Способ диагностики состояния микрофлоры влагалища и кишечника у женщин с осложненной беременностью



Владельцы патента RU 2742110:

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Санкт-Петербургский государственный педиатрический медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО СПбГПМУ Минздрава России) (RU)

Изобретение относится к медицине, в частности к акушерству, гинекологии, гастроэнтерологии и функциональной диагностике, и может быть использовано для диагностики состояния микрофлоры влагалища и кишечника у женщин с осложненной беременностью. Для этого при исследовании влагалищной флоры одновременно исследуют микрофлору кишечника. При определенных величинах различных микроорганизмов во влагалищной и кишечной микрофлоре ставят разные диагнозы нормы и патологии влагалища и/или кишечника. Способ при его простоте, неинвазивности и информативности позволяет эффективно диагностировать состояние дисбиоза влагалища и/или кишечника, что, в свою очередь, может привести к развитию осложненной беременности. 4 пр.

 

Изобретение относится к медицине, в частности к акушерству, гинекологии, гастроэнтерологии и функциональной диагностике, и может применяться в диагностике осложненной беременности.

Известны способы диагностики влагалищной флоры для выявления патогенной среды при осложненной беременности путем анализа данных микроскопического исследования нативного препарата и микроскопии окрашенных препаратов [Е.В. Рыбин // Современные методы оценки микробиоценоза влагалища // Журнал акушерства и женских болезней, 2015, ТОМ LXIV ВЫПУСК 1, С. 53-65; Рухляда Н.Н., Горбакова Л.Ш. и др. // Инфицированные аборты I триместра беременности - Современная тактика ведения// Журнал скорая медицинская помощь, 2016 Том 17 выпуск 2, С. 57-61].

Недостатками этих способов являются как временная, так и аппаратная трудоемкость в определении влагалищной флоры, необходимость сложного и дорогостоящего оборудования. Кроме того, точность результатов в этих способах зависит от квалификации специалистов.

Ближайшим к заявляемому является способ определения патогенной флоры во влагалище при осложненной беременности с помощью бактериального посева [Ю.Э. Доброхотова, Ж.А. Мандрыкина и др. // Несостоявшийся выкидыш. Причины и возможности реабилитации //, Российский вестник акушера-гинеколога. 2016; 16(4): 85-90].

Недостатком способа, выбранного в качестве прототипа, является то, что он трудоемкий и затратный, требует большого количества питательных средств.

Задачей настоящего изобретения является повышение эффективности диагностики.

Технический результат поставленной задачи достигается тем, что в способе диагностики состояния микрофлоры влагалища и кишечника у женщин с осложненной беременностью, заключающемся в исследовании микрофлоры влагалища, одновременно исследуют состояние кишечной микрофлоры и при выявлении в микрофлоре влагалища Lactobacillus spp. более 80% и числе анаэробных или/и аэробных микроорганизмов Eubacterium spp., Gardnerella vaginalis + Prevotella bivia + Porphyromonas spp., Atobium vaginae, Staphylococcus spp. меньше 10%, Candida spp. не более 104, а также присутствии Escherichia coli и/или Lactobacillus spp. больше 107, наличии патогенных микроорганизмов Staphylococcus aureus не более 104, Citrobacter spp.не более 104, Candida spp. не более 104 и отсутствии анаэробного дисбаланса Bacteroides fragilis/ Faecalibacterium prausnitzii меньше 100 в кишечной микрофлоре, диагностируют нормоциноз влагалища и кишечника, при выявлении увеличенного числа анаэробных или/и аэробных микроорганизмов Eubacterium spp., Gardnerella vaginalis + Prevotella bivia + Porphyromonas spp., Atobium vaginae, Staphylococcus spp. больше 10%, Candida spp. более 104 во влагалище и снижении Lactobacillus spp. менее 80% и наличии патогенных микроорганизмов Staphylococcus aureus, не более 104, Citrobacter spp. не более 104, Candida spp. более 104, а также присутствии Escherichia coli больше 107 и/или Lactobacillus spp. больше 107 и отсутствии анаэробного дисбаланса Bacteroides fragilis/ Faecalibacterium prausnitzii меньше 100 в кишечнике, диагностируют дисбиоз влагалища и нормоциноз кишечника, при выявлении в микрофлоре влагалища Lactobacillus spp. более 80% и числе анаэробных или/и аэробных микроорганизмов Eubacterium spp., Gardnerella vaginalis + Prevotella bivia + Porphyromonas spp., Atobium vaginae, Staphylococcus spp. меньше 10%, Candida spp. не более 104, a в кишечной микрофлоре Escherichia coli меньше 107 и/или Lactobacillus spp. меньше 107, определение патогенных микроорганизмов Staphylococcus aureus, более 104, Citrobacter spp. более 104, Candida spp.более 104 и присутствии анаэробного дисбаланса Bacteroides fragilis/ Faecalibacterium prausnitzii больше 100 диагностируют нормоциноз влагалища и дисбиоз кишечника, при наличии патогенной среды во влагалищной и кишечной флоре, а также снижении во влагалище Lactobacillus spp. менее 80%, увеличении числа анаэробных или/и аэробных микроорганизмов Eubacterium spp., Gardnerella vaginalis + Prevotella bivia + Porphyromonas spp., Atobium vaginae, Staphylococcus spp. больше 10%, Candida spp. более 104, а в кишечнике снижении Escherichia coli меньше 107 и/или Lactobacillus spp. меньше 107, определении патогенных микроорганизмов Staphylococcus aureus, более 104, Citrobacter spp. более 104, Candida spp. более 104 и присутствии анаэробного дисбаланса Bacteroides fragilis/ Faecalibacterium prausnitzii больше 100 диагностируют дисбиоз влагалища и кишечника.

Физиологическое течение беременности обеспечивается за счет нормального микробиоценоза различных биотопов организма, обеспечивающих формирование колонизационной резистентности слизистой оболочки. Микробиоценоз влагалища и кишечника имеет существенные различия, что обусловлено анатомическими и функциональными особенностями. Вместе с тем, они тесно связаны между собой в единую экосистему, благодаря способности синтезировать секреторные иммуноглобулины, выполняющие защитные функции. Нарушение микрофлоры кишечника является первичным триггером разнообразных химических, физических, биологических и других факторов, оказывающих значительное влияние на характер течения и исход беременности.

Во влагалищной и в кишечной микрофлоре одновременно присутствует основной представитель двух биоценозов Lactobacillus spp. Показатель нормального его содержания во влагалище больше 80%, а в кишечнике больше 107. Два микробиоценоза находятся в состоянии равновесия между собой и при изменении состава во одной из флор влагалища или кишечника, также происходят изменения в другой. Все это способно привести к развитию инфекции беременности, т.к. уменьшение содержания Lactobacillus spp. снижается продукция ферментов, удерживающих рост патогенных микроорганизмов.

При этом происходит интенсивный рост таких патогенных микроорганизмов как Staphylococcus aureus, Citrobacter spp. и Candida spp., показатель нормы их содержания не более 104, которые могут одновременно встречаться, как и в кишечнике, так и во влагалище. Они способны мигрировать из флоры влагалища, в флору кишечника, или наоборот.

Также важно во влагалище определять содержание Eubacterium spp., Gardnerella vaginalis + Prevotella bivia + Porphyromonas spp., Atobium vagina, показатель нормы не более 10%, так как они могут препятствовать росту основного представителя влагалищной флоры Lactobacillus spp. и тем самым способствовать прогрессированию дисбиоза во влагалища и в последующем изменять состав кишечной микрофлоры.

В кишечнике еще важно исследовать содержание Escherichia coli, показатель нормы 107-108, помимо определения Lactobacillus spp. Т.к. часто происходит снижение содержания Escherichia coli без снижения Lactobacillus spp., в результате развивается дисбиоз кишечнике и это приводит к росту патогенных микроорганизмов, которые в последующем перемещаются во влагалище. Также наличие анаэробного дисбаланса Bacteroides fragilis/ Faecalibacterium prausnitzii, в норме меньше 100, показывает нарушение местного иммунного ответа, который косвенный признак дисбиоза кишечника.

Одновременное исследование микрофлоры влагалища и кишечника повышает точность диагностики состояния флоры влагалища и кишечника, при наличии патогенной среды диагностировать дисбиоз влагалища и/или кишечника, который приводит к последующему инфицированию беременности и способствует развитию осложненной беременности.

Способ осуществляется следующим образом. Исследование флоры влагалища проводят с помощью «Фемофлора-16», а кишечной «Колонофлором-16». Исследование влагалищной и кишечной микробиоты с помощью ПЦР РВ позволяет выполнить качественный и количественный анализ состава флоры, путем сравнения содержания конкретных представителей нормо- и условно-патогенной биоты с общей бактериальной массой (ОБМ). Полученные данные сопоставляют с показателями нормы. Если при исследовании влагалища выявляют снижение Lactobacillus spp. меньше 80%, увеличение числа анаэробных или/и аэробных микроорганизмов больше 10% Eubacterium spp., Gardnerella vaginalis + Prevotella bivia + Porphyromonas spp., Atobium vaginae, Staphylococcus spp. и присутствие Candida spp. более 104. А в кишечной микрофлоре обнаруживают уменьшение Escherichia coli меньше 107 и/или Lactobacillus spp. меньше 107, помимо этого, присутствуют патогенные микроорганизмы в большом количестве Staphylococcus aureus, более 104, Citrobacter spp. более 104, Candida spp. более 104, Bacteroides fragilis/ Faecalibacterium prausnitzii больше 100 признак аэробного дисбаланса. Выставляют диагнозы: Дисбиоз влагалища. Дисбиоз кишечника.

Если обнаруживают во влагалищной микрофлоре Lactobacillus spp.меньше 80% и рост числа анаэробных или/и аэробных микроорганизмов больше 10% Eubacterium spp., Gardnerella vaginalis + Prevotella bivia + Porphyromonas spp., Atobium vaginae, Staphylococcus spp. и наличие Candida spp. более 104. В кишечнике не выявляют уменьшения числа основных представителей флоры Escherichia coli и Lactobacillus spp. больше 107, а также наличие патогенных микроорганизмов в пределах допустимых значений Staphylococcus aureus, не более 104, Citrobacter spp. не более 104, Candida spp.не более 104, признак аэробного дисбаланса меньше 100 Bacteroides fragilis/ Faecalibacterium prausnitzii. Ставят диагнозы: Дисбиоз влагалища. Нормоциноз кишечника.

Во влагалищной флоре определяют Lactobacillus spp. больше 80%, а число анаэробных и аэробных микроорганизмов меньше 10% Eubacterium spp., Gardnerella vaginalis + Prevotella bivia + Porphyromonas spp., Atobium vaginae, Staphylococcus spp. и Candida spp. не более 104. При исследовании кишечного микробиоценоза определяют сдвиг главных представителей (уменьшение Escherichia coli меньше 107 и/или Lactobacillus spp. меньше 107, а также находятся патогенные микроорганизмы за границами нормы (taphylococcus aureus, более 104, Citrobacter spp. более 104, Candida spp. более 104, Bacteroides fragilis/ Faecalibacterium prausnitzii больше 100 признак аэробного дисбаланса. В этом случае выставляют диагнозы: Нормоциноз влагалища. Дисбиоз кишечника.

Если определяют во влагалище Lactobacillus spp. больше 80%, а число анаэробных и аэробных микроорганизмов меньше 10% Eubacterium spp., Gardnerella vaginalis + Prevotella bivia + Porphyromonas spp., Atobium vaginae, Staphylococcus spp., Candida spp. не более 104 и в кишечной микрофлоре не выявляют изменения показателей количества основных представителей флоры Escherichia coli и Lactobacillus spp. больше 107, а также выявляют наличие патогенных микроорганизмов в пределах допустимых значений Staphylococcus aureus, не более 104, Citrobacter spp. не более 104, Candida spp. не более 104, признак аэробного дисбаланса меньше 100 Bacteroides fragilis/ Faecalibacterium prausnitzii, ставят диагнозы: Нормоциноз влагалища. Нормоциноз кишечника.

Пример 1. Больная К., 34 г. поступила 02.02.2020 в НИИ скорой помощи им. И.И. Джанелидзе поставлен диагноз погибшее плодное яйцо на сроке 9/10 нед. Выполнена диагностика заявляемым способом. При исследовании влагалища с помощью ПЦР РВ Lactobacillus spp. 103.0 меньше 80%, увеличение числа анаэробных микроорганизмов больше 10% Eubacterium spp. 106.9, Gardnerella vaginalis + Prevotella bivia + Porphyromonas spp.107.3, Atobium vaginae 106.7, Candida spp. 106.7. При анализе кишечника обнаружено снижение Escherichia coli 2*104 и Lactobacillus spp. 4*105, определение патогенных микроорганизмов за предалах допустимых значений Staphylococcus aureus. 5*107, Citrobacter spp. 3*105, Candida spp. 3*107 и присутствие анаэробного дисбаланса Bacteroides fragilis/ Faecalibacterium prausnitzii 345. Установлен диагноз: Погибшее плодное яйцо на сроке 9/10 нед. Дисбиоз влагалища. Дисбиоз кишечника. При сравнении полученных результатов флоры влагалища и кишечника диагностировали инфекцию беременности. Пациентка выписана.

Пример 2. Пациентка Б., 34 г. поступила НИИ скорой помощи им. И.И. Джанелидзе 10.02.2020. При обследовании у больной диагностировано неполный инфицированный выкидыш на сроке 6/7 нед. Выполнена диагностика заявляемым способом. Исследование влагалища с помощью ПЦР РВ обнаружило Lactobacillus spp. 104.0 меньше 80%, увеличение числа анаэробных или/и аэробных микроорганизмов больше 10% Staphylococcus spp. 107.6 Eubacterium spp. 106.1, Gardnerella vaginalis + Prevotella bivia + Porphyromonas spp. 107.9, Atobium vaginae 106.6 и Candida spp. 105.4. При исследовании кишечной микрофлоры, используя ПЦР РВ выявили: Lactobacillus spp. 8*108, Escherichia coli 6*107, Bacteroides fragilis/ Faecalibacterium prausnitzii 90 и наличие патогенных микроорганизмов в пределах допустимых значений Staphylococcus aureus. 3*102, Citrobacter spp. 104, Candida spp. 2*104. При анализе кишечника изменений не выявлено. По результатам исследования диагноз: Неполный инфицированный выкидыш на сроке 6/7 нед. Дисбиоз влагалища. Нормоциноз кишечника. Пациентка переведена на дневной стационар для дальнейшего лечения.

Пример 3. Больная Я., 24 г. При обследовании в НИИ скорой помощи им. И.И. Джанелидзе 13.02.2020 поставлен диагноз погибшее плодное яйцо на сроке 6/7 нед. Кровотечение. Выполнена диагностика заявляемым способом. При исследовании флоры влагалища с помощью ПЦР РВ выявило Lactobacillus spp. 108.0 больше 80%, а число анаэробных и аэробных микроорганизмов меньше 10% Eubacterium spp. 101.9, Gardnerella vaginalis + Prevotella bivia + Porphyromonas spp. 102.3, Atobium vaginae 100.6, Staphylococcus spp. 102.6, Candida spp. 103.0. При анализе кишечника обнаружено Escherichia coli 5*105 и Lactobacillus spp. 2*105, определение патогенных микроорганизмов за предалах допустимых значений Staphylococcus aureus. 6*1010, Citrobacter spp. 6*104, Candida spp. 3*107 и присутствие анаэробного дисбаланса Bacteroides fragilis/ Faecalibacterium prausnitzii 156. Диагноз: Погибшее плодное яйцо на сроке 6/7 нед. Кровотечение. Нормоциноз влагалища. Дисбиоз кишечника. При сравнении полученных результатов флоры влагалища и кишечника инфекция беременности не выявлена. Пациентка выписана.

Пример 4. Больная С., 21 г. При обследовании в НИИ скорой помощи им. И.И. Джанелидзе 04.02.2020 поставлен диагноз погибшее плодное яйцо на сроке 6/7 нед. Выполнена диагностика заявляемым способом. При исследовании флоры влагалища с помощью ПЦР РВ в Lactobacillus spp. 108.0 больше 80%, число анаэробных и аэробных микроорганизмов меньше 10% Eubacterium spp. 103.5, Gardnerella vaginalis + Prevotella bivia + Porphyromonas spp. 103.0, Atobium vaginae 101.7, Staphylococcus spp. 103.1, Candida spp. 102.1. При анализе кишечника Lactobacillus spp. 6*108, Escherichia coli 2*107, Bacteroides fragilis/ Faecalibacterium prausnitzii 75 и наличие патогенных микроорганизмов в пределах допустимых значений Staphylococcus aureus. 2*103, Citrobacter spp. 104, Candida spp. 2*102. Диагноз: Погибшее плодное яйцо на сроке 6/7 нед. Нормоциноз влагалища. Нормоциноз кишечника. При сравнении полученных результатов флоры влагалища и кишечника инфекция беременности не выявлена.

Заявляемый способ позволяет эффективно диагностировать состояние влагалищной и кишечной микрофлоры, при наличии патогенной среды диагностировать дисбиоз влагалища и/или кишечника, который в свою очередь, приводит к инфицированию беременности и способствует развитию осложненной беременности. Способ доступен врачам любой специальности, не требует дорогостоящего оборудования и проведения большого количества лабораторных и инструментальных исследований. Заявляемый способ является простым, неинвазивным, информативным, высоко скоростным и высоко воспроизводимым в определении состава микробиоты влагалища и кишечника.

Выполнение заявляемого способа дает возможность не только диагностировать инфекцию беременности, но и провести коррекцию лечения с учетом флоры влагалища и кишечника для последующей предотвращения развития данной патологии.

Способ диагностики состояния микрофлоры влагалища и кишечника у женщин с осложненной беременностью, заключающийся в исследовании микрофлоры влагалища, отличающийся тем, что одновременно исследуют состояние кишечной микрофлоры и при выявлении в микрофлоре влагалища Lactobacillus spp.более 80% и числе анаэробных или/и аэробных микроорганизмов Eubacterium spp., Gardnerella vaginalis + Prevotella bivia + Porphyromonas spp., Atobium vaginae, Staphylococcus spp. меньше 10%, Candida spp. не более 104, а также присутствии Escherichia coli и/или Lactobacillus spp. больше 107, наличии патогенных микроорганизмов Staphylococcus aureus не более 104, Citrobacter spp. не более 104, Candida spp. не более 104 и отсутствии анаэробного дисбаланса Bacteroides fragilis/ Faecalibacterium prausnitzii меньше 100 в кишечной микрофлоре, диагностируют нормоциноз влагалища и кишечника, при выявлении увеличенного числа анаэробных или/и аэробных микроорганизмов Eubacterium spp., Gardnerella vaginalis + Prevotella bivia + Porphyromonas spp., Atobium vaginae, Staphylococcus spp. больше 10%, Candida spp. более 104 во влагалище и снижении Lactobacillus spp. менее 80% и наличии патогенных микроорганизмов Staphylococcus aureus не более 104, Citrobacter spp. не более 104, Candida spp. более 104, а также присутствии Escherichia coli больше 107 и/или Lactobacillus spp. больше 107 и отсутствии анаэробного дисбаланса Bacteroides fragilis/ Faecalibacterium prausnitzii меньше 100 в кишечнике, диагностируют дисбиоз влагалища и нормоциноз кишечника, при выявлении в микрофлоре влагалища Lactobacillus spp. более 80% и числе анаэробных или/и аэробных микроорганизмов Eubacterium spp., Gardnerella vaginalis + Prevotella bivia + Porphyromonas spp., Atobium vaginae, Staphylococcus spp. меньше 10%, Candida spp. не более 104, a в кишечной микрофлоре Escherichia coli меньше 107 и/или Lactobacillus spp. меньше 107, определение патогенных микроорганизмов Staphylococcus aureus более 104, Citrobacter spp. более 104, Candida spp. более 104 и присутствии анаэробного дисбаланса Bacteroides fragilis/ Faecalibacterium prausnitzii больше 100 диагностируют нормоциноз влагалища и дисбиоз кишечника, при наличии патогенной среды во влагалищной и кишечной флоре, а также снижении во влагалище Lactobacillus spp. менее 80%, увеличении числа анаэробных или/и аэробных микроорганизмов Eubacterium spp., Gardnerella vaginalis + Prevotella bivia + Porphyromonas spp., Atobium vaginae, Staphylococcus spp. больше 10%, Candida spp. более 104, а в кишечнике снижении Escherichia coli меньше 107 и/или Lactobacillus spp. меньше 107, определении патогенных микроорганизмов Staphylococcus aureus более 104, Citrobacter spp. более 104, Candida spp. более 104 и присутствии анаэробного дисбаланса Bacteroides fragilis/ Faecalibacterium prausnitzii больше 100 диагностируют дисбиоз влагалища и кишечника.



 

Похожие патенты:

Группа изобретений относится к области отбору и получения антител. Способ определения пригодности раствора антитела для включения в фармацевтическую композицию включает установление верхнего предела вязкости; расчет, исходя из информации о первичной структуре структурной информации об антителе в растворе, общего заряда и зарядовой асимметрии.
Настоящее изобретение относится к медицине, а именно к хирургии и реаниматологии, и касается определения декомпенсации функции симпатической нервной системы у больных при распространенном перитоните.
Изобретение относится к области медицины, в частности к неонатологии, и предназначено для ранней диагностики тяжелой формы инфекции, вызванной вирусом герпеса 6 типа, у новорожденных детей.

Изобретение относится к области биотехнологии и диагностической медицины, а именно к способу выделения экзосом из плазмы крови. Способ выделения экзосом из плазмы крови включает взятие периферической крови, отделение плазмы от клеточной массы путем центрифугирования, добавление к плазме смеси полимеров декстрана с молекулярной массой 450-650 кДа и полиэтиленгликоль с молекулярной массой 20 кДа растворяют в одном объеме плазмы крови до концентрации 1,5% и -3,5% соответственно с последующей инкубацией в течение 1 часа при температуре +4°С и центрифугированием при ускорении 1000 G, +4°С в течение 10 минут, полученный осадок растворяют в полимерной смеси декстрана и полиэтиленгликоля в фосфатно-солевом буфере в той же концентрации, повторно центрифугируют в том же режиме до получения целевого продукта.

Изобретение относится к области медицины, а именно к эндокринологии, и представляет собой способ прогнозирования формирования микрососудистых осложнений сахарного диабета 2 типа с помощью клинико-анамнестических и лабораторных данных.

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической лабораторной диагностике, и может быть использовано для оценки состояния дисбиоза ротоглотки у детей. В слюне ребенка методом газожидкостной хроматографии определяют содержание уксусной, пропионовой, изомасляной, масляной и капроновой кислот.
Изобретение относится к медицине, а именно к клинической лабораторной диагностике, андрологии, репродуктологии, и может быть использовано для оценки риска развития тератозооспермии у мужчин.

Изобретение относится к биологии, экологии, медицине. Способ подготовки пробы для газохроматографического определения хлорорганических соединений в биоматериале включает отбор биоматериала, в качестве которого используют биологические жидкости или придатки кожи, из которых получают измельченные гомогенизированные образцы, увлажненные бидистиллированной водой до влажности не менее 80% и двукратно криоденатурированные, отбирают пробу образца в количестве, достаточном для получения не более 0,5 г сухого липофильного экстракта, при этом в навеску пробы образца, которую принимают за 5 частей по массе, вносят 3 см3 1%-ного раствора бикарбоната натрия, и после интенсивного встряхивания добавляют экстрагент, в качестве которого используют смесь трихлорметан : метиловый спирт : гексан, причем на 5 частей навески пробы образца в г берут 6 частей трихлорметана в см3, 3 части метилового спирта в см3 и 5 частей n-гексана в см3, интенсивно встряхивают 5 минут и проводят экстракцию в течение 25 мин, липофильный экстракт хлорорганического соединения отстаивают до разделения фаз, после чего водно-спиртовой слой удаляют, а экстракт фильтруют через безводный сульфат натрия, выпаривают и затем очищают концентрированной серной кислотой.

Изобретение относится к биологии, экологии, медицине. Способ подготовки пробы для газохроматографического определения хлорорганических соединений в биоматериале заключается в том, что отбирают пробы из внутренних органов и тканей многоклеточного животного, гомогенизируют и полученный гомогенизированный образец помещают в ацетон и после интенсивного встряхивания добавляют n-гексан при соотношении: навеска образца в г:ацетон в см3:n-гексан в см3, равном 2:4:3, закрывают посуду парафиновой пленкой и оставляют экстрагироваться на лабораторном шейкере со скоростью не более 1 Гц на 25 минут, после чего жидкую фазу декантируют в делительную воронку, содержимое которой двукратно промывают порциями n-гексана по 2-3 см3, после чего в нее вносят 50 см3 1%-ного раствора KCl или NaCl, встряхивают и отстаивают до разделения фаз, после чего водно-ацетоновый слой удаляют, затем осуществляют полное выпаривание n-гексана, для очистки полученного липофильного экстракта от соэкстративных веществ в содержащую его посуду вносят 20-25 см3 n-гексана, тщательно перемешивают и вносят 10 см3 H2SO4 конц., повторно перемешивают содержимое и оставляют на 24 часа, затем отделяют кислоту, а n-гексановый слой переносят в делительную воронку, далее промывают липофильный экстракт в n-гексане порцией 20 см3 1%-ного бикарбоната натрия, а затем порциями бидистиллированной воды объемом 20-30 см3 до нейтральной реакции универсального бумажного индикатора, полученный раствор фильтруют через безводный сульфат натрия и осуществляют полное выпаривание n-гексана.

Изобретение относится к ветеринарии, в частности к способам прогнозирования послеродовой патологии у коров. Способ прогнозирования послеродовых заболеваний у коров включает взятие крови у коров в сухостойный период, при этом кровь берут за 15 дней до отела и определяют содержание положительных нейтрофилов в стимулированном НСТ-тесте и концентрацию плацентарной щелочной фосфатазы с последующим расчетом коэффициента, определяемого соотношением содержание положительных нейтрофилов:концентрация плацентарной щелочной фосфатазы, и при его величине выше 2 прогнозируют задержание плодных оболочек, а при величине меньше 1 прогнозируют развитие эндометрита.

Изобретение относится к области медицины, а именно неврологии и может быть использовано для реабилитации больных, перенесших инсульт. Для этого проводят тренировки, предъявляя больному ментальное задание с последующим контролем воображения больного, основанным на анализе паттернов электроэнцефалограммы (ЭЭГ), возникающих при воображении задания.
Наверх