Способ массового разведения яйцееда ooencyrtus kuvanae (howard)
Владельцы патента RU 2730035:
Федеральное бюджетное учреждение "Всероссийский научно-исследовательский институт лесоводства и механизации лесного хозяйства (ФБУ ВНИИЛМ) (RU)
Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой способ массового разведения яйцееда, включающий замачивание зараженных яиц непарного шелкопряда на 4 часа в 9% растворе пищевой уксусной кислоты (СН3СООН), промывание в проточной воде, сушку на открытом воздухе и помещение в садки, заражение их Ooencyrtus kuvanae в пропорции на одну часть энтомофага двадцать частей яиц насекомых хозяев, садок закрывание плотной тканью, поверх которой размещают ватный диск, смоченный 25% раствором меда, и выдерживают 16 часов в световом периоде при температуре +25°C днем, 8 часов при +17°C ночью и влажности 50-60%. Изобретение позволяет повысить выход имаго яйцееда с сохранением его заражающей способности и плодовитости. 2 табл.
Изобретение относится к области лесного хозяйства, в частности к биологическому методу защиты лесов путем массовой наработки культуры яйцееда Ooencyrtus kuvanae (Howard, 1910) (Hymenoptera: Encyrtidae) и его последующего выпуска в очаги вредителей для борьбы с ними.
Известен способ разведения Ooencyrtus kuvanae на яйцах альтернативного вида насекомого-хозяина - павлиноглазки Philosamia ricini (Donovan, 1798) (Lepidoptera: Saturniidae) [1]. Способ может быть использован только для поддержания культуры яйцееда, но для массового разведения О. kuvanae он не пригоден.
Известен также способ наработки культуры О. kuvanae на свежих яйцах непарного шелкопряда Lymantia dispar (Linnaeus, 1758) (Lepidoptera: Erebidae), полученных в результате лабораторного разведения насекомого-хозяина [2]. Недостатки способа: большие трудозатраты при выкармливании гусениц фитофага, а также риск потери биокультуры, поскольку при лабораторном содержании гусеницы непарного шелкопряда неустойчивы к поражению вирусной инфекцией.
Известен, в том числе, способ наработки культуры О. kuvanae (оэнциртуса) на яйцах непарного шелкопряда Lymantia dispar, собранных в природе и прошедших диапаузу (принятый за прототип) [2]. Это самый дешевый и эффективный способ массового разведения О. kuvanae, поскольку при наличии мест с повышенной численностью непарного шелкопряда в древостоях, можно собрать достаточный запас биоматериала (кладок яиц), который хранят при пониженной температуре, и затем прошедшие диапаузу яйца непарного шелкопряда используют для массового разведения энтомофага.
Однако в результате заражения отдиапаузировавших яиц непарного шелкопряда, значительная часть гусениц насекомого-хозяина отрождается в течение нескольких суток, яйцеед не успевает заразить все яйца, и массовая наработка культуры энтомофага невозможна. Такие яйца авторами предложено предварительно обрабатывать в низкотемпературной камере 2 часа при -70°C или тепловой обработкой: 1 час при 60°C и 70-80% влажности или прогревание в течение часа в воде той же температуры. Одновременно было установлено, что из убитых в результате этих обработок яиц непарного шелкопряда процент выхода имаго яйцееда снижается (по сравнению с заражением живых яиц) падая до 10% и ниже. Кроме того, при прохождении нескольких поколений оэнциртуса на убитых яйцах, его плодовитость не сразу восстанавливается и при заражении свежих яиц непарного шелкопряда. Следовательно, недостатками способа являются: риск большой потери биоматериала, поскольку при любом режиме хранения живых яиц непарного шелкопряда, они выходят из диапаузы, а также неэффективность проведения температурных обработок яиц для наращивания численности О. kuvanae с целью успешного применения энтомофага в защите леса от вредителя.
В основу изобретения поставлена задача усовершенствования способа массового разведения яйцееда О. kuvanae на прошедших диапаузу яйцах непарного шелкопряда, повышение выхода имаго яйцееда с сохранением его заражающей способности и плодовитости.
Технический результат достигается за счет того что, перед заражением яйца непарного шелкопряда замачивают на 4 часа в 9% растворе пищевой уксусной кислоты (СН3СООН), промывают в проточной воде сушат на открытом воздухе и помещают в садки, заражая их Ooencyrtus kuvanae в пропорции на одну часть энтомофага двадцать частей яиц насекомых хозяев, садок закрывают плотной тканью, поверх которой размещают ватный диск, смоченный 25% раствором меда, и выдерживают 16 часов в световом периоде при температуре +25°C днем, 8 часов при +17°C ночью и влажности 50-60%.
Пример конкретного осуществления способа.
Очищенные от пушка яйца непарного шелкопряда, прошедшие диапаузу, замачивают на 4 часа в 9%-ном растворе пищевой уксусной кислоты (СН3СООН), затем промывали под струей проточной воды и высушивали на открытом воздухе. Сухие яйца помещали в садки, куда выпускали имаго яйцееда О. kuvanae в пропорции на одну часть энтомофого - двадцать частей яиц насекомых-хозяев. Садок закрывали плотной тканью, сверху ткани помещали ватный диск, смоченный 25%-ным раствором меда. По мере высыхания диск смачивали. Содержание садков проводили при 16-часовом световом периоде, температуре +25°C днем и 8 часов +17°C ночью, и влажности 50-60%).
В опыте использовано 10 повторностей заражения яйцеедом обработанных по заявленному способу яиц непарного шелкопряда. Для сравнения результатов заявляемого способа разведения яйцееда, его воспроизводство проведено также по способу-прототипу на яйцах непарного шелкопряда из той же партии, очищенных от пушка и не подвергавшихся каким-либо воздействиям (10 повторностей). В каждой повторности содержалось 2 тыс. яиц непарного шелкопряда. Полученные данные представлены в таблице 1.
Из данных таблицы 1 видно, что доля отродившихся яйцеедов по заявляемому способу в среднем составляет 68,7% (min 64,3% - max 75,1%) что в 4,8 раза больше, чем при развитии на яйцах по способу-прототипу, где выход яйцееда составлял 14,4% (min 6,8% - max 21,1%).
Для оценки эффективности предложенного способа по основным общепринятым биологическим показателям оэнциртуса в сравнении с показателями способа-прототипа, выполнен учет сроков развития (от даты заражения до начала выхода имаго) и соотношение полов яйцееда. Определена плодовитость самок, выращенных по заявленному способу и прототипу. Для этого на 5-й день после отрождения имаго оэнциртуса, методом случайной выборки из каждой зараженной партии отбирали по 1 самке. Каждую самку подсаживали в контейнер, где содержалось 150 очищенных от пушка свежих яиц непарного шелкопряда (срок развития яиц - не более месяца после откладки бабочками). В опыте использовали по 10 самок яйцееда, полученных по заявляемому способу и способу-прототипу. Содержание самок и их кормление осуществляли по приведенному выше способу. Оценивали продолжительность их жизни. Отродившееся поколение самки ежедневно отлавливали - для исключения перезаражения яиц насекомого-хозяина в опыте. Для получения общего результата плодовитости самок, подсчитывали также число зараженных яиц с погибшими личинками оэнциртуса.
Результаты оценки популяционных параметров О. kuvanae при выращивании по предложенному способу и способу-прототипу, представлены в таблице 2.
Сравнительный анализ предлагаемого технического результата и прототипа показывает, что заявляемый способ отличается высоким выходом биоматериала (имаго яйцееда) при этом на естественном уровне сохраняются основные биологические показатели энтомофага.
Разведение О. kuvanae по заявленному способу выполнено на 8 поколениях яйцееда. Полученные особи использованы как при получении следующих поколений лабораторной популяции оэнциртуса, так и при опытно-производственном применении энтомофага против непарного шелкопряда.
Новизна и промышленная применимость предложенного способа в сравнении с прототипом проверены экспериментально. Полученные опытным путем данные, показывают, использование яиц насекомого-хозяина, прошедших обработку слабым раствором органической кислоты, позволяет в 4,8 раз увеличить выход имаго яйцееда, при этом сохраняются на естественном уровне плодовитость и эффективность особей О. kuvanae.
Таким образом, заявленный способ позволяет повысить производительность работ при массовом разведении яйцееда О. kuvanae, снизить потери биоматериала (яиц непарного шелкопряда) и проводить массовую наработку культуры энтомофага для выпуска в очаги вредителя.
Источники информации
1. Tunca Н., Venard М., Colombel Е.-А., Tabone Е. A new substitute host and its effects on some biological properties of Ooencyrtus kuvanae // Bulletin of Entomological Research. - 2017. - V. 107. - Issue 6. - pp. 742-748.
2. Методическое руководство по применению интродуцированного яйцееда оэнциртуса куванэ против непарного шелкопряда // http://agrozoo.ru/base_gvc/karantin/document/17.html.
Способ массового разведения яйцееда Ooencyrtus kuvanae (Howard, 1910) (Hymenoptera: Encyrtidae), включающий заражение энтомофагом прошедших диапаузу яиц непарного шелкопряда Lymantia dispar (Linnaeus, 1758) (Lepidoptera: Erebidae), отличающийся тем, что перед заражением яйца непарного шелкопряда замачивают на 4 часа в 9% растворе пищевой уксусной кислоты (СН3СООН), промывают в проточной воде, сушат на открытом воздухе и помещают в садки, заражая их Ooencyrtus kuvanae в пропорции на одну часть энтомофага двадцать частей яиц насекомых хозяев, садок закрывают плотной тканью, поверх которой размещают ватный диск, смоченный 25% раствором меда, и выдерживают 16 часов в световом периоде при температуре +25°C днем, 8 часов при +17°C ночью и влажности 50-60%.
