2 тяжелой цепи SEQ ID NO:79; и
(в) CDR3 тяжелой цепи SEQ ID NO:107;
где указанная вариабельная область легкой цепи включает
(г) CDR1 легкой цепи SEQ ID NO:113; и
(д) CDR2 легкой цепи SEQ ID NO:115; и
(е) CDR3 легкой цепи SEQ ID NO:117.

19. Выделенный полинуклеотид по п.17, где указанная вариабельная область тяжелой цепи включает
(а) CDR1 тяжелой цепи SEQ ID NO:59; и
(б) CDR2 тяжелой цепи SEQ ID NO:91; и
(в) CDR3 тяжелой цепи SEQ ID NO:107;
где указанная вариабельная область легкой цепи включает
(г) CDR1 легкой цепи SEQ ID NO:113; и
(д) CDR2 легкой цепи SEQ ID NO:115; и
(е) CDR3 легкой цепи SEQ ID NO:117.

20. Выделенный полинуклеотид по п.17, где указанная вариабельная область тяжелой цепи включает
(а) CDR1 тяжелой цепи SEQ ID NO:65; и
(б) CDR2 тяжелой цепи SEQ ID NO:97; и
(в) CDR3 тяжелой цепи SEQ ID NO:107; и
где указанная вариабельная область легкой цепи включает
(г) CDR1 легкой цепи SEQ ID NO:113; и
(д) CDR2 легкой цепи SEQ ID NO:115; и
(e) CDR3 легкой цепи SEQ ID NO:117.

21. Выделенный полинуклеотид по п.17, где указанный полинуклеотид включает
(а) SEQ ID NO:54, SEQ ID NO:60 или SEQ ID NO:66; и
(б) SEQ ID NO:80, SEQ ID NO:92 или SEQ ID NO:98; и
(в) SEQ ID NO:108; и
(г) SEQ ID NO:114; и
(д) SEQ ID NO:116 или SEQ ID NO:118; и
(e) SEQ ID NO:119.

22. Выделенный полинуклеотид по п.17, где указанный полинуклеотид включает
(а) SEQ ID NO:54; и
(б) SEQ ID NO:80; и
(в) SEQ ID NO:108; и
(г) SEQ ID NO:114; и
(д) SEQ ID NO:118; и
(e) SEQ ID NO:119.

23. Выделенный полинуклеотид по п.17, где указанный полипуклеотид включает
(а) SEQ ID NO:60; и
(б) SEQ ID NO:92; и
(в) SEQ ID NO:108; и
(г) SEQ ID NO:114; и
(д) SEQ ID NO:118; и
(e) SEQ ID NO:119.

24. Выделенный полинуклеотид по п.17, где указанный полинуклеотид включает
(а) SEQ ID NO:66; и
(б) SEQ ID NO:98; и
(в) SEQ ID NO:108; и
(г) SEQ ID NO:114; и
(д) SEQ ID NO:118; и
(e) SEQ ID NO:119.

25. Выделенный полинуклеотид, кодирующий вариабельную область гуманизированной тяжелой цепи и вариабельную область гуманизированной легкой цепи, которые специфично связывают человеческий EGFR, как часть гуманизированного антитела к EGFR,
где указанная вариабельная область тяжелой цепи включает
(a) CDR1 тяжелой цепи, выбранный из группы, состоящей из: SEQ ID NO:53, SEQ ID NO:55, SEQ ID NO:57, SEQ ID NO:59, SEQ ID NO:61, SEQ ID NO:63, SEQ ID NO:65, SEQ ID NO:67, SEQ ID NO:69, SEQ ID NO:71, SEQ ID NO:73, SEQ ID NO:123 и SEQ ID NO:125; и
(б) CDR2 тяжелой цепи SEQ ID NO:79; и
(в) CDR3 тяжелой цепи SEQ ID NO:107; и
где вариабельная область указанной легкой цепи включает
(а) CDR1 легкой цепи SEQ ID NO:111 или SEQ ID NO:113; и
(б) CDR2 легкой цепи SEQ ID NO:115; и
(в) CDR3 легкой цепи SEQ ID NO:117.

26. Выделенный полинуклеотид по,п.25, где указанная вариабельная область тяжелой цепи включает
(а) CDR1 тяжелой цепи, выбранный из группы, состоящей из SEQ ID NO:53, SEQ ID NO:59 и SEQ ID NO:65; и
(б) CDR2 тяжелой цепи SEQ ID NO:79; и
(в) CDR3 тяжелой цепи SEQ ID NO:107;
где вариабельная область указанной легкой цепи включает
(а) CDR1 легкой цепи SEQ ID NO:111 или SEQ ID NO:113; и
(б) CDR2 легкой цепи SEQ ID NO:115; и
(в) CDR3 легкой цепи SEQ ID NO:117.

27. Выделенный полинуклеотид по п.26, где указанный полинуклеотид включает
(а) SEQ ID NO:54, SEQ ID NO:60 или SEQ ID NO:66; и
(б) SEQ ID NO:80; и
(в) SEQ ID NO:108;
(г) SEQ ID NO:112 или SEQ ID NO:114; и
(д) SEQ ID NO:116 или SEQ ID NO:118; и
(е) SEQ ID NO:119.

28. Выделенный полинуклеотид по любому из пп.1-27, где указанная вариабельная область тяжелой цепи содержит последовательность SEQ ID NO:15, и где указанная вариабельная область легкой цепи содержит SEQ ID NO:45.

29. Выделенный полинуклеотид по п.28, где указанный полинуклеотид включает SEQ ID NO:16 и SEQ ID NO:46.

30. Вектор экспрессии, включающий выделенный полинуклеотид по любому из пп.1-29.

31. Вектор экспрессии, включающий выделенный полинуклеотид по любому из пп.1-9 и выделенный полинуклеотид по любому из пп.10-15.

32. Вектор экспрессии, включающий выделенный полипуклеотид по любому из пп.16-29.

33. Композиция для экспрессии антитела, которое связывает человеческий EGFR, включающая выделенный полинуклеотид по любому из пп.1-9 и выделенный полинуклеотид по любому из пп.10-15 в эффективном количестве для экспрессии указанного антитела.

34. Клетка-хозяин для экспрессии антитела, которое связывает человеческий EGFR, включающая выделенный полинуклеотид по любому из пп.1-29.

35. Клетка-хозяин для экспрессии антитела, которое связывает человеческий EGFR, включающая вектор экспрессии по п.30.

36. Клетка-хозяин для экспрессии антитела, которое связывает человеческий EGFR, включающая композицию по п.33.

37. Клетка-хозяин по п.34, включающая первый выделенный полинуклеотид и второй выделенный полинуклеотид, где указанный первый выделенный полинуклеотид кодирует
(а) CDR1 тяжелой цепи, выбранный из группы, состоящей из SEQ ID NO:53, SEQ ID NO:59 и SEQ ID NO:65; и
(б) CDR2 тяжелой цепи SEQ ID NO:79; и
(в) CDR3 тяжелой цепи SEQ ID NO:107,
где указанный выделенный второй полинуклеотид кодирует
(а) CDR1 легкой цепи SEQ ID NO:113; и
(б) CDR2 легкой цепи SEQ ID NO:115; и
(в) CDR3 легкой цепи SEQ ID NO:117.

38. Клетка-хозяин по п.34, включающая первый выделенный полинуклеотид и второй выделенный полинуклеотид, где указанный выделенный первый полинуклеотид кодирует
(а) CDR1 тяжелой цепи SEQ ID NO:53; и
(б) CDR2 тяжелой цепи SEQ ID NO:79; и
(в) CDR3 тяжелой цепи SEQ ID NO:107;
где указанный выделенный второй полинуклеотид кодирует
(а) CDR1 легкой цепи SEQ ID NO:113; и
(б) CDR2 легкой цепи SEQ ID NO:115; и
(в) CDR3 легкой цепи SEQ ID NO:117.

39. Клетка-хозяин по п.34, включающая первый выделенный полинуклеотид и второй выделенный полинуклеотид, где указанный первый выделенный полинуклеотид включает
(а) последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:54, SEQ ID NO:60 и SEQ ID NO:66; и
(б) последовательность SEQ ID NO:80; и
(в) последовательность SEQ ID NO:108; и
где указанный второй выделенный полинуклеотид включает последовательность
(а) SEQ ID NO:114; и
(б) SEQ ID NO:116 или SEQ ID NO:118; и
(в) SEQ ID NO:119.

40. Клетка-хозяин по п.34, включающая первый выделенный полинуклеотид и второй выделенный полинуклеотид, где указанный первый выделенный полинуклеотид включает последовательность
(а) SEQ ID NO:54; и
(б) SEQ ID NO:80; и
(в) SEQ ID NO:108; и
где указанный второй выделенный полинуклеотид включает последовательность
(а) SEQ ID NO:114; и
(б) SEQ ID NO:118; и
(в) SEQ ID NO:119.

41. Клетка-хозяин по п.34, включающая первый выделенный полинуклеотид и второй выделенный полинуклеотид,
где указанный первый выделенный полинуклеотид включает последовательность SEQ ID NO:16; и
где указанный второй выделенный полинуклеотид включает последовательность SEQ ID NO:46.

42. Клетка-хозяин по п.34, включающая первый выделенный полинуклеотид и второй выделенный полинуклеотид,
где указанный первый выделенный полинуклеотид кодирует полипептид SEQ ID NO:15; и
где указанный второй выделенный полинуклеотид кодирует полипептид SEQ ID NO:45.

43. Способ получения антитела, которое способно конкурировать с крысиным антителом ICR62 за связывание с человеческим EGFR, и причем указанное антитело является химерным, который заключается в
(а) культивировании клетки-хозяина по п.34 в среде в условиях, обеспечивающих экспрессию указанного полинуклеотида, и
(б) выделение указанного антитела.

44. Выделенный полипептид для связывания человеческого EGFR, как часть анти-EGFR антитела, кодируемый полинуклеотидом по пп.1-29.

45. Антитело, которое связывает EGFR, включающее первый выделенный полипептид, кодируемый полинуклеотидом по любому из пп.1-9, и второй выделенный полипептид, кодируемый полинуклеотидом по любому из пп.10-15.

46. Антитело по п.45, где указанное антитело включает первый полипептид, содержащий последовательность SEQ ID NO:15, и второй полипептид, содержащий последовательность SEQ ID NO:45.

47. Антитело по п.45, где указанное антитело включает первый полипептид и второй полипептид,
где указанный первый полипептид включает последовательность:
(а) CDR1 тяжелой цепи, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:53, SEQ ID NO:59 и SEQ ID NO:65; и
(б) CDR2 тяжелой цепи SEQ ID NO:79; и
(в) CDR3 тяжелой цепи SEQ ID NO:107,
где указанный второй полипептид включает последовательность
(г) CDR1 легкой цепи SEQ ID NO:113; и
(д) CDR2 легкой цепи SEQ ID NO:115; и
(е) CDR3 легкой цепи SEQ ID NO:117.

48. Антитело по п.47,
где указанный первый полипептид включает последовательность
(а) CDR1 тяжелой цепи SEQ ID NO:53; и
(б) CDR2 тяжелой цепи SEQ ID NO:79; и
(в) CDR3 тяжелой цепи SEQ ID NO:107, и
где указанный второй полипептид включает последовательность
(г) CDR1 легкой цепи SEQ ID NO:113; и
(д) CDR2 легкой цепи SEQ ID NO:115; и
(е) CDR3 легкой цепи SEQ ID NO:117.

49. Антитело, которое специфично связывает EGFR, где указанное антитело включает первый полипептид и второй полипептид и Fc-участок,
где указанный первый полипептид включает последовательность
(а) CDR1 тяжелой цепи, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:53, SEQ ID NO:55, SEQ ID NO:57, SEQ ID NO:59, SEQ ID NO:61, SEQ ID NO:63, SEQ ID NO:65, SEQ ID NO:67, SEQ ID NO:69, SEQ ID NO:71, SEQ ID NO:73, SEQ ID NO:123 и SEQ ID NO:125; и
(б) CDR2 тяжелой цепи, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:75, SEQ ID NO:79, SEQ ID NO:81, SEQ ID NO:83, SEQ ID NO:85, SEQ ID NO:87, SEQ ID NO:89, SEQ ID NO:127, SEQ ID NO:91, SEQ ID NO:93, SEQ ID NO:95, SEQ ID NO:97, SEQ ID NO:99, SEQ ID NO:101, SEQ ID NO:103 и SEQ ID NO:105; и
(в) CDR3 тяжелой цепи SEQ ID NO:107,
где указанный второй полипептид включает последовательность
(г) CDR1 легкой цепи SEQ ID NO:113; и
(д) CDR2 легкой цепи SEQ ID NO:115; и
(е) CDR3 легкой цепи SEQ ID NO:117.

50. Антитело по п.49,
где указанный первый полипептид включает последовательность
(а) CDR1 тяжелой цепи, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:53, SEQ ID NO:59 и SEQ ID NO:65; и
(б) CDR2 тяжелой цепи, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:79, SEQ ID NO:91 и SEQ ID NO:97; и
(в) CDR3 тяжелой цепи SEQ ID NO:107, и
где указанный второй полипептид включает последовательность
(г) CDR1 легкой цепи SEQ ID NO:113; и
(д) CDR2 легкой цепи SEQ ID NO:115; и
(e) CDR3 легкой цепи SEQ ID NO:117.

51. Антитело по п.50,
где указанный первый полипептид включает последовательность:
(а) CDR1 тяжелой цепи SEQ ID NO:53; и
(б) CDR2 тяжелой цепи SEQ ID NO:79; и
(в) CDR3 тяжелой цепи SEQ ID NO:107; и
где указанный второй полипептид включает последовательность:
(г) CDR1 легкой цепи SEQ ID NO:113; и
(д) CDR2 легкой цепи SEQ ID NO:115; и
(e) CDR3 легкой цепи SEQ ID NO:117.

52. Антитело по п.50,
где указанный первый полипептид включает последовательность:
(а) CDR1 тяжелой цепи SEQ ID NO:59; и
(б) CDR2 тяжелой цепи SEQ ID NO:91; и
(в) CDR3 тяжелой цепи SEQ ID NO:107; и
где указанный второй полипептид включает последовательность:
(г) CDR1 легкой цепи SEQ ID NO:113; и
(д) CDR2 легкой цепи SEQ ID NO:115; и
(e) CDR3 легкой цепи SEQ ID NO:117.

53. Антитело по п.50,
где указанный первый полипептид включает последовательность:
(а) CDR1 тяжелой цепи SEQ ID NO:65; и
(б) CDR2 тяжелой цепи SEQ ID NO:97; и
(в) CDR3 тяжелой цепи SEQ ID NO:107; и
где указанный второй полипептид включает последовательность:
(г) CDR1 легкой цепи SEQ ID NO:113; и
(д) CDR2 легкой цепи SEQ ID NO:115; и
(e) CDR3 легкой цепи SEQ ID NO:117.

54. Антитело по любому из пп.50-53, где указанное антитело включает первый полипептид и второй полипептид,
где указанный первый полипептид кодируется полинуклеотидом, включающим последовательность
(а) SEQ ID NO:54, SEQ ID NO:60 или SEQ ID NO:66; и
(б) SEQ ID NO:80, SEQ ID NO:92 или SEQ ID NO:98; и
(в) SEQ ID NO:108,
где указанный второй полипептид кодируется полинуклеотидом, включающим последовательность
(г) SEQ ID NO:114; и
(д) SEQ ID NO:116 или SEQ ID NO:118; и
(e) SEQ ID NO:119.

55. Антитело по п.54, где указанный первый полипептид кодируется полинуклеотидом, включающим последовательность
(а) SEQ ID NO:54; и
(б) SEQ ID NO:80; и
(в) SEQ ID NO:108,
где указанный второй полипептид кодируется полинуклеотидом, включающим последовательность
(а) SEQ ID NO:114; и
(б) SEQ ID NO:118; и
(в) SEQ ID NO:119.

56. Антитело по п.54, где указанный первый полипептид кодируется полинуклеотидом, включающим последовательность
(а) SEQ ID NO:60; и
(б) SEQ ID NO:92; и
(в) SEQ ID NO:108,
где указанный второй полипептид кодируется полинуклеотидом, включающим последовательность
(a) SEQ ID NO:114; и
(б) SEQ ID NO:118; и
(в)SEQ ID NO:119.

57. Антитело по п.54, где указанный первый полипептид кодируется полинуклеотидом, включающим последовательность
(а) SEQ ID NO:66; и
(б) SEQ ID NO:98; и
(в) SEQ ID NO:108,
где указанный второй полипептид кодируется полинуклеотидом, включающим последовательность
(а) SEQ ID NO:114; и
(б) SEQ ID NO:118; и
(в) SEQ ID NO:119.

58. Антитело, которое специфично связывает EGFR, где указанное антитело включает первый полипептид и второй полипептид и Fc-участок,
где указанный первый полипептид включает последовательность
(a) CDR1 тяжелой цепи, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:53, SEQ ID NO:55, SEQ ID NO:57, SEQ ID NO:59, SEQ ID NO:61, SEQ ID NO:63, SEQ ID NO:65, SEQ ID NO:67, SEQ ID NO:69, SEQ ID NO:71, SEQ ID NO:73, SEQ ID NO:123 и SEQ ID NO:125; и
(б) CDR2 тяжелой цепи SEQ ID NO:79 и
(в) CDR3 тяжелой цепи SEQ ID NO:107,
где указанный второй полипептид включает последовательность
(г) CDR1 легкой цепи SEQ ID NO:111 или SEQ ID NO:113; и
(д) CDR2 легкой цепи SEQ ID NO:115; и
(е) CDR3 легкой цепи SEQ ID NO:117.

59. Антитело по п.58,
где указанный первый полипептид включает последовательность
(а) CDR1 тяжелой цепи, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:53, SEQ ID NO:59 и SEQ ID NO:65; и
(б) CDR2 тяжелой цепи SEQ ID NO:79 и
(в) CDR3 тяжелой цепи SEQ ID NO:107,
где указанный второй полипептид включает последовательность
(г) CDR1 легкой цепи SEQ ID NO:111 или SEQ ID NO:113; и
(д) CDR2 легкой цепи SEQ ID NO:115; и
(е) CDR3 легкой цепи SEQ ID NO:117.

60. Антитело по п.59, где указанное антитело включает первый полипептид и второй полипептид,
где указанный первым полипептид кодируется полинуклеотидом, включающим последовательность
(а) SEQ ID NO:54, SEQ ID NO:60 или SEQ ID NO:66; и
(б) SEQ ID NO:80; и
(в) SEQ ID NO:108,
где указанный второй полипептид кодируется полинуклеотидом, включающим последовательность:
(г) SEQ ID NO:112 или SEQ ID NO:114; и
(д) SEQ ID NO:116 или SEQ ID NO:118; и
(е) SEQ ID NO:119.

61. Антитело, которое специфично связывает EGFR, где указанное антитело включает первый полипептид и второй полипептид и Fc-участок, где указанный первый полипептид включает последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:7, SEQ ID NO:9, SEQ ID NO:11, SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:15, SEQ ID NO:17, SEQ ID NO:19, SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:23, SEQ ID NO:25, SEQ ID NO:27, SEQ ID NO:29, SEQ ID NO:31, SEQ ID NO:33, SEQ ID NO:35, SEQ ID NO:37, SEQ ID NO:39 и SEQ ID NO:121; и где указанный второй полипептид включает последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:43, SEQ ID NO:45, SEQ ID NO:49 и SEQ ID NO:51.

62. Антитело, которое специфично связывает EGFR, где указанное антитело включает первый полипептид и второй полипептид и Fc-участок, где указанный первый полипептид включает SEQ ID NO:1; и где указанный второй полипептид включает последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:45, SEQ ID NO:49 и SEQ ID NO:51.

63. Антитело по любому из пп.49-61, где указанное антитело содержит первый полипептид, включающий последовательность SEQ ID NO:15, и второй полипептид, включающий последовательность SEQ ID NO:45.

64. Антитело по п.63, где указанный первый полипептид кодируется полинуклеотидом, включающим последовательность SEQ ID NO:16, и второй полипептид кодируется полинуклеотидом, включающим последовательность SEQ ID NO:46.

65. Антитело по любому из пп.49-64, причем указанный Fc-участок представляет собой человеческий Fc-участок.

66. Антитело по п.65, причем указанное антитело подвергнуто гликоинженерингу с целью получения измененной структуры олигосахаридов на Fc-участке.

67. Антитело по п.66, причем указанный Fc-участок имеет уменьшенное число остатков фукозы по сравнению с негликоинженерным антителом.

68. Антитело по п.67, в котором по меньшей мере 70% олигосахаридов на Fc-участке являются нефукозилированными.

69. Антитело по любому из пп.49-68, где указанное антитело является гуманизированным антителом.

70. Способ детекции in vivo или in vitro присутствия EGFR в образце, заключающийся в:
(а) контактировании тестируемого образца, необязательно с контрольным образом, с антителом по любому из пп.49-69 в условиях, обеспечивающих формирование комплекса между антителом и EGFR и
(б) детекции указанных комплексов антитело-EGFR.

71. Клетка-хозяин для экспрессии полученного в результате гликоинженеринга антитела, которое специфично связывает человеческий EGFR, где клетка-хозяин экспрессирует антитело по п.65 и по меньшей мере одну нуклеиновую кислоту, кодирующую полипептид, имеющий активность β(1,4)-N-ацетилгликозаминилтрансферазы III, в количестве, достаточном для модификации олигосахаридов на Fc-участке антитела.

72. Клетка-хозяин по п.71, в которой указанное антитело, продуцируемое указанной клеткой-хозяином, проявляет повышенную аффинность связывания Fc-рецептора в результате указанной модификации.

73. Клетка-хозяин по п.71, в которой указанное антитело, продуцируемое указанной клеткой-хозяином, проявляет повышенную эффекторную функцию в результате указанной модификации.

74. Клетка-хозяин по п.73, в которой указанная повышенная эффекторная функция представляет собой повышенную Fc-опосредованную клеточную цитотоксичность.

75. Фармацевтическая композиция для связывания человеческого EGFR, включающая эффективное количество антитела по любому из пп.49-69.

76. Применение фармацевтической композиции по п.75 для лечения связанного с EGFR нарушения.

77. Применение фармацевтической композиции по п.75 для лечения или диагностики связанного со сверхэкспрессией EGFR нарушения.

78. Применение фармацевтической композиции по п.75 для лечения пролиферации клеток, которую лечат блокированием EGFR-опосредованной передачи сигнала.

79. Применение антитела по любому из пп.49-69 для получения лекарственного средства для лечения или профилактики рака, характеризующегося экспрессией EGFR.

80. Применение по п.79, в котором указанное антитело используется в терапевтически эффективном количестве, которое составляет от приблизительно 1,0 мг/кг до приблизительно 15 мг/кг.

81. Применение антитела по любому из пп.46-69 для лечения связанного с EGFR нарушения, причем указанное лечение дает в результате сывороточные концентрации указанного антитела от приблизительно 1 до приблизительно 100 мкг/мл в течение по меньшей мере 4 недель, и при этом указанное лечение не приводит к клинически значимому уровню токсичности у указанного млекопитающего.

82. Антитело по любому из пп.49-69 для применения в качестве лекарственного средства для лечения связанного с EGFR нарушения.

83. Антитело по п.82, где связанное с EGFR нарушение характеризуется сверхэкспрессией EGFR.

84. Антитело по п.82, где связанное с EGFR нарушение представляет собой рак.

85. Антитело по п.82, в котором рак выбирают из группы, состоящей из рака молочной железы, рака мочевого пузыря, рака головы и шеи, рака кожи, рака поджелудочной железы, рака легкого, рака яичников, рака толстой кишки, рака простаты, рака почки и рака головного мозга.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу продукции требуемого полипептида (варианты), способу получения фармацевтической композиции, клетке СНО для получения требуемого белка, клетке СНО-реципиенту ДНК, кодирующей требуемый полипептид, способу продукции требуемого полипептида.

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу получения клетки СНО, способной продуцировать желаемый полипептид с высоким выходом, клетке, полученной данным способом, способу получения желаемого полипептида, способу количественного увеличения продукции полипептида клеткой СНО с сильной экспрессией переносчика таурина.

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано в фармацевтической промышленности. .

Антитела // 2482131
Изобретение относится к антителам и их производным, индуцирующим апоптоз за счет присоединения к гликопротеиновому лиганду-1 Р-селектина (PSGL-1) на активированных Т-клетках.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к экспрессионным конструкциям, и может быть использовано для экспрессии иммуноглобулина. .

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению миелоподобных клеток, и может быть использовано в медицине. .

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к полипептиду и его гомодимеру, которые обладают агонистической активностью в отношении рецептора гормона роста, молекуле нуклеиновой кислоты, их кодирующей, вектору, который включает данную нуклеиновую кислоту, клетке для экспрессии данного полипептида, фармацевтической композиции и способу с применением вышеуказанных полипептидов для лечения дефицита гормона роста.

Изобретение относится к области биотехнологии. .

Изобретение относится к иммунологии. .

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к полипептидам и составу для профилактики или лечения гипертрофии миокарда, применению и способам получения указанных полипептидов.

Изобретение относится к терапевтическим композициям, которые содержат анти-CD20 антитела человека или их антиген-связывающие фрагменты по настоящему изобретению. .
Наверх