Материал заменителя костной ткани

Изобретение относится к медицине. Описан двухфазный материал заменителя костной ткани на основе фосфата кальция / гидроксиапатита (САР/НАР), включающий ядро из спеченного CAP и как минимум один равномерный и закрытый эпитаксически нарастающий слой нанокристаллического НАР, нанесенный сверху на ядро из спеченного CAP, причем эпитаксически нарастающие нанокристаллы имеют такой же размер и морфологию, что и у минерала костей человека, то есть длину от 30 до 46 нм и ширину от 14 до 22 нм. Описан также способ получения материала заменителя костной ткани на основе САР/НАР, включающий этапы: а) изготовления ядра из спеченного материала CAP, b) погружения ядра из спеченного материала CAP в водный раствор при температуре от 10°С до 50°С для запуска процесса преобразования CAP в НАР, при помощи которого на поверхности ядра из спеченного материала CAP образуется равномерный и закрытый эпитаксически нарастающий слой нанокристаллического гидроксиапатита, причем эпитаксически нарастающие нанокристаллы имеют такие же размер и морфологию, что и у минерала костей человека, с) прекращения преобразования путем отделения твердого материала от водного раствора при наличии равномерного и закрытого покрытия из как минимум одного нанокристаллического слоя НАР, но до полного завершения процесса преобразования, d) необязательной стерилизации отделенного материала с этапа с), и применения вышеупомянутого материала заменителя костной ткани в качестве имплантата или протеза для остеогенеза, регенерации костей, восстановления костей и/или реплантации костей в месте повреждения у человека или животного. 4 н. и 11 з.п. ф-лы, 3 табл., 6 пр.

 

Изобретение касается нового двухфазного материала заменителя костной ткани с двухслойной структурой на основе фосфата кальция/гидроксиапатита (САР/НАР), способа получения такого материала и его применения в качестве имплантата или протеза для поддержки остеогенеза, регенерации костей, восстановления костей и/или реплантации костей в месте повреждения у человека или животного.

Дефекты в костной структуре возникают в различных обстоятельствах, таких как травма, болезнь и хирургическая операция, и по-прежнему существует потребность в эффективном устранении дефектов костей в различных областях хирургии.

Многочисленные природные и синтетические материалы и композиции применяются для стимуляции заживления в месте повреждения кости. Общеизвестным природным остеокондуктивным материалом заменителя костной ткани, способствующим росту костей при периодонтальных и челюстно-лицевых костных повреждениях является Geistlich Bio-Oss®, выпускаемый на рынок компанией Geistlich Pharma AG. Этот материал производится из природной кости с применением способа, описанного в Патенте США №5167961, позволяющего сохранять трабекулярную архитектуру и нанокристаллическую структуру природной кости и в результате обеспечивающего отличный остеокондуктивный матрикс, который не поддается или очень медленно поддается резорбции.

Системы трикальцийфосфата/гидроксиапатита (ТСР/НАР) и их применение в качестве материалов заменителя костной ткани описываются, например, в патенте US-6,338,752, в котором раскрывается способ получения двухфазного цемента α-ТСР/НАР путем нагревания порошковой смеси фосфата аммония и НАР при 1200-1500°С.

В Европейском патенте ЕР-285826 описывается способ получения слоя НАР на металлических и неметаллических телах для имплантатов путем нанесения слоя α-ТСР и полного преобразования слоя α-ТСР в НАР путем реакции с водой при рН от 2 до 7 при 80-100°С.Полученным продуктом является металлическое или неметаллическое тело, покрытое слоем НАР.

В документе WO 97/41273 описывается способ покрытия подложки, в частности гидроксиапатита (НАР) или других фосфатов кальция (CAP), слоем карбонизированного гидроксиапатита, то есть гидроксиапатита, в котором фосфатные и/или гидроксильные ионы частично заменены бикарбонатными ионами, при помощи процесса, включающего (а) погружение подложки в раствор с рН от 6,8 до 8,0, содержащий ионы кальция, фосфатные ионы и бикарбонатные ионы при температуре ниже 50°С, (b) нагревание части раствора, контактирующей с подложкой, до температуры от 50 до 80°С до достижения уровня рН более 8, (с) поддержание подложки в контакте со щелочным раствором, полученным на этапе (b) для образования карбонизированного гидроксиапатитного покрытия и (d) вынимание подложки из раствора и высушивание покрытия. В указанном источнике описывается, что бикарбонатные ионы действуют как ингибиторы роста гидроксиапатитных кристаллов, и в результате образуются нестехиометрические кристаллы, имеющие дефекты и довольно малые размеры, то есть длиной 10-40 нм и шириной 3-10 нм (см. стр.7, строки 1-7).

Компоненты систем фосфата кальция/гидроксиапатита (САР/НАР), в частности систем ТСР/НАР, отличаются по термодинамической устойчивости.

Из-за этого различия при имплантации систем САР/НАР в организм млекопитающего, в частности человека, растворимость TCP и других фосфатов кальция в жидкости организма выше, чем растворимость НАР. Разница в растворимости между фосфатами кальция и НАР вызывает разрушение неупорядоченной суперструктуры системы САР/НАР, поскольку более растворимое соединение CAP (например, TCP) удаляется быстрее, чем НАР. Спеченная взаимосвязь между CAP и НАР, возникающая при высоких температурах, также в значительной степени способствует повышению растворимости устройства в физиологической среде. В ускоренном in-vivo распаде таких керамических соединений доминируют два разных типа реакции: химическое растворение и биологическая резорбция клетками. Оба процесса вызывают растворение керамического материала, которое к тому же вызывает местное перенасыщение ионами кальция, при котором высвобождается большее количество ионов кальция, чем количество адсорбируемых ионов кальция. Исчезает природное равновесие ионов кальция, как во внеклеточном матриксе, так и в ткани, окружающей имплантат. Местное нарушение природного кальциевого равновесия, выражающееся в перенасыщении ионами кальция, приводит к повышенной активности остеокластов и, таким образом, к ускоренной неконтролируемой резорбции керамического материала и риску неблагоприятных воспалительных реакций, в частности, при использовании большого количества синтетического материала заменителя костной ткани.

Когда материал заменителя костной ткани Geistlich Bio-Oss® имплантируется в тело человека, это практически не влияет на природное кальциевое равновесие, и концентрация ионов кальция на поверхности материала и в пределах его локального окружения остается почти неизменной. Таким образом, биологическая резорбция материала не происходит или происходит с очень низкой скоростью без риска неблагоприятных воспалительных реакций.

Цель данного изобретения состоит в обеспечении материала заменителя костной ткани на основе фосфата кальция/гидроксиапатита (САР/НАР), который, подобно материалу заменителя костной ткани Geistlich Bio-Oss®, после установки in vivo обеспечивает возможность концентрации ионов кальция на поверхности материала и в пределах его локального окружения для того, чтобы оставаться почти неизменным и, таким образом, не приводить к повышенной активности остеокластов.

Действительно, природное кальциевое равновесие, необходимое для оптимальной регенерации костей, не должно нарушаться и разрушаться. Кроме того, природное равновесие концентрации кальция должно поддерживаться в течение длительного периода материалом заменителя костной ткани до завершения процесса регенерации. Когда эти условия выполняются, не происходит повышения активности остеокластов, а значит, не возникает риска неблагоприятных воспалительных реакций.

Было обнаружено, что вышеуказанная цель достигается благодаря новому двухфазному нанокристаллическому материалу заменителя костной ткани на основе САР/НАР с точно определенной биомиметической двухслойной структурой, обеспечиваемой при описанных авторами конкретных условиях.

Действительно, как показывают наблюдения при помощи флуоресцентной световой микроскопии этого нового двухфазного нанокристаллического материала заменителя костной ткани на основе САР/НАР, имплантированного в тело млекопитающего, не происходит заметного повышения активности остеокластов поблизости от имплантата, что свидетельствует об отсутствии повышения концентрации ионов кальция на поверхности материала и в пределах его локального окружения.

Новый двухфазный нанокристаллический материал заменителя костной ткани на основе САР/НАР демонстрирует очень интересные свойства in vivo.

Таким образом, изобретение касается двухфазного материала заменителя костной ткани на основе фосфата кальция/гидроксиапатита (САР/НАР), который включает ядро из спеченного CAP и как минимум один равномерный и закрытый эпитаксически нарастающий слой нанокристаллического НАР, нанесенного сверху на ядро из спеченного CAP, причем эпитаксически нарастающие нанокристаллы имеют такой же размер и морфологию, как и у минерала костей человека, то есть длину от 30 до 46 нм и ширину от 14 до 22 нм.

Ядро из спеченного CAP может включать трикальцийфосфат (TCP), в частности α-ТСР (α-Са3(РO4)2) или β-ТСР (β-Са3(РO4)2), и/или тетрафосфат кальция (ТТСР) Са4(РO4)2O.

Согласно часто применяемому варианту осуществления ядро из спеченного CAP по сути состоит из TCP, причем предпочтение отдается α-ТСР.

Эпитаксически нарастающий слой нанокристаллического НАР структурно и химически почти идентичен природному минералу костей человека.

Эпитаксически нарастающий слой нанокристаллического НАР обычно имеет толщину как минимум от 15 до 50 нм, предпочтительно как минимум от 20 до 40 нм, более предпочтительно как минимум от 25 до 35 нм. Эта минимальная толщина соответствует одному слою нанокристаллов НАР в эпитаксальной ориентации.

Эпитаксически нарастающий слой нанокристаллического НАР может включать один или несколько слоев нанокристаллов НАР в эпитаксальной ориентации. Толщину эпитаксически нарастающего слоя нанокристаллического НАР, которая касается нескольких таких слоев нанокристаллов НАР в эпитаксальной ориентации, выбирают в соответствии с предполагаемым применением материала заменителя костной ткани в качестве имплантата или протеза в подвергающихся различной нагрузке частях тела. Материал заменителя костной ткани согласно изобретению действительно предназначен для функционирования in vivo в качестве замены живой системе, постепенно преобразующей ядро из спеченного CAP в гидроксиапатит, подобный по размеру и морфологии минералу костей человека, причем скорость этого преобразования зависит от скорости высвобождения кальция ядром из спеченного CAP, которая в значительной мере регулируется толщиной эпитаксически нарастающего слоя нанокристаллического НАР.

Свойства материала заменителя костной ткани на основе САР/НАР в значительной мере регулируются толщиной эпитаксически нарастающего слоя кристаллического НАР. Термин "свойства" включает способность заменителя костной ткани на основе САР/НАР к высвобождению неизменной концентрации ионов кальция в локальное окружение in vitro и in vivo.

Толщина эпитаксически нарастающего слоя нанокристаллического НАР касается соотношения ядра из спеченного материала CAP с НАР, причем вышеупомянутое соотношение обычно составляет от 5:95 до 95:5 предпочтительно от 10:90 до 90:10.

Материал заменителя костной ткани на основе САР/НАР может быть кусковым или гранулированным, с частицами или гранулами, имеющими необходимые размер и форму. Как правило, частицы или гранулы являются приблизительно сферическими и имеют диаметр от 250 до 5000 мкм.

Материал заменителя костной ткани на основе САР/НАР также может быть формованным изделием, например в форме винта, гвоздя, штыря или конструкции, имеющей профиль части костного тела, такой как часть бедра, ключицы, ребра, нижней челюсти или черепа. Такой винт, гвоздь или штырь может использоваться в восстановительной ортопедической хирургии для прикрепления связок к кости, например в колене или локте. Такая конструкция, имеющая профиль части костного тела, может применяться в ортопедической хирургии в качестве протеза для замены отсутствующей или поврежденной кости или части кости.

Изобретение также касается способа получения определенного выше материала заменителя костной ткани на основе САР/НАР, причем способ включает следующие этапы:

a) изготовление ядра из спеченного материала CAP,

b) погружение ядра из спеченного материала CAP в водный раствор при температуре от 10°С до 50°С для запуска процесса преобразования CAP в НАР, при помощи которого на поверхности ядра из спеченного материала CAP образуется равномерный и закрытый эпитаксически нарастающий слой нанокристаллического гидроксиапатита, причем эпитаксически нарастающие нанокристаллы имеют такие же размер и морфологию, что и у минерала костей человека,

c) прекращение преобразования путем отделения твердого материала от водного раствора при наличии равномерного и закрытого покрытия из как минимум одного нанокристаллического слоя НАР, но до полного завершения процесса преобразования,

d) необязательную стерилизацию отделенного материала с этапа с).

Ядро из спеченного материала CAP может включать трикальцийфосфат (TCP), в частности α-ТСР (α-Са3(РO4)2) или β-ТСР (β-Са3(РO4)2), и/или тетрафосфат кальция (ТТСР) Са4(РO4)2O.

Согласно часто применяемому варианту осуществления ядро из спеченного материала CAP по сути состоит из TCP, причем предпочтение отдают α-ТСР.

Изготовление ядра из спеченного материала CAP осуществляют известными специалистам способами, включающими сначала смешивание порошков дикальцийфосфата (СаНРO4), карбоната кальция и/или гидроксида кальция, затем обжиг и спекание смеси в соответствующем диапазоне температур, с получением, таким образом, кускового материала ядра из спеченного CAP (см., например, Mathew M. et al, 1977, Acta. Cryst. B33:1325; Dickens В. et al., 1974, J. Solid State Chemistry 10, 232; и Durucan С.et al., 2002, J. Mat. Sci., 37:963).

Кусковой материал ядра из спеченного TCP, таким образом, может быть получен путем смешивания порошков дикальцийфосфата (СаНРO4), карбоната кальция и/или гидроксида кальция в стехиометрическом соотношении, обжига и спекания смеси при температуре в диапазоне 1200-1450°С, предпочтительно - около 1400°С.

Кусковой материал ядра из спеченного ТТСР также может быть получен при помощи описанного выше процесса.

Кусковой материал из спеченного CAP, полученный такими способами, может быть пористым с пористостью от 2 до 80 об. % и широким распределением пор. Параметры пористости выбирают в соответствии с предполагаемым применением материала заменителя костной ткани на основе САР/НАР.

Ядро из спеченного материала CAP, применяемое на этапе b), может быть

- кусковым материалом ядра из спеченного CAP, полученным, как описано выше,

- частицами или гранулятом ядра из спеченного материала CAP, полученными из кускового материала ядра из спеченного CAP, изготовленного, как описано выше, путем применения традиционных способов, таких как дробление, измельчение и/или помол и просеивание, или

- заготовкой ядра из спеченного материала CAP, имеющей необходимые форму и размер, например в форме винта, гвоздя, штыря или конструкции, имеющей профиль части костного тела.

Такая заготовка, имеющая любые необходимые форму и размер, может быть получена из кускового спеченного материала ядра, полученного, как описано выше, путем применения общеизвестных способов макетирования, таких как CNC-фрезерование или стереоскопическая печать (см., например, Bartolo P. et al., 2008, Bio-Materials and Prototyping Applications in Medicine, Springer Science New York, ISBN 978-0-387-47682-7; Landers R. et al., 2002, Biomaterials 23(23), 4437; Yeong W. - Y. et al., 2004, Trends in Biotechnology, 22 (12), 643; и Seitz H. et al., 2005, Biomed. Mater. Res. 74B (2), 782).

Водный раствор с этапа b) может быть чистой водой, моделированной жидкостью организма или буфером. Важно, чтобы уровень рН раствор для погружения с этапа b) был почти нейтральным и оставался устойчивым в течение всего процесса преобразования, предпочтительно - в пределах рН от 5,5 до 9,0.

Буфер может быть любым буфером в вышеуказанном диапазоне рН, но предпочтение отдают фосфатному буферу с кальцием, магнием и/или натрием или без него.

Термин "моделированная жидкость организма" относится к любому раствору, который имитирует жидкость организма. Предпочтительно моделированная жидкость организма имеет концентрацию ионов, приближенную к показателю плазмы крови.

Диапазон температур на этапе b) обычно составляет от 10°С до 50°С, предпочтительно от 25 до 45°С, более предпочтительно - от 35°С до 40°С.

Этап погружения b) в первой фазе вызывает фазовый переход первого рода материала CAP ядра и, таким образом, образование центров кристаллизации прекурсоров нанокристаллов НАР. Во время второй фазы полученные в результате прекурсоры НАР из первой фазы растут и образуют закрытый (то есть полностью покрывающий) эпитаксический нанокристаллический композитный слой. Первый слой нанокристаллов НАР должен быть равномерным и закрытым и эпитаксически соединенным с ядром из спеченного материала CAP.

Во время третьей фазы фазовый переход первого рода может происходить в пределах новообразованного двухслойного композита для дальнейшего преобразования ядра из спеченного материала CAP (TCP или ТТСР) в нанокристаллический НАР. Во время этого третьего этапа фазы перехода ионы кальция высвобождаются на протяжении контролируемого периода времени в ходе контролируемого процесса медленной диффузии, пока часть ядра из спеченного материала CAP не преобразуется в нанокристаллический НАР.

Время преобразования и, следовательно, скорость высвобождения кальция, может регулироваться путем изменения толщины слоя НАР.

Эпитаксически нарастающий слой нанокристаллического НАР соответствующей толщины получают in-vitro, причем преобразование CAP в НАР прекращается до его завершения.

Как только материал заменителя костной ткани на основе САР/НАР помещают in vivo, процесс преобразования CAP в НАР снова активируется вследствие контакта с жидкостями организма, и материал заменителя костной ткани функционирует в качестве замены живой системы, образуя новый гидроксиапатит, подобный по размеру и морфологии материалу человеческой кости. Во время процесса преобразования in vivo фазы перемещенные ионы кальция высвобождаются в локальное окружение, поддерживая местное кальциевое равновесие, которое является важным и благоприятным для процессов регенерации костей.

Из-за разницы во времени регенерации при повреждениях костей в подвергающихся различной нагрузке участках тела важной является контролируемость скорости высвобождения кальция. Это может достигаться путем изменения толщины эпитаксически нарастающего слоя гидроксиапатита.

Таким образом, этап с) является ключевым этапом. Время воздействия водного раствора на этапе b) основывается на необходимой толщине слоя НАР. Необходим как минимум один слой нанокристаллического НАР в эпитаксальной ориентации. Существенно, что преобразование CAP в НАР является незавершенным.

Надлежащее время воздействия в соответствии с необходимой толщиной может быть рассчитано при помощи нескольких термодинамических дифференциальных уравнений, хорошо известных специалистам в области химии, касающейся фосфатов кальция и производства цемента и бетона.

См., например: Pommersheim, J.C.; Clifton, J.R. (1979) Cem. Cone. Res.; 9:765; Pommersheim, J.C.; Clifton, J.R. (1982) Cem. Cone. Res.; 12:765; и Schlussler, K.H. Mcedlov-Petrosjan, O.P.; (1990): Der Baustoff beton, VEB Verlag Bauwesen, Berlin.

Перенос решения вышеупомянутых дифференциальных уравнений на систему САР/НАР позволяет спрогнозировать фазовый переход от CAP к НАР и толщину слоя, таким образом, чтобы эпитаксический слой НАР мог быть образован устойчивым и воспроизводимым способом.

Отделение твердого материала от водного раствора обычно выполняют путем фильтрации и высушивания, применяя способы, общеизвестные среди специалистов в данной области.

Необязательный этап стерилизации d) выполняют способами, общеизвестными среди специалистов в данной области, такими как облучение гамма-лучами.

Изобретение также касается применения определенного выше материала заменителя костной ткани на основе САР/НАР, как правило, в форме кускового или формованного изделия, в качестве имплантата или протеза для поддержки остеогенеза, регенерации костей, восстановления костей и/или реплантации костей в месте повреждения у человека или животного.

Изобретение также касается способа содействия остеогенезу, регенерации костей и/или восстановлению костей в месте повреждения у человека или животного путем имплантации определенного выше материала заменителя костной ткани на основе САР/НАР, как правило, в форме кускового или формованного изделия.

Преимущества материала заменителя костной ткани на основе САР/НАР согласно изобретению

Эпитаксически нарастающие нанокристаллы НАР, окружающие ядро из спеченного материала CAP, идентичны по размеру и морфологии кристаллам апатитов, составляющим природный минерал костей человека, как показано ниже в Таблице 1. Таким образом, материал заменителя костной ткани на основе САР/НАР согласно изобретению успешно имитирует состав или микроструктуру кости и представляет собой биомиметический материал минерала костей человека.

Таблица 1
Сравнение размера и морфологии кристаллов НАР для заменитель костной ткани на основе САР/НАР согласно изобретению и минерала костей человека
Кристаллографические оси (шестиугольная пространственная группа Р63/м) САР/НАР согласно изобретению, полученный при физиологической температуре. Размер кристаллов+ [нм] Природный минерал костей человека. Размер кристаллов+ [нм]
а (1,0,0) 18 (±4) 15-21
b (0,1,0) 18 (±4) 15-21
с (0,0,1) 38 (±8) 34-45
+ Анализ размера кристаллов выполняли путем применения ТЕМ (просвечивающей электронной микроскопии), SPM (сканирующей зондовой микроскопии), а также обработки данных дифракции рентгеновских лучей с применением метода Брэгга.

Постоянная концентрация ионов кальция в результате улучшает адгезию остеобластов и остеокластов к поверхности НАР в правильном соотношении для остеогенеза и, таким образом, для устойчивого состояния в цикле регенерации костей. Обеспечивается поверхность, к которой остеобласты и остеокласты легко прикрепляются в правильном соотношении для регенерации костей.

Кроме того, благодаря хорошо регулируемой поверхности, свойства материала заменителя костной ткани на основе САР/НАР согласно изобретению могут функционировать в качестве матрикса для биологически активных молекул, такого как белки внеклеточного матрикса, в частности факторов роста для регенерации костей.

Представленные ниже примеры поясняют изобретение, не ограничивая его объем.

Пример 1. Приготовление кускового спеченного материала α-ТСР

Для смеси 500 г (сухая масса) 360 г безводного порошка дикальцийфосфата, 144 г порошкового карбоната кальция и 220 мл деионизированной воды смешивали в течение 7 минут при 500 об/мин при помощи лабораторной мешалки. Суспензию после процесса смешивания сразу переносили в высокотемпературную устойчивую платиновую чашку. Заполненную платиновую чашку помещали в холодную печь. Печь нагревали до 1400°С со скоростью нагревания 60°С в час. Процесс нагревания останавливали через 72 часа путем выключения печи. Образец охлаждали до комнатной температуры, не вынимая из печи. Кусковой спеченный материал (чистофазный α-Са3(РO4)2) вынимали из печи и платиновой чашки. Кусковой продукт после процесса спекания весил 420 г (потеря массы 16,7%). Контроль за чистотой фазы осуществляли при помощи анализа путем порошковой рентгеновской дифракции.

Пример 2. Изготовление пористых гранул спеченного α-ТСР с размером частиц от 0,25 до 2 мм

Кусковой продукт с Примера 1 измельчали при помощи щековой дробилки (размер щели 4 мм). Грубые гранулы просеивали, применяя ситовую установку и съемные сита с ячейками 2 мм и 0,25 мм. После просеивания фракции гранул дважды промывали очищенной водой для отделения мелких порошковых остатков, адсорбированных в гранулы. Пористые гранулы высушивали в течение 10 часов при 120°С в сушильной камере. Контроль за гранулометрическим составом осуществляли при помощи технологии лазерной дифракции. Чистоту поверхности частиц после промывания контролировали путем наблюдения за поверхностью при помощи сканирующей электронной микроскопии.

Пример 3. Изготовление пористых цилиндров (длина 10 мм, диаметр 6 мм) из спеченного α-ТСР путем CNC-фрезерования

Кусковой продукт с Примера 1 уменьшали до кубовидной заготовки с длиной краев а=3 см, b=2 см, c=2 см при помощи шлифовального станка. Заготовку помещали и фиксировали в четырехосном CNC-фрезерном станке, оснащенном полукруглым резцом для твердых металлов диаметром 3 мм. Цилиндры вырезали, применяя путь фрезерования с радиусом 3 мм и наклоном 0,25 мм. Основная скорость заготовки во время процесса CNC-фрезерования составляла 1700 оборотов в минуту, максимальную скорость вращения пути фрезерования рассчитывали по интегральному процессу в пределах CNC-оборудования, и она составляет 10 оборотов в минуту. После фрезерования цилиндрические заготовки дважды промывали очищенной водой для отделения мелких порошковых остатков, адсорбированных в цилиндрическую поверхность. Пористые цилиндры высушивали в течение 10 часов при 120°С в сушильной камере. Чистоту поверхности заготовки после промывания контролировали путем наблюдения за поверхностью при помощи сканирующей электронной микроскопии. Правильность размеров заготовки контролировали при помощи штангенциркуля.

Пример 4. Получение эпитаксически нарастающего покрытия из нанокристаллического НАР на гранулах из спеченного α-ТСР с Примера 2

Буферный раствор (1000 мл), достаточный для покрытия и процесса фазового преобразования приготавливали, используя 1,82 моль/л натрия, 4,68 моль/л водорода, 0,96 моль/л фосфора, 5,64 моль/л кислорода, 0,01 моль/л кальция и 0,71 моль/л хлора. Раствор доводят до рН 7,4 при температуре 40°С. Гранулы, полученные согласно примерам 1 и 2, погружали в приготовленный раствор и держали в водяной бане с устойчивой температурой (40°С) в течение времени, рассчитанного в соответствии с толщиной слоя в среднем 250 нм (10 часов), что соответствует фазовому составу (масса/масса) 75% альфа-ТСР и 25% гидроксиапатита. После погружения гранулы трижды промывали очищенной водой для удаления остатков из буферного раствора. Пористые гранулы высушивали в течение 4 часов при 120°С в сушильной камере. Фазовый состав гранул анализировали с применением ритвельдовского анализа данных порошковой рентгеновской дифракции, размер кристаллов кристаллических фаз, полученных в процессе покрытия, анализировали путем size-strain обработки данных дифракции рентгеновских лучей в соответствии с методом Брэгга. Пористость гранул контролировали при помощи порометрии с интрузией ртути, морфологию поверхности после покрытия контролировали при помощи сканирующей электронной микроскопии.

Пример 5. Получение эпитаксически нарастающего покрытия из нанокристаллического НАР на цилиндрах из спеченного α-ТСР с Примера 3

Буферный раствор (1000 мл), достаточный для покрытия и процесса фазового преобразования приготавливали, используя 1,82 моль/л натрия, 4,68 моль/л водорода, 0,96 моль/л фосфора, 5,64 моль/л кислорода, 0,01 моль/л кальция и 0,71 моль/л хлора. Раствор доводили до рН 7,4 при температуре 40°С. Пористые цилиндры, полученные согласно примерам 1 и 3, погружали в приготовленный раствор и держали в водяной бане с устойчивой температурой (40°С) в течение времени, рассчитанного в соответствии с толщиной слоя в среднем 20 мкм (60 часов), что соответствует фазовому составу приблизительно 85% (масса/масса) альфа-ТСР и 15% (масса/масса) гидроксиапатита. После погружения цилиндры трижды промывали очищенной водой для удаления остатков из буферного раствора. Пористые цилиндры высушивали в течение 10 часов при 120°С в сушильной камере. Фазовый состав цилиндров анализировали с применением ритвельдовского анализа данных порошковой рентгеновской дифракции, размер кристаллов кристаллических фаз, полученных в процессе покрытия, анализировали путем size-strain обработки данных дифракции рентгеновских лучей в соответствии с методом Брэгга. Эпитаксический рост анализировали путем отражательно-разностной (RD) спектроскопии. Пористость цилиндров контролировали при помощи порометрии с интрузией ртути, морфологию поверхности после покрытия контролировали при помощи сканирующей электронной микроскопии. Толщину слоя контролировали, применяя отражательную дифракцию электронов высоких энергий (RHEED) и/или фотоэлектронную спектроскопию (XPS).

Пример 6. Влияние времени погружения на толщину слоя и фазовый состав

В Таблицах 2 и 3 показаны данные экспериментов для примера, показывающего влияние времени погружения на толщину слоя и фазовый состав, соответственно, для пористых частиц α-ТСР почти сферической геометрической формы и с размером от 10 до 20 мкм, пористостью 25-40 об.%, удельной (внутренней) площадью поверхности 50-60 м /г и объемной плотностью 0,6-0,8 г/мл.

Таблица 2
Влияние времени погружения на толщину слоя
Время погружения [мин] Толщина слоя*
[нм]
0 -
15 37(±10)
30 112 (±4)
60 121 (±9)
600 238(±8)
* Анализ эпитаксии, химического состава слоя и толщины слоя осуществляли при помощи RHEED (отражательной дифракции электронов высоких энергий) и XPS (фотоэлектронной спектроскопии)
Таблица 3
Влияние времени погружения на фазовый состав
Время погружения [ч] TCP** [мас.%] НАР** [мас.%]
0 100 -
0,5 86,6 (±1) 13,4 (±2)
1 85,8 (±1) 14,2 (±3)
2 83,5 (±1) 16,4 (±3)
5 78,1 (±1) 21,9 (±3)
7,5 75,3 (±1) 24,7 (±3)
10 74,2 (±5) 25,8 (±2)
12 58,8 (±6) 41,2 (±7)
24 44,8 (±9) 55,2 (±6)
48 35,8 (±6) 64,2 (±3)
72 - 100
** Количественный фазовый анализ осуществляли с применением ритвельдовского анализа данных порошковой рентгеновской дифракции.
*** Данные экспериментов оценивали на системе со следующими параметрами: жидкая фаза: фосфатно-солевой буферный раствор, 20х, температура 40°С.

1. Двухфазный материал заменителя костной ткани на основе фосфата кальция / гидроксиапатита (САР/НАР), включающий ядро из спеченного CAP и как минимум один равномерный и закрытый эпитаксически нарастающий слой нанокристаллического НАР, нанесенный сверху на ядро из спеченного CAP, причем эпитаксически нарастающие нанокристаллы имеют такой же размер и морфологию, что и у минерала костей человека, то есть длину от 30 до 46 нм и ширину от 14 до 22 нм.

2. Материал заменителя костной ткани на основе САР/НАР по п.1, отличающийся тем, что эпитаксически нарастающий слой нанокристаллического НАР, как правило, имеет толщину как минимум от 15 до 50 нм.

3. Материал заменителя костной ткани на основе САР/НАР по п.1, отличающийся тем, что эпитаксически нарастающий слой нанокристаллического НАР, как правило, имеет толщину как минимум от 20 до 40 нм.

4. Материал заменителя костной ткани на основе САР/НАР по любому из пп.1-3, отличающийся тем, что соотношение материала с НАР составляет от 5:95 до 95:5.

5. Материал заменителя костной ткани на основе САР/НАР по любому из пп.1-3, отличающийся тем, что соотношение ядра из спеченного материала CAP с НАР составляет от 10:90 до 90:10.

6. Материал заменителя костной ткани на основе САР/НАР по любому из пп.1-3, отличающийся тем, что ядро из спеченного CAP по сути состоит из α-ТСР.

7. Материал заменителя костной ткани на основе САР/НАР по любому из пп.1-3, отличающийся тем, что предусмотрен в форме частиц или гранулята.

8. Материал заменителя костной ткани на основе САР/НАР по любому из пп.1-3, отличающийся тем, что является формованным изделием.

9. Материал заменителя костной ткани на основе САР/НАР по п.8, отличающийся тем, что имеет форму винта, гвоздя или штыря.

10. Материал заменителя костной ткани на основе САР/НАР по п.8, отличающийся тем, что представляет собой конструкцию, имеющую профиль части костного тела.

11. Способ получения материала заменителя костной ткани на основе САР/НАР по любому из пп.1-10, включающий следующие этапы
a) изготовление ядра из спеченного материала CAP,
b) погружение ядра из спеченного материала CAP в водный раствор при температуре от 10°C до 50°C для запуска процесса преобразования CAP в НАР, при помощи которого на поверхности ядра из спеченного материала CAP образуется равномерный и закрытый эпитаксически нарастающий слой нанокристаллического гидроксиапатита, причем эпитаксически нарастающие нанокристаллы имеют такие же размер и морфологию, что и у минерала костей человека,
c) прекращение преобразования путем отделения твердого материала от водного раствора при наличии равномерного и закрытого покрытия из как минимум одного нанокристаллического слоя НАР, но до полного завершения процесса преобразования, и
d) необязательную стерилизацию отделенного материала с этапа c).

12. Способ по п.11, отличающийся тем, что на этапе b) уровень pH водного раствора остается в пределах от 5,5 до 9,0.

13. Способ по п.11 или 12, отличающийся тем, что температура на этапе b) составляет от 25 до 45°C, предпочтительно от 35°C до 40°C.

14. Применение материала заменителя костной ткани на основе САР/НАР по любому из пп.1-10 в качестве имплантата или протеза для остеогенеза, регенерации костей, восстановления костей и/или реплантации костей в месте повреждения у человека или животного.

15. Способ содействия остеогенезу, регенерации костей и/или восстановлению костей в месте повреждения у человека или животного путем имплантации материала заменителя костной ткани на основе САР/НАР по любому из пп.1-10.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к наноструктурированным материалам с сегнетоэлектрической активностью. Технический результат заключается в получении сегнетоэлектрического материала с высокими и регулируемыми диэлектрическими и пироэлектрическими характеристиками.
Группа изобретений относится к катализаторам циклизации нормальных парафиновых углеводородов. Катализатор содержит носитель, который готовят с использованием высококремнеземного цеолита KL и бемита, а каталитически активное вещество представляет собой как иммобилизованные на поверхности катализатора кристаллиты платины, так и локализованные внутри канала цеолита частицы платины, характеризующиеся размером 0,6-1,2 нм.

Изобретение относится к области оценки свойств дисперсных материалов и может быть использовано для разработки энергетических нанотехнологий в разных отраслях промышленности и областях знаний, а также для разработки и управления самоорганизующихся систем, открывает возможности для изучения новых принципов построения технических устройств.

Способ формирования наноразмерных структур предназначен для получения полосок тонких пленок наноразмерной ширины с целью их исследования и формирования элементов наноэлектромеханических систем (НЭМС). Сущность изобретения заключается в том, что в способе формирования наноразмерных структур, включающем получение заготовок тонких пленок и выделение из них полосок тонких пленок, по меньшей мере, одну заготовку тонкой пленки закрепляют внутри заполненного объема, который устанавливают в держатель микротома таким образом, чтобы плоскость заготовки тонкой пленки оказалась непараллельна плоскости реза, после этого ножом осуществляют рез заполненного объема с, по меньшей мере, одной заготовкой тонкой пленки и получение плоского фрагмента с полоской тонкой пленки. Существуют варианты, в которых заполненный объем устанавливают в держателе микротома таким образом, чтобы плоскость заготовки тонкой пленки оказалась перпендикулярна плоскости реза и перпендикулярна направлению реза; или заполненный объем устанавливают в держателе микротома таким образом, чтобы плоскость заготовки тонкой пленки оказалась перпендикулярна плоскости реза и параллельна направлению реза. Существуют также варианты, в которых после осуществления реза проводят исследование зондом сканирующего зондового микроскопа поверхности заполненного объема с, по меньшей мере, одной заготовкой тонкой пленки; или производят модификацию заготовки тонкой пленки, расположенной внутри заполненного объема. Существуют также варианты, в которых модификация заготовки тонкой пленки заключается в механическом воздействии на нее зондом; или в электрическом воздействии на нее зондом; или в электрохимическом воздействии на нее зондом; или в воздействии на нее электронным пучком; или в воздействии на нее ионным пучком; или в воздействии на нее рентгеновским пучком; или в воздействии на нее пучком альфа-частиц; или в воздействии на нее пучком протонов; или в воздействии на нее пучком нейтронов. Существует также вариант, в котором внутри заполненного объема закрепляют набор заготовок тонких пленок; при этом заготовки тонких пленок расположены параллельно друг другу. Существует также вариант, в котором в качестве тонких пленок используется графен. Все перечисленные варианты способа расширяют его функциональные возможности.

Изобретение используется для определения усиления локального электростатического поля и работы выхода в нано- или микроструктурных эмиттерах. Сущность изобретения заключается в том, что измеряют темновую зависимость туннельного эмиссионного тока при увеличении напряжения на аноде и определяют значение напряжения V∞, облучают измеряемую поверхность эмиттера лазерным пучком ультрафиолетового или видимого диапазона с фиксированным значением оптической мощности и длины волны λ1, измеряют значение туннельного фотоэмиссионного тока при увеличении напряжения на аноде и фиксируют значение напряжения V∞ λ1, определяют значение работы выхода А и значение усиления локального электростатического поля β в пространственной области облучения эмиттера из данного соотношения или дополнительно облучают измеряемую поверхность эмиттера лазерным пучком на другой длине волны λ2 ультрафиолетового или видимого диапазона с максимальной разницей относительно первой длины волны, определяют значение напряжения V∞λ2 и определяют значение усиления локального электростатического поля в пространственной области облучения эмиттера и значение работы выхода А из данного соотношения.
Изобретение относится к светотехнике, а именно изготовлению светоизлучающих полупроводниковых приборов на подложке из аморфного минерального стекла. Стекловидная композиция на основе минерального стекла, содержащего окислы элементов II, и/или III, и/или IV группы периодической системы, отличается тем, что поверхность стекла покрыта выращенным слоем электропроводящего и светоизлучающего полупроводникового соединения типа A2B5, и/или A2B6, и/или А3В5, и/или А4В6.

Изобретение относится к газовым микрокриогенным машинам, а именно к регенеративным теплообменникам. В комбинированном регенеративном теплообменнике, включающем теплоизоляционный корпус, насадку, находящуюся внутри корпуса, насадка состоит из двух частей: со стороны "теплого" конца регенеративного теплообменника насадка выполнена из плетеной металлической сетки, со стороны "холодного" конца регенеративного теплообменника заполнена свинцовыми наношариками, между частями насадки установлена защитная сетка, предотвращающая проникновение свинцовых наношариков в область плетеной металлической сетки.

Изобретение относится к технологии наноматериалов и наноструктур и может применяться для получения тонкопленочных полимерных материалов и покрытий, используемых как в сенсорных, аналитических, диагностических и других устройствах, так и при создании защитных диэлектрических покрытий.

Изобретение относится к нанотехнологии, а именно к материалу и способу получения сферических конгломератов, содержащих наноразмерные частицы (НРЧ) металла, в частности меди, в оболочке из другого вещества или органического полимера.

Изобретение относится к области гигиены, санитарии и медицины, в частности, к способам лабораторной диагностики содержания нанодисперсных частиц диоксида кремния в организме работающих, к факторам риска в воздухе рабочей зоны которых относится диоксид кремния, и может быть использован для обоснования санитарно-гигиенических мероприятий по предупреждению и устранению воздействия нанодисперсных соединений.

Изобретение относится к медицине, конкретно к композиционному материалу, включающему биосовместимое и биорассасывающееся стекло, биосовместимый и биорассасывающийся матричный полимер и связывающий агент, способный образовывать ковалентные связи.
Изобретение относится к химии высокомолекулярных соединений, к получению полимерных композиций на основе волокнистых материалов, обладающих антимикробными свойствами.
Изобретение относится к способу получения биосовместимого наноструктурированного композиционного электропроводящего материала. .

Изобретение относится к медицине. .
Изобретение относится к области медицины и реабилитации (восстановительного лечения) и может быть использовано для антисептической обработки поверхностей изделий из полимерных материалов медицинского назначения, используемых в малой ортопедии.
Изобретение относится к области медицинского материаловедения, конкретно к подготовке поверхностей медицинских полимеров с улучшенными биосовместимыми свойствами, и может использоваться в имплантационной хирургии.

Изобретение относится к профилируемому препрегу, включающему волокна и полимерную матрицу. .

Изобретение относится к медицинскому материаловедению, а конкретнее к технике подготовки поверхностей медицинских полимеров с улучшенными гемосовместимыми свойствами, и может использоваться в имплантационной хирургии при протезировании различных органов человека: искусственных кровеносных сосудов, артериовенозных шунтов, клапанов сердца, кардиостимуляторов и др.
Изобретение относится к области медицины, а именно к сердечно-сосудистой хирургии, и может быть использовано для профилактики развития спаечной болезни после операций на открытом сердце.

Изобретение относится к медицине. Описан двухфазный материал заменителя костной ткани на основе фосфата кальция гидроксиапатита, включающий ядро из спеченного CAP и как минимум один равномерный и закрытый эпитаксически нарастающий слой нанокристаллического НАР, нанесенный сверху на ядро из спеченного CAP, причем эпитаксически нарастающие нанокристаллы имеют такой же размер и морфологию, что и у минерала костей человека, то есть длину от 30 до 46 нм и ширину от 14 до 22 нм. Описан также способ получения материала заменителя костной ткани на основе САРНАР, включающий этапы: а) изготовления ядра из спеченного материала CAP, b) погружения ядра из спеченного материала CAP в водный раствор при температуре от 10°С до 50°С для запуска процесса преобразования CAP в НАР, при помощи которого на поверхности ядра из спеченного материала CAP образуется равномерный и закрытый эпитаксически нарастающий слой нанокристаллического гидроксиапатита, причем эпитаксически нарастающие нанокристаллы имеют такие же размер и морфологию, что и у минерала костей человека, с) прекращения преобразования путем отделения твердого материала от водного раствора при наличии равномерного и закрытого покрытия из как минимум одного нанокристаллического слоя НАР, но до полного завершения процесса преобразования, d) необязательной стерилизации отделенного материала с этапа с), и применения вышеупомянутого материала заменителя костной ткани в качестве имплантата или протеза для остеогенеза, регенерации костей, восстановления костей иили реплантации костей в месте повреждения у человека или животного. 4 н. и 11 з.п. ф-лы, 3 табл., 6 пр.

Наверх