Способ оценки длины стороны столбчатых гистологических структур с гексагональной укладкой

Авторы патента:

Ноздрин Григорий Антонович (RU)

Новик Яна Викторовна (RU)

Тишков Сергей Николаевич (RU)

G01N1/28 - Исследование или анализ материалов путем определения их химических или физических свойств (разделение материалов вообще B01D,B01J,B03,B07; аппараты, полностью охватываемые каким-либо подклассом, см. в соответствующем подклассе, например B01L; измерение или испытание с помощью ферментов или микроорганизмов C12M,C12Q; исследование грунта основания на стройплощадке E02D 1/00;мониторинговые или диагностические устройства для оборудования для обработки выхлопных газов F01N 11/00; определение изменений влажности при компенсационных измерениях других переменных величин или для коррекции показаний приборов при изменении влажности, см. G01D или соответствующий подкласс, относящийся к измеряемой величине; испытание

A61B5/1079 - Измерение для диагностических целей (радиодиагностика A61B 6/00; диагностика с помощью ультразвуковых, инфразвуковых и звуковых волн A61B 8/00); опознание личности

A61B5/107 - измерение физических размеров, например размеров тела в целом или его частей

Владельцы патента RU 2741724:

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Новосибирский государственный аграрный университет" (RU)

Изобретение относится к области медицины, а именно к гистологии. Для оценки длины столбчатых гистологических структур с гексагональной укладкой на косо ориентированных гистологических срезах проводят замеры трех сторон гистологической структуры, а оценку длины стороны гистологической структуры вычисляют по оригинальной расчетной формуле. Способ позволяет получить точные измерения длины стороны гистологической структуры с гексагональной укладкой на срезах, полученных при помощи замораживающего микротома или микротома для изготовления парафиновых срезов без точного ориентирования блоков изучаемого органа для нарезки. 2 ил., 1 табл.

Изобретение относится к гистологии, а именно к оценке длины столбчатых гистологических структур с гексагональной укладкой.

Известен ряд патентов на способы оценки морфологического состояния различных гистологических структур в частности печени, чья гистологическая структура и подпадает под определения столбчатых с гексагональной укладкой.

Среди них - способ оценки морфологических изменений ткани печени при острой ишемии (Патент РФ №2131124 от 13.08.1996); способ комплексной морфометрической оценки капсулы печени (Патент РФ №2153851 от 30.03.1999); способ гистоморфометрического исследования дистракционного остеогенеза (Патент РФ №2213963 от 16.04.2001); способ оценки состояния печени при лечении описторхоза (Патент РФ №2283493 от 27.10.2003).

Способ оценки морфологических изменений ткани печени при острой ишемии (Патент РФ №2131124 от 13.08.1996) заключается в том, что степень тяжести патологических процессов оценивается суммой морфологических изменений, выраженных в бальной системе в зависимости от ширины локализации патологического процесса. Данный метод может быть использован только тогда, когда наблюдается выраженный патологический процесс (дистрофии, некроз, холестаз, дилатация сосудов, стаз в синусоидах), и не возможно его использовать для общей оценки состояния печени. Также данный метод использует субъективную бальную систему оценивания признаков.

Способ комплексной морфометрической оценки капсулы печени (Патент РФ №2153851 от 30.03.1999) заключается в том, что степень утолщения капсулы органа проводят как в перпендикулярном поверхности органа направлении, так и в параллельном ему. Данный метод оценки линейных размеров гистологических структур не удобен ввиду того, что необходимо точно позиционировать идентифицируемую гистологическую структуру в блоке для последующей нарезки.

Способ гистоморфометрического исследования дистракционного остеогенеза (Патент РФ №2213963 от 16.04.2001) заключается в том, что процесс остеогенеза на гистологических срезах оценивается выведением специальных индексов, основанных на линейных размерах и площади отдельных гистологических структур. Этот крайне

узкоспециализированный метод требует обязательной оцифровки снимком и использования специального программного обеспечения для оценки площадей исследуемых гистологических структур.

Способ оценки состояния печени при лечении описторхоза (Патент РФ №2283493 от 27.10.2003) заключается в том, что об исходе переболевания распространенной печеночной нозологией (описторхозу) судят по характеристике клеточного состава на единицу площади. Данный метод является цитологическим и не акцентирует внимание на морфологии органа и неклеточных элементах.

Ни один из выше представленных аналогов не является ближайшим аналогом, который раскрывает все признаки ограничительной части формулы.

Техническая задача

При использовании современных средств получения гистологических срезов, замораживающего или парафинового микротомов, всегда остро стоит задача точной ориентировки гистологических структур перпендикулярно лезвию микротома. Чем точнее будет произведен гистологический сред, тем более объективно можно будет судить о его состоянии, в том числе и при постановке точного медико-диагностического заключения о статусе органа и организма в целом. Также при проведении медико-биологических исследований необходимо точно произвести замер линейных размеров отдельных гистологических показателей органов и сравнить их друг с другом, однако когда срезы произведены косо может произойти замер, который в совокупности замеров может привести к ложноотрицательному эффекту теста проверки на достоверность вероятности измерений. Этот эффект будет иметь исключительно аналитический, а не статистический характер.

Таким образом, необходимо изменить технологию получения гистологических срезов. Решение этой проблемы производилось путем точного ориентирования образца на фиксирующем столике микротома. Этот метод накладывал множество существенных ограничений. Среди них предварительная жесткая фиксация в пинцете для позиционирования, которая могла повредить срез, малые размеры анализируемого образца, которые не позволяли должным образом оценить угол наклона плоскости перпендикуляра структур и плоскости среза, а также не всегда четкая фиксируемая визуально направленность направлений волокон органа. При использовании парафинового микротома эта задача усложнялась, поскольку при заливке анализируемого образца парафиново-восковой смесью орган просто ставится на дно емкости и производить поддерживающую фиксацию для предотвращения изменения угла наклона очень сложно, тем более что работа идет с горячим раствором.

Решение данной задачи может крыться не в кардинальном изменении технологии приготовления срезов, а в расчете истинных значений гистологических структур. Это возможно благодаря тому, что для максимального заполнения объема и избегания высоких давлений с соседними структурами, ткань или иная гистологическая структура, которую можно представить на плоскости, приобретает форму правильных шестиугольников или сот. На гистологических срезах, выполненных косо, отображаются неправильные шестиугольники. Наша задача рассчитать значения истинного шестиугольника гистологической структуры или ткани по срезу в виде неправильного шестиугольника.

Предлагаемый способ позволяет производить срезы без точного позиционирования в микротоме при получении косых срезов органов и тканей.

Способ оценки длины стороны гистологических структур с гексагональной укладкой на срезах с блоков при их косой и ненаправленной ориентации на фиксирующем столике микротома, включающий измерение дли трех сторон гистологической структуры как показано на фиг. 2А, а оценку длины стороны гистологической структуры проводят по формуле:

Где: х - длина стороны элементарной ячейки гистологической структуры с гексагональной укладкой;

а, b, с - длины сторон эмпирического треугольника, на изображении при косом сечении гистологической структуры с гексагональной укладкой

На фиг. 1. Изображено сечение прямой треугольной призмы, чье основание рассчитывается по нашей формуле на основании данных срезов.

На фиг. 2. Изображены косые гистологические срезы печени, обладающие столбчатой структурой при гексагональной укладке, А - 1-я мышь, Б - 2-я мышь; В - 3-мышь; Г - 4-я мышь

Для математической проверки правильности расчетов метода использовали гистологические срезы печени от 4 мышей. В результате изменений полученные значения были меньше, чем наименьшее из измерений (табл.), что следует из методики выведения формулы по косому сечению треугольной прямой призмы (фиг. 1). В таблице a, b и с - это измерения эмпирического треугольника - составной единицы печеночной триады при косом гистологическом срезе печени каждой отдельной мыши, используемой для оценки метода.

Таким образом, согласно полученным данным (табл.) прослеживается четкая зависимость, при которой наблюдается более низкое расчетное значение, чем самое низкое из измеренных значений. Данный эффект позволяет избежать ошибок измерений и привести к истинному значению эмпирические значении произведенные в результате замеров косо направленных срезов и, как следствие, потенциального переделывания срезов.

Преимущество способа, заключается в том, что он менее трудоемкий, так как позволяет точно оценить косо приготовленные гистологические срезы, не требующие точности в приготовлении.

Способ оценки длины стороны гистологических структур с гексагональной укладкой на срезах с блоков при их косой и ненаправленной ориентации на фиксирующем столике микротома, включающий измерение длин трех сторон гистологической структуры, как показано на фиг. 2А, а оценку длины стороны гистологической структуры проводят по формуле:

где: х - длина стороны элементарной ячейки гистологической структуры с гексагональной укладкой;

а, b, с - длины сторон эмпирических треугольников на изображении при косом сечении гистологической структуры с гексагональной укладкой.

Изобретение относится к способам и устройствам обнаружения, а именно к способам и устройствам для получения проб пара для детекторов, таких как спектрометрические детекторы, например спектрометры подвижности ионов и масс-спектрометры.

Способ иммуноферментного анализа идиотипических и антиидиотипических антител к бензо[а]пирену в биологических жидкостях человека // 2741382

Изобретение относится к области иммунологии, биотехнологии и клинической лабораторной диагностики. Раскрыт способ определения идиотипических и антиидиотипических антител к бензо[а]пирену в биологических жидкостях человека, включающий забор и подготовку донорской крови, иммобилизацию человеческого рекомбинантного идиотипического Т72 и антиидиотипического А4 антител к бензо[а]пирену на иммунологический планшет, инкубацию с сывороткой крови человека, инкубацию с антителами к IgG человека, меченными пероксидазой хрена и анализ с помощью раствора тетраметилбензидина.

Способ подготовки пробы для газохроматографического определения хлорорганических соединений в биоматериале // 2741368

Изобретение относится к биологии, экологии, медицине. Способ подготовки пробы для газохроматографического определения хлорорганических соединений в биоматериале включает отбор биоматериала, в качестве которого используют биологические жидкости или придатки кожи, из которых получают измельченные гомогенизированные образцы, увлажненные бидистиллированной водой до влажности не менее 80% и двукратно криоденатурированные, отбирают пробу образца в количестве, достаточном для получения не более 0,5 г сухого липофильного экстракта, при этом в навеску пробы образца, которую принимают за 5 частей по массе, вносят 3 см3 1%-ного раствора бикарбоната натрия, и после интенсивного встряхивания добавляют экстрагент, в качестве которого используют смесь трихлорметан : метиловый спирт : гексан, причем на 5 частей навески пробы образца в г берут 6 частей трихлорметана в см3, 3 части метилового спирта в см3 и 5 частей n-гексана в см3, интенсивно встряхивают 5 минут и проводят экстракцию в течение 25 мин, липофильный экстракт хлорорганического соединения отстаивают до разделения фаз, после чего водно-спиртовой слой удаляют, а экстракт фильтруют через безводный сульфат натрия, выпаривают и затем очищают концентрированной серной кислотой.

Способ подготовки пробы для газохроматографического определения хлорорганических соединений в биоматериале // 2741367

Изобретение относится к биологии, экологии, медицине. Способ подготовки пробы для газохроматографического определения хлорорганических соединений в биоматериале заключается в том, что отбирают пробы из внутренних органов и тканей многоклеточного животного, гомогенизируют и полученный гомогенизированный образец помещают в ацетон и после интенсивного встряхивания добавляют n-гексан при соотношении: навеска образца в г:ацетон в см3:n-гексан в см3, равном 2:4:3, закрывают посуду парафиновой пленкой и оставляют экстрагироваться на лабораторном шейкере со скоростью не более 1 Гц на 25 минут, после чего жидкую фазу декантируют в делительную воронку, содержимое которой двукратно промывают порциями n-гексана по 2-3 см3, после чего в нее вносят 50 см3 1%-ного раствора KCl или NaCl, встряхивают и отстаивают до разделения фаз, после чего водно-ацетоновый слой удаляют, затем осуществляют полное выпаривание n-гексана, для очистки полученного липофильного экстракта от соэкстративных веществ в содержащую его посуду вносят 20-25 см3 n-гексана, тщательно перемешивают и вносят 10 см3 H2SO4 конц., повторно перемешивают содержимое и оставляют на 24 часа, затем отделяют кислоту, а n-гексановый слой переносят в делительную воронку, далее промывают липофильный экстракт в n-гексане порцией 20 см3 1%-ного бикарбоната натрия, а затем порциями бидистиллированной воды объемом 20-30 см3 до нейтральной реакции универсального бумажного индикатора, полученный раствор фильтруют через безводный сульфат натрия и осуществляют полное выпаривание n-гексана.

Способ оценки качества образца флавивируса для получения трехмерной структуры с использованием лазера на свободных электронах // 2741124

Изобретение относится к области биологии. Предложен способ оценки качества образца флавивируса для получения трехмерной структуры с использованием лазеров на свободных электронах, включающий разделение раствора, содержащего частицы флавивируса, на три порции, где первую и вторую порции сканируют с использованием просвечивающего электронного микроскопа, причем вторую порцию предварительно подвергают витрификации, а третью порцию помещают в рентгеновский кварцевый капилляр с последующим определением статистического распределения частиц по размерам методом малоуглового рентгеновского рассеяния.

Способ определения содержания органического хлора в химических реагентах, применяемых в нефтедобыче // 2740991

Изобретение относится к способам определения органического хлора. Описан способ определения содержания органического хлора в химических реагентах на органической основе, на водной основе, на основе соляной кислоты и в твердом агрегатном состоянии, применяемых в нефтедобыче, включающий введение в подготовленный анализируемый образец внутреннего стандарта - раствор висмута в неполярном растворителе с массовой долей висмута 5000 млн-1 в количестве 10% от навески образца, выполнение измерений на рентгенофлуоресцентном волнодисперсионном спектрометре.

Способ количественного определения производных морфолина // 2740909

Изобретение относится к фармацевтическому анализу. Раскрыт способ количественного определения производных морфолина, включающий растворение анализируемой пробы, обработку аликвотной части приготовленного раствора химическими реактивами с последующим фотоэлектроколориметрированием полученных окрашенных растворов, количественное определение целевого вещества по градуировочным графикам.

Способ прогнозирования риска развития жизнеугрожающих осложнений у пациентов с инфарктом миокарда на фоне хронической обструктивной болезни легких // 2740896

Изобретение относится к области медицины, а именно к терапии, кардиологии и пульмонологии. Раскрыт способ прогнозирования развития жизнеугрожающих осложнений у пациентов с инфарктом миокарда на фоне хронической обструктивной болезни легких на основе определения в плазме крови уровня гомоцистеина, в котором для прогнозирования кардиогенного шока и отека легких как жизнеугрожающих осложнений у пациентов с инфарктом миокарда на фоне хронической обструктивной болезни легких определяют уровень гомоцистеина в плазме крови методом иммуноферментного анализа в сочетании с определением фенотипа хронической обструктивной болезни легких и далее рассчитывают вероятность развития кардиогенного шока и отека легких.

Способ прогнозирования осложненного течения родового акта у юных первородящих женщин // 2740803

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству и гинекологии. Предложен способ прогноза осложненного течения родового акта у юных первородящих.

Микроскопия структурированного освещения уменьшенной размерности со структурированными массивами наноразмерных лунок // 2740776

Изобретение относится к области микроскопии структурированного освещения (SIM). Технический результат заключается в уменьшении числа изображений и размеров, необходимых, чтобы разрешать флуоресцентные образцы с использованием SIM с помощью структурированных особым образом проточных ячеек, и оптимизацию перемещения светового пучка относительно флуоресцентных образцов для достижения реализации SIM, которая может использоваться в методах линейного сканирования.

Способ оценки состояния дисбиоза ротоглотки у детей // 2741709

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической лабораторной диагностике, и может быть использовано для оценки состояния дисбиоза ротоглотки у детей. В слюне ребенка методом газожидкостной хроматографии определяют содержание уксусной, пропионовой, изомасляной, масляной и капроновой кислот.