Способ ранней диагностики полиорганной недостаточности у пациентов после абдоминальных хирургических вмешательств

Авторы патента:

Марочков Алексей Викторович (BY)

Точило Сергей Анатольевич (BY)

Сергеев Сергей Сергеевич (BY)

G01N33/92 - с использованием жиров, например холестерина

Владельцы патента RU 2628571:

Государственное учреждение высшего профессионального образования "БЕЛОРУССКО-РОССИЙСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ" (BY)

Изобретение относится к медицине, а именно к реаниматологии и хирургии, и касается способа прогнозирования полиорганной недостаточности у пациентов после абдоминальных хирургических вмешательств. Сущность способа: определяют в крови уровень общего холестерина и при снижении уровня общего холестерина в первые, вторые и третьи сутки после операции меньше 3,4 ммоль/л констатируют высокий риск развития полиорганной недостаточности. При нарастании в динамике уровня общего холестерина констатируют снижение риска развития полиорганной недостаточности, при снижении в динамике уровня общего холестерина либо при сохраняющемся низком уровне общего холестерина констатируют увеличение риска развития полиорганной недостаточности. Время от получения образца крови пациента до получения результата риска развития органной недостаточности составляет менее 60 минут. Объем крови, взятой для исследования, составляет от 100 мкл до 200 мкл. Данный способ позволяет прогнозировать полиорганную недостаточность у пациентов, что дает возможность своевременно назначить необходимое лечение. Способ является более простым и экспрессным методом прогнозирования полиорганной недостаточности у пациентов после абдоминальных хирургических вмешательств. 3 з.п. ф-лы, 6 табл., 5 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к реаниматологии и хирургии.

Полиорганная недостаточность - тяжелая неспецифическая стресс-реакция организма, характеризующаяся недостаточностью двух и более функциональных систем, когда требуется их искусственное замещение. Развивается в результате утяжеления какой-либо патологии (острые заболевания, травмы, острые отравления).

Известна методика клинической и лабораторной оценки органной дисфункции при развитии синдрома системного воспалительного ответа [1]. Параметры органной дисфункции включают: артериальную гипоксемию (PaO₂/TiO₂ <300 мм рт.ст.), острую олигурию (диурез <0,5 мл/кг/час или мочевина плазмы ≥45 ммоль/л по крайней мере за последних 2 часа), креатинин >2,0 мг/дл, коагуляционные нарушения (MHO >1,5 или АЧТВ >60 с), тромбоцитопению (<100000 тромбоцитов в мкл), гипербилирубинемию (плазменный общий билирубин >35 ммоль/л), недостаточную перфузию тканей (гиперлактатемия >3 ммоль/л, снижение капиллярного наполнения или неравномерность окраски кожных покровов), гемодинамическую недостаточность (артериальная гипотензия: систолическое артериальное давление <90 мм рт.ст., среднее артериальное давление <70 мм рт.ст. или снижение систолического артериального давления >40 мм рт.ст. у взрослых или артериальное давление <2 стандартных отклонений ниже возрастной нормы).

Недостатком является то, что данный метод диагностирует уже развившуюся полиорганную недостаточность и не позволяет ее спрогнозировать.

Существуют также клинико-лабораторные шкалы оценки тяжести состояния и прогноза хирургических больных [2]. Многоступенчатые системы оценки состояния пациента и прогноза исхода заболевания: система APACHE (Acute Physiology and Chronic Health Evaluation) I, II, III, система SUPPORT, система HIS (Hannover Intensive Score), система хирургической оценки POSSUM (Physologic and Operative Severity Score for the enumeration of Mortality and morbidity), упрощенная шкала оценки острых физиологических изменений SAPS (Simplified Acute Physiology Score) I и II, система оценки уровня тяжести заболевания Sickness Score, быстрая шкала оценки острых физиологических нарушений RAPS (Rapid Acute Physiology Score). Шкалы оценки выраженности моно- и полиорганной недостаточности: шкала оценки органной недостаточности SOFA (Sequential Organ Failure Assessment), шкала оценки полиорганной недостаточности Гориса MOFSG (Multiple Organ Failure Score of Goris), логистическая система оценки органной дисфункции LODS (Logistic Organ Dysfunction System), шкала полиорганной дисфункции MODS (Multiple Organ Dysfunction Score), шкала оценки органной дисфункции OFC (Organ Failure Score), шкала оценки полиорганной недостаточности Трана MOFST (Multiple Organ Failure Score of Iran), система оценки полиорганной недостаточности по М.И. Прудкову с соавт. с расчетом индекса полиорганной дисфункции (ИПД). Позднее были разработаны компьютерные программы для расчета количества баллов по различным шкалам, что позволило оптимизировать процесс расчетов и существенно сократить их время [2].

Недостатками данных методов является необходимость выполнения большого количества лабораторных исследований, что требует наличия сложного оборудования и больших материальных затрат, а также проведения математических расчетов.

Известен способ прогнозирования течения полиорганной недостаточности при проведении экстракорпоральной терапии [3], в котором проводят исследование системы гемостаза больного до и после лечебного воздействия. При этом определяют диаметр тромбоцитов и количество активированных тромбоцитов, и при уменьшении среднего значения диаметра тромбоцитов на 10-12% от показателей до воздействия при одновременном снижении количества активированных тромбоцитов не менее чем на 10% прогнозируют благоприятный исход полиорганной недостаточности. При увеличении среднего значения диаметра тромбоцитов на 10-20% при одновременном увеличении количества активированных тромбоцитов не менее чем на 15% прогнозируют необратимое развитие полиорганной недостаточности.

Однако данный способ может применяться только у тех больных, у которых при лечении применяют методы экстракорпоральной терапии.

Имеется способ прогнозирования степени риска развития респираторного дистресс-синдрома взрослых и полиорганной недостаточности у пациента с морбидным ожирением [4], при котором выявляют факторы риска и определяют соответствующие им балльные коэффициенты в соответствии с таблицей описания, рассчитывают коэффициент p по формуле:

p=(1-P)*100%,

где Р - произведение значений балльных коэффициентов всех выявленных факторов риска, и при значении p<10% прогнозируют низкую, при значении 10%<p<30% - среднюю, при значении 30%<p<60% - высокую, а при значении p>60% - облигатную степень риска развития респираторного дистресс-синдрома взрослых и полиорганной недостаточности у пациента с морбидным ожирением.

Однако данный способ также может применяться только у пациентов с морбидным ожирением.

Наиболее близким к настоящему изобретению является способ определения течения пневмонии, вызванной вирусом гриппа A (H1N1), при проведении интенсивной терапии [5], согласно которому определяют в крови больного количество общего холестерина и при снижении его до менее 3 ммоль/л устанавливают тяжелое течение пневмонии.

Технической задачей, для решения которой направлено настоящее изобретение является создание более простого и экспрессного метода прогнозирования полиорганной недостаточности у пациентов после абдоминальных хирургических вмешательств.

Указанная задача достигается тем, что в способе прогнозирования полиорганной недостаточности у пациентов после абдоминальных хирургических вмешательств определяют в крови уровень общего холестерина и, согласно изобретению при снижении уровня общего холестерина в первые, вторые и третьи сутки после операции меньше 3,4 ммоль/л констатируют высокий риск развития полиорганной недостаточности. При нарастании в динамике уровня общего холестерина констатируют снижение риска развития полиорганной недостаточности, при снижении в динамике уровня общего холестерина либо при сохраняющемся низком уровне общего холестерина констатируют увеличение риска развития полиорганной недостаточности. Время от получения образца крови пациента до получения результата риска развития органной недостаточности составляет менее 60 минут. Объем крови взятой для исследования составляет от 100 мкл до 200 мкл.

В публикациях последних лет усилился интерес к биомаркерам полиорганной недостаточности. Рядом авторов показана связь между нарушением жирового обмена и развитием признаков полиорганной дисфункции у пациентов с перитонитом [6], пневмонией [7]. Установлено, что у пациентов с тяжелым сепсисом и синдромом полиорганной недостаточности отмечается снижение уровня холестерина в сыворотке крови [8, 9], что гипохолестеринемия у хирургических больных является предиктором повышенной летальности [10, 11].

Нами предложена гипотеза, что уровень общего холестерина является критерием прогнозирования полиорганной недостаточности у пациентов после абдоминальных хирургических вмешательств.

Для проверки данной гипотезы нами проведено обследование 63 пациентов: 37 мужчин и 27 женщин, средний возраст 55,9±16,4 лет, масса тела 80,7±16,4 кг, рост 164,7±4,7 см, которым выполнялись абдоминальные хирургические вмешательства продолжительностью 77,2±40,7 минут в условиях общей анестезии. Обследуемые были разделены на две группы: первая группа (n=31) - пациенты, у которых в послеоперационном периоде развились признаки полиорганной недостаточности; вторая группа (n=33) - пациенты, у которых в послеоперационном периоде признаков полиорганной недостаточности не отмечалось. Группы не различались по полу, возрасту, массе тела, росту, сопутствующей патологии, объему и продолжительности хирургических вмешательств (p>0,05).

Забор венозной крови для исследования общего холестерина выполняли на четырех этапах: 1-й этап - в день операции до ее начала; 2-й этап - первые сутки после операции; 3-й этап - вторые сутки после операции; 4-й этап - третьи сутки после операции. Цельную кровь набирали у пациентов натощак, в период с 8.00 до 9.00, из периферической вены, в которую не проводилась инфузионная терапия. Анализ выполняли в течение 1 часа после забора крови. Определение холестерина производили с помощью биохимического анализатора AU 680 (Beckman Coulter, США), использовали ферментативный метод. Перед проведением проб прибор калибровали с помощью наборов системного калибратора, контроль качества выполняли с помощью контрольных сывороток.

Статистическую обработку результатов выполняли с использованием программы Statistica 7.0. Данные представлены в виде среднего значения и стандартного отклонения. Для сравнения групп применяли критерий Манна-Уитни, для сравнения этапов - критерий Вилкоксона, для множественных сравнений применяли поправку Бонферрони. Статистически значимые отличия определяли при p<0,05.

Средние значения уровня общего холестерина для каждого этапа и результаты статистической обработки данных представлены в таблице 1.

* - статистически значимые отличия этапа 1 vs. 2, 3,4 (критерий Вилкоксона, p<0,05);

# - статистически значимые отличия группы 1 vs. 2 (критерий Манна-Уитни, p<0,001).

Пороговый уровень общего холестерина для пациентов после абдоминальных хирургических вмешательств, у которых развились признаки полиорганной недостаточности, находился в пределах 95% процентильного интервала значений и составил 3,4 ммоль/л.

Таким образом, у пациентов в первые, вторые и третьи сутки после абдоминального хирургического вмешательства определяют в крови уровень общего холестерина и при снижении его меньше 3,4 ммоль/л прогнозируют высокий риск развития полиорганной недостаточности.

Использование данного способа подтверждается конкретными примерами:

Пример 1

Больной С., 65 лет, поступил в УЗ «Могилевская областная больница 11.08.2015 г. Клинический диагноз: Острый тяжелый панкреатит. Инфицированный панкреонекроз. Некротизирующий парапанкреатит. Оментобурсит. Серозный перитонит. ИБС: атеросклеротический и постинфарктный (2011 г.) кардиосклероз. H1. Сахарный диабет 2 тип, инсулинозависимый. Операция 13.08.2015 г: Верхнесрединная лапаротомия. Вскрытие оментобурсита. Некрсеквестрэктомия. Дренирование сальниковой сумки. Оментобурсостомия. Дренирование брюшной полости.

У пациента отмечался низкий уровень общего холестерина. Развилась полиорганная недостаточность. 16.08.2015 г. консилиум выставил диагноз: Синдром системного воспалительного ответа. Синдром полиорганной недостаточности: сердечно-сосудистая, дыхательная, энтеральная, синдром цитолиза, лимфопения.

Пример 2

Больной Г., 56 лет, поступил в УЗ «Могилевская областная больница 4.07.2015 г. Клинический диагноз: Ущемленная диафрагмальная грыжа слева. Некроз поперечной ободочной кишки. Эмпиема плевры слева. Операции: 7.07.2015 г. Лапаротомия, спленэктомия, резекция поперечной ободочной кишки с анастамозом «конец в конец». Торакотомия, ушивание дефекта диафрагмы. 19.08.2015 г. Релапаротомия I. Вскрытие абсцессов брюшной полости.

У пациента после перенесенных двух операций отмечалось снижение уровня общего холестерина, существовал высокий риск развития полиорганной недостаточности, что подтверждается оценкой по шкале APACHE III. Однако в динамике отмечено повышение общего холестерина. Полиорганная недостаточность не развилась.

Пример 3

Больная М., 83 года, поступила в УЗ «Могилевская областная больница 8.02.2015 г. Клинический диагноз: Прободная язва задней стенки желудка. ИБС: атеросклеротический кардиосклероз. Артериальная гипертензия 3 ст, риск 4. H1. Операция 10.07.2015 г: Лапаротомия. Ушивание прободной язвы желудка. Санация и дренирование брюшной полости.

Несмотря на тяжесть состояния пациентки и повышенное количество баллов по шкале APACHE III, что было обусловлено возрастом 83 года и наличием прободной язвы желудка, у нее сохранялся высокий уровень холестерина. Полиорганная недостаточность не развилась.

Пример 4

Больной М., 44 года, поступил в УЗ «Могилевская областная больница 10.01.2015 г. Клинический диагноз: Хронический панкреатит, обострение. Операция 21.01.2015 г: Верхне-срединная лапаротомия. Вскрытие и дренирование кисты поджелудочной железы.

Состояние пациента обычное послеоперационное. Полиорганная недостаточность не развилась.

Разработанный нами способ прогнозирования полиорганной недостаточности у пациентов после абдоминальных хирургических вмешательств имеет преимущества. Он позволяет прогнозировать полиорганную недостаточность у пациентов, что дает возможность своевременно назначить необходимое лечение. Данный способ прост и не требует проведения большого количества лабораторных исследований.

Источники информации

1. Levy М.М., Fink М.Р., Marshall J.C. et al. 2001 SCCM/ESICM/ACCP/ATS/SIS international sepsis definitions conference // Crit Care Med. - 2003. - Vol. 31. - P. 1250-1256.

2. Гаин Ю.М., Хулуп Г.Я., Завала H.B., Алексеев С.А., Богдан В.Г. Объективная оценка тяжести состояния больных и прогноз в хирургии / Ю.М. Гаин, Г.Я. Хулуп, Н.В. Завала, С.А. Алексеев, В.Г. Богдан - Минск, 2005. - 299 с., ил.

3. Патент 2377566 Российской Федерации, МПК G01N 33/49, опубликовано: 27.12.2009. Способ прогнозирования течения полиорганной недостаточности при проведении экстракорпоральной терапии / Василенко И.А., Кошелев Р.В., Волгина Ю.Д., Фомин A.M., Метелин В.Б.; Патентообладатель: Государственное учреждение Московский областной научно-исследовательский институт им. М.Ф. Владимирского (МОНИКИ им. М.Ф. Владимирского) - №2008134067/15, заявл. 20.08.2008 // Бюллетень изобретения №36/2009.

4. Патент 19344 Республики Беларусь, МПК C1 А61В 5/00, опубликовано: 30.12.2013. Способ прогнозирования степени риска развития респираторного дистресс-синдрома взрослых и полиорганной недостаточности у пациента с морбидным ожирением / Давидович В.В, Прасмыцкий О.Т., Богдан В.Г, Грачев С.С.; Патентообладатели: Давидович В.В, Прасмыцкий О.Т., Богдан В.Г, Грачев С.С.- а 20120771, заявл. 17.05.2012 // Aфiцыйны бюлетэнь №4/2015.

5. Патент 18290 Республики Беларусь, МПК CI G01N 33/50, опубликовано: 30.06.2014. Способ определения течения пневмонии, вызванной вирусом гриппа A (H1N1), при проведении интенсивной терапии / Марочков А.В., Кохан З.В., Акулич Н.В.; Патентообладатели: Марочков А.В., Кохан З.В., Акулич Н.В. - а 20100802, заявл. 24.05.2010 // Aфiцыйны бюлетэнь №3/2014. - прототип.

6. Илюкевич Г.В., Канус И.И., Хулуп Г.Я. Особенности нарушения метаболизма липидов и возможность их коррекции у больных с распространенным перитонитом // Вестник интенсивной терапии. - 2002. - №3. - С. 83-87.

7. Светлицкая О.И., Канус И.И. Респираторная поддержка у пациентов с острым повреждением легких // Новости хирургии. - 2014. - Том 22. - №4. - С. 474-480.

8. Липницкий А.Л., Марочков А.В., Морозов Д.П., Акулич Н.В., Жилинский Д.А., Шваленок В.В. Прогностическая ценность уровня холестерина у больных в критическом состоянии // Здравоохранение. - 2012. - №1. - С. 8-11.

9. Leardi S., Altilia F., Delmonaco S., Cianca G., Pietroletti R., Simi M. Blood levels of cholesterol and postoperative septic complications // Ann Ital Chir. - 2000. - Vol. 71. - №2. - P. 233-237.

10. Biller K., Fae P., Germann R., Drexel H., Walli A.K., Fraunberger P. Cholesterol rather than procalcitonin or C-reactive protein predicts mortality in patients with infection // Shock. - 2014. - Vol. 42. - №2. - P. 129-132.

11. Fraunberger P., Nagel D., Walli A.K., Seidel D. Serum cholesterol and mortality in patients with multiple organ failure // Crit Care Med. - 2000. - Vol. 28. - №10. - P. 3574-3575.

1. Способ прогнозирования полиорганной недостаточности у пациентов после абдоминальных хирургических вмешательств, при котором определяют в крови уровень общего холестерина, отличающийся тем, что при снижении уровня общего холестерина в первые, вторые и третьи сутки после операции меньше 3,4 ммоль/л констатируют высокий риск развития полиорганной недостаточности.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что при нарастании в динамике уровня общего холестерина констатируют снижение риска развития полиорганной недостаточности, при снижении в динамике уровня общего холестерина либо при сохраняющемся низком уровне общего холестерина констатируют увеличение риска развития полиорганной недостаточности.

3. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что время от получения образца крови пациента до получения результата риска развития органной недостаточности составляет менее 60 минут.

4. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что объем крови, взятой для исследования, составляет от 100 мкл до 200 мкл.

Способ относится к области медицины, а именно к интенсивной терапии критических состояний, и представляет собой способ лабораторной диагностики синдрома жировой эмболии, включающий забор крови из вены и артерии.

Биологический способ анализа для контроля качества нутрицевтиков и лекарственных средств // 2570626

Изобретение относится к области биотехнологии. Способ обнаружения вещества, которое опосредует положительную регуляцию транскрипции гена биологического маркера, или определения, опосредует ли вещество положительную регуляцию транскрипции гена биологического маркера, состоит из следующих этапов: обеспечение первой системы анализа, включающей последовательность мРНК, которая содержит область, кодирующую первый репортерный белок, функционально связанную с промотором первого биологического маркера; обеспечение второй системы анализа, включающей вторую последовательность мРНК, которая содержит область, кодирующую второй репортерный белок, функционально связанную с промотором второго биологического маркера; осуществление контакта указанной второй системы анализа с веществом; осуществления контакта указанной первой системы анализа со стандартным веществом или контрольным веществом и определение уровней транскрипции указанных первой и второй последовательностей мРНК.

Биомаркер для болезни альцгеймера или умеренного когнитивного расстройства // 2563987

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу диагностики болезни Альцгеймера или умеренного когнитивного расстройства. Сущность способа состоит в том, что способ включает измерение в крови десмостерола, бета-амилоида, гельсолина.

Способ определения атерогенности иммунных комплексов // 2549467

Изобретение относится к клинической иммунологии и может быть использовано для определения атерогенности иммунных комплексов, содержащих множественно модифицированные липопротеины низкой плотности (ИК-ммЛПНП).

Экспресс-способ определения атерогенности иммунных комплексов сыворотки крови человека // 2549466

Изобретение относится к клинической иммунологии и может быть использовано для экспресс-определения атерогенности иммунных комплексов (ИК) сыворотки крови человека.

Способ прогнозирования риска метаболического синдрома // 2530770

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использовано в лечебных учреждениях для оценки риска метаболического синдрома (МС). Определяют диагностические показатели клинико-лабораторными и функциональным методами с последующим расчетом прогностического индекса.

Способ прогнозирования течения ишемической болезни сердца // 2520755

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу прогнозирования течения ишемической болезни сердца. Сущность способа состоит в том, что до и после лечения одновременно определяют в сыворотке крови аполипопротеин А-1 (Апо А-1), общий холестерин и модифицированные липопротеины ЛП(а) с помощью дополнительной обработки 0,5 мл сыворотки крови 0,1 мл 0,1% раствором Тритона Х-100, которую инкубируют 15 мин при 20°С, перемешивают смесь методом встряхивания 120 раз в 1 мин, инкубируют с раствором Судана Б в течение 1 ч в темном термостате при 40°С и затем вносят пробу в лунку в геле агарозы с площадью основания 4×20 мм для электрофореза с последующей фиксацией электрофореграмм, их высушиванием, денситометрией.

Способ прогнозирования риска раннего развития атеросклероза у больных хроническим простатитом // 2504782

Изобретение относится к области медицины, в частности к прогнозированию риска раннего развития атеросклероза у больных хроническим простатитом. Сущность способа состоит в том, что в сыворотке крови больных хроническим простатитом молодой возрастной группы определяют уровень общего тестостерона, секссвязывающего глобулина с последующим расчетом индекса свободного тестостерона, а также определяют содержание липопротеидов высокой плотности, триацилглицеридов и рассчитывают коэффициент атерогенного риска по формуле.

Способ определения минимально модифицированных липопротеинов низкой плотности в сыворотке или плазме крови человека // 2501013

Изобретение относится к клинической биохимии, и может быть использовано в лабораторной диагностике для определения атерогенности крови по уровню содержания минимально модифицированных липопротеинов низкой плотности (ММ-ЛПНП) в сыворотке или плазме крови человека.

Способ определения атерогенности крови человека // 2497116

Настоящее изобретение относится к клинической биохимии и описывает способ определения модифицированных липопротеинов низкой плотности (мЛПНП) в сыворотке (плазме) крови человека путем обработки буфером, содержащим поливинилпирролидон (ПВП) с последующей турбидиметрической регистрацией смеси, где обработку сыворотки или плазмы крови человека ведут 10% раствором ПВП-35000±5000 в 0,01 М Трис-HCl-буфере, рН 7,4, содержащем 0,15 М NaCl, при объемном соотношении сыворотка(плазма) : ПВП от (1:2) до (1:10), инкубируют 10 мин при комнатной температуре, измеряют светопоглощение в опытной и контрольной пробах, вычисляют разность между ними и при величине разности более 15 Е констатируют повышенный уровень атерогенных мЛПНП в крови и наличие атеросклеротического процесса у обследуемого человека.

Способ оценки эффективности лечения хронического генерализованого пародонтита // 2632102

Изобретение относится к области медицины, а именно к исследованию физических и химических свойств биологической жидкости, и может быть использовано в терапевтической стоматологии для оценки эффективности лечения хронического генерализованного пародонтита (ХГП) у пациентов с метаболическим синдромом (МС). Способ включает биохимическое исследование ротовой жидкости до и после проведенного лечения у пациентов с диагностированным хроническим генерализованным пародонтитом и диагностированным метаболическим синдромом, с использованием спектрофотометрического анализа определяют липидный профиль ротовой жидкости, а именно концентрацию триглицеридов (ТГ), общего холестерина (ОХ), липопротеинов низкой плотности (ЛПНП) и липопротеинов высокой плотности (ЛПВП). При изменении концентрации ТГ с 0,04±0,01 ммоль/л до 0,01±0,001 ммоль/л, ОХ с 0,08±0,02 ммоль/л до 0,04±0,02 ммоль/л, ЛПНП с 0,04±0,001 ммоль/л до 0,01±0,001 ммоль/л, ЛПВП с 0,08±0,01 ммоль/л до 0,12±0,01 ммоль/л лечение оценивают как эффективное. Применение изобретения обеспечивает возможность оценки эффективности лечения ХГП и повышение точности оценки у больных ХГП с сопутствующим метаболическим синдромом. Достоверные изменения показателей липидного профиля в ротовой жидкости больных генерализованным пародонтитом (Р<0,01) позволяют сделать вывод о том, что для оценки эффективности лечения ХГП исследование слюны является показательным и может быть рекомендовано для использования в условиях пародонтологического отделения. 2 пр.

Способ выделения и исследования атерогенности иммунных комплексов, содержащих множественно модифицированные липопротеины // 2632118

Изобретение относится к медицине и предназначено для выделения и исследования иммунных комплексов, содержащих множественно модифицированные липопротеины низкой плотности (ИК-ммЛНП), из сыворотки крови человека. Агрегируют из сыворотки крови человека множественно модифицированные ЛНП в условиях 9,1% ПВП-35000 при комнатной температуре, осаждают центрифугированием, тщательно декантируют. Полученный супернатант инкубируют при 4°С в течение 30 мин. Образовавшиеся агрегаты ИК-ммЛНП осаждают повторным центрифугированием, декантируют, растворяют преципитат в буфере без ПВП и определяют содержание холестерина, триацилглицеринов. Определяют содержание IgG в составе преципитата. Исследуют комплемент-связывающую способность иммунных комплексов, содержащих ммЛНП. Способ может применяться для ранней диагностики субклинического атеросклероза. 1 ил., 5 табл., 3 пр.

Стабилизация и анализ жирных кислот в биологическом образце при хранении на твердом носителе // 2639455

Настоящее изобретение относится к способу стабилизации жирных кислот, присутствующих в образце, таком как биологические жидкости (например, кровь, слюна, грудное молоко, моча, сперма, плазма и сыворотка крови), причем способ предусматривает нанесение жирных кислот или образца, содержащего жирные кислоты, на твердый носитель, который содержит твердую подложку, по меньшей мере одно хелатообразующее средство и по меньшей мере один антиоксидант, где твердая подложка содержит менее 2 мкг/см2 примесей, где примеси представляют собой одно или более соединений, выбранных из группы, состоящей из насыщенных жирных кислот, сложных эфиров насыщенных жирных кислот, смоляных кислот и сложных эфиров смоляных кислот. Настоящее изобретение дополнительно относится к способу определения состава жирных кислот в образце при хранении на таком носителе. причем способ предусматривает: (a) нанесение образца на твердый носитель, содержащий твердую подложку, по меньшей мере одно хелатообразующее средство и по меньшей мере один антиоксидант, где твердая подложка содержит менее 2 мкг/см2 примесей, в результате чего образец становится сорбированным на твердой подложке; (b) определение состава жирных кислот в образце, сорбированном на твердой подложке, где примеси представляют собой одно или более соединений, выбранных из группы, состоящей из насыщенных жирных кислот, сложных эфиров насыщенных жирных кислот, смоляных кислот и сложных эфиров смоляных кислот. Также изобретение относится к твердому носителю и способу его получения. 5 н. и 69 з.п. ф-лы, 8 ил., 13 табл.

Способ определения активности n-3 полиненасыщенной жирной кислоты в образце рыбьего жира // 2642292

Изобретение относится к биотехнологии. Предложен способ in vitro определения наличия в образце рыбьего жира активности n-3 полиненасыщенной жирной кислоты (PUFA). Обеспечивают первую тестовую систему, включающую первую последовательность мРНК, кодируемую первым геном биомаркера, которая имеет кодирующую область первого репортерного белка, функционально связанную с промотором первого маркера. Приводят первую тестовую систему в контакт со стандартным веществом или контрольным веществом. Обеспечивают вторую тестовую систему, включающую вторую последовательность мРНК, кодируемую вторым геном биомаркера, которая имеет кодирующую область второго репортерного белка, функционально связанную со вторым промотором маркера. Приводят вторую тестовую систему в контакт с образцом рыбьего жира. Первый и второй гены маркеров выбраны из группы, состоящей из последовательностей нуклеиновых кислот, которые кодируют проапоптотический белок, гомологичный С/ЕВР (CHOP), ER белок, связывающий шапероны (BiP), фактор активации транскрипции 4 (ATF-4), и белок I, связывающий X-box (Xbp-1). Определяют уровни транскрипции первой и второй последовательностей мРНК. Определяют образец рыбьего жира как имеющий PUFA активность в случае, если образец опосредует положительную регуляцию транскрипции гена маркера и при этом уровень транскрипции второй последовательности мРНК является более высоким, чем уровень транскрипции первой последовательности мРНК. Изобретение позволяет исследовать продукты питания, нутрицевтики и лекарственные средства на наличие активности n-3 PUFA. 12 з.п. ф-лы, 1 ил., 4 пр.