Комбинация анти-pd-l1 антитела и ингибитора днк-пк для лечения злокачественного новообразования

Настоящее изобретение относится к способу лечения злокачественного новообразования с помощью комбинации, которая содержит анти-PD-L1 антитело и ингибитор ДНК-ПК - (S)-[2-хлор-4-фтор-5-(7-морфолин-4-ил-хиназолин-4-ил)-фенил]-(6-метоксипиридазин-3-ил)-метанол или его фармацевтически приемлемую соль, а также к фармацевтической композиции и набору, ее содержащим. Изобретение эффективно для лечения злокачественного новообразования, которое тестировали как положительное относительно PD-L1 экспрессии. 5 н. и 15 з.п. ф-лы, 10 ил., 4 табл., 7 пр.

 

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к комбинированным терапиям, пригодным для лечения злокачественного новообразования. В особенности, изобретение относится к терапевтической комбинации, которая содержит анти-PD-L1 антитело и ингибитор ДНК-ПК, необязательно совместно с одним или несколькими дополнительными химиотерапевтическими средствами или лучевой терапией. Терапевтическая комбинация в особенности предназначена для применения для лечения субъекта, имеющего злокачественное новообразование, которое тестировали как положительное относительно PD-L1 экспрессии.

Предпосылки создания изобретения

В последние годы механизм костимуляции Т-клеток привлекает значительный терапевтический интерес в связи с его потенциалом усиливать клеточный иммунный ответ. Костимулирующие молекулы, экспрессируемые на антиген-презентирующих клетках (АРС), способствуют и индуцируют Т-клетки к стимуляции клональной экспансии, секреции цитокинов и эффекторной функции. При отсутствии костимуляции, Т-клетки могут становиться нечувствительными к антигенной стимуляции, не осуществляют эффективный иммунный ответ и, в дальнейшем, это может приводить к истощению или толерантности к чужеродным антигенам (Lenschow и др., Ann. Rev. Immunol. (1996) 14: 233). В последнее время было обнаружено, что дисфункция или анергия Т-клеток происходит конкурентно с индуцированной и долгосрочной экспрессией ингибирующего рецептора, полипептида 1 запрограммированной смерти клетки (PD-1). Рецептор программируемой смерти 1 (PD-1) и PD-1 лиганды 1 и 2 (PD-L1 и PD-L2, соответственно) играют ключевую роль в регуляции иммунной функции. Экспрессируемый на активированных Т-клетках, PD-1 активируется PD-L1 (также известным как В7-Н1) и PD-L2, экспрессируемыми стромальными клетками, опухолевыми клетками, или и теми, и другими клетками, инициируя гибель Т-клеток и локализованное подавление иммунитета (Dong и др. (1999) Nat Med 5: 1365; Freeman и др. (2000) J Exp Med 192: 1027), потенциально обеспечивая иммунотолерантное окружение для развития и роста опухоли. И наоборот, ингибирование этого взаимодействия может усилить локальные Т-клеточные ответные реакции и опосредовать противоопухолевую активность в неклинических животных моделях (Iwai и др. (2002) PNAS USA 99: 12293). Вследствие этого, проводятся исследования различных моноклональных антител (mAb), нацеленных на ось PD-1/PD-L1, при различных злокачественных новообразованиях, и активно осуществляются сотни клинических испытания для анти-PD-1 и анти-PD-L1 mAb.

PD-L1 с высокой частотой экспрессируется в различных злокачественных новообразованиях, вплоть до 88% в некоторых типах злокачественных новообразований. В некоторых таких злокачественных новообразованиях, включая рак легких, почек поджелудочной железы и яичников, экспрессия PD-L1 ассоциирована с уменьшенным выживанием и неблагоприятным прогнозом. Интересным является тот факт, что большинство опухолей, инфильтрированных Т-лимфоцитами, экспрессируют главным образом PD-1, в отличие от Т-лимфоцитов в нормальных тканях и Т-лимфоцитах периферической крови, указывая на то, что повышенная регуляция PD-1 на опухолереактивных Т-клетках может способствовать нарушенным противоопухолевым ответным иммунным реакциям (Ahmadzadeh и др. (2009) Blood 14(8): 1537). Это может быть обусловлено использованием PD-L1 пути передачи сигналов, опосредуемых экспрессирующими PD-L1 опухолевыми клетками, взаимодействующими с экспрессирующими PD-1 Т-клетками, что приводит к ослаблению активации Т-клеток и избеганию иммунного надзора (Keir и др. (2008) Annu. Rev. Immunol. 26: 677). Следовательно, ингибирование взаимодействия PD-L1/PD-1 может усиливать опосредованное CD8+ Т-клетками уничтожение опухолей.

Сходные усиления для Т-клеточного иммунитета наблюдали путем ингибирования связывания PD-L1 с партнером связывания В7-1. На основании этих данных, блокада оси PD-1/PD-L1 может использоваться терапевтически для усиления противоопухолевых иммунных ответов у пациентов со злокачественным новообразованием. Таким образом, в клинических условиях интенсивно исследовались ингибиторы контрольной точки иммунного ответа, нацеленные на ось PD-1/PD-L1, и была показана клиническая активность на некоторых типах злокачественных новообразований, включая меланому, карциному из клеток Меркеля, немелкоклеточный рак легких, рак головы и шеи, почечно-клеточную карциному, уротелиальную карциному и лимфому Ходжкина. Несмотря на то, что ингибиторы PD-1 и PD-L1 предоставляют существенные преимущества при лечении, и, во многих случаях, долгосрочные ремиссии, частоты ответов находятся в интервале от 10% до 61%, что для многих пациентов приводит к необходимости альтернативной терапии. Следовательно, современные тенденции лечения злокачественных новообразований двигаются в направлении комбинированной иммунотерапии, но их успех зависит от направления задач обнаружения правильных комбинаций лекарственных средств, дозы и схемы введения комбинации, и управления токсичностями и побочными эффектами.

Недостаточность репарации ДНК для опухолей является общеизвестной. Опухоли с мутационным ландшафтом, в котором доминируют C>A трансверции, схема, связанная с воздействием табака, более вероятно получают преимущества от ингибиторов контрольных точек иммунного ответа, и такой геномный курительный характерный признак является более предсказательной блокировкой ответа контрольной точки иммунного ответа по сравнению с описанным для пациента анамнезом курения (Rizvi NA). Кроме того, некоторые пациенты, у которых наблюдали долгосрочные преимущества от ингибиторов контрольной точки иммунного ответа, имели опухоли с соматическими измерениями в генах, задействованных в репликацию или репарацию ДНК (таких как POLE, POLD1, и MSH2).

Ингибирование пути передачи сигналов через PD-1 ось с помощью их прямых лигандов (например, PD-L1 или PD-L2) было предложено в качестве средств для усиления Т-клеточного иммунитета для лечения злокачественного новообразования (например, иммунитета к опухоли). Кроме того, сходные усиления Т-клеточного иммунитета наблюдали путем ингибирования связывания PD-L1 с партнером связывания В7-1. Кроме того, комбинирование ингибирования PD-1 передачи сигналов с другими путями может дополнительно оптимизировать терапевтические свойства (например, WO 2016/205277 или WO 2016/032927).

В настоящее время проводят несколько клинических испытаний для тестирования комбинации агентов, нацеленных на репарацию ДНК, с агентами контрольной точки иммунного ответа в обоих профилях, как дефицитных по репарации ДНК, так и профицитных по репарации ДНК. Исследования множественных комбинаций задействуют ингибиторы контрольных точек иммунного ответа с ингибиторами ответа на повреждение ДНК (DDR), такими как ингибиторы поли(АДФ-рибоза) полимеразы (PARP) и атаксия-телеангиэктазии и RAD3-связанного белок (ATR) ингибиторы. Дополнительно, успешность анти-PD-1/PD-L1 терапевтических средств для опухолей, дефектных по репарации ошибочно спаренных оснований, поднимает интригующий вопрос относительно того, может ли возрастание мутационной нагрузки с DDR ингибиторами повышать иммуногенность злокачественных новообразований и последующие ответные реакции на иммунотерапию (Brown и др. (2017) Cancer Discovery 7(1): 20). Материалы и методы для лечения потенциально химиорезистентных опухолей, например, с использованием ДНК-ПКкс ингибиторов и анти-В7-Н1 антител, представлены в WO 2016/014148.

Один из важных классов ферментов, который является предметом интенсивных исследований, представляет собой протеинкиназы. Протеинкиназы являются большим семейством структурно родственных ферментов, которые отвечают за контроль различных процессов передачи сигналов в клетке. Полагают, что протеинкиназы эволюционировали от общего предкового гена вследствие консервативности их структуры и каталитической функции. Практически все киназы содержат сходный каталитический домен, состоящий из 250-300 аминокислот. Киназы могут быть классифицированы на семейства на основании субстратов, которые они фосфорилируют (например, протеин-тирозин, протеин-серин/треонин, липиды и др.). ДНК-зависимая протеинкиназа (ДНК-ПК) представляет собой серии/треонин протеинкиназу, которая активируется в комплексе с ДНК. Биохимические и генетические данные свидетельствуют о том, что ДНК-ПК состоит из (а) каталитической субъединицы, которую называют ДНК-ПКкс, и (б) двух регуляторных компонентов (Ku70 и Ku80). По функциональным показателям, ДНК-ПК является чрезвычайно важной составляющей, с одной стороны, репарации двухцепочечных разрывов ДНК (ДЦР), а, с другой стороны, соматической или V(D)J рекомбинации. Дополнительно, ДНК-ПК и ее компоненты связаны с множеством других физиологических процессов, включая модуляцию структуры хроматина и поддержание теломер (Smith & Jackson (1999) Genes и Dev 13: 916; Goytisolo и др. (2001) Mol. Cell. Biol. 21: 3642; Williams и др. (2009) Cancer Res. 69: 2100).

Генетический материал человека в форме ДНК постоянно подвержен атакам активных форм кислорода (АФК), которые образуются главным образом в качестве побочных продуктов окислительного метаболизма. АФК способны вызывать повреждение ДНК в форме одноцепочечных разрывов. Двухцепочечные разрывы могут возникать, если предшествующие одноцепочечные разрывы происходят в непосредственной близости. Дополнительно, одно- и двухцепочечные разрывы могут возникать, если ДНК репликативная вилка наталкивается на поврежденные структуры оснований. Кроме того, экзогенные влияния, такие как ионизирующее излучение (например, гамма или корпускулярное излучение), и определенные противораковые лекарственные средства (например, блеомицин), способны вызывать двухцепочечные разрывы ДНК. Кроме того, ДЦР могут встречаться в качестве промежуточных продуктов соматической рекомбинации, процесса, который является важным для образования функциональной иммунной системы всех позвоночных. Если двухцепочечные разрывы ДНК не репарированы или репарированы неправильно, то могут встречаться мутации и/или хромосомные аберрации, которые впоследствии могут привести к клеточной гибели. Для противодействия тяжелых повреждений, возникающим вследствие двухцепочечных разрывов ДНК, эукариотические клетки разработали различные механизмы для их репарации. Высшие эукариоты используют главным образом так называемое негомологичное соединение концов, в котором ключевую роль выполняет ДНК-зависимая протеинкиназа. В биохимических исследованиях было показано, что ДНК-ПК наиболее эффективно активируется посредством появления ДНК-ДЦР. Клеточные линии, у которых ДНК-ПК компоненты были мутировали и являются нефункциональными, оказываются чувствительными к действию радиации.

Многие заболевания связаны с аномальными клеточными ответами, пролиферацией и уклонением от запрограммированной клеточной гибели, запускаемыми опосредуемыми событиями, как описано выше и в настоящей заявке. Злокачественное новообразование представляет собой атипичный рост клеток с тенденцией пролиферировать неконтролируемым образом и, в некоторых случаях, метастазировать (распространяться). Злокачественное новообразование не является одним заболеванием. Оно представляет собой группу из больше 100 различных и отличающихся заболеваний. Злокачественное новообразование может вовлекать любую ткань организма и имеет различные формы в каждой области тела. Большинство злокачественных новообразований называются по типу клеток или органов, где они инициируются. Если злокачественное новообразование распространяется (метастазирует), то новая опухоль несет такое же название, как и исходная (первичная) опухоль. Частота конкретного злокачественного новообразования может зависеть от пола.

Следовательно, существует потребность в развитии новых терапевтических подходов для лечения злокачественных новообразований. Кроме того, существует потребность в терапиях, которые имеют эффективность по сравнению с существующими терапиями. Предпочтительные комбинированные терапии согласно настоящему изобретению демонстрируют эффективность по сравнению с лечением любым из терапевтических средств отдельно.

Краткое изложение сущности изобретения

Настоящее изобретение основано на открытии того, что субъект, имеющий злокачественное новообразование, может подвергаться лечению с применением комбинации, включающей анти-PD-L1 антитело и ингибитор ДНК-ПК. Таким образом, в первом аспекте, настоящее изобретение обеспечивает способ, включающий введение субъекту анти-PD-L1 антитела и ингибитора ДНК-ПК для лечения злокачественного новообразования у субъекта, который в этом нуждается. Также обеспечиваются способы ингибирования роста или прогрессирования опухоли у субъекта, который имеет злокачественные опухоли. Также обеспечиваются способы ингибирования метастазирования злокачественных клеток у субъекта. Также обеспечиваются способы уменьшения риска развития метастаз и/или роста метастаз у субъекта. Также обеспечиваются способы индуцирования регрессии опухоли у субъекта, который имеет злокачественные клетки. Комбинированное лечение приводит к объективному ответу, предпочтительно полному ответу или частичному ответу у субъекта. В некоторых вариантах осуществления, злокачественное новообразование идентифицировано как PD-L1 положительное онкологическое заболевание.

Специфические типы злокачественного новообразования, подвергаемые лечению в соответствии с изобретением, включают, но не ограничиваясь только ими, рак легких, головы и шеи, ободочной кишки, нейроэндокринной системы, мезенхимы, молочной железы, поджелудочной железы, и их гистологических подтипов. В некоторых вариантах осуществления, злокачественное новообразование выбирают из мелкоклеточного рака легких (SCLC), немелкоклеточного рака легких (NSCLC), плоскоклеточной карциномы головы и шеи (SCCHN), рака ободочной и прямой кишки (CRC), первичных нейроэндокринных опухолей и саркомы.

Анти-PD-L1 антитело и ингибитор ДНК-ПК могут вводиться в терапии первой линии, второй линии или более высоких терапий (то есть, за пределами терапий у субъектов) злокачественного новообразования. В некоторых вариантах осуществления, SCLC распространенное заболевание (ED), NSCLC и SCCHN выбраны для терапии первой линии. В некоторых вариантах осуществления, злокачественное новообразование является резистентным или стало резистентным к предшествующей терапии рака. Комбинированную терапию согласно изобретению также можно применять для лечения субъекта со злокачественным новообразованием, которого ранее подвергали лечению с применением одной или нескольких химиотерапии или он получал лучевую терапию, но такое предшествующее лечение было неуспешным. Злокачественное новообразование для терапии второй линии или дальнейшей терапии может представлять собой леченный ранее рецидивирующий метастатический NSCLC, неоперабельный местнораспространенный NSCLC, SCLC ED, леченный ранее SCLC ED, SCLC непригодный для системного лечения, леченный ранее рецидивирующий или метастатический SCCHN, рекуррентный SCCHN пригодный для повторного облучения, леченный ранее метастатический рак ободочной и прямой кишки (mCRC) с нестабильным низким микросателлитным статус ом (MSI-L) или стабильным микросателлитным статусом (MSS), леченный ранее поднабор пациентов с mCRC (то есть MSI-L или MSS), и неоперабельный или метастатический микросателлитный нестабильный высокий (MSI-H) или дефицитные по репарации ошибочно спаренных оснований опухоли, прогрессирующие после предшествующего лечения и которые не имели удовлетворительных альтернативных вариантов лечения. В некоторых вариантах осуществления, прогрессирующий или метастатический MSI-H или дефицитные по репарации ошибочно спаренных оснований опухоли, прогрессирующие после предшествующего лечения и которые не имели удовлетворительных альтернативных вариантов лечения, подвергают лечению применением комбинации анти-PD-L1 антитела и ингибитора ДНК-ПК.

В некоторых вариантах осуществления, анти-PD-L1 антитело используют для лечения субъекта-человека. В некоторых вариантах осуществления, PD-L1 представляет собой PD-L1 человека.

В некоторых вариантах осуществления, анти-PD-L1 антитело содержит тяжелую цепь, которая включает три гипервариабельных участка (CDR), имеющих аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и легкую цепь, которая включает три гипервариабельных участка (CDR), имеющих аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 4, 5 и 6. Анти-PD-L1 антитело предпочтительно содержит тяжелую цепь, имеющую аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 7 или 8, и легкую цепь, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9. В некоторых предпочтительных вариантах осуществления, анти-PD-L1 антитело представляет собой авелумаб.

В другом варианте осуществления, анти-PD-L1 антитело вводят внутривенно (например, в виде внутривенной инфузии) или подкожно, предпочтительно внутривенно. Более предпочтительно, анти-PD-L1 антитело вводят в виде внутривенной инфузии. Наиболее предпочтительно, ингибитор вводят в течение 50-80 минут, чрезвычайно предпочтительно, в виде одночасовой внутривенной инфузии. В другом варианте осуществления, анти-PD-L1 антитело вводят в дозе приблизительно 10 мг/кг веса тела через неделю (то есть каждые две недели, или "Q2W"). В некоторых вариантах осуществления, анти-PD-L1 антитело вводят в фиксированной схеме дозирования 800 мг в виде 1 часовой в/в инфузии Q2W.

В некоторых аспектах, ингибитор ДНК-ПК представляет собой (S)-[2-хлор-4-фтор-5-(7-морфолин-4-ил-хиназолин-4-ил)-фенил]-(6-метоксипиридазин-3-ил)-метанол ("Соединение 1") или его фармацевтически приемлемую соль. В некоторых вариантах осуществления, ингибитор ДНК-ПК вводят перорально. В некоторых вариантах осуществления, ингибитор ДНК-ПК вводят в дозе приблизительно 1-800 мг один или два раза в сутки (то есть, "QD" или "BID"). Предпочтительно, ингибитор ДНК-ПК вводят в дозе приблизительно 100 мг QD, 200 мг QD, 150 мг BID, 200 мг BID, 300 мг BID или 400 мг BID, более предпочтительно приблизительно 400 мг BID.

В предпочтительном варианте осуществления, рекомендованная доза в фазе II для ингибитора ДНК-ПК составляет 400 мг перорально два раза в сутки, и рекомендованная доза в фазе II для авелумаба составляет 10 мг/кг в/в каждую вторую неделю. В предпочтительном варианте осуществления, рекомендованная доза в фазе II для ингибитора ДНК-ПК представляет собой 400 мг два раза в сутки в виде капсулы, и рекомендованная доза в фазе II для авелумаба составляет 800 мг Q2W.

В других вариантах осуществления, анти-PD-L1 антитело и ингибитор ДНК-ПК применяют в комбинации с химиотерапией (СТ), лучевой терапией (RT) или химиолучевой терапией (CRT). Химиотерапевтическое средство может представлять собой этопозид, доксорубицин, топотекан, иринотекан, фторурацил, препарат платины, антрациклин и их комбинацию. В предпочтительном варианте осуществления, химиотерапевтическое средство может представлять собой доксорубицин. Доклинические исследования продемонстрировали противоопухолевый синергетический эффект с ингибиторами ДНК-ПК без серьезной токсичности.

В некоторых вариантах осуществления, этопозид вводят путем внутривенной инфузии приблизительно в течение 1 часа. В некоторых вариантах осуществления, этопозид вводят в день 1-3 один раз в три недели (то есть "D1-3 Q3W") в количестве приблизительно 100 мг/м². В некоторых вариантах осуществления, цисплатин вводят путем внутривенной инфузии приблизительно в течение 1 часа. В некоторых вариантах осуществления, цисплатин вводят один раз в три недели (то есть "Q3W") в количестве приблизительно 75 мг/м². В некоторых вариантах осуществления, оба препарата этопозид и цисплатин вводят один за другим (в разное время) в любом порядке или по существу одновременно (в одно и то же время).

В некоторых вариантах осуществления, доксорубицин вводят каждые 21-28 дней в количестве от 40 до 60 мг/м² в/в. Доза и схема введения может изменяться в зависимости от виде опухоли и существующих заболеваний и костномозговых резервов.

В некоторых вариантах осуществления, топотекан вводят в день 1-5 один раз в три недели (то есть "D1-5 Q3W").

В некоторых вариантах осуществления, антрациклин вводят до достижения максимальной пожизненной кумулятивной дозы.

Лучевая терапия может представлять собой лечение, осуществляемое с применением электронов, фотонов, протонов, испускателей альфа-частиц, других ионов, радио-нуклеотидов, борозахватывающих нейронов и их комбинаций. В некоторых вариантах осуществления, лучевая терапия включает приблизительно 35-70 Гр/20-35 фракций.

В дальнейшем аспекте, схема комбинированной терапии включает основную фазу, необязательно с последующей поддерживающей фазой (или фаза консолидации) после завершения основной фазы. Схемы лечения могут отличаться в обеих фазах. В некоторых вариантах осуществления, схемы лечения отличаются в обеих фазах. В некоторых вариантах осуществления, анти-PD-L1 антитело и ингибитор ДНК-ПК вводят конкурентно (во время одной и той же фазы) либо в основной или в поддерживающей фазе. В некоторых вариантах осуществления, либо анти-PD-L1 антитело или ингибитор ДНК-ПК может дополнительно вводиться в другой фазе, необязательно совместно с химиотерапией, лучевой терапией или химиолучевой терапией. В некоторых вариантах осуществления, анти-PD-L1 антитело и ингибитор ДНК-ПК вводят неконкурентно в основной и поддерживающей фазе. Конкурентное введение включает введение анти-PD-L1 антитела и ингибитора ДНК-ПК один за другим в любом порядке (то есть, одно лечение осуществляют после другого) или по существу одновременно (то есть, оба лечение по существу осуществляют в одно и то же время) в той же самой фазе лечения. Неконкурентное введение включает введение анти-PD-L1 антитела и ингибитора ДНК-ПК один за другим в двух различных фазах лечения.

В некоторых вариантах осуществления, ингибитор ДНК-ПК вводят отдельно в основной фазе. В некоторых вариантах осуществления, ингибитор ДНК-ПК вводят конкурентно с одной или несколькими терапиями в основной фазе. Такие терапии могут задействовать анти-PD-L1 антитело, химиотерапию или лучевую терапию, или их комбинацию. Основная фаза в особенности включает конкурентное введение ингибитора ДНК-ПК и PD-L1 антитела.

В некоторых вариантах осуществления, отсутствует поддерживающая фаза. В некоторых вариантах осуществления, не вводят ни анти-PD-L1 антитело, ни ингибитор ДНК-ПК в поддерживающей фазе. В некоторых вариантах осуществления, анти-PD-L1 антитело вводят отдельно в поддерживающей фазе. В некоторых вариантах осуществления, анти-PD-L1 антитело вводят конкурентно с ингибитором ДНК-ПК в поддерживающей фазе.

В некоторых вариантах осуществления, основная фаза включает введение ингибитора ДНК-ПК и, после завершения основной фазы, поддерживающая фаза включает введение анти-PD-L1 антитела. Оба компонента, ингибитор ДНК-ПК и анти-PD-L1 антитело могут вводиться отдельно или конкурентно с одним или несколькими химиотерапевтическими средствами, лучевой терапией или химиолучевой терапией.

В некоторых предпочтительных вариантах осуществления, SCLC ED лечат в основной фазе, включающей конкурентное введение ингибитора ДНК-ПК и этопозида, необязательно совместно с цисплатином, и, после завершения основной фазы, в поддерживающей фазе, включающей введение анти-PD-L1 антитела, необязательно совместно с ингибитором ДНК-ПК. В настоящей заявке, основная фаза, в особенности, включает трехкомпонентную комбинацию ингибитора ДНК-ПК, этопозида и цисплатина для лечения SCLC ED. В некоторых других предпочтительных вариантах осуществления, SCLC ED лечат в основной фазе, включающей конкурентное введение анти-PD-L1 антитела, ингибитора ДНК-ПК и этопозида, необязательно совместно с цисплатином. В настоящей заявке, основная фаза, в особенности, включает четырехкомпонентную комбинацию анти-PD-L1 антитела, ингибитора ДНК-ПК, этопозида и цисплатина для лечения SCLC ED. После завершения основной фазы лечение SCLC ED может быть продолжено в поддерживающей фазе, включающей введение анти-PD-L1 антитела. В некоторых вариантах осуществления, этопозид, необязательно совместно с цисплатином, вводят вплоть до 6 циклов или до прогрессирования SCLC ED.

В некоторых других предпочтительных вариантах осуществления, mCRC MSI-L лечат в основной фазе, включающей конкурентное введение анти-PD-L1 антитела, ингибитора ДНК-ПК, иринотекана и фторурацила.

В некоторых других предпочтительных вариантах осуществления, NSCLC или SCCHN лечат в основной фазе, включающей конкурентное введение ингибитора ДНК-ПК и лучевую терапию или химиолучевую терапию и, после завершения основной фазы, в поддерживающей фазе, включающей введение анти-PD-L1 антитела. В настоящей заявке основная фаза в особенности включает конкурентное введение анти-PD-L1 антитела, ингибитора ДНК-ПК и лучевую терапию для лечения NSCLC или SCCHN.

В дальнейшем аспекте, изобретение также относится к способу рекламирования анти-PD-L1 антитела в комбинации с ингибитором ДНК-ПК, включающий промотирование, для целевой аудитории, применения комбинации для лечения субъекта со злокачественным новообразованием на основании PD-L1 экспрессии в образцах, предпочтительно опухолевых образцах, полученных от субъекта. PD-L1 экспрессия может быть определена с помощью иммуногистохимии, например, с применением одного или нескольких первичных анти-PD-L1 антител.

Также в настоящей заявке обеспечивается фармацевтическая композиция, содержащая анти-PD-L1 антитело, ингибитор ДНК-ПК и по меньшей мере фармацевтически приемлемый наполнитель или адъювант. Анти-PD-L1 антитело и ингибитор ДНК-ПК обеспечиваются в одной или раздельных единичных дозированных формах.

Также в настоящей заявке обеспечивается анти-PD-L1 антитело в комбинации с ингибитором ДНК-ПК для применения в качестве лекарственного средства, в особенности для применения для лечения злокачественного новообразования. Аналогичным образом, ингибитор ДНК-ПК обеспечивается в комбинации с анти-PD-L1 антителом для применения в качестве лекарственного средства, в особенности для применения для лечения злокачественного новообразования. Также обеспечивается комбинация, включающая анти-PD-L1 антитело и ингибитор ДНК-ПК, для любой цели, для применения в качестве лекарственного средства или для лечения злокачественного новообразования. Также обеспечивается применение комбинации для приготовления лекарственного средства для лечения злокачественного новообразования, включающей анти-PD-L1 антитело и ингибитор ДНК-ПК.

В дальнейшем аспекте, изобретение относится к набору, содержащему анти-PD-L1 антитело и листок-вкладыш, включающий инструкции для применения анти-PD-L1 антитела в комбинации с ингибитором ДНК-ПК для лечения или задержки прогрессирования злокачественного новообразования у субъекта. Также обеспечивается набор, содержащий ингибитор ДНК-ПК и листок-вкладыш, включающий инструкции для применения ингибитора ДНК-ПК в комбинации с анти-PD-L1 антителом для лечения или задержки прогрессирования злокачественного новообразования у субъекта. Также обеспечивается набор, содержащий анти-PD-L1 антитело и ингибитор ДНК-ПК, и листок-вкладыш, включающий инструкции для применения анти-PD-L1 антитела и ингибитора ДНК-ПК для лечения или задержки прогрессирования злокачественного новообразования у субъекта. Набор может включать первый контейнер, второй контейнер и листок-вкладыш, где первый контейнер содержит по меньшей мере одну дозу лекарственного средства, включающего анти-PD-L1 антитело, второй контейнер содержит по меньшей мере одну дозу лекарственного средства, включающего ингибитор ДНК-ПК, и листок-вкладыш содержит инструкции для лечения субъекта от злокачественного новообразования с использованием лекарственных средств. Инструкции могут указывать, что лекарственные средства предназначены для применения для лечения субъекта, имеющего злокачественное новообразование, которое тестировали как положительное относительно PD-L1 экспрессии с помощью иммуногистохимического (IHC) анализа.

В различных вариантах осуществления, анти-PD-L1 антитело, которое вводят субъекту, представляет собой авелумаб и/или ингибитор ДНК-ПК представляет собой (S)-[2-хлор-4-фтор-5-(7-морфолин-4-ил-хиназолин-4-ил)-фенил]-(6-метоксипиридазин-3-ил)-метанол, или его фармацевтически приемлемую соль.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ФИГУР

На Фигуре 1 представлена последовательность тяжелой цепи авелумаба. (A) SEQ ID NO: 7 представляет собой полноразмерную последовательность тяжелой цепи авелумаба. CDR, имеющие аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 1, 2 и 3, выделены подчеркиванием. (В) SEQ ID NO: 8 представляет собой последовательность тяжелой цепи авелумаба без С-концевого лизина. CDR, имеющие аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 1, 2 и 3, выделены подчеркиванием.

На Фигуре 2 (SEQ ID NO: 9) представлена последовательность легкой цепи авелумаба. CDR, имеющие аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 4, 5 и 6, выделены подчеркиванием.

На Фигуре 3 показано, что Соединение 1 (aka М3814) в комбинации с авелумабом (без агента, повреждающего ДНК) увеличивает ингибирование роста опухоли и улучшает выживание по сравнению с лечением отдельными средствами на модели сингенной МС38 опухоли. М3814 применяли ежедневно, начиная с дня 0; Авелумаб применяли в дни 3, 6 и 9.

На Фигуре 4 показано, что комбинация лучевой терапии, М3814 и авелумаба приводит к лучшему контролю роста опухоли относительно лучевой терапии отдельно, лучевой терапии и М3814, или лучевой терапии и авелумаба, на сингенной МС38 модели.

На Фигуре 5 представлены опции для включения авелумаба в 1L SCLC развитие. (1) Дополнительная 3я группа в MS100036-0022 с СТ + М3814 + (поддержание авелумаб, или поддержание авелумаб + М3814) для пациентов, которые получали клинический результат (SD, PR или CR); (2) исследование с 4-мя группами (конкурентное) с СТ +/- М3814 +/- авелумаб (факториальный дизайн, который предоставляет возможность оценки вклада каждого лекарственного средства в эффект комбинации); (3) раздельное исследование (СТ + авелумаб +/- М3814) и план для сводных анализов. Многоцентровое исследование с первой частью - фаза Ib открытая, за которым осуществляли следующую часть - фазу II рандомизированное, плацебо-контролируемое, двойное слепое, для оценки эффективности, безопасности, переносимости, и ПК ингибитора ДНК-ПК М3814 и авелумаба в комбинации с этопозидом и цисплатином у субъектов с SCLC ED.

На Фигуре 6 представлены опции для включения авелумаба в 1L SCLC развитии с применением комбинации СТ + М3814 + авелумаб конкурентно в виде 3ей группы.

На Фигуре 7 представлены опции для включения авелумаба в 1L SCLC развитии с помощью четырехкомпонентной комбинации, с последующим поддержанием с помощью авелумаба (все группы).

На Фигуре 8 показано развитие благоприятных возможностей для авелумаба + М3814 с СТ: Исследование потенциальной фазы II в 2L SCLC ED.

На Фигуре 9 показано развитие благоприятных возможностей для авелумаба + М3814 без RT: Комбинация с SoC у пациентов с mCRC MSI низким.

На Фигуре 10 показано исследование фазы Ib с повышением дозы: Авелумаб + М3814 (ДНК-ПКи). (1) Указание распространения: 2L CRC MSI низкий; (2) Указание распространения: 1L/2L SCCHN и 1L/2L NSCLC.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Определения

Следующие определения представлены для помощи читателю. Если специально не указано иначе, то все термины в данной области, примечания и другие научные или медицинские термины или терминология, используемые в настоящей заявке, имеют общепринятые значения, которые подразумеваются квалифицированным в специалистом в области химии и медицины. В некоторых случаях, термины с общепринятыми значениями определяются в настоящей заявке для ясности и/или для удобства ссылок, и включение таких определений в настоящую заявку не следует рассматривать как представляющих существенное отличие от определения термина, как обычно понимается в данной области техники.

Формы, представленные в единственном числе, также включают ссылки на множественное число, если из контекста очевидно не следует другое. Таким образом, например, ссылка на антитело относится к одному или нескольким антителам или по меньшей мере одному антителу. Как таковые, термины, представленные в единственном числа, "один или несколько", и "по меньшей мере один" применяют взаимозаменяемо в настоящей заявке.

"Приблизительно", когда используется для модификации параметра, определенного в цифровой форме (например, доза анти-PD-L1 антитела или ингибитора ДНК-ПК, или продолжительности периода лечения с применением комбинированной терапии, определенной в настоящей заявке) обозначает, что параметр может изменяться вплоть до 10% ниже или выше указанного числового значения для этого параметра. Например, доза приблизительно 10 мг/кг может изменяться в диапазоне от 9 мг/кг до 11 мг/кг.

"Вводить" или "введение" лекарственного средства пациенту (и грамматические эквиваленты этой фразы) относятся к непосредственному введению, которое может представлять собой введение пациенту с помощью медицинского персонала или может представлять собой самостоятельное введение, и/или опосредованное введение, которое может представлять собой протокол назначения лекарственного средства. Например, лечащий врач, который инструктирует пациента относительно самостоятельного введения лекарственного средства или предоставляет пациенту рецепт на лекарственное средство, вводит лекарственное средство пациенту.

"Антитело" представляет собой молекулу иммуноглобулина, способную специфически связываться с мишенью, такой как углерод, полинуклеотид, липид, полипептид и др., с помощью по меньшей мере одного сайта распознавания антигена, расположенного в вариабельном участке молекулы иммуноглобулина. Как используется в настоящей заявке, термин "антитело" охватывает не только интактивные поликлональные или моноклональные антитела, но также, если специально не указано иначе, любой его антигенсвязывающий фрагмент или фрагмент антитела, которые конкурирует с интактным антителом за специфическое связывание, слитые белки, содержащие антигенсвязывающую часть (например, конъюгаты антитело-лекарственное средство), любую другую модифицированную конфигурацию молекулы иммуноглобулина, которая содержит сайт распознавания антигена, композиции антител с полиэпитопными специфичностями, и мультиспецифические антитела (например, биспецифические антитела).

"Антигенсвязывающий фрагмент" антитела или "фрагмент антитела" включает часть интактного антитела, которая все еще способна к связыванию антигена и/или вариабельный участок интактного антитела. Антигенсвязывающие фрагменты включают, например, Fab, Fab', F(ab')₂, Fd, и Fv фрагменты, доменные антитела (dAb, например, акульи и верблюжьи антитела), фрагменты, включая гипервариабельные участки (CDR), одноцепочечные вариабельные фрагменты антитеа (scFv),одноцепочечные молекулы антител, мультиспецифические антитела, образованные из фрагментов антител, максиантитела, миниантитела, интраантитела, диатела, триатела, тетратела, v-NAR и bis-scFv, линейные антитела (см., например, Патент US 5,641,870, Пример 2; Zapata и др. (1995) Protein Eng. 8НО: 1057), и полипептиды, которые содержат по меньшей мере часть иммуноглобулина, которой достаточно для придания специфического антигенного связывания полипептиду. При расщеплении антител папаином образуются два идентичные антигенсвязывающие фрагменты, называемые "Fab" фрагменты, и оставшийся "Fc" фрагмент, обозначение, отражающее способность легко кристаллизоваться. Fab фрагмент состоит из целой L цепи вместе с доменом вариабельного участка Н цепи (V_H), и первого константного домена одной тяжелой цепи (C_H1). Каждый Fab фрагмент является одновалентным по отношению к связыванию антигена, то есть, он имеет единственный антигенсвязывающий сайт. При обработке антител пепсином получают один большой F(ab')₂ фрагмент, который приближенно отвечает двум дисульфидно-связанным Fab фрагментам, имеющим различные антиген-связывающие активности и все еще способным перекрестно связывать. Fab' фрагменты отличаются от Fab фрагментов путем наличия нескольких дополнительных остатков на карбокси конце C_H1 домена, включая один или несколько цистеинов из шарнирной области антитела. Fab'-SH представляет собой обозначение в настоящей заявке для Fab', в котором остаток(и) цистеина константных доменов несут свободную тиольную группу. F(ab')₂ фрагменты антител изначально получают в виде пар Fab' фрагментов, которые имеют петлевые цистеины между ними. Также известны другие химические связи для фрагментов антител.

"Антителозависимая клеточно-обусловленная цитотоксичность" или "ADCC" относится к форме цитотоксичности, при которой секретируемый Ig связывается на Fc рецепторах (FcR), презентированных на определенных цитотоксических клетках (например, клетках природных клетках-киллерах (NK), нейтрофилах и макрофагах), позволяя этим цитотоксическим эффекторным клеткам специфически связываться с клеткой-мишенью, несущей антиген, и затем убивать целевую клетку с помощью цитотоксинов. Антитела «вооружают» цитотоксические клетки и необходимы для уничтожения клетки-мишени посредством такого механизма. Первичные клетки для опосредования ADCC, NK клетки, экспрессируют только FcγRIII, в то время как моноциты экспрессируют FcγRI, FcγRII и FcγRIII. Fc экспрессия на гемопоэтических клетках обобщена в Таблице 3 на странице 464 Ravetch и Kinet, Annu. Rev. Immunol. 9: 457-92 (1991).

"Анти-PD-L1 антитело" обозначает антитело, которое блокирует связывание PD-L1, экспрессируемого на злокачественной клетке, с PD-1. В любом способе лечения, лекарственных средствах и применениях согласно настоящему изобретению, в которых лечат субъекта-человека, анти-PD-L1 антитело специфически связывается с PD-L1 человека и блокирует связывание PD-L1 человека с PD-1 человека. Антитело может представлять собой моноклональное антитело, антитело человека, гуманизированное антитело или химерное антитело, и могут включать константный участок человека. В некоторых вариантах осуществления константный участок человека выбирают из группы, включающей константные участки IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4, и в предпочтительных вариантах осуществления, константный участок человека представляет собой константный участок IgG1 или IgG4. В некоторых вариантах осуществления, антигенсвязывающий фрагмент выбирают из группы, включающей Fab, Fab'-SH, F(ab')₂, scFv и Fv фрагменты. Примеры моноклональных антител, которые связываются с PD-L1 человека, и пригодны для способа лечения, лекарственных средств и применений согласно настоящему изобретению, описаны в WO 2007/005874, WO 2010/036959, WO 2010/077634, WO 2010/089411, WO 2013/019906, WO 2013/079174, WO 2014/100079, WO 2015/061668, и патентах US №№8,552,154, 8,779,108 и 8,383,796. Специфические анти-человеческие PD-L1 моноклональные антитела, пригодные в качестве PD-L1 антитела для способа лечения, лекарственных средств и применений согласно настоящему изобретению включают, например, без ограничений, авелумаб (MSB0010718C), ниволумаб (BMS-936558), MPDL3280A (IgG1-сконструированное, анти-PD-L1 антитело), BMS-936559 (полностью человеческое, анти-PD-L1, IgG4 моноклональное антитело), MED14736 (сконструированное IgG1 каппа моноклональное антитело с тройными мутациями в Fc домене для удаления антитело-зависимой, клеточно-опосредованной цитотоксической активности), и антитело, которое содержит вариабельные участки тяжелой цепи и легкой цепи SEQ ID NO: 24 и SEQ ID NO: 21, соответственно, WO 2013/019906.

"Биомаркер" в целом относится к биологическим молекулам, и их количественным и качественным измерениям, которые указывают на болезненное состояние. "Прогностические биомаркеры" коррелируют с исходом заболевания, независимо от терапии. Например, гипоксия опухоли является отрицательным прогностическим маркером - чем более высокая гипоксия опухоли, тем более высокая вероятность, что исход заболевания будет отрицательным. "Предиктивные биомаркеры" указывают на то, будет ли пациент, вероятно, отвечать на конкретное лечение. Например, HER2 профилирование обычно используется при раке молочной железы у пациентов для определения, будут ли такие пациенты, вероятно, отвечать на Герцептин (трастузумаб, Genentech). "Биомаркеры ответа" обеспечивает критерий оценки ответа на лечения и, таким образом, обеспечивают ориентир, будет ли работать лечение. Например, снижение уровней специфического для предстательной железы антигена обычно указывает на то, что противораковая терапия для рака предстательной железы у пациента является работающей. Если маркер используют в качестве основания для идентификации или выбора пациента для лечения, описанного в настоящей заявке, то маркер можно измерять перед и/или во время лечения, и полученные значения использует лечащий врач для оценки любого из следующих параметров: (а) возможность или вероятность пригодности индивидуума к исходно получаемому(ым) лечению(ям); (б) возможность или вероятность непригодности индивидуума к исходно получаемому(ым) лечению(ям); (в) восприимчивость к лечению; (г) возможность или вероятность пригодности индивидуума к продолжению получаемого(ых) лечения(й); (д) возможность или вероятность непригодности индивидуума к продолжению получаемого(ых) лечения(й); (е) корректировки дозировка; (ж) предсказание вероятности клинических результатов; или (з) токсичность. Как будет хорошо понятно для квалифицированного специалиста в данной области техники, измерение биомаркера в клинических параметрах является четким указанием того, что этот параметр используют в качестве основания для инициации, продолжения, корректировки и/или прекращения осуществления лечений, описанных в настоящей заявке.

"Кровь" относится ко всем компонентам крови, циркулирующей у субъекта, включая, но не ограничиваясь только ими, эритроциты, лейкоциты, плазму, факторы свертывания крови, небольшие белки, тромбоциты и/или криопреципитат. Типично она представляет собой тип крови, который получают при отборе крови у пациента. Плазма известна в данной области техники как желтый жидкий компонент, в котором типично суспендированы клетки крови в цельной крови. Она составляет приблизительно вплоть до 55% общего объема крови. Плазма крови может быть получена путем центрифугирования пробирки свежей крови, содержащей антикоагулянт, в центрифуге до тех пора, пока клетки крови не осядут на дно пробирки. После этого плазму крови сливают или извлекают. Плазма крови имеет плотность приблизительно 1025 кг/м³ или 1,025 кг/л.

"Злокачественное новообразование", "раковый" или "злокачественный" относится к или описывает физиологическое состояние у млекопитающих, которое обычно характеризуется нерегулируемым ростом клеток. Примеры злокачественного новообразования включают, но не ограничиваясь только ими, карциному, лимфому, лейкоз, бластому и саркому. Более предпочтительные примеры таких злокачественных новообразований включают плоскоклеточную карциному, миелому, мелкоклеточный рак легких, немелкоклеточный рак легких, глиома, ходжкинскую лимфому, неходжкинскую лимфому, острый миелоидный лейкоз, множественную миелому, рак желудочно-кишечного тракта, рак почки, рак яичников, рак печени, лимфобластный лейкоз, лимфоцитарный лейкоз, рак ободочной и прямой кишки, рак эндометрия, рак почки, рак предстательной железы, рак щитовидной железы, меланому, хондросаркому, нейробластому, рак поджелудочной железы, мультиформную глиобластому, рак шейки матки, рак головного мозга, рак желудка, рак мочевого пузыря, гепатому, рак молочной железы, карциному ободочной кишки и рак головы и шеи.

"Химиотерапия" представляет собой терапию, задействующую химиотерапевтическое средство, которое представляет собой химическое соединение, пригодное для лечения злокачественного новообразования. Примеры химиотерапевтических средств включают алкилирующие агенты, такие как тиотепа и циклофосфамид; алкилсульфонаты, такие как бусульфан, импросульфан и пипосульфан; азиридины, такие как бензодопа, карбоквон, метуредопа и уредопа; этиленимины и метиламеламины, включая алтретамин, триэтиленмеламин, триэтиленфосфорамид, триэтиилентифосфорамид и триметилоломеламин; ацетогенины (в особенности буллатацин и буллатацинон); дельта-9-тетрагидроканнабинол (дронабинол); бета-лапахон; лапахол; колхицины; бетулиновую кислоту; камптотецин (включая синтетический аналог топотекан (СРТ-11 (иринотекан), ацетилкамптотецин, скополектин, и 9-аминокамптотецин); бриостатин; пеметрексед; каллистатин; СС-1065 (включая его синтетические аналоги адоцелезин, карцелезин и бизелезин); подофиллотоксин; подофиллиновую кислоту; тенипозид; криптофицины (в особенности, криптофицин 1 и криптофицин 8); доластатин; дуокармицин (включая синтетические аналоги KW-2189 и СВ1-ТМ1); элеутеробин; панкратистатин; TLK-286; CDP323, пероральный ингибитор альфа-4 интегрина; саркодиктиин; спонгистатин; азотные аналоги горчичного газа, такие как хлорамбуцил, хлорнафазин, циклофосфамид, эстамустин, ифосфамид, мехлорэтамин, гидрохлорид оксида мехлорэтамина, мельфалан, новембихин, фенэстерин, преднимустин, трофосфамид, урациловый аналог горчичного газа; нитрозомочевины, такие как кармустин, хлозотоцин, фотемустин, ломустин, нимустин и ранимнустин; антибиотики, такие как энедииновые антибиотики (например, калихеамицин, в особенности калихеамицин гамма II и калихеамицин омега II (см., например, Nicolaou и др. (1994) Angew. Chem Intl. Ed. Engl. 33: 183); динемицин включая динемицин А; эсперамицин, а также неокарзиностатин-хромофор и родственные хромопротеиновые энедииновые антибиотики-хромофоры, аклациномизины, актиномицин, аутрамицин, азасерин, блеомицины, кактиномицин, карабицин, карминомицин, карзинофилин, хромомицины, дактиномицин, даунорубицин, деторубицин, 6-диазо-5-оксо-L-норлейцин, доксорубицин (включая морфолино-доксорубицин, цианоморфолино-доксорубицин, 2-пирролидино-доксорубицин, липосомная инъекция доксорубицин HCl и деоксидоксорубицин), эпирубицин, эзорубицин, идарубицин, марцелломицин, митомицины, такие как митомицин С, микофенольная кислота, ногаламицин, оливомицины, пепломицин, потфиромицин, пуромицин, квеламицин, родорубицин, стрептонигрин, стрептозоцин, туберцидин, убенимекс, зиностатин и зорубицин; антиметаболиты, такие как метотрексат, гемцитабин, тегафур, капецитабин, эпитилон и 5-фторурацил (5-ФУ); аналоги фолиевой кислоты, такие как деноптерин, метотрексат, птероптерин и триметрексат; аналоги пурина, такие как флударабин, 6-меркаптопурин, тиамиприн и тиогуанин; аналоги пиримидина, такие как анцитабин, азацитидин, 6-азауридин, кармофур, цитарабин, дидеоксиуридин, доксифлуридин, эноцитабин, флоксуридин и иматиниб (производное 2-фениламинопиримидина), а также другие ингибиторы с-Kit; антиадренергетики, такие как аминоглутетимид, митотан и трилостан; заменитель фолиевой кислоты, такой как фролиновая кислота; ацеглатон; альдофосфамидгликозид; аминолевулиновую кислоту; энилурацил; амсакрин; бестрабуцил; бисантрен; эдатраксат; дефофамин; демеколцин; диазиквин; элфорнитин; ацетат эллиптиния; этоглюцид; нитрат галлия; гидроксимочевину; лентинан; лонидаинин; маитансиноиды, такие как маитансин и ансамитоцины; митогуазон; митоксантрон; мопиданмол; нитраэрин; пентостатин; фенамет; пирарубицин; лозоксантрон; 2-этилгидразид; прокарбазин; полисахаридный комплекс PSK (JHS Natural Products, Юджин, шт. Орегон); разоксан; ризоксин; сизофиран; спирогерманий; тенуазоновую кислоту; триазиквин; 2,2',2''-трихлортриэтиламин; трихотецены (в особенности Т-2 токсин, верракурин А, роридин А и ангуидин); уретан; виндезин; дакарбазин; манномустин; митобронитол; митолактол; пипоброман; гацитозин; арабинозид ("Ara-C"); тиотепа; таксоиды, например, паклитаксел, препарат паклитаксела в виде наночастичек на основе альбумина и доксетаксел; хлоранбуцил; 6-тиогуанин; меркаптопурин; метотрексат; аналоги платины, такие как цисплатин и карбоплатин; винбластин; платину; этопозид (VP-16); ифосфамид; митоксантрон; винкристин; оксалиплатин; лейкововин; винорелбин; новантрон; эдатрексат; дауномицин; аминоптерин; ибандронат; ингибитор типоизомеразы RFS 2000; дифторметилорнитин (DMFO); ретиноиды, такие как ретиновевая кислота; фармацевтически приемлемые соли, кислоты или производные любого из вышеуказанных соединений; а также комбинации двух или более вышеуказанных соединений, таких как CHOP, сокращение для комбинированной терапии с применением циклофосфамида, доксорубицина, винкристина и преднизолона, или FOLFOX, сокращение для схемы лечения с применением оксалиплатина в комбинации с 5-ФУ и лейкововином.

"Клинический исход", "клинический параметр", "клинический ответ" или "клиническая конечная точка" относится к любому клиническому наблюдению или измерению, относящемуся к реакции пациента на терапию. Неограничивающие примеры клинического исхода включают ответ опухоли (TR), общую выживаемость (OS), выживаемость без прогрессирования заболевания (PFS), выживаемость без признаков заболевания, время до рецидива опухоли (TTR), время до прогрессирования опухоли (ТТР), относительный риск (RR), токсичность или побочное действие.

"Полный ответ" или "полная ремиссия" относится к исчезновению всех признаков злокачественного новообразования в ответ на лечение. Это не всегда обозначает, что злокачественное новообразование было вылечено.

"Включающий", как используется в настоящей заявке, предназначен для обозначения того, что композиции и способы включают указанные элементы, но не исключая других. "Состоящие по существу из", при использовании для определения композиций и способов, будет обозначать исключение других элементов любой необходимой важности для композиции или способа. "Состоящие из" будет обозначать исключение более чем следовых количеств элементов других компонентов для заявленных композиций и существенных стадий способа. Варианты осуществления, определяемые каждым из таких переходных терминов, охватываются объемом настоящего изобретения. Таким образом, подразумевается, что способы и композиции могут включать дополнительные стадии и компоненты (включающие) или альтернативно включать не имеющие значения стадии и композиции (состоящие по существу из) или альтернативно, предполагающие только указанные стадии способа или композиции (состоящие из).

"Доза" и "дозировка" относится к конкретному количеству активных или терапевтических средств для введения. Такие количества включены в "дозированную форму", которая относится к физически дискретным единицам, подходящим в качестве однократных дозировок для субъектов-людей и других млекопитающих, каждая единица содержит заранее определенное количество активного агента, рассчитанное для получения желательного начала, переносимости и терапевтических эффектов, в ассоциации с одним или несколькими подходящими фармацевтическими наполнителями, такими как носители.

"Диатела" относятся к небольшим фрагментам антител, которые получают путем построения sFv фрагментов с короткими линкерами (приблизительно 5-10 остатков) между V_H и V_L доменами, так, чтобы достигалось образование пар V-доменов между цепями, а не внутри цепей, с образованием, таким образом, двухвалентного фрагмента, т.е. фрагмента, имеющего два антигенсвязывающих сайта. Биспецифические антитела-димеры представляют собой гетеродимеры двух "пересекающихся" sFv-фрагментов, в которых VH- и VL-домены двух антител присутствуют на различных полипептидных цепях. Антитела-димеры более подробно описаны, например, в документах ЕР 404097; WO 1993/11161; Hollinger и др. (1993) PNAS USA 90: 6444.

"Усиление функции Т-клеток" обозначает индукцию, вызывание или стимуляцию Т-клеток иметь продолжительную или амплифицированную биологическую функцию, или возобновлять или реактивировать истощенные или неактивные Т-клетки. Примеры усилений функций Т-клеток включают: увеличенная секреция гамма-интерферона из CD8+ Т-клеток, увеличенная пролиферация, увеличенная реактивность на антигены (например, вирус, патоген или клиренс опухоли) относительно таких уровней перед вмешательством. В одном варианте осуществления, уровень усиления составляет по меньшей мере 50%, альтернативно 60%, 70%, 80%, 90%, 100%, 120%, 150%, 200%. Методы определения такого усиления известны квалифицированному специалисту в данной области техники.

"Fc" представляет собой фрагмент, содержащий карбокси-концевые части обоих Н-цепей, удерживаемые вместе дисульфидами. Эффекторные функции антител определяются последовательностями Fc-участка, который также является частью, распознаваемой Fc-рецепторами (FcR), встречающимися на определенных типах клеток.

"Функциональные фрагменты" антител согласно изобретению включают часть интактного антитела, как правило, включающую антигенсвязывающую или вариабельную область интактного антитела или F-область антитела, которая сохраняет способность связывания FcR или обладает модифицированной способностью связывания FcR. Примеры функциональных фрагментов антител включают линейные антитела, одноцепочечное антитело молекул и мультиспецифичные антитела, образованные из фрагментов антитела.

"Fv" представляет собой минимальный фрагмент антитела, который содержит полный антигенраспознающий и антигенсвязывающий сайт. Этот фрагмент состоит из димера доменов, состоящих из одной вариабельной области тяжелой цепи и одной вариабельной области легкой цепи, связанных прочной нековалентной связью. Сворачивание этих двух доменов образует шесть гипервариабельных петель (3 петли в каждой из Н- и L-цепи), которые предоставляют аминокислотные остатки для связывания антигена и обеспечивают специфичность связывания антигена антителом. Однако даже один вариабельный домен (или половина Fv, содержащая только три области HVR, специфичных к антигену) обладает способностью распознавать и связывать антиген, хотя и с более низкой аффинностью, чем целый участок связывания.

"Человеческое антитело" представляет собой антитело, включающее аминокислотную последовательность, соответствующую последовательности антитела, вырабатываемого человеком и/или полученного с использованием любого из способов получения антител человека, как описано в настоящем документе. Это определение человеческого антитела специально исключает гуманизированное антитело, включающее отличные от человеческих антигенсвязывающие остатки. Человеческие антитела могут быть получены с использованием различных способов, известных в данной области, включая библиотеки фагового дисплея (см., например, Hoogenboom и Winter (1991), JMB 227: 381; Marks и др. (1991) JMB 222: 581). Также для получения моноклональных антител человека доступны способы, описанные в Cole и др. (1985) Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Alan R. Liss, стр. 77; Boerner и др. (1991), J. Immunol 147(1): 86; van Dijk и van de Winkel (2001) Curr. Opin. Pharmacol 5: 368). Человеческие антитела можно получать введением антигена трансгенному животному, которое модифицировано для продукции таких антител в ответ на иммунизацию антигеном, и эндогенные локусы которых заблокированы, например, иммунизированных ксеномышей (см., например, патенты US №№6,075,181; и 6,150,584 касающиеся технологии XENOMOUSE). См. также, например, Li и др. (2006) PNAS USA, 103: 3557, касающуюся человеческих антител, полученных с применением технологии В-клеточных гибридом человека.

"Гуманизированные" формы отличных от человеческих (например, мышиных) антител являются химерными антителами, содержащими минимальную последовательность, полученную из отличного от человеческого иммуноглобулина. В одном варианте воплощения гуманизированное антитело является человеческим иммуноглобулином (реципиентным антителом), в котором остатки из HVR реципиента заменены остатками HVR отличного от человека вида (донорное антитело), такого как мышь, крыса, кролик или отличный от человека примат, имеющими требуемую специфичность, аффинность и потенциал. В некоторых случаях каркасные ("FR") остатки человеческого иммуноглобулина заменяют соответствующими отличными от человеческих остатками. Кроме того, гуманизированные антитела могут включать остатки, которые не встречаются ни в реципиентном антителе, ни в донорном антителе. Эти модификации могут быть проведены для дополнительного улучшения характеристик антитела, таких как аффинность связывания. В целом гуманизированное антитело должно включать по сути все из как минимум одного, как правило, двух вариабельных доменов, в которых все или по сути все из гипервариабельных петель соответствуют гипервариабельным петлям последовательности отличного от человеческого иммуноглобулина, и все или по сути все из областей FR представляют собой области последовательности человеческого иммуноглобулина, хотя FR-области могут включать замещения одного или нескольких остатков FR, которые улучшают характеристики антитела, такие как аффинность связывания, изомеризация, иммуногенность и т.д. Количество этих аминокислотных замен в FR, как правило, составляет не более 6 в Н-цепи, и не более 3 в L-цепи. Гуманизированное антитело необязательно также включает как минимум часть константной области (Fc) иммуноглобулина, как правило, константной области иммуноглобулина человека. Для более подробного ознакомления см., например, Jones и др. (1986) Nature 321: 522; Riechmann и др. (1988), Nature 332: 323; Presta (1992) Curr. Op. Struct. Biol. 2: 593; Vaswani и Hamilton (1998), Ann. Allergy, Asthma & Immunol. 1: 105; Harris (1995) Biochem. Soc. Transactions 23: 1035; Hurle и Gross (1994) Curr. Op. Biotech. 5: 428; и патенты US №№6,982,321 и 7,087,409.

"Иммуноглобулин" (Ig) в настоящем описании применяется взаимозаменяемо с термином "антитело". Основной 4-цепочечной единицей антитела является гетеротетрамерный гликопротеин, состоящий из двух идентичных легких (L) цепей и двух идентичных тяжелых (Н) цепей. Антитело IgM состоит из 5 основных гетеротетрамерных единиц вместе с дополнительным полипептидом, называемым J-цепью, и содержит 10 антигенсвязывающих участков, в то время как антитела IgA включают 2-5 основных 4-цепочечных единиц, которые могут полимеризироваться для образования поливалентных совокупностей в комбинации с J-цепью. В случае IgG 4-цепочечная единица, как правило, составляет около 150000 Дальтон. Каждая L-цепь связывается с Н-цепью одной ковалентной дисульфидной связью, в то время как две Н-цепи связываются между собой одним или несколькими дисульфидными связями в зависимости от изотипа Н-цепи. Каждая Н- или L-цепь также имеет расположенные с равными интервалами межцепочечные дисульфидные мостики. Каждая Н-цепь на N-конце имеет вариабельный домен (V_H) с последующими тремя константными доменами (C_H) для каждой из α- и γ-цепей и четырьмя C_H доменами для μ- и ε-изотипов. Каждая L-цепь на N-конце имеет вариабельный домен (V_L) с последующим константным доменом на другом конце. V_L выравнивается с V_H, и C_L выравнивается с первым константным доменом тяжелой цепи (C_H1). Предполагается, что конкретные аминокислотные остатки образуют поверхность контакта между вариабельными доменами легкой цепи и тяжелой цепи. Образование пары V_H и V_L формирует один антигенсвязывающий участок. Структура и свойства разных классов антител представлены, например, в публикации Basic and Clinical Immunology, 8-e изд., Sties и др. (ред.), Appleton & Lange, Norwalk, CT, 1994, страница 71 и глава 6. L-цепь любых видов позвоночных может быть отнесена к одному из двух четко отличающихся типов, называемых каппа и лямбда, на основе аминокислотных последовательностей их константных доменов. В зависимости от аминокислотной последовательности константного домена их тяжелых цепей (СН) иммуноглобулины могут быть отнесены к различным классам или изотипам. Существует пять классов иммуноглобулинов: IgA, IgD, IgE, IgG и IgM, имеющих тяжелые цепи, обозначаемые как α, δ, ε, γ и μ, соответственно. Классы γ и α далее подразделяются на подклассы на основе относительно небольших различий в последовательности СН и функции; например, у человека экспрессируются следующие подклассы: IgG1, IgG2A, IgG2B, IgG3, IgG4, IgA1 и IgK1.

"Инфузия" или "инфузирование" относится к введению раствора, содержащего лекарственное средство, в организм через вену для терапевтических целей. Как правило, это достигается с помощью пакета для внутривенного вливания (в/в, IV).

"В комбинации с" или "в сочетании с" относится к введению одной процедуры лечения дополнительно к другой процедуре лечения. Как таковой, "в комбинации с" или "в сочетании с" относится к введению одной процедуры лечения перед, во время или после введения другой процедуры лечения индивидууму. Как используется в настоящей заявке, термин "в комбинации" по отношению к введению Соединения 1 и дополнительного химиотерапевтического средства обозначает, что каждый из компонентов, Соединение 1 или его фармацевтически приемлемую соль, и дополнительное химиотерапевтическое средство вводят пациенту в любом порядке (то есть, одновременно или один за другим) или совместно в одной композиции, препарате или единичной дозированной форме. В некоторых вариантах осуществления, термин "комбинация" обозначает, что Соединение 1 или его фармацевтически приемлемую соль, и дополнительное терапевтическое средство, вводят одновременно или один за другим. В определенных вариантах осуществления, Соединение 1 или его фармацевтически приемлемую соль, и дополнительное терапевтическое средство, вводят одновременно в одной и той же композиции, включающей Соединение 1 или его фармацевтически приемлемую соль, и дополнительное терапевтическое средство. В определенных вариантах осуществления, Соединение 1 или его фармацевтически приемлемую соль, и дополнительное терапевтическое средство, вводят одновременно в раздельных композициях, то есть, где Соединение 1 или его фармацевтически приемлемую соль, и дополнительное терапевтическое средство вводят одновременно каждый в раздельной единичной дозированной форме. Следует принять во внимание, что Соединение 1 или его фармацевтически приемлемую соль, и дополнительное химиотерапевтическое средство вводят в тот же самый день или в различные дни и в любом порядке в соответствии с подходящим протоколом дозирования.

"Выделенный" относится к молекулам или биологическим или клеточным материалам, которые по существу не содержат других материалов. В одном аспекте, термин "выделенный" относится к нуклеиновой кислоте, такой как ДНК или РНК, или белку или полипептиду, или клетке или клеточной органелле, или ткани или органу, отделенному от других ДНК или РНК, или белков или полипептидов, или клеток или клеточных органелл, или тканей или органов, соответственно, которые присутствуют в природном источнике. Термин "выделенный" также относится к нуклеиновой кислоте или пептиду, которая(ый) по существу не содержит клеточного материала, вирусного материала или культуральной среды, при получении с помощью методик рекомбинантной ДНК, или химических предшественников или других химических веществ, при получении методом химического синтеза. Кроме того, "выделенная нуклеиновая кислота" обозначает, что она включает фрагменты нуклеиновой кислоты, которые не встречаются природно в качестве фрагментов и не будут обнаружены в природном состоянии. Термин "выделенный" также используется в настоящей заявке по отношению к полипептидам, которые отделены от других клеточных белков, и обозначает, что он охватывает как очищенные, так и рекомбинантные полипептиды. Термин "выделенный" также используется в настоящей заявке по отношению к клеткам или тканям, которые отделены от других клеток или тканей и обозначает, что он охватывает как культивированные, так и сконструированные клетки или ткани. Например, "выделенное антитело" представляет собой антитело, которое идентифицировано, отделено и/или извлечено из компонента среды, где оно вырабатывается (например, природное или рекомбинантное). Предпочтительно выделенный полипептид не ассоциируется ни с какими другими компонентами из среды, где он вырабатывается. Загрязняющие компоненты среды, где он продуцируется, такие как компоненты, полученные из рекомбинантных трансфицированных клеток, представляют собой материалы, которые препятствуют применению антитела для исследования, диагностики или лечения, и могут включать ферменты, гормоны и другие белковые или небелковые растворенные вещества. В предпочтительных вариантах воплощения полипептид очищают: (1) до более чем 95% по массе антитела, как определяют, например, способом Лоури, в некоторых вариантах воплощения - до более чем 99% по массе; (1) до степени, достаточной для получения как минимум 15 остатков N-концевой или внутренней аминокислотной последовательности с применением секвенатора с вращающимся стаканом, или (3) до гомогенности при помощи SDS-PAGE в невосстановительных или восстановительных условиях с использованием кумасси синего или, предпочтительно, окрашивания серебром. Выделенное антитело включает антитело в рекомбинантных клетках in situ, поскольку отсутствует как минимум один компонент условий естественного окружения антитела. Однако, как правило, выделенный полипептид или антитело получают с применением как минимум одного этапа очистки.

"Метастатическое" злокачественное новообразование относится к злокачественному новообразованию, которое распространяется из одной части организма (например, легкого) в другую часть организма.

"Моноклональное антитело", как используется в настоящей заявке, относится к антителу из совокупности по сути гомогенных антител, т.е. отдельные антитела, составляющие совокупность, являются идентичными, за исключением возможных встречающихся в природе мутаций и/или посттрансляционных модификаций (например, изомеризации и амидирований), которые могут быть представлены в небольших количествах. Моноклональные антитела являются высокоспецифичными, и они направлены против одного антигенного участка. В отличие от препаратов поликлональных антител, которые, как правило, включают различные антитела, направленные против различных детерминант (эпитопов), каждое моноклональное антитело в препарате моноклонального антитела направлено против одной детерминанты на антигене. В дополнение к их специфичности, моноклональные антитела являются преимущественными в том, что они синтезированы из своей гибридомной культуры и не содержат других иммуноглобулинов. Определение "моноклональный" указывает на характер антитела как полученного из по сути гомогенной совокупности антител, и не подразумевает того, что антитело должно быть получено каким-либо конкретным способом. Например, моноклональные антитела, предназначенные для применения согласно настоящему изобретению, можно получать множеством способов, включая, например, способ гибридом (например, Kohler и Milstein (1975) Nature 256: 495; Hongo и др. (1995) Hybridoma 14 (3): 253; Harlow и др. (1988) Антитела: A Laboratory Manual (Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2-e изд.; Hammerling и др. (1981) В: Monoclonal Antibodies and T-CeIl Hybridomas 563 (Elsevier, N.Y.), способы рекомбинантных ДНК (см., например, патент US №4,816,567), технологии фагового дисплея (см., например, Clackson и др. (1991) Nature 352: 624; Marks и др. (1992) JMB 222: 581; Sidhu и др. (2004) JMB 338(2): 299; Lee и др. (2004) JMB 340(5): 1073; Fellouse (2004) PNAS USA 101(34): 12467; и Lee и др. (2004) J. Immunol. Methods 284(1-2): 119), и технологии продуцирования антитела человека или антител, подобных антителам человека, у животных, которые имеют части локусов или генов иммуноглобулинов человека, кодирующие последовательности иммуноглобулинов, или все эти локусы или гены (см., например, WO 1998/24893; WO 1996/34096; WO 1996/33735; WO 1991/10741; Jakobovits и др. (1993) PNAS USA 90: 2551; Jakobovits и др. (1993) Nature 362: 255; Bruggemann и др. (1993) Year in Immunol. 7: 33; патенты US №№5,545,807; 5,545,806; 5,569,825; 5,625,126; 5,633,425; и 5,661,016; Marks и др. (1992) Bio/Technology 10: 779; Lonberg и др. (1994) Nature 368: 856; Morrison (1994) Nature 368: 812; Fishwild и др. (1996) Nature Biotechnol. 14: 845; Neuberger (1996), Nature Biotechnol. 14: 826; и Lonberg и Huszar (1995), Intern. Rev. Immunol. 13: 65-93). Моноклональные антитела согласно настоящему изобретению конкретно включают химерные антитела (иммуноглобулины), в которых часть тяжелой и/или легкой цепи является идентичной или гомологичной соответствующим последовательностям в антителах, полученных из конкретного вида или принадлежащих к конкретному классу или подклассу антител, в то время как оставшаяся часть цепи(ей) является идентичной или гомологичной соответствующим последовательностям в антителах, полученных из другого вида или принадлежащих другому классу или подклассу антител, а также фрагменты таких антител, при условии, что они проявляют требуемую биологическую активность (см., например, патент US №4,816,567; Morrison и др. (1984) PNAS USA, 81: 6851).

"Нанотела" относится к однодоменным антителам, которые представляют собой фрагменты, состоящие из одного мономерного вариабельного домена антитела. Подобно целому антителу, они способны селективно связываться со специфическим антигеном. Обладая молекулярной массой всего 12-15 кДа, однодоменные антитела являются намного меньшими, чем обычные антитела (150-160 кДа). Первые однодоменные антитела были получены путем инженерии из тяжелоцепочечных антител, обнаруженных у верблюдовых (см., например, W. Wayt Gibbs, "Nanobodies", Scientific American Magazine (август 2005 г.)).

"Объективный ответ" относится к измеряемому ответу, включая полный ответ (CR) или частичный ответ (PR).

"Частичный ответ" относится к снижению размера одного или нескольких опухолей или поражений, или распространения злокачественного новообразования в организме, в ответ на лечение.

"Пациент" и "субъект" применяют взаимозаменяемо в настоящей заявке для обозначения млекопитающего, нуждающегося в лечении злокачественного новообразования. Главным образом, пациент представляет собой человека, у которого диагностировано или есть риск страдания от одного или нескольких симптомов злокачественного новообразования. В определенных вариантах осуществления, "пациент" или "субъект" может относиться к млекопитающему, отличающемуся от человека, такому как отличающийся от человека примат, собака, кот, кролик свинья, мышь, или крыса, или животные, используемые при скрининге, характеристике и оценке лекарственных средств и терапий.

"PD-L1 экспрессия", как используется в настоящей заявке, обозначает любой обнаруживаемый уровень экспрессии PD-L1 белка на клеточной поверхности или мРНК PD-L1 в клетке или ткани. Экспрессия PD-L1 белка может быть обнаружена с помощью диагностического PD-L1 антитела в IHC анализе среза опухолевой ткани или с помощью проточной цитометрии. Альтернативно, экспрессия PD-L1 белка опухолевыми клетками может быть обнаружена с помощью PET визуализации, используя связующее средство (например, фрагмент антитела, аффитело и др.), которое специфически связывается с PD-L1. Методики для обнаружения и измерения экспрессии мРНК PD-L1 включают полимеразную цепную реакцию с обратной транскрипцией и количественную ПЦР в реальном времени с обратной транскрипцией.

"PD-L1 положительное" злокачественное новообразование, включая "PD-L1 положительный" рак, представляет собой новообразование, содержащее клетки, которые имеют PD-L1, присутствующий на их клеточной поверхности. Термин "PD-L1 положительный" также относится к злокачественному новообразованию, которое продуцирует достаточные уровни PD-L1 но поверхности их клеток, таким образом, что анти-PD-L1 антитело имеет терапевтический эффект, опосредуемый связыванием указанного анти-PD-L1 антитела с PD-L1.

"Фармацевтически приемлемый" указывает на то, что вещество или композиция должна быть совместима химически и/или токсикологически, с другими компонентами, содержащимися в препарате, и/или млекопитающим, которого будут ими лечить. "Фармацевтически приемлемый носитель" включает любые и все растворители, дисперсионную среду, покрытия, антибактериальные и противогрибковые агенты, изотонические агенты и агенты, которые замедляют абсорбцию, и другие, которые являются физиологически совместимыми. Примеры фармацевтически приемлемых носителей включают один или несколько из следующих компонентов: вода, солевой раствор, забуференный фосфатом солевой раствор, декстроза, глицерин, этанол и другие, а также их комбинации.

"Рекуррентное" злокачественное новообразование представляет собой злокачественное новообразование, которое повторно растет, либо в исходном участке или в удаленном участке, после ответа на начальную терапию, такую как хирургия. Локально "рекуррентное" злокачественное новообразование представляет собой злокачественное новообразование, которое возвращается после лечения в то же самое место, что и ранее леченное злокачественное новообразование.

"Уменьшение" симптома или симптомов (и грамматические эквиваленты этой фразы) относятся к снижению тяжести или частоты симптома(ов), или устранения симптома(ов).

"Сыворотка" относится к прозрачной жидкости, которая может быть отделена от свернувшейся крови. Сыворотка отличается от плазмы, жидкой части нормальной несвернувшейся крови, содержащей эритроциты и лейкоциты и тромбоциты. Сыворотка представляет собой компонент, в котором нет ни одной клеток крови (сыворотка не содержит лейкоцитов или эритроцитов), ни фактора свертывания крови. Она представляет собой плазму крови, но не включая фибриногены, которые помогают образованию кровяного сгустка. Различия между сывороткой и плазмой обусловлены сгустком крови.

"Одноцепочечные Fv", также сокращенно указываемые как "sFv " или "scFv", представляют собой фрагменты антител, которые включают VH и VL-домены антитела, соединенные в единую полипептидную цепь. Предпочтительно полипептид sFv также включает полипептидный линкер между V_H и V_L доменами, что позволяет sFv формировать нужную структуру для связывания антигена. Для обзора sFv см., см., например, Pluckthun (1994), IBn: The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, том 113, Rosenburg и Moore (ред.), Springer-Verlag, New York, cc. 269.

"Подходящий для терапии" или "подходящий для лечения" будет обозначать, что пациент, вероятно, проявляет один или несколько благоприятных клинических исходов по сравнению с пациентами, имеющими такое же злокачественное новообразование и получающими такую же терапию, но обладающий отличающейся характеристикой, которая рассматривается для сравнения. В одном аспекте, рассматриваемая характеристика представляет собой генетический полиморфизм или соматическую мутацию (см., например, Samsami и др. (2009) J Reproductive Med 54(1): 25). В другом аспекте, рассматриваемая характеристика представляет собой уровень экспрессии гена или полипептида. В одном аспекте, более желательный клинический исход представляет собой относительно большую вероятность или относительно лучший ответ опухоли, например, уменьшение опухолевой нагрузки. В другом аспекте, более желательный клинический исход представляет собой относительно более длительную общую выживаемость. В еще другом аспекте, более желательный клинический исход представляет собой относительно более длительную выживаемость без прогрессирования заболевания или время до прогрессирования опухоли. В еще другом аспекте, более желательный клинический исход представляет собой относительно более длительную выживаемость без признаков заболевания. В другом аспекте, более желательный клинический исход представляет собой относительное уменьшение или задержку рецидивирования опухоли. В другом аспекте, более желательный клинический исход представляет собой относительно сниженное метастазирование. В другом аспекте, более желательный клинический исход представляет собой относительно более низкий относительный риск. В еще другом аспекте, более желательный клинический исход представляет собой относительно уменьшенную токсичность или побочные эффекты. В некоторых вариантах осуществления, одновременно рассматриваются более одного клинического исхода. В одном таком аспекте, пациент, обладающий характерным признаком, таким как генотип генетического полиморфизма, может проявлять больше одного желательных клинических исходов по сравнению с пациентами, имеющими такое же злокачественное новообразование и получающими такую же терапию, но не обладающими характерным признаком. Как определено в настоящей заявке, пациент считается подходящим для терапии. В другом таком аспекте, пациент, обладающий характерным признаком, может проявлять один или несколько желательных клинических исходов, но одновременно проявлять один или несколько менее желательных клинических исходов. Затем клинические исходы будут рассматриваться обобщенно, и решение о том, будет ли пациент являться подходящим для терапии, будет приниматься таким образом, что учитывается специфическая ситуация пациента и релевантность клинических исходов. В некоторых вариантах осуществления, выживаемость без прогрессирования заболевания или общую выживаемость являются более весомыми, чем ответ опухоли, при принятии обобщенного решения.

"Долгосрочный ответ" обозначает долгосрочный терапевтический эффект после прекращения лечения с применением терапевтического средства или комбинированной терапии, описанной в настоящей заявке. В некоторых вариантах осуществления, долгосрочный ответ имеет продолжительность, которая является по меньшей мере такой самой, как и продолжительность лечения, или по меньшей мере в 1,5, 2,0, 2,5 или 3 раз более продолжительной по сравнению с продолжительностью лечения.

"Системное" лечение представляет собой лечение, при котором лекарственное вещество проходит через кровоток, достигая и оказывая влияние на все клетки в организме.

"Терапевтически эффективное количество" анти-PD-L1 антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, или ингибитора ДНК-ПК, в каждом случае согласно изобретению, относится к количеству, эффективному, в дозировках и для необходимых периодов времени, которое, при введении пациенту со злокачественным новообразованием, будет иметь предполагаемый терапевтический эффект, например, облегчение, ослабление, временное смягчение или устранение одного или нескольких проявлений злокачественного новообразования у пациента, или любой другой клинический результат во время курса лечения пациента со злокачественным новообразованием. Терапевтический эффект не обязательно происходит после введения одной дозы, и может происходить только после введения серий доз. Таким образом, терапевтически эффективное количество может быть введено за одно или несколько введений. Такое терапевтически эффективное количество может изменяться в зависимости от таких факторов, как болезненное состояние, возраст, пол и вес индивидуума, и способность анти-PD-L1 антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, или ингибитора ДНК-ПК, вызывать желательный терапевтический ответ у индивидуума. Терапевтически эффективное количество также представляет собой такое количество, при котором любые токсические или неблагоприятные эффекты анти-PD-L1 антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, или ингибитора ДНК-ПК, перевешиваются терапевтически благоприятными эффектами.

"Лечить" или "лечение" состояния или пациента относится к осуществлению этапов получения благоприятных или желательных результатов, включая клинические результаты. В контексте согласно настоящего изобретения, благоприятные или желательные клинические результаты включают, но не ограничиваясь только ими, облегчение, ослабление одного или нескольких симптомов злокачественного новообразования; уменьшение степени заболевания; задержку или замедление прогрессирования заболевания; купирование, временное смягчение, или стабилизацию болезненного состояния; или другие благоприятные результаты. Следует принять во внимание, что ссылки на "лечение" или "лечить" включают профилактику, а также ослабление установленных симптомов состояния. "Лечить" или "лечение" состояния, нарушения или расстройства, следовательно, включает: (1) предотвращение или замедление появления клинических симптомов состояния, нарушения или расстройства, развивающегося у субъекта, который может страдать от или быть предрасположенным к состоянию, нарушению или расстройству, но еще не ощущает или не проявляются клинические или субклинические симптомы состояния, нарушения или расстройства, (2) ингибирование состояния, нарушения или расстройства, то есть, остановка, уменьшение или замедление развития заболевания или его рецидива (в случае поддерживающего лечения) или по меньшей мере одного его клинического или субклинического симптома, или (3) облегчение или ослабление заболевания, то есть, вызывание регрессии состояния, нарушения или расстройства или по меньшей мере один одного из его клинических или субклинических симптомов.

"Опухоль", как термин применятся к субъекту, у которого она диагностирована, или предполагается наличие, злокачественное новообразование относится к злокачественной или потенциально злокачественной неоплазме или тканевой массе любого размера, и включает первичные опухоли и вторичные неоплазмы. опухоль представляет собой аномальный рост или массу ткани, которая обычно не содержит кист или жидких участков. Различные типы опухолей называют по типу клеток, из которых они образованы. Примерами опухолей являются саркомы, карциномы и лимфомы. Лейкозы (злокачественные новообразования крови) обычно не образуют опухоли.

"Единичная дозированная форма", как используется в настоящей заявке, относится к физически дискретной единице терапевтического препарата, подходящей для субъекта, подвергаемого лечению. Тем не менее, подразумевается, что общая применяемая суточная дозировка композиций согласно настоящему изобретению будет определяться лечащим врачом с учетом тщательной медицинской клинической оценки. Уровень специфической эффективной дозы для любого конкретного субъекта или организма будет зависеть от различных факторов, включая нарушение, подвергаемое лечению, и тяжесть нарушения; активность специфического применяемого агента; специфичность применяемой композиции; возраст, вес тела, общее состояние здоровья, пол и питание субъекта; время введения, и скорость выведения специфического активного средства; продолжительность лечения; лекарственных средств и/или дополнительных терапий, используемых в комбинации или совместно с применяемым(и) специфическим(и) соединением(ями), и другими факторами, хорошо известными в области медицины.

"Вариабельный" означает, что последовательности определенных сегментов вариабельных доменов значительно отличаются среди антител. V-домен опосредует связывание антигена и определяет специфичность конкретного антитела к его конкретному антигену. Однако вариабельность не является равномерной на протяжении всего участка вариабельных доменов. Вместо этого она сконцентрирована в трех сегментах, называемых гипервариабельными областями (HVR) в вариабельных доменах как легкой цепи, так и тяжелой цепи. Более высококонсервативные участки вариабельных доменов называют каркасными областями (FR). Каждый из вариабельных доменов нативных тяжелых и легких цепей включает четыре FR, главным образом принимающих конфигурацию бета-слоев, соединенных тремя HVR, которые формируют петли, объединяющие структуру бета-слоев и в некоторых случаях формирующие ее часть. HVR в каждой цепи расположены вместе в непосредственной близости от FR-областей и, совместно с HVR другой цепи, участвуют в формировании антигенсвязывающего участка антител (см. Kabat и др., (1991), Sequences of Immunological Interest, пятое изд., National Institute of Health, Bethesda, MD). Константные домены не вовлечены непосредственно в связывание антитела с антигеном, но они проявляют различные эффекторные функции, такие как участие антитела в антителозависимой клеточной цитотоксичности.

"Вариабельный участок " или "вариабельный домен" антитела относится к амино-концевым доменам тяжелой или легкой цепи антитела. Вариабельные домены тяжелой цепи и легкой цепи могут называться "VH" и "VL", соответственно. Эти домены, как правило, являются наиболее вариабельными частями антитела (относительно других антител того же класса) и содержат антигенсвязывающие участки.

Как используется в настоящей заявке, множество понятий, структурных элементов, составных элементов и/или материалов могут присутствовать в общепринятом перечне для удобства. Однако эти перечни должны рассматриваться, как если бы каждый член перечня был индивидуально идентифицирован в качестве отдельного и уникального члена. Таким образом, ни один индивидуальный член такого перечня не должен рассматриваться как фактический эквивалент любого другого члена того же перечня, только на основании их презентации в общей группе, если специально не указано иное.

Концентрации, количества и другие числовые данные могут быть выражены или представлены в настоящей заявке в формате диапазоне. Подразумевается, что такой формат диапазона используется только исключительно для удобства и краткости и, следовательно, его следует интерпретировать гибко, как включающий не только числовые значения, которые точно указаны в качестве переделов диапазона, но также как включающий все индивидуальные числовые значения или под-диапазоны, охватываемые в пределах этого диапазона, если бы каждое числовое значение и под-диапазон был точно указан. В качестве иллюстрации, числовой диапазон "от приблизительно 1 до приблизительно 5" следует интерпретировать как включающий не только точно указанные значения от приблизительно 1 до приблизительно 5, но и как также включающий индивидуальные значения и под-диапазоны в пределах указанного диапазона. Таким образом, включенными в этот числовой диапазон являются индивидуальные значения, такие как 2, 3, и 4 и под-диапазоны, такие как от 1-3, от 2-4, и от 3-5, и др., а также 1, 2, 3, 4, и 5, индивидуально. Такой же принцип применяется к диапазонам, указывающим только одно числовое значение в качестве минимума или максимума. Кроме того, такую же интерпретацию следует применять независимо от ширины диапазона или характеристик, которые описываются.

Сокращения

Некоторые сокращения, используемые в описании, включают:

1L:	Первая линия
2L:	Вторая линия
ADCC:	Антителозависимая клеточно-обусловленная цитотоксичность
BID:	Два раза в сутки
CDR:	Гипервариабельный участок
CR:	Полный ответ
CRC:	Рак ободочной и прямой кишки
CRT:	Химиолучевая терапия
СТ:	Химиотерапия
ДНК:	Дезоксирибонуклеиновая кислота
ДНК-ПК:	ДНК-зависимая протеинкиназа
ДНК-ПКи:	Ингибитор ДНК-зависимой протеинкиназы
ДЦР:	Двухцепочечный разрыв
ED:	Распространенное заболевание
Это:	Этопозид
Ig:	Иммуноглобулин
IHC:	Иммуногистохимия
IV:	Внутривенный (в/в)
mCRC:	Метастатический рак ободочной и прямой кишки
MSI-H:	Нестабильный высокий микросателлитный статус
MSI-L:	Нестабильный низкий микросателлитный статус
MSS:	Стабильный микросателлитный статус
NK:	Природные киллеры
NSCLC:	Немелкоклеточный рак легких
OS:	Общая выживаемость
PD:	Прогрессирующее заболевание
PD-1:	Запрограммированная смерть 1
PD-L1:	Лиганд запрограммированной смерти 1
PES:	Полиэфирсульфоны
PFS:	Выживаемость без прогрессирования заболевания
PR:	Частичный ответ
QD:	Один раз в сутки
QID:	Четыре раза в сутки
Q2W:	Каждые две недели
Q3W:	Один раз в три недели
РНК:	Рибонуклеиновая кислота
RP2D:	Рекомендуемая доза II фазы
RR:	Относительный риск
RT:	Лучевая терапия
SCCHN:	Плоскоклеточная карцинома головы и шеи
SCLC:	Мелкоклеточный рак легких
SoC:	Стандарт лечения
SR:	Долгосрочный ответ
TID:	Три раза в сутки
Топо:	Топотекан
TR:	Ответ опухоли
ТТР:	Время до прогрессирования опухоли
TTR:	Время до рецидива опухоли

Иллюстративные варианты осуществления изобретения

Терапевтическая комбинация и способ ее применения

Некоторые химиотерапии и лучевая терапия могут вызывать гибель иммуногенных опухолевых клеток и создают микроокружение опухоли для способствования противоопухолевому иммунитету. ДНК-ПК ингибирование с помощью ингибиторов репарации ДНК может запускать и повышать гибель иммуногенных клеток, индуцированную лучевой терапией или химиотерапией, и, следовательно, может дополнительно повышать Т-клеточные иммунные реакции. Активация стимулятора пути генов интерферонов (STING) и последующая индукция интерферонов I тира и PD-L1 экспрессии является частью ответной реакции на двухцепочечные разрывы в ДНК. Кроме того, опухоли с высокой нагрузкой соматических мутации особенно отвечают на ингибиторы контрольных точек, потенциально вследствие повышенного образования неоантигенов. В особенности, имеет место сильный анти-PD1 ответ в дефицитных по репарации ошибочно спаренных оснований CRC. Ингибиторы репарации ДНК, кроме того, могут повышать частоту мутаций опухолей и, следовательно, репертуар неоантигенов. Не желая ограничиваться какой-либо теорией, изобретатели настоящего изобретения полагают, что накопление двухцепочечных разрывов (ДЦР), например, путем ингибирования репарации ДЦР, в особенности в комбинации с ДНК-повреждающими вмешательствами, такими как лучевая терапия или химиотерапия, или в генетически нестабильных опухолях, сенсибилизирует опухоли к лечению с применением анти-PD-L1 антитела, содержащего тяжелую цепь, которая содержит три гипервариабельных участка, имеющих аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и легкую цепь, которая содержит три гипервариабельных участка, имеющих аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 4, 5 и 6. Ингибирование взаимодействия между PD-1 и PD-L1 усиливает Т-клеточные иммунные реакции и опосредует клиническую противоопухолевую активность. PD-1 представляет собой ключевой рецептор контрольной точки иммунного ответа, экспрессируемый активированными Т-клетками, которые опосредует иммуносупрессию и функционирует главным образом в периферических тканях, где Т-клетки могут сталкиваться с иммуносупрессивными PD-1 лигандами PD-L1 (В7-Н1) и PD-L2 (B7-DC), которые экспрессируются опухолевыми клетками, стромальными клетками, или обеими клетками.

Настоящее изобретение является результатом, частично, неожиданного открытия преимуществ комбинации для ингибитора ДНК-ПК и анти-PD-L1 антитела, а также для ингибитора ДНК-ПК и анти-PD-L1 антитела в комбинации с лучевой терапией, химиотерапией или химиолучевой терапией, где анти-PD-L1 антитело содержит тяжелую цепь, которая содержит три гипервариабельных участка, имеющих аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и легкую цепь, которая содержит три гипервариабельных участка, имеющих аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 4, 5 и 6. Полагали, что добавление ингибитора ДНК-ПК к указанному анти-PD-L1 антителу является противопоказанием, поскольку ДНК-ПК является основным ферментом в VDJ рекомбинации и, как таковой, потенциально иммуносупрессивный до такой степени, что делеция ДНК-ПК приводит к SCID (тяжелый комбинированный иммунодефицит) фенотипу у мышей. В отличие от этого, комбинация согласно настоящему изобретению замедляет рост опухоли по сравнению с применением отдельных взятых лечений (см., например, Фигуру 3). Схема лечения и дозы созданы для выявления потенциального синергизма. Оптимальные схемы для комбинаций Соединение 1/лучевая терапия, а также авелумаб/лучевая терапия, будут чрезвычайно эффективными на этой конкретной опухолевой модели. Данные in-vitro демонстрируют синергизм ингибитора ДНК-ПК, в особенности Соединения 1, в комбинации с PD-L1 антителом, в особенности авелумабом, необязательно совместно с лучевой терапией, по сравнению с ингибитором ДНК-ПК или авелумабом (см., например, Фигуру 3 или 4).

Таким образом, в одном аспекте, настоящее изобретение обеспечивает способ лечения злокачественного новообразования у субъекта, который в этом нуждается, включающий введение субъекту анти-PD-L1 антитела или его антигенсвязывающего фрагмента или функционального фрагмента, и ингибитора ДНК-ПК. Подразумевается, что терапевтически эффективное количество анти-PD-L1 антитела и ингибитора ДНК-ПК применяют в способе согласно изобретению, которого достаточно для лечения одного или нескольких симптомов заболевания или нарушения, связанного с PD-L1 и ДНК-ПК, соответственно.

В особенности, настоящее изобретение обеспечивает способ лечения злокачественного новообразования у субъекта, который в этом нуждается, включающий введение субъекту анти-PD-L1 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, и ингибитора ДНК-ПК, где анти-PD-L1 антитело содержит тяжелую цепь, которая содержит три гипервариабельных участка, имеющих аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и легкую цепь, которая содержит три гипервариабельных участка, имеющих аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 4, 5 и 6.

В одном варианте осуществления, анти-PD-L1 антитело представляет собой моноклональное антитело. В одном варианте осуществления, анти-PD-L1 антитело проявляет антителозависимую клеточно-обусловленную цитотоксичность (ADCC). В одном варианте осуществления, анти-PD-L1 антитело представляет собой человеческое или гуманизированное антитело. В одном варианте осуществления, анти-PD-L1 антитело представляет собой выделенное антитело. В различных вариантах осуществления, анти-PD-L1 антитело характеризуется комбинацией одного или нескольких вышеизложенных признаков, как определено выше.

В различных вариантах осуществления, анти-PD-L1 антитело представляет собой авелумаб. Авелумаб (ранее обозначаемый как MSB0010718C) представляет собой полностью человеческое моноклональное антитело изотипа иммуноглобулина (Ig) G1 (см., например, WO 2013/079174). Авелумаб селективно связывается с PD-L1 и конкурентно блокирует его взаимодействие с PD-1. Механизмы действия основаны на ингибировании взаимодействия PD-1/PD-L1 и основанной на природных киллерах (NK) антителозависимой клеточно-обусловленной цитотоксичности (ADCC) (см., например, Boyerinas и др. (2015) Cancer Immunol Res 3: 1148). По сравнению с анти-PD-1 антителами, которые нацелены на Т-клетки, авелумаб нацелен на опухолевые клетки и, следовательно, полагают, что он будет иметь меньше побочных действий, включая меньший риск связанных с аутоиммунными процессами угроз безопасности, так как блокада PD-L1 оставляет PD-L2/PD-1 путь интактным, что способствует периферической аутотолерантности (см., например, Latchman и др. (2001) Nat Immunol 2(3): 261).

Авелумаб, его последовательность и многие его свойства были описаны в WO 2013/079174, где он был обозначен А09-246-2, имеющее последовательности тяжелой и легкой цепей в соответствии с SEQ ID NO: 32 и 33, как представлено на Фигуре 1 (SEQ ID NO: 7) и Фигуре 2 (SEQ ID NO: 9), настоящей патентной заявки. Тем не менее, часто наблюдает, что в процессе продукции антитела, С-концевой лизин (К) тяжелой цепи отщеплен. Эта модификация не оказывает влияние на связывание антитела. Следовательно, в некоторых вариантах осуществления С-концевой лизин (K) последовательности тяжелой цепи авелумаба отсутствует. Последовательность тяжелой цепи авелумаба без С-концевого лизина представлена на Фигуре 1B (SEQ ID NO: 8), в то время как на Фигуре 1А (SEQ ID NO: 7) показана полноразмерная последовательность тяжелой цепи авелумаба. Кроме того, как описано в WO 2013/079174, одним из свойств авелумаба является его способность проявлять антителозависимую клеточно-обусловленную цитотоксичность (ADCC), таким образом действуя непосредственно на несущие PD-L1 опухолевые клетки путем индуцирования их лизиса без проявления какой-либо существенной токсичности. В предпочтительном варианте осуществления, анти-PD-L1 антитело представляет собой авелумаб, который имеет последовательности тяжелой и легкой цепей, представленные на Фигуре 1А или 1B (SEQ ID NOs: 7 или 8), и Фигуре 2 (SEQ ID NO: 9), или его антигенсвязывающий фрагмент.

В некоторых аспектах, ингибитор ДНК-ПК представляет собой (S)-[2-хлор-4-фтор-5-(7-морфолин-4-ил-хиназолин-4-ил)-фенил]-(6-метоксипиридазин-3-ил)-метанол, который имеет структуру Соединения 1:

или его фармацевтически приемлемую соль.

Соединение 1 подробно описано в патентной заявке США US 2016/0083401, опубликованной 24 марта 2016 г. (которая обозначается в настоящей заявке как "публикация ‘401 "), полное содержание которой таким образом включено в настоящую заявку путем ссылки. Соединение 1 обозначено как соединение 136 в Таблице 4 ‘401 публикации. Соединение 1 является активным в различных исследованиях и терапевтических моделях, демонстрирующих ингибирование ДНК-ПК (см., например, Таблицу 4 ‘401 публикации). Таким образом, Соединение 1 или его фармацевтически приемлемая соль пригодно (а) для лечения одного или нескольких нарушений, связанных с активностью ДНК-ПК, как подробно описано в настоящей заявке.

Соединение 1 является эффективным и селективным АТФ-конкурентным ингибитором ДНК-ПК, как показано с помощью кристаллографических исследований и исследований ферментативной кинетики. ДНК-ПК, совместно с пятью дополнительными белковыми факторами (Ku70, Ku80, XRCC4, Лигаза IV и Artemis) играет решающую роль в репарации ДЦР посредством NHEJ. Киназная активность ДНК-ПК является чрезвычайно важной для надлежащей и своевременной репарации ДНК и длительного выживания злокачественных клеток. Не желая ограничиваться какой-либо конкретной теорией, полагают, что основными эффектами Соединения 1 являются супрессия активности ДНК-ПК и репарации двухцепочечных разрывов ДНК (ДЦР), что приводит к измененной репарации ДНК и потенцированию противоопухолевой активности агентов, повреждающих ДНК.

Следует принять во внимание, что, несмотря на то, что все способы, описанные в настоящей заявке, могут относиться к препаратам, дозам и режимам применения/схемам Соединения 1, такие препараты, дозы и/или режимы применения/схемы в равной степени приемлемы к любой фармацевтически приемлемой соли Соединения 1. Таким образом, в некоторых вариантах осуществления, дозу или режим дозирования для фармацевтически приемлемой соли Соединения 1, или его фармацевтически приемлемую соль, выбирают из любых доз или режимов дозирования для Соединения 1, как описано в настоящей заявке.

Фармацевтически приемлемая соль может задействовать включение другой молекулы, такой как ацетатный ион, сукцинатный ион или другой противоион. Противоион может представлять собой любой органический или неорганический компонент, который стабилизирует заряд на родительском соединении. Кроме того, фармацевтически приемлемая соль может иметь больше одного заряженного атома в своей структуре. Примеры, где множественно заряженные атомы являются частью фармацевтически приемлемой соли, могут иметь множество противоионов. В данном случае, фармацевтически приемлемая соль может иметь один или несколько заряженных атомов и/или один или несколько противоионов. Если соединение согласно изобретению представляет собой основание, то желательная фармацевтически приемлемая соль может быть приготовлена с помощью любого подходящего способа, доступного в данной области, например, обработки свободного основания неорганической кислотой, такой как соляная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, метансульфоновая кислота, фосфорная кислота и др., или органической кислотой, такой как уксусная кислота, малеиновая кислота, янтарная кислота, миндальная кислота, фумаровая кислота, малоновая кислота, пировиноградная кислота, щавелевая кислота, гликолевая кислота, салициловая кислота, пиранозидальная кислота, такая как глюкуроновая кислота или галактуроновая кислота, альфагидрокси кислота, такая как лимонная кислота или винная кислота, аминокислота, такая как аспарагиновая кислота или глутаминовая кислота, ароматическая кислота, такая как бензойная кислота или коричная кислота, сульфоновая кислота, такая как n-толуолсульфоновая кислота или этансульфоновая кислота, или др. Если соединение согласно изобретению представляет собой кислоту, то желательная фармацевтически приемлемая соль может быть приготовлена с помощью любого подходящего способа, например, обработки свободной кислотой неорганическим или органическим основанием, таким как амин (первичный, вторичный или третичный), гидроксид щелочного металла или гидроксид щелочноземельного металла или др. Иллюстративные примеры подходящих солей включают, но не ограничиваясь только ими, органические соли, имеющие происхождение из аминокислот, таких как глицин и аргинин, аммиак, первичные, вторичные и третичные амины, и циклические амины, такие как пиперидин, морфолин и пиперазин, и неорганические соли, имеющие происхождение из натрия, кальция, калия, магния, марганца, железа, меди, цинка, алюминия и лития.

В одном варианте осуществления, терапевтическая комбинация согласно изобретению применяется для лечения субъекта-человека. В одном варианте осуществления, анти-PD-L1 антитело нацелено на PD-L1, который представляет собой PD-L1 человека. Основным ожидаемым преимуществом для лечения с применением терапевтической комбинации является увеличение соотношения «риск-польза» с применением указанного антитела, в особенности авелумаба, для таких пациентов-людей.

В одном варианте осуществления, злокачественное новообразование идентифицировано как a PD-L1 положительное онкологическое заболевание. Фармакодинамические анализы указывают на то, что опухолевая экспрессия PD-L1 может быть прогностической для эффективности лечения. В соответствии с изобретением, злокачественное новообразование предпочтительно рассматривают как PD-L1 положительное, если в диапазоне от по меньшей мере 0,1% до по меньшей мере 10% клеток злокачественного новообразования имеют PD-L1, присутствующие на их клеточной поверхности, более предпочтительно в диапазоне от по меньшей мере 0,5% до 5%, наиболее предпочтительно по меньшей мере 1%. В одном варианте осуществления, PD-L1 экспрессия определяется с помощью иммуногистохимии (IHC).

В другом варианте осуществления, злокачественное новообразование выбирают из злокачественного новообразования легких, головы и шеи, ободочной кишки, нейроэндокринной системы, мезенхимы, молочной железы, яичников, поджелудочной железы, и их гистологических подтипов (например, адено, плосколеточный, крупноклеточный). В предпочтительном варианте осуществления, злокачественное новообразование выбирают из мелкоклеточного рака легких (SCLC), немелкоклеточного рака легких (NSCLC), плоскоклеточной карциномы головы и шеи (SCCHN), рака ободочной и прямой кишки (CRC), первичных нейроэндокринных опухолей и саркомы.

В различных вариантах осуществления, способ согласно изобретению применяются в качестве лечения первой, второй, третьей или дальнейшей линии. Линия лечения относится к расположению в порядке лечения с применением различных лекарственных средств или других терапий, получаемых пациентов. Режимы терапий первой линии представляют собой лечения, осуществляемые первыми, в то время как терапии второй или третьей линии водят после терапии первой линии или после терапии второй линии, соответственно. Следовательно, терапия первой линии представляет собой первое лечение для заболевания или состояния. У пациентов со злокачественным новообразованием, терапия первой линии, иногда обозначаемая как первичная терапия или первичное лечение, может представлять собой хирургическое вмешательство, химиотерапию, лучевую терапию или комбинацию этих терапий. Типично, пациент получает последующую схему химиотерапии (терапию второй или третьей линии), либо в связи с тем, что пациент не проявил положительный клинический исход или проявил только субклинический ответ на терапию первой линии или терапию второй линии или проявил положительный клинический ответ, но затем у него развился рецидив, иногда с заболеванием, которое в настоящее время резистентно к более ранней терапии, на которую ранее наблюдался положительный ответ.

Если безопасность и клинический результат, обеспечиваемый терапевтической комбинацией согласно изобретению, подтверждаются, то эта комбинация анти-PD-L1 антитела и ингибитора ДНК-ПК служит основанием для установок первой линии у пациентов со злокачественными новообразованиями. В особенности, комбинация может становиться новым стандартным лечением для пациентов, страдающих от злокачественного новообразования, которые выбирают из группы SCLC распространенного заболевания (ED), NSCLC и SCCHN.

Является предпочтительным, когда терапевтическую комбинацию согласно изобретению применяют в дальнейшей линии лечения, в особенности, в лечении второй линии или более высоком лечении злокачественного новообразования. Отсутствуют ограничения для предшествующих количеств лечений, при условии, что субъекта подвергают по меньшей мере одному циклу предшествующей противораковой терапии. Цикл предшествующей противораковой терапии относится к определенной схеме / фазе для лечения субъекта, например, с помощью одного или нескольких химиотерапевтические средства, лучевой терапии или химиолучевой терапии, и для субъекта такое предшествующее лечение является неуспешным, которое либо завершается или останавливается ранее намеченного срока. Одной из причин может являться тот факт, что злокачественное новообразование является резистентным или становится резистентным к предшествующей терапии. Существующий в настоящее время стандарт лечения (SoC) для лечения пациентов со злокачественными новообразованиями часто включает введение токсических и старых химиотерапевтических схем. SoC связано с высоким риском сильных нежелательных явлений, которые, вероятно, препятствуют качеству жизни (такие как вторичные злокачественные новообразования). Полагают, что профили токсичности комбинации анти-PD-L1 антитело / ингибитор ДНК-ПК, предпочтительно авелумаб и (S)-[2-хлор-4-фтор-5-(7-морфолин-4-ил-хиназолин-4-ил)-фенил]-(6-метоксипиридазин-3-ил)-метанол, или его фармацевтически приемлемой соли, должны быть значительно лучшими, чем SoC химиотерапия. В одном варианте осуществления, комбинация анти-PD-L1 антитело / ингибитор ДНК-ПК, предпочтительно авелумаб и (S)-[2-хлор-4-фтор-5-(7-морфолин-4-ил-хиназолин-4-ил)-фенил]-(6-метоксипиридазин-3-ил)-метанол, или его фармацевтически приемлемую соль, может быть такой же по эффективности и лучше переносимой по сравнению с SoC химиотерапией у пациентов со злокачественным новообразованием, резистентным к моно- и/или полихимиотерапии, лучевой терапии или химиолучевой терапии.

В предпочтительном варианте осуществления, анти-PD-L1 антитело и ингибитор ДНК-ПК вводят в лечении второй линии или лечении более высокого порядка, более предпочтительно в лечении второй линии, злокачественного новообразования, выбранного из группы, включающей леченный ранее рецидивирующий метастатический NSCLC, неоперабельный местнораспространенный NSCLC, леченный ранее SCLC ED, SCLC непригодный для системного лечения, леченный ранее рецидивирующий (рекуррентный) или метастатический SCCHN, рекуррентный SCCHN, пригодный для повторного облучения, и леченный ранее нестабильный низкий микросателлитный статус (MSI-L) или стабильный микросателлитный статус (MSS) метастатический рак ободочной и прямой кишки (mCRC). SCLC и SCCHN являются, в особенности, системно леченными ранее. MSI-L/MSS mCRC происходят в 85% всех mCRC. После того как, профиль безопасность/переносимость и эффективность двухкомпонентной комбинации анти-PD-L1 антитела и ингибитора ДНК-ПК устанавливают у пациентов, при использовании стандартной дозы анти-PD-L1 антитела и рекомендованной дозы в фазе II (RP2D) ингибитора ДНК-ПК, в каждом случае, как описано в настоящей заявке, нацеливают дополнительные расширенные когорты, включая химиотерапию (например, этопозид или топотекан), лучевую терапию или химиолучевую терапию для интродукции двухцепочечных разрывов.

В некоторых вариантах осуществления, которые используют анти-PD-L1 антитело в комбинационной терапии, режим дозирования будет включать введение анти-PD-L1 антитела в дозе приблизительно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20 мг/кг с интервалами приблизительно 14 дней (±2 дня) или приблизительно 21 день (±2 дня) или приблизительно 30 дней (±2 дня) на протяжении всего курса лечения. В других вариантах осуществления, которые используют анти-PD-L1 антитело в комбинационной терапии, режим дозирования будет включать введение анти-PD-L1 антитела в дозе от приблизительно 0,005 мг/кг до приблизительно 10 мг/кг, с индивидуальным повышением дозы. В других вариантах осуществления повышения дозы, интервал между дозами будет постепенно сокращаться, например, приблизительно 30 дней (±2 дня) между первой и второй дозой, приблизительно 14 дней (±2 дня) между второй и третьей дозами. В определенных вариантах осуществления, интервал дозирования будет составлять приблизительно 14 дней (±2 дня), для доз после второй дозы. В определенных вариантах осуществления, субъекту будут вводить внутривенную (IV, в/в) инфузию лекарственного средства, включающего любое из анти-PD-L1 антител, описанных в настоящей заявке. В некоторых вариантах осуществления, анти-PD-L1 антитело в комбинационной терапии представляет собой авелумаб, который вводят внутривенно в дозе, выбранной из группы, включающей: приблизительно 1 мг/кг Q2W (Q2W = одна доза каждые две недели), приблизительно 2 мг/кг Q2W, приблизительно 3 мг/кг Q2W, приблизительно 5 мг/кг Q2W, приблизительно 10 мг/кг Q2W, приблизительно 1 мг/кг Q3W (Q3W = одна доза один раз в три недели), приблизительно 2 мг/кг Q3W, приблизительно 3 мг/кг Q3W, приблизительно 5 мг/кг Q3W, и приблизительно 10 мг Q3W. В некоторых вариантах осуществления согласно изобретению, анти-PD-L1 антитело в комбинационной терапии представляет собой авелумаб, который вводят в жидком лекарственном средстве в дозе, выбранной из группы, включающей приблизительно 1 мг/кг Q2W, приблизительно 2 мг/кг Q2W, приблизительно 3 мг/кг Q2W, приблизительно 5 мг/кг Q2W, приблизительно 10 мг/кг Q2W, приблизительно 1 мг/кг Q3W, приблизительно 2 мг/кг Q3W, приблизительно 3 мг/кг Q3W, приблизительно 5 мг/кг Q3W, и приблизительно 10 мг/кг Q3W. В некоторых вариантах осуществления, цикл лечения начинается с первым днем комбинированного лечения и продолжается в течение 2 недель. В таких вариантах осуществления, комбинированную терапию предпочтительно вводят в течение по меньшей мере 12 недель (6 циклов лечения), более предпочтительно по меньшей мере 24 недели, и еще более предпочтительно по меньшей мере 2 недель после достижения пациентом CR.

В некоторых вариантах осуществления, которые используют анти-PD-L1 антитело в комбинационной терапии, режим дозирования будет включать введение анти-PD-L1 антитела в дозе приблизительно 400-800 мг фиксированная доза Q2W. Предпочтительно, базовый режим дозирования составляет 400 мг, 450 мг, 500 мг, 550 мг, 600 мг, 650 мг, 700 мг 750 мг или 800 мг фиксированной дозы Q2W. Более предпочтительно, базовый режим дозирования составляет 800 мг фиксированной дозы Q2W. В некоторых более предпочтительных вариантах осуществления, в которых используют анти-PD-L1 антитело в комбинационной терапии, режим дозирования будет представлять собой фиксированную дозу 800 мг, вводимую внутривенно с интервалами приблизительно 14 дней (±2 дня).

В другом варианте осуществления, анти-PD-L1 антитело, предпочтительно авелумаб, будут вводить в/в каждые две недели (Q2W). В определенных вариантах осуществления, анти-PD-L1 антитело вводят внутривенно в течение 50-80 минут в дозе приблизительно 10 мг/кг веса тела каждые две недели (Q2W). В более предпочтительном варианте осуществления, доза авелумаба будет составлять 10 мг/кг веса тела, вводимая в виде 1-часовых внутривенных инфузий каждые две недели (Q2W). В определенных вариантах осуществления, анти-PD-L1 антитело вводят внутривенно в течение 50-80 минут в фиксированной дозе приблизительно 800 мг каждые две недели (Q2W). В более предпочтительном варианте осуществления, доза авелумаба будет составлять 800 мг, вводимая в виде 1-часовых внутривенных инфузий каждые 2 недели (Q2W). Принимая во внимание изменчивость инфузионных насосов для разных сайтов, разрешается временное окно от минус 10 минут до плюс 20 минут.

Фармакокинетические исследования свидетельствуют о том, что доза авелумаба 10 мг/кг обеспечивает чрезвычайно хорошее заполнение рецептора с прогнозируемым фармакокинетическим профилем (см., например, Heery и др. (2015) Proc 2015 ASCO Annual Meeting, реферат 3055). Эта доза является хорошо переносимой, и наблюдаются признаки противоопухолевой активности, включая продолжительные ответные реакции. Авелумаб может вводиться вплоть до 3 дней до или после дня введения, предусмотренного графиком, каждого цикла по соображениям введения. Фармакокинетические симуляции также свидетельствуют о том, что воздействие авелумаба для доступного диапазона веса тела является менее переменными с 800 мг Q2W по сравнению с дозой 10 мг/кг Q2W. Воздействия являются сходными для среднего веса популяции. Субъекты с низким весом имеют тенденцию к значительно меньшим экспозициям по сравнению с остальной популяцией при использовании дозирования на основании веса, и значительно более высокие дозирования при использовании фиксированного дозирования. Предполагают, что последствия этих отличий экспозиции не будут являться клинически значимыми при любой весе для всей популяции. Кроме того, полагают, что 800 мг Q2W режим дозирования приводит к C_trough>1 мг/мл, необходимой для поддержания концентраций авелумаба в сыворотке на уровне >95% ТО для всего Q2W интервала дозирования во всех весовых категориях. В предпочтительном варианте осуществления, фиксированный режим дозирования 800 мг, вводимый в виде 1 часовой в/в инфузии Q2W, будет использоваться для авелумаба в клинических исследованиях.

В некоторых вариантах осуществления, обеспечиваемые способы включают введение фармацевтически приемлемой композиции, содержащей ингибитор ДНК-ПК, предпочтительно Соединение 1, или его фармацевтически приемлемую соль, один, два, три или четыре раза в сутки. В некоторых вариантах осуществления, фармацевтически приемлемаую композицию, содержащую ингибитор ДНК-ПК, предпочтительно Соединение 1, или его фармацевтически приемлемую соль, вводят один раз в сутки ("QD"), в особенности непрерывно. В некоторых вариантах осуществления, фармацевтически приемлемую композицию, содержащую ингибитор ДНК-ПК, предпочтительно Соединение 1, или его фармацевтически приемлемую соль, вводят два раза в сутки, в особенности непрерывно. В некоторых вариантах осуществления, два раза в сутки введение относится к соединению или композиции, которое(ую) вводят "BID", или две эквивалентные дозы, вводимые в два различных момента времени в один день. В некоторых вариантах осуществления, фармацевтически приемлемую композицию, содержащую ингибитор ДНК-ПК, предпочтительно Соединение 1, или его фармацевтически приемлемую соль, вводят три раза в сутки. В некоторых вариантах осуществления, фармацевтически приемлемую композицию, содержащую Соединение 1, или его фармацевтически приемлемую соль, вводят "TID", или три эквивалентные дозы, вводят в три различных момента времени в один день. В некоторых вариантах осуществления, фармацевтически приемлемую композицию, содержащую ингибитор ДНК-ПК, предпочтительно Соединение 1, или его фармацевтически приемлемую соль, вводят четыре раза в сутки. В некоторых вариантах осуществления, фармацевтически приемлемую композицию, содержащую Соединение 1, или его фармацевтически приемлемую соль, вводят "QID", или четыре эквивалентные дозы, вводимые в четыре различных момента времени в один день. В некоторых вариантах осуществления, ингибитор ДНК-ПК, предпочтительно Соединение 1, или его фармацевтически приемлемую соль, вводят пациенту натощак и общая суточная доза представляет собой любую из доз, описанных выше и в настоящей заявке. В некоторых вариантах осуществления, ингибитор ДНК-ПК, предпочтительно Соединение 1, или его фармацевтически приемлемую соль, вводят пациенту после еды и общая суточная доза представляет собой любую из доз, описанных выше и в настоящей заявке. В некоторых вариантах осуществления, ингибитор ДНК-ПК, предпочтительно Соединение 1, или его фармацевтически приемлемую соль, вводят перорально. В некоторых вариантах осуществления, ингибитор ДНК-ПК, предпочтительно Соединение 1, или его фармацевтически приемлемую соль, будут вводить перорально либо один или два раза в сутки непрерывно. В предпочтительных вариантах осуществления, ингибитор ДНК-ПК, предпочтительно Соединение 1, или его фармацевтически приемлемую соль, вводят один раз в сутки (QD) или два раза в сутки (BID), в дозе от приблизительно 1 до приблизительно 800 мг. В предпочтительных вариантах осуществления, ингибитор ДНК-ПК, предпочтительно Соединение 1, или его фармацевтически приемлемую соль, вводят два раза в сутки (BID), в дозе приблизительно 400 мг.

Конкурентное лечение, которое считается необходимым для хорошего самочувствия пациентов, может находиться в компетенции лечащего врача. В некоторых вариантах осуществления, анти-PD-L1 антитело и ингибитор ДНК-ПК вводят в комбинации с химиотерапией (СТ), лучевой терапией (RT), или химиотерапией и лучевой терапией (CRT). Как описано в настоящей заявке, в некоторых вариантах осуществления, настоящее изобретение обеспечивает способы лечения, стабилизации или снижения тяжести или прогрессирования одного или нескольких заболеваний или нарушений, связанных с PD-L1 и ДНК-ПК, включающие введение пациенту, который в этом нуждается, анти-PD-L1 антитела и ингибитора ДНК-ПК в комбинации с дополнительным химиотерапевтическим средством. В определенных вариантах осуществления, химиотерапевтическое средство выбирают из группы, включающей этопозид, доксорубицин, топотекан, иринотекан, фторурацил, препарат платины, антрациклин и их комбинацию.

В определенных вариантах осуществления, дополнительное химиотерапевтическое средство представляет собой этопозид. Этопозид образует тройной комплекс с ДНК и ферментом топоизомераза II, который помогает расплетанию ДНК во время репликации. Это предотвращает повторное лигирование цепей ДНК и вызывает разрыв цепей ДНК. Злокачественные клетки больше зависят от этого фермента по сравнению со здоровыми клетками, поскольку они делятся более быстро. Следовательно, лечение с применением этопозида вызывает ошибки в синтезе ДНК и способствует апоптозу злокачественных клеток. Не желая ограничиваться какой-либо конкретной теорией, полагают, что ингибитор ДНК-ПК блокирует один из основных путей для репарации ДЦР в ДНК, таким образом замедляя процесс репарации и приводит к усилению противоопухолевая активность этопозида. Данные в условиях in-vitro демонстрируют синергизм Соединения 1 в комбинации с этопозидом по сравнению с этопозидом отдельно. Таким образом, в некоторых вариантах осуществления, обеспечиваемая комбинация Соединения 1, или его фармацевтически приемлемой соли, с этопозидом является синергической.

В определенных вариантах осуществления, дополнительное химиотерапевтическое средство представляет собой топотекан.

В определенных вариантах осуществления, терапевтическую комбинацию согласно изобретению дополнительно комбинируют с химиотерапией, которая, в особенности, представляет собой лечение с применением этопозида и антрациклина, либо в качестве единственного цитостатического средства или в качестве двухкомпонентной или трехкомпонентной схемы. С такой химиотерапией, ингибитор ДНК-ПК предпочтительно может вводиться один или два раза в сутки с анти-PD-L1 антителом, в особенности авелумабом, которое вводят каждые две недели. В тех случаях, при которых применяют антрациклины, лечение с применением антрациклина останавливают после применения максимальной пожизненной кумулятивной дозы (вследствие кардиотоксичности).

В определенных вариантах осуществления, дополнительное химиотерапевтическое средство представляет собой препарат платины. Препараты платины представляют собой химиотерапевтические средства на основании платины. Как используется в настоящей заявке. Термин "платина" используется взаимозаменяемо с термином "препарат на основе платины". Препараты на основе платины хорошо известны в данной области техники. В некоторых вариантах осуществления, платину (или препарат на основе платины) выбирают из цисплатина, карбоплатина, оксалиплатина, недаплатина и сатраплатина.

В определенных вариантах осуществления, платина представляет собой цисплатин. Цисплатин перекрестно сшивает клеточную ДНК, несколькими различными путями препятствуя делению клеток посредством митоза. Наиболее заметными з всех изменений ДНК являются внутрицепочечные поперечные сшивки с пуриновыми основаниями. Эти поперечные сшивки репарируются главным образом путем эксцизионной репарации нуклеотидов. Поврежденная ДНК активирует механизмы контрольных точек, что, в свою очередь, активирует апоптоз, если репарация оказалась невозможной. В определенных вариантах осуществления, обеспечиваемый способ дополнительно введение лучевой терапии пациенту.

В определенных вариантах осуществления, дополнительное химиотерапевтическое средство представляет собой карбоплатин.

В некоторых вариантах осуществления, дополнительное химиотерапевтическое средство представляет собой комбинацию обоих средств, этопозида и препарата платины. В определенных вариантах осуществления, настоящее изобретение обеспечивает способ лечения злокачественного новообразования, выбранного из злокачественного новообразования легких, головы и шеи, ободочной кишки, нейроэндокринной системы, мезенхимы, молочной железы, яичников, поджелудочной железы, и их гистологических подтипов (например, адено, плосколеточный, крупноклеточный) у пациента, который в этом нуждается, включающий введение указанному пациенту анти-PD-L1 антитела и ингибитора ДНК-ПК, предпочтительно Соединения 1 или его фармацевтически приемлемой соли, в комбинации с по меньшей мере одним дополнительным терапевтическим средством, выбранным из этопозида и препарата платины. В определенных вариантах осуществления, обеспечиваемый способ дополнительно включает проведение лучевой терапии пациенту.

В некоторых вариантах осуществления, дополнительное химиотерапевтическое средство представляет собой комбинацию обоих средств, этопозида и цисплатина. В определенных вариантах осуществления, настоящее изобретение обеспечивает способ лечения злокачественного новообразования, выбранного из злокачественного новообразования легких, головы и шеи, ободочной кишки, нейроэндокринной системы, мезенхимы, молочной железы, поджелудочной железы, и их гистологических подтипов (например, адено, плосколеточный, крупноклеточный) у пациента, который в этом нуждается, включающий введение указанному пациенту анти-PD-L1 антитела и ингибитора ДНК-ПК, предпочтительно Соединения 1 или его фармацевтически приемлемой соли, в комбинации с по меньшей мере одним дополнительным терапевтическим средством, выбранным из этопозида и цисплатина. В определенных вариантах осуществления, обеспечиваемый способ дополнительно включает проведение лучевой терапии пациенту.

В некоторых вариантах осуществления, дополнительное химиотерапевтическое средство представляет собой комбинацию обоих средств, этопозида и карбоплатина.

Ингибитор ДНК-ПК, предпочтительно Соединение 1, или его фармацевтически приемлемую соль, и их композиции в комбинации с анти-PD-L1 антителом и дополнительным химиотерапевтическим средством в соответствии со способами согласно настоящему изобретению, вводят, используя любое количество и любой путь введения, эффективный для лечения или снижения тяжести нарушения, раскрытого выше. Точное необходимое количество будет изменяться для разных субъектов, в зависимости от вида, возраста и общего состояния субъекта, тяжести инфекции, конкретного средства, его способа введения и др.

В некоторых вариантах осуществления, настоящее изобретение обеспечивает способ лечения злокачественного новообразования, выбранного из злокачественного новообразования легких, головы и шеи, ободочной кишки, нейроэндокринной системы, мезенхимы, молочной железы, яичников, поджелудочной железы, и их гистологических подтипов (например, адено, плосколеточный, крупноклеточный) у пациента, который в этом нуждается, включающий введение указанному пациенту ингибитора ДНК-ПК, предпочтительно Соединения 1, или его фармацевтически приемлемой соли, в количестве от приблизительно 1 до приблизительно 800 мг, предпочтительно в количестве приблизительно 10 до приблизительно 800 мг, более предпочтительно в количестве приблизительно 100 до приблизительно 400 мг, в каждом случае в комбинации с анти-PD-L1 антителом и по меньшей мере одним дополнительным терапевтическим средством, выбранным из препарата платины и этопозида, в количествах в соответствии с местными директивами клинического стандартного лечения.

В некоторых вариантах осуществления, обеспечиваемые способы включают введение фармацевтически приемлемой композиции, содержащей химиотерапевтическое средство, один, два, три или четыре раза в сутки. В некоторых вариантах осуществления, фармацевтически приемлемую композицию, содержащую химиотерапевтическое средство, вводят один раз в сутки ("QD"). В некоторых вариантах осуществления, фармацевтически приемлемую композицию, содержащую химиотерапевтическое средство, вводят два раза в сутки. В некоторых вариантах осуществления, два раза в сутки введение относится к соединению или композиции, которое (ую) вводят "BID", или две эквивалентные дозы, вводимые в два различных момента времени в один день. В некоторых вариантах осуществления, фармацевтически приемлемую композицию, содержащую химиотерапевтическое средство, вводят три раза в сутки. В некоторых вариантах осуществления, фармацевтически приемлемую композицию, содержащую химиотерапевтическое средство, вводят "TID", или три эквивалентные дозы, вводят в три различных момента времени в один день. В некоторых вариантах осуществления, фармацевтически приемлемую композицию, содержащую химиотерапевтическое средство, вводят четыре раза в сутки. В некоторых вариантах осуществления, фармацевтически приемлемую композицию, содержащую химиотерапевтическое средство, вводят "QID", или четыре эквивалентные дозы, вводимые в четыре различных момента времени в один день. В некоторых вариантах осуществления, фармацевтически приемлемую композицию, содержащую химиотерапевтическое средство, вводят на протяжении разного количества дней (например, 14, 21, 28) з разным количеством дней между лечениями (0, 14, 21, 28). В некоторых вариантах осуществления, химиотерапевтическое средство вводят пациенту натощак и общая суточная доза представляет собой любую из доз, описанных выше и в настоящей заявке. В некоторых вариантах осуществления, химиотерапевтическое средство вводят пациенту после еды и общая суточная доза представляет собой любую из доз, описанных выше и в настоящей заявке. В некоторых вариантах осуществления, химиотерапевтическое средство вводят перорально по соображениям удобства. В некоторых вариантах осуществления, при введении перорально, химиотерапевтическое средство вводят с пищей и водой. В другом варианте осуществления, химиотерапевтическое средство растворено в воде или соке (например, яблочном соке или апельсиновом соке) и его вводят перорально в виде суспензии. В некоторых вариантах осуществления, при введении перорально, химиотерапевтическое средство вводят натощак. Химиотерапевтическое средство также может вводиться внутрикожно, внутримышечно, внутрибрюшинно, чрескожно, внутривенно, подкожно, интраназально, эпидурально, сублингвально, интрацеребрально, интравагинально, трансдермально, ректально, мукозально, путем ингаляции или местно в уши, нос, глаза или кожу. Способ введения находится на усмотрении лечащего врача и может частично зависеть от сайта медицинского состояния.

В некоторых вариантах осуществления, этопозид вводят путем внутривенной инфузии. В некоторых вариантах осуществления, этопозид вводят внутривенно в количестве приблизительно 50 до приблизительно 100 мг/м². Чаще всего, этопозид вводят в дозе 100 мг/м². В некоторых вариантах осуществления, этопозид вводят путем внутривенной инфузии приблизительно в течение 1 часа. В определенных вариантах осуществления, этопозид вводят путем внутривенной инфузии приблизительно в дозе 100 мг/м² в течение 60-минутного периода. В некоторых вариантах осуществления, этопозид вводят в день 1-3 один раз в три недели (D1-3 Q3W), в количестве приблизительно 100 мг/м². В определенных вариантах осуществления, этопозид вводят путем внутривенной инфузии в День 1 и затем путем внутривенной инфузии или перорального введения в дни 2 и 3.

В определенных вариантах осуществления, топотекан вводят в день 1-5 один раз в три недели (D1-5 Q3W).

В определенных вариантах осуществления, цисплатин вводят путем внутривенной инфузии. В некоторых вариантах осуществления, цисплатин вводят путем внутривенной инфузии приблизительно в течение 1 часа. В определенных вариантах осуществления, цисплатин вводят внутривенно в количестве приблизительно 50 до приблизительно 75 мг/м². Чаще всего, цисплатин вводят в дозе 75 мг/м². В определенных вариантах осуществления, цисплатин вводят путем внутривенной инфузии приблизительно в дозе 75 мг/м² в течение 60-минутного периода. В некоторых вариантах осуществления, цисплатин вводят один раз в три недели (Q3W), в количестве приблизительно 75 мг/м².

В определенных вариантах осуществления, настоящее изобретение обеспечивает способ лечения злокачественного новообразования у пациента, который в этом нуждается, включающий введение указанному пациенту ингибитора ДНК-ПК, предпочтительно Соединения 1, или его фармацевтически приемлемой соли, в комбинации с цисплатин и этопозид. Чаще всего, цисплатин вводят в дозе 75 мг/м² и этопозид в дозе 100 мг/м².

В некоторых вариантах осуществления, этопозид и цисплатин вводят один за другим в любом порядке или по существу одновременно. Дополнительные химиотерапевтические средства вводят пациенту в любом порядке (то есть, одновременно или один за другим) в раздельных композициях, препаратах или единичных дозированных формах, или совместно в одной композиции, препарате или единичной дозированной форме. В определенных вариантах осуществления, этопозид вводят одновременно в одной и той же композиции, включающей этопозид и цисплатин. В определенных вариантах осуществления, этопозид и цисплатин вводят одновременно в раздельных композициях, то есть, где этопозид и цисплатин вводят одновременно каждый в раздельной единичной дозированной форме. Следует принять во внимание, что этопозид и цисплатин вводят в тот же самый день или в различные дни и в любом порядке в соответствии с подходящим протоколом дозирования.

В определенных вариантах осуществления, настоящее изобретение обеспечивает способ лечения злокачественного новообразования, предпочтительно выбранного из злокачественного новообразования легких, головы и шеи, ободочной кишки, нейроэндокринной системы, мезенхимы, молочной железы, яичников, поджелудочной железы, и их гистологических подтипов (например, адено, плосколеточный, крупноклеточный), у пациента, который в этом нуждается, включающий введение указанному пациенту ингибитора ДНК-ПК, предпочтительно Соединения 1, или его фармацевтически приемлемой соли, в комбинации с анти-PD-L1 антителом и по меньшей мере одним дополнительным терапевтическим средством, предпочтительно, выбранным из этопозида и цисплатина, где (I) ингибитор ДНК-ПК, предпочтительно Соединение 1, или его фармацевтически приемлемая соль, и дополнительное терапевтическое средство обеспечиваются в той же самой композиции, необязательно совместно с анти-PD-L1 антителом, (II) ингибитор ДНК-ПК, предпочтительно Соединение 1, или его фармацевтически приемлемая соль, и анти-PD-L1 антитело обеспечиваются в той же самой композиции, необязательно совместно с дополнительным терапевтическим средством, или (III) анти-PD-L1 антитело и дополнительное терапевтическое средство обеспечиваются в той же самой композиции, необязательно совместно с ингибитором ДНК-ПК, предпочтительно Соединение 1, или его фармацевтически приемлемой солью. В определенных вариантах осуществления, обеспечиваемый способ дополнительно включает проведение лучевой терапии пациенту.

В определенных вариантах осуществления, настоящее изобретение обеспечивает способ лечения злокачественного новообразования, предпочтительно выбранного из злокачественного новообразования легких, головы и шеи, ободочной кишки, нейроэндокринной системы, мезенхимы, молочной железы, поджелудочной железы, и их гистологических подтипов (например, адено, плосколеточный, крупноклеточный), у пациента, который в этом нуждается, включающий введение указанному пациенту ингибитора ДНК-ПК, предпочтительно Соединения 1, или его фармацевтически приемлемой соли, в комбинации с анти-PD-L1 антителом и по меньшей мере одним дополнительным терапевтическим средством, предпочтительно, выбранным из этопозида и цисплатина, где ингибитор ДНК-ПК, предпочтительно Соединение 1, или его фармацевтически приемлемая соль, анти-PD-L1 антитело и дополнительное терапевтическое средство обеспечиваются в раздельных композициях для одновременного введения или введения один за другим указанному пациенту. В определенных вариантах осуществления, обеспечиваемый способ дополнительно включает проведение лучевой терапии пациенту.

В некоторых вариантах осуществления, настоящее изобретение обеспечивает способ лечения злокачественного новообразования у пациента, который в этом нуждается, включающий введение указанному пациенту ингибитора ДНК-ПК, предпочтительно Соединения 1, или его фармацевтически приемлемой соли, с последующим введением цисплатина и затем введение этопозида. В определенных вариантах осуществления, ингибитор ДНК-ПК, предпочтительно Соединение 1, вводят приблизительно 1-2, предпочтительно приблизительно за 1,5 часа до введения цисплатина. В некоторых вариантах осуществления, ингибитор ДНК-ПК, предпочтительно Соединение 1, вводят указанному пациенту QD. В определенных вариантах осуществления, ингибитор ДНК-ПК, предпочтительно Соединение 1, вводят в течение 5 дней. В некоторых вариантах осуществления, ингибитор ДНК-ПК, предпочтительно Соединение 1, вводят от приблизительно 4 дней до приблизительно 3 недель, в течение приблизительно 5 дней, в течение приблизительно 1 недели, или в течение приблизительно 2 недель.

В определенных вариантах осуществления, анти-PD-L1 антитело и ингибитор ДНК-ПК, предпочтительно Соединение 1, или его фармацевтически приемлемую соль, вводят в комбинации с лучевой терапией. В определенных вариантах осуществления, обеспечиваемые способы включают введение анти-PD-L1 антитела и ингибитора ДНК-ПК, предпочтительно Соединение 1, или его фармацевтически приемлемую соль, в комбинации с одним или обоими средствами, этопозидом и цисплатином, где указанный способ дополнительно включает проведение лучевой терапии пациенту. В определенных вариантах осуществления, лучевая терапия включает приблизительно 35-70 Гр / 20-35 фракций. В некоторых вариантах осуществления, лучевую терапию осуществляют либо путем стандартного фракционирования (от 1,8 до 2 Гр в течение 5 дней недели) вплоть до суммарной дозы 50-70 Гр один раз в сутки. Другие фракционированные схемы также могут применяться, например, более низкая доза на фракцию, но осуществляемая два раза в сутки с ингибитором ДНК-ПК, вводимым также два раза в сутки. Также могут проводиться более высокие ежедневные дозы в течение более короткого периода времени. В одном варианте осуществления, применяют стереотаксическую лучевую терапию, а также гамма-нож. При паллиативных установках, широко используются другие фракционированные схемы также, например, 25 Гр за 5 фракций или 30 Гр за 10 фракций. Во всех случаях, авелумаб предпочтительно вводят каждые две недели. Для лучевой терапии, продолжительность лечения будет представлять собой временной интервал, когда осуществляют лучевую терапию. Эти вмешательства применяют для лечения, осуществляемого с электронами, фотонами и протонами, испускателями альфа-частиц или другими ионами, лечения с применением радио-нуклеотидов, например, лечения с применением ¹³¹I, вводимого пациентам с раком щитовидной железы, а также пациентов, леченных с применением бор-нейтронно-захватной терапий.

В некоторых вариантах осуществления, схема комбинированной терапии включает стадии: (а) под руководством или контролем лечащего врача, субъект получает PD-L1 антитело до первого получения ингибитора ДНК-ПК; и (б) под руководством или контролем лечащего врача, субъект получает ингибитор ДНК-ПК. В некоторых вариантах осуществления, схема комбинированной терапии включает стадии: (а) под руководством или контролем лечащего врача, субъект получает ингибитор ДНК-ПК до первого получения PD-L1 антитела; и (б) под руководством или контролем лечащего врача, субъект получает PD-L1 антитело. В некоторых вариантах осуществления, схема комбинированной терапии включает стадии: (а) предписание субъекту для самостоятельного введения, и подтверждение, что субъект самостоятельно ввел, PD-L1 антитело до первого введения ингибитора ДНК-ПК; и (б) введение ингибитора ДНК-ПК субъекту. В некоторых вариантах осуществления, схема комбинированной терапии включает стадии: (а) предписание субъекту для самостоятельного введения, и подтверждение, что субъект самостоятельно ввел, ингибитор ДНК-ПК до первого введения PD-L1 антитела; и (б) введение PD-L1 антитела субъекту. В некоторых вариантах осуществления, схема комбинированной терапии включает, после того, как субъект получил PD-L1 антитело перед первым введением ингибитора ДНК-ПК, введение ингибитора ДНК-ПК субъекту. В некоторых вариантах осуществления, схема комбинированной терапии включает, после того, как субъект получил ингибитор ДНК-ПК до первого введения анти-PD-L1 антитела, введение анти-PD-L1 антитела субъекту.

В дальнейшем аспекте, схема комбинированной терапии включает основную фазу, необязательно с последующей поддерживающей фазой после завершения основной фазы. Как используется в настоящей заявке, комбинированное лечение включает определенный период лечения (то есть, первую фазу или основную фаза). После завершения такого периода или фазы, может наступать определенный период лечения (то есть, вторая фаза или поддерживающая фаза). Другими словами, после завершения химиотерапевтического лечения у пациентов, которые имеют стабильное заболевание или улучшения, может быть благоприятной стратегия поддержания и лечение пациентов осуществляют до прогрессирования заболевания. В определенных вариантах осуществления, поддержание предпочтительно может включать монотерапию анти-PD-L1 антителом, более предпочтительно монотерапию авелумабом, или комбинацию с ингибитором ДНК-ПК.

Схемы лечения отличаются в основной фазе и поддерживающей фазе. В некоторых вариантах осуществления, анти-PD-L1 антитело и ингибитор ДНК-ПК вводят конкурентно либо в основной или в поддерживающей фазе и необязательно неконкурентно в другой фазе, или анти-PD-L1 антитело и ингибитор ДНК-ПК вводят неконкурентно в основной и поддерживающей фазе. В некоторых вариантах осуществления, анти-PD-L1 антитело и ингибитор ДНК-ПК вводят конкурентно (во время одной и той же фазы) либо в основной или в поддерживающей фазе. В особенности, если анти-PD-L1 антитело и ингибитор ДНК-ПК вводят конкурентно в основной фазе, то их не вводят конкурентно в поддерживающей фазе снова, и наоборот. В некоторых вариантах осуществления, либо анти-PD-L1 антитело или ингибитор ДНК-ПК может дополнительно вводиться в другой фазе, необязательно совместно с химиотерапией, лучевой терапией или химиолучевой терапией. В некоторых вариантах осуществления, анти-PD-L1 антитело и ингибитор ДНК-ПК вводят неконкурентно в основной и поддерживающей фазе, то есть, один из них вводят в основной фазе, а другой вводят в поддерживающей фазе.

В некоторых вариантах осуществления, конкурентное введение включает введение анти-PD-L1 антитела и ингибитора ДНК-ПК один за другим в любом порядке или по существу одновременно. Как используется в настоящей заявке, конкурентное введение включает введение анти-PD-L1 антитела и ингибитора ДНК-ПК один за другим в любом порядке или по существу одновременно, в каждом случае во время одной и той же самой фазы лечения. Анти-PD-L1 антитело и ингибитор ДНК-ПК вводят пациенту в любом порядке (то есть одновременно или один за другим) в раздельных композициях, препаратах или единичных дозированных формах, или совместно в одной композиции, препарате или единичной дозированной форме. В определенных вариантах осуществления, анти-PD-L1 антитело вводят одновременно в одной и той же композиции, включающей анти-PD-L1 антитело и ингибитор ДНК-ПК. В определенных вариантах осуществления, анти-PD-L1 антитело и ингибитор ДНК-ПК вводят одновременно в раздельных композициях, то есть, где анти-PD-L1 антитело и ингибитор ДНК-ПК вводят одновременно каждый в раздельной единичной дозированной форме. Следует принять во внимание, что анти-PD-L1 антитело и ингибитор ДНК-ПК вводят в тот же самый день или в различные дни и в любом порядке в соответствии с подходящим протоколом дозирования. В отличие от этого, неконкурентное введение включает введение анти-PD-L1 антитела и ингибитора ДНК-ПК один за другим в двух различных фазах лечения, то есть, только один из них вводят в основной фазе, а другой вводят в поддерживающей фазе.

Анти-PD-L1 антитело, предпочтительно авелумаб, может вводиться конкурентно с ингибитором ДНК-ПК (либо отдельно или в комбинации с химиотерапией или лучевой терапией или обеими терапиями) или один за другим, то есть, после того, как лечение с применением ингибитора ДНК-ПК (с или без химиотерапии или лучевая терапия) остановлено (в качестве поддерживающей терапии).

В некоторых вариантах осуществления, ингибитор ДНК-ПК вводят отдельно в основной фазе. В некоторых вариантах осуществления, ингибитор ДНК-ПК вводят конкурентно с одной или несколькими терапиями в основной фазе, где такие терапии выбирают из группы, включающей анти-PD-L1 антитело, химиотерапию и лучевую терапию. Основная фаза в особенности включает конкурентное введение ингибитора ДНК-ПК и PD-L1 антитело.

В некоторых вариантах осуществления, анти-PD-L1 антитело вводят отдельно в поддерживающей фазе. В некоторых вариантах осуществления, анти-PD-L1 антитело вводят конкурентно с ингибитором ДНК-ПК в поддерживающей фазе. В некоторых вариантах осуществления, ни один из них не вводят в поддерживающей фазе. В некоторых вариантах осуществления, отсутствует поддерживающая фаза.

В некоторых вариантах осуществления, основная фаза включает введение ингибитора ДНК-ПК и, после завершения основной фазы, поддерживающая фаза включает введение анти-PD-L1 антитела. Оба компонента, ингибитор ДНК-ПК и анти-PD-L1 антитело могут вводиться отдельно, конкурентно или неконкурентно с одним или несколькими химиотерапевтическими средствами, лучевой терапией или химиолучевой терапией. Химиотерапию и/или лучевую терапию предпочтительно осуществляют в основной фазе.

В некоторых предпочтительных вариантах осуществления, настоящее изобретение обеспечивает способ лечения SCLC ED у субъекта во время основной и поддерживающей фазы, где основная фаза включает конкурентное введение ингибитора ДНК-ПК и этопозида, необязательно совместно с цисплатином, и поддерживающая фаза включает введение анти-PD-L1 антитела, необязательно совместно с ингибитором ДНК-ПК, после завершения основной фазы. В настоящей заявке, основная фаза, в особенности, включает трехкомпонентную комбинацию ингибитора ДНК-ПК, этопозида и цисплатина для лечения SCLC ED (см., например, Фигуру 5(1)).

В некоторых предпочтительных вариантах осуществления, настоящее изобретение обеспечивает способ лечения субъектов с метастатическим NSCLC, у которых наблюдается прогрессирования после индукционной терапии после лечения второй линии и консолидации лечения. В то время как основная фаза включает введение ингибитора ДНК-ПК в комбинации с анти-PD-L1 антителом и лучевая терапия, поддерживающая фаза включает введение анти-PD-L1 антитела, необязательно совместно с ингибитором ДНК-ПК. В настоящей заявке, основная фаза, в особенности, включает трехкомпонентную комбинацию ингибитора ДНК-ПК, авелумаба и лучевой терапии.

В некоторых других предпочтительных вариантах осуществления, настоящее изобретение обеспечивает способ лечения SCLC ED у субъекта во время основной фазы, где основная фаза включает конкурентное введение анти-PD-L1 антитела, ингибитора ДНК-ПК и этопозида, необязательно совместно с цисплатином, и необязательно дополнительно включает поддерживающую фазу после завершения основной фазы, где поддерживающая фаза включает введение анти-PD-L1 антитела (см., например, Фигуру 5(2), 5(3) или 6). В настоящей заявке, основная фаза, в особенности, включает четырехкомпонентную комбинацию анти-PD-L1 антитела, ингибитора ДНК-ПК, этопозида и цисплатина для лечения SCLC ED. После завершения основной фазы, лечение SCLC ED может быть продолжено в поддерживающей фазе, включающей введение анти-PD-L1 антитела (см., например, Фигуру 7). Продолжительность лечения с применением химиотерапии в некоторых случаях ограничивают на 6 циклах (например, при лечении SCLC) или до прогрессирования злокачественного заболевания. В некоторых вариантах осуществления, этопозид, необязательно совместно с цисплатином, вводят вплоть до 6 циклов или до прогрессирования SCLC ED. Не желая ограничиваться какой-либо теорией, после химиотерапия, оставшиеся опухолевые клетки будут продолжать продуцировать спонтанные ДЦР во время репликации, что будет делать их мишенью для ингибитора ДНК-ПК. Большинство пациентов, получающих химиотерапию для лечения SCLC, будут достигать в наилучшем случае частичного ответа и, следовательно, преимущество от поддерживающей терапии, которая комбинирует ингибитор ДНК-ПК для ингибирования репарации ДЦР, происходящей после химиотерапии, с ингибитором контрольных точек иммунного ответа, то есть, анти-PD-L1 антителом, для дальнейшего уменьшения опухолевой нагрузки и/или рецидива заболевания.

В одном варианте осуществления, SCLC лечат во второй линии или далее. В особенности, он включает пациентов с трудно поддающимся лечению SCLC (то есть, пациентов, у которых заболевание рецидивирует в течение 3 месяцев, имеют ~5,7 месяцев, PFS 2,6 месяцев и RR ~10%) и пациентов с рецидивирующим SCLC (то есть, пациентов, у которых заболевание рецидивирует через 3 месяца, имеют OS 7,8 месяца и RR ~23%). Для пациентов с трудно поддающимся лечению SCLC, не существует SoC, хотя широко используется Топотекан (см., например, Фигуру 8).

В некоторых других предпочтительных вариантах осуществления, настоящее изобретение обеспечивает способ лечения mCRC MSI-L во время основной фазы, который включает конкурентное введение анти-PD-L1 антитела, ингибитора ДНК-ПК, иринотекана и фторурацила. В одном варианте осуществления, MSI низкий mCRC лечат во второй линии или выше. Рак ободочной и прямой кишки (CRC) может быть подразделен на несколько молекулярных подгрупп на основании, например, KRAS и NRAS мутационного статуса, который имеет влияние на лечений (например, EGFR нацеливание отн. VEGF нацеливания). Другая характеристика основана на микросателлитном статусе, либо стабильном (MSS) или нестабильном, либо низком (MSI-L) или высоком (MSI-H). MSI-H наблюдается только у ~15% всех пациентов с CRC, но MSI-L/MSS у 85%. Более ранние исследования показали, что PD-x при монотерапии не оказывали влияния на пациентов с MSS/MSI-L CRC (0% ORR) (Le и др. (2015), N Engl J Med 372: 2509) (см., например, Фигуру 9 или 10(1)).

В некоторых других предпочтительных вариантах осуществления, настоящее изобретение обеспечивает способ лечения NSCLC или SCCHN во время основной и поддерживающей фазы, где основная фаза включает конкурентное введение ингибитора ДНК-ПК и лучевую терапию или химиолучевую терапию и, после завершения основной фазы, поддерживающая фаза включает введение анти-PD-L1 антитела. В настоящей заявке, основная фаза в особенности включает конкурентное введение анти-PD-L1 антитела, ингибитора ДНК-ПК и лучевую терапию для лечения NSCLC или SCCHN. В одном варианте осуществления, химиолучевая терапия сопровождается авелумабом при терапии первой линии NSCLC. В одном варианте осуществления, лучевую терапию вводят конкурентно с авелумабом в терапии первой линии NSCLC. В одном предпочтительном варианте осуществления, химиолучевая терапия сопровождается авелумабом в терапии первой линии SCCHN. В одном предпочтительном варианте осуществления, лучевую терапию вводят конкурентно с авелумабом в терапии первой линии SCCHN. В одном предпочтительном варианте осуществления, лучевую терапию вводят конкурентно с авелумабом в лечении второй линии рекуррентного SCCHN, пригодного для повторного облучения (40-50 Гр). Пациенты с рекуррентным/метастатическим SCCHN имеют OS ~ 5-7 месяцев, PFS 4-5 месяцев и RR ~ 30%. Для пациентов с рекуррентным/метастатическим SCCHN, не существует SoC, хотя применяют метотрексат, препараты на основе платины с или без фторурацила, а также таксаны (см., например, Фигуру 10(2)).

Также в настоящей заявке обеспечивается анти-PD-L1 антитело для применения в качестве лекарственного средства в комбинации с ингибитором ДНК-ПК. Аналогичным образом, обеспечивается ингибитор ДНК-ПК для применения в качестве лекарственного средства в комбинации с анти-PD-L1 антитело. Также обеспечивается анти-PD-L1 антитело для применения для лечения злокачественного новообразования в комбинации с ингибитором ДНК-ПК. Аналогичным образом, обеспечивается ингибитор ДНК-ПК для применения для лечения злокачественного новообразования в комбинации с анти-PD-L1 антитело.

Также обеспечивается комбинация, включающая анти-PD-L1 антитело и ингибитор ДНК-ПК. Также обеспечивается комбинация, включающая анти-PD-L1 антитело и ингибитор ДНК-ПК для применения в качестве лекарственного средства. Также обеспечивается комбинация, включающая анти-PD-L1 антитело и ингибитор ДНК-ПК для применения для лечения злокачественного новообразования.

Если специально не указано иначе, подразумевается, что, в различных вариантах осуществления, описанных выше, анти-PD-L1 антитело содержит тяжелую цепь, которая содержит три гипервариабельных участка, имеющих аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и легкую цепь, которая содержит три гипервариабельных участка, имеющих аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 4, 5 и 6.

Также обеспечивается применение комбинации для приготовления лекарственного средства для лечения злокачественного новообразования, включающей анти-PD-L1 антитело и ингибитор ДНК-ПК, где анти-PD-L1 антитело содержит тяжелую цепь, которая содержит три гипервариабельных участка, имеющих аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и легкую цепь, которая содержит три гипервариабельных участка, имеющих аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 4, 5 и 6.

Предшествующее раскрытие настоящего описания, охватывающее терапевтическую комбинацию, включая способы ее применения, и все их аспекты и варианты осуществления, настоящего раздела, озаглавленного "Терапевтическая комбинация и способ ее применения", являются действующими и применимыми без ограничений к лекарственному средству, анти-PD-L1 антителу и/или ингибитору ДНК-ПК для применения для лечения злокачественного новообразования, а также комбинаций, и их аспектов и вариантов осуществления, настоящего раздела, если это является подходящим.

Фармацевтические препараты и наборы

В некоторых вариантах осуществления, настоящее изобретение обеспечивает фармацевтически приемлемую композицию, содержащую анти-PD-L1 антитело. В некоторых вариантах осуществления, настоящее изобретение обеспечивает фармацевтически приемлемую композицию, содержащую ингибитор ДНК-ПК, предпочтительно Соединение 1, или его фармацевтически приемлемую соль. В некоторых вариантах осуществления, настоящее изобретение обеспечивает фармацевтически приемлемую композицию химиотерапевтического средства. В некоторых вариантах осуществления, настоящее изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию, содержащую анти-PD-L1 антитело, ингибитор ДНК-ПК и по меньшей мере фармацевтически приемлемый наполнитель или адъювант. В различных вариантах осуществления, описанных выше и ниже, анти-PD-L1 антитело содержит тяжелую цепь, которая содержит три гипервариабельных участка, имеющих аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и легкую цепь, которая содержит три гипервариабельных участка, имеющих аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 4, 5 и 6. В некоторых вариантах осуществления, композиция, включающая ингибитор ДНК-ПК, предпочтительно Соединение 1, или его фармацевтически приемлемую соль, разделена от композиции, включающей анти-PD-L1 антитело и/или химиотерапевтическое средство. В некоторых вариантах осуществления, ингибитор ДНК-ПК, предпочтительно Соединение 1, или его фармацевтически приемлемая соль, и анти-PD-L1 антитело и/или химиотерапевтическое средство присутствуют в той же самой композиции.

В определенных вариантах осуществления, настоящее изобретение обеспечивает композицию, включающую ингибитор ДНК-ПК, предпочтительно Соединение 1, или его фармацевтически приемлемую соль, и по меньшей мере один из этопозида и цисплатина, необязательно совместно с анти-PD-L1 антителом. В некоторых вариантах осуществления, обеспечиваемая композиция, содержащая ингибитор ДНК-ПК, предпочтительно Соединение 1, или его фармацевтически приемлемую соль, и по меньшей мере один из этопозида и цисплатина, приготовлена для перорального введения.

Примеры таких фармацевтически приемлемых композиций описаны в дальнейшем ниже и в настоящей заявке.

Жидкие дозированные формы для перорального введения включают, но не ограничиваясь только ими, фармацевтически приемлемый эмульсии, микроэмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры. Дополнительно к Соединению 1, или его фармацевтически приемлемой соли, и/или химиотерапевтическому средству, жидкие дозированные формы могут содержать инертные разбавители, обычно используемые в данной области техники, такие как, например, вода или другие растворители, солюбилизирующие агенты и эмульсификаторы, такие как этиловый спирт, изопропиловый спирт, этилкарбонат, этилацетат, бензиловый спирт, бензилбензоат, пропиленгликоль, 1,3-бутиленгликоль, диметилформамид, масла (в особенности, хлопковое, арахисовое, кукурузное, зародышевое, оливковое, касторовое и кунжутное масла), глицерин, тетрагидрофурфуриловый спирт, полиэтиленгликоли и сложные эфиры сорбита и жирных кислот и их смеси. Кроме инертных разбавителей, пероральные композиции также включают адъюванты, такие как смачивающие агенты, эмульгирующие и суспендирующие агенты, подсластители, отдушки и ароматизаторы.

Инъекционные препараты, например, стерильные инъекционные водные или масляные суспензии могут быть приготовлены в соответствии с известными в данной области сведениями, используя подходящие диспергирующие или смачивающие вещества и суспендирующие агенты. Стерильный инъекционный препарат также может представлять собой стерильный инъекционный раствор, суспензию или эмульсию в нетоксичном парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, например, в виде раствора в 1,3-бутандиоле. В качестве приемлемых наполнителей и растворителей, которые могут применяться, можно упомянуть воду, раствор Рингера, Фармакопея США и изотоничный раствор хлорида натрия. Дополнительно, общепринято применяются стерильные, нелетучие масла в качестве растворителя или суспендирующей среды. Для этой цели, может применяться любой мягкое нелетучее масло, включая синтетические моно- или диглицериды. Дополнительно, в препаратах для инъекций используют жирные кислоты, такие как олеиновая кислота.

Инъекционные препараты можно стерилизовать, например, путем фильтрации через фильтр, задерживающий бактерии, или путем инкорпорации стерилизующих агентов в форме стерильных твердых композиций, которые можно растворять или дисперировать в стерильной воде или другой стерильной инъецируемой средой перед использованием.

Для пролонгирования эффекта анти-PD-L1 антитела, ингибитора ДНК-ПК, предпочтительно Соединения 1 и/или дополнительного химиотерапевтического средства, часто является желательным замедлить абсорбцию из подкожной или внутримышечной инъекции. Это можно осуществлять путем применения жидкой суспензии кристаллического или аморфного материала с плохой растворимостью в воде. Таким образом, скорость абсорбции будет зависеть от его скорости растворения, что, в свою очередь, может зависеть от размера кристаллов и кристаллической формы. Альтернативно, замедленная абсорбция парентерально вводимого анти-PD-L1 антитела, ингибитора ДНК-ПК, предпочтительно Соединения 1 или его фармацевтически приемлемой соли и/или химиотерапевтического средства, осуществляется путем растворения или суспендирования соединения в масляном наполнителе. Депо-формы для инъекций получают путем образования микроинкапсулированных матриц анти-PD-L1 антитела, ингибитора ДНК-ПК, предпочтительно Соединения 1 или его фармацевтически приемлемой соли и/или химиотерапевтического средства, в биоразлагаемых полимерах, таких как полилактид-полигликолид. В зависимости от соотношения между Соединением и полимером и природой конкретного применяемого полимера, можно контролировать скорость высвобождения Соединения. Примеры других биоразлагаемых полимеров включают поли(ортоэфиры) и поли(ангидриды). Депо инъекционные препараты также приготавливают путем включения Соединения в липосомы или микроэмульсии, которые совместимы с тканями организма.

Композиции для ректального или вагинального введения предпочтительно представляют собой суппозитории, которые могут быть приготовлены путем смешивания соединений согласно настоящему изобретению с подходящими нераздражающими наполнителями или носителями, такими как масло какао, полиэтиленгликоль или воском для суппозитория, которые являются твердыми при температуре окружающей среды, но жидкими при температуре организма, и, следовательно, расплавляются в прямой кишке или полости влагалища и высвобождают активное соединение.

Твердые дозированные формы для перорального введения включают капсулы, таблетки, пилюли, порошки и гранулы. В таких твердых дозированных формах, активное соединение смешивают по меньшей мере с одним инертным, фармацевтически приемлемым наполнителем или носителем, таким как цитрат натрия или дикальцийфосфат и/или а) заполнителями или добавками, такими как крахмалы, лактоза, сахароза, глюкоза, маннит и кремниевая кислота, б) связующими, такими как, например, карбоксиметилцеллюлоза, альгинаты, желатин, поливинилпирролидон, сахароза и гуммиарабик, в) увлажнителями, такими как глицерин, г) дезинтегрирующими средствами, такими как агар-агар, карбонат кальция, картофельный или тапиоковый крахмал, альгиновая кислота, определенные силикаты и карбонат натрия, д) средствами, замедляющими растворения, такими как парафин, э) ускорителями абсорбции, такими как четвертичные аммониевые соединения, е) смачивающими веществами, такими как, например, цетиловый спирт и глицеринмоностеарат, ж) абсорбентами, такими как каолин и бентонитовая глина, и з) смазывающими веществаами, такими как тальк, стеарат кальция, стеарат магния, твердые полиэтиленгликоли, натрийлуарилсульфат и их смеси. В случае капсул, таблеток и пилюль, дозированная форма также может включать буферные агенты.

Также могут применяться твердые композиции сходного типа в качестве заполнителей в мягких и твердых заполненных желатиновых капсулах, используя наполнители, такие как лактоза или молочный сахар, а также высокомолекулярные полиэтиленгликоли и другие. Твердые дозированные формы в виде таблеток, драже, капсул, пилюль и гранул могут быть приготовлены с покрытиями и оболочками, такими как кишечнорастворимые покрытия и другие покрытия, хорошо известные в области приготовления фармацевтических препаратов. Они необязательно могут содержать средства, придающие непрозрачность, и также могут представлять собой композицию, таким образом, что они высвобождают активный (ые) компонент (ы) только или предпочтительно, в определенной части кишечника, необязательно, замедленным образом. Примерами композиций для включения, которые могут использоваться, являются полимерные вещества и воски.

Анти-PD-L1 антитело, ингибитор ДНК-ПК, предпочтительно Соединение 1, или его фармацевтически приемлемая соль и/или химиотерапевтическое средство, также может быть представлено в микроинкапсулированной форме с одним или несколькими наполнителями, как указано выше. Твердые дозированные формы в виде таблеток, драже, капсул, пилюль и гранул могут быть приготовлены с покрытиями и оболочками, такими как кишечнорастворимые покрытия, покрытия с контролируемым высвобождением и другими покрытиями, хорошо известными в области приготовления фармацевтических препаратов. В таких твердых дозированных формах, анти-PD-L1 антитело, ингибитор ДНК-ПК, предпочтительно Соединение 1 или его фармацевтически приемлемая соль и/или химиотерапевтическое средство, могут быть смешаны по меньшей мере с одним инертным разбавителем, таким как сахароза, лактоза или крахмал. Такие дозированные формы также могут включать, в качестве общепринятой практики, дополнительные вещества, отличающиеся от инертных разбавителей, например, таблетирующие смазывающие вещества и другие таблетирующие вспомогательные средства, такие как стеарат магния и микрокристаллическая целлюлоза. В случае капсул, таблетки и пилюль, дозированные формы также могут включать буферные агенты. Они необязательно могут содержать средства, придающие непрозрачность, и также могут представлять собой композицию, таким образом, что они высвобождают активный(ые) компонент (ы) только или предпочтительно, в определенной части кишечника, необязательно, замедленным образом. Примерами композиций для включения, которые могут использоваться, являются полимерные вещества и воски.

Дозированные формы для местного или трансдермального введения анти-PD-L1 антитела, ингибитора ДНК-ПК, предпочтительно Соединения 1 или его фармацевтически приемлемой соли и/или химиотерапевтического средства, включают мази, пасты, кремы, лосьоны, гели, порошки, раствори, спреи, препараты для ингаляций или пластыри. Активный компонент смешивают в стерильных условиях с фармацевтически приемлемым носителем и любыми требуемыми консервантами или буферами, что может быть необходимым. Глазные препараты, ушные капли и глазные капли также охватываются объемом изобретения. Дополнительно, настоящее изобретение охватывает применение трансдермальных пластырей, которые могут предоставлять преимущество обеспечения контролируемой доставки соединения в организм. Такие дозированные формы могут быть приготовлены путем растворения или диспергирования Соединения в надлежащей среде. Также можно использовать ускорители абсорбции для повышения потока Соединения через кожу. Скорость можно контролировать либо путем обеспечения мембраны, контролирующей скорость высвобождения, или путем диспергирования Соединения в полимерной матрице или геле.

Типично, анти-PD-L1 антитела или антигенсвязывающие фрагменты в соответствии с изобретением включают в фармацевтические композиции, подходящие для введения субъекту, где фармацевтическая композиция содержит анти-PD-L1 антитела или их антигенсвязывающие фрагменты и фармацевтически приемлемый носитель. Во многих случаях, предпочтительным является включение в композицию изотонических средств, например, сахаров, полиспиртов, таких как маннит, сорбит или хлорид натрия. Фармацевтически приемлемые носители могут содержать небольшие количества вспомогательных веществ, таких как смачивающие или эмульсифицирующие вещества, консерванты или буферы, которые увеличивают срок годности или эффективности анти-PD-L1 антител или их антигенсвязывающих фрагментов.

Композиции согласно настоящему изобретению могут быть представлены в различных формах. Они включают, например, жидкие, полутвердые и твердые лекарственные формы, такие как жидкие растворы (например, растворы для инъекции и инфузии), дисперсии или суспензии, таблетки, пилюли, порошки, липосомы и суппозитории. Предпочтительная форма зависит от предполагаемого пути введения и терапевтического применения. Типичные предпочтительные композиции представлены в форме растворов для инъекции или инфузии, например, композиции, аналогичные используемым для пассивной иммунизации людей. Предпочтительным путем введения является парентеральное введение (например, внутривенное, подкожное, внутрибрюшинное, внутримышечное). В предпочтительном варианте осуществления, анти-PD-L1 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент вводят путем внутривенной инфузии или инъекции. В другом предпочтительном варианте осуществления, анти-PD-L1 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент вводят путем внутримышечной или подкожной инъекции.

Терапевтические композиции обычно должны быть стерильными и стабильными в условиях изготовления и хранения. Композиция может быть приготовлена в виде раствора, микроэмульсии, дисперсии, липосомы, или другой упорядоченной структуры, подходящей для высокой концентрации лекарственного средства. Стерильные растворы для инъекции могут быть приготовлены путем добавления активного анти-PD-L1 антитела или его антигенсвязывающего фрагмента в желательном количестве в подходящем растворителе с одним ингредиентом или комбинацией ингредиентов, перечисленных выше, при необходимости, с последующей стерилизацией. Обычно, дисперсии приготавливают путем введения активного компонента в стерильный наполнитель, который содержит щелочную диспергирующую среду и другие необходимые компоненты из перечисленных выше. В случае стерильных порошков для приготовления стерильных растворов для инъекции, предпочтительными методами получения являются вакуумная сушка и лиофильная сушка, которая обеспечивает получение порошка активного компонента с любым дополнительным желательным компонентом из его раствора, предварительно отфильтрованного стерилизацией. Надлежащая текучесть раствора может поддерживаться, например, путем использования покрытия, такого как лецитин, путем поддержания требуемого размера частиц в случае дисперсии и путем применения поверхностно-активных веществ. Пролонгированная абсорбция композиций для инъекций может достигаться путем включения в композицию вещества, замедляющего абсорбцию, например, моностеаратных солей и желатина.

В одном варианте осуществления, авелумаб представляет собой стерильный, прозрачный и бесцветный раствор, предназначенный для в/в введения. Содержимое флаконов с авелумабом является апирогенным и не содержит бактериостатических консервантов. Авелумаб приготавливают в виде раствора 20 мг/мл и выпускают в одноразовых стеклянных флаконах, закрытых резиновой мембраной и запечатанных алюминий-полипропиленовым предохранительным колпачком. Для введения, авелумаб следует развести 0,9% хлоридом натрия (физиологический солевой раствор). При введении используют систему для внутривенных инфузий, с встроенным фильтром с низким связыванием белков 0,2 микрон, изготовленным из полиэфирсульфона (PES).

В дальнейшем аспекте, изобретение относится к набору, содержащему анти-PD-L1 антитело и листок-вкладыш, включающий инструкции для применения анти-PD-L1 антитела в комбинации с ингибитором ДНК-ПК для лечения или задержки прогрессирования злокачественного новообразования у субъекта. Также обеспечивается набор, содержащий ингибитор ДНК-ПК и листок-вкладыш, включающий инструкции для применения ингибитора ДНК-ПК в комбинации с анти-PD-L1 антителом для лечения или задержки прогрессирования злокачественного новообразования у субъекта. Также обеспечивается набор, содержащий анти-PD-L1 антитело и ингибитор ДНК-ПК, и листок-вкладыш, включающий инструкции для применения анти-PD-L1 антитела и ингибитора ДНК-ПК для лечения или задержки прогрессирования злокачественного новообразования у субъекта. В различных вариантах осуществления набора, описанных выше, анти-PD-L1 антитело содержит тяжелую цепь, которая содержит три гипервариабельных участка, имеющих аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и легкую цепь, которая содержит три гипервариабельных участка, имеющих аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 4, 5 и 6. Набор может включать первый контейнер, второй контейнер и листок-вкладыш, где первый контейнер содержит по меньшей мере одну дозу лекарственного средства, включающего анти-PD-L1 антитело, второй контейнер содержит по меньшей мере одну дозу лекарственного средства, включающего ингибитор ДНК-ПК, и листок-вкладыш содержит инструкции для лечения субъекта от злокачественного новообразования с использованием лекарственных средств. Первый и второй контейнеры быть выполнены в одинаковой или различной форме (например, флаконы, шприцы и бутылки) и/или из материала (например, пластика или стекла). Набор дополнительно может включать другие материалы, которые могут быть полезными для введения лекарственных средств, такие как разбавители, фильтры, пакеты и системы для внутривенного вливания, иголки и шприцы. Инструкции могут указывать на то, что лекарственные средства предназначены для применения для лечения субъекта, имеющего злокачественное новообразование, которое тестировали как положительное относительно PD-L1 экспрессии с помощью иммуногистохимического (IHC) анализа.

Предшествующее раскрытие настоящего описания, охватывающее терапевтическую комбинацию, включая способы ее применения, и все их аспекты и варианты осуществления, предыдущего раздела, озаглавленного "Терапевтическая комбинация и способ ее применения", являются действующими и применимыми без ограничений к фармацевтическим препаратам и наборам, и их аспектам и вариантам осуществления, настоящего раздела, озаглавленного "Фармацевтические препараты и наборы", если это является подходящим.

Другие диагностические, предиктивные, прогностические и/или терапевтические способы

Раскрытие в дальнейшем обеспечивает диагностические, предиктивные, прогностические и/или терапевтические способы, которые основаны, по меньшей мере частично, на определении идентичности уровня экспрессии представляющего интерес маркера. В особенности, количество PD-L1 человека в образце пациента со злокачественным новообразованием можно использовать для предсказания того, будет ли пациент, вероятно, благоприятно отвечать на противораковую терапию с использованием терапевтической комбинации согласно изобретению.

В способе можно использовать любой подходящий образец. Неограничивающие примеры таких образцов включают один или несколько образцов сыворотки, образцов плазм, цельной крови, образцов сока поджелудочной железы, образцов тканей, опухолевого лизата или опухолевых образцов, который(ые) может(гут) представлять собой изолят из игольчатой биопсии, кор-биопсии и отобранного шприцем аспирата. Например, образцы ткани, плазмы или сыворотки отбирают у пациента перед лечением и необязательно во время лечения с применением терапевтической комбинации согласно изобретению. Уровни экспрессии, полученные при лечении, сравнивают со значениями, полученными перед началом лечения пациента. Полученная информация может быть прогностический в том понимании, что она может указывать на то, будет ли пациент отвечать благоприятно или неблагоприятно не лечение злокачественного новообразования.

Следует принять во внимание, что информацию, полученную с помощью диагностических исследований, описанных в настоящей заявке, можно использовать отдельно или в комбинации с другой информацией, такой как, но не ограничиваясь только ею, уровни экспрессии других генов, клинические химические показатели, гистопатологические показатели, или возраст, пол и вес субъекта. При использовании самостоятельно, информация, полученная с помощью диагностических исследований, описанных в настоящей заявке, является полезной для определения или идентификации клинического исхода лечения, выбора пациента для лечения, или лечения пациента, и т.д. С другой стороны, при использовании в комбинации с другой информацией, информация, полученная с помощью диагностических исследований, описанных в настоящей заявке, пригодна для помощи в определении или идентификации клинического исхода лечения, помощи в выборе пациента для лечения, или помощи в лечении пациента и др. В предпочтительном аспекте, уровень экспрессии можно использовать в диагностической панели, каждый из которых способствует конечному диагнозу, прогнозу или лечению, выбранному для пациента.

Любой подходящий метод можно использовать для измерения PD-L1 пептида, ДНК, РНК или других подходящих регистрируемых данных для уровней PD-L1, примеры которых описаны в настоящей заявке и/или которые хорошо известны квалифицированному специалисту в данной области техники.

В некоторых вариантах осуществления, определение уровня PD-L1 включает определение экспрессии PD-L1. В некоторых предпочтительных вариантах осуществления, уровень PD-L1 определяют с помощью концентрации пептида PD-L1 в образце пациента, например, с PD-L1 специфическими лигандами, такими как антитела или специфические партнеры связывания. Событие связывания можно обнаружить, например, с помощью конкурентных или неконкурентных методов, включая применение меченного лиганда или PD-L1 специфических компонентов, например, антител, или меченных конкурентных компонентов, включая меченный PD-L1 стандарт, который конкурирует с маркерными белками за событие связывания. Если маркерный специфический лиганд способен образовывать комплекс с PD-L1, то образованный комплекс может указывать на экспрессию PD-L1 в образце. В различных вариантах осуществления, уровень биомаркерного белка определяют с помощью метода, включающего количественный вестерн-блоттинг, множественные форматы иммунологических анализов, ELISA, иммуногистохимию, гистохимию или применение FACS анализа лизатов опухолей, иммунофлуоресцентное окрашивание, суспензионный иммуноанализ на основе шариков, технологию Luminex или метод близкого лигирования. В предпочтительном варианте осуществления, PD-L1 экспрессия определяется с помощью иммуногистохимии с применением одного или нескольких первичных анти-PD-L1 антител.

В другом варианте осуществления, уровень биомаркера РНК определяют с помощью метода, включающего микроматричные чипы, полимеразную цепную реакцию с обратной транскрипцией, полимеразную цепную реакцию с обратной транскрипцией в реальном времени, мультиплексную количественную ПЦР или гибридизацию in-situ. В одном варианте осуществления изобретения, набор фрагментов ДНК или РНК включает расположение полинуклеотидов, презентированных с помощью или гибридизируемых с PD-L1 геном, иммобилизированном на твердой поверхности. Например, для определения мРНК PD-L1, образец мРНК может быть выделен, при необходимости, после стадий приготовления репрезентативного образца, например, гомогенизации ткани, и гибризирован с зондами специфических маркеров, в особенности, на микроматричной платформе с или без амплификации или праймерами для способов обнаружения на основе ПЦР, например, мечения с ПЦР удлинением с зондами, специфичными для части мРНК маркера.

Несколько подходов было описано для количественного анализа экспрессии PD-L1 белка в IHC анализах срезов опухолевой ткани (Thompson и др. (2004) PNAS 101(49): 17174; Thompson и др. (2006) Cancer Res. 66: 3381; Gadiot и др. (2012) Cancer 117: 2192; Taube и др. (2012) Sci Transl Med 4, 127ra37; и Toplian и др. (2012) New Eng. J Med. 366 (26): 2443). В одном из подходов используют простую бинарную конечную точку положительной или отрицательной для PD-L1 экспрессии, с положительным результатом, определенным в пересчете на процент опухолевых клеток, которые проявляют гистологическое подтверждение окрашивание мембран клеточной поверхности. Срез опухолевой ткани считают как положительный для PD-L1 экспрессии, когда он имеет по меньшей мере 1%, и предпочтительно 5% суммарных опухолевых клеток. Уровень экспрессии мРНК PD-L1 может быть сравнен с уровнями экспрессии мРНК одного или нескольких эталонных генов, которые часто используют для количественной ОТ-ПЦР, таких как убиквитин С. В некоторых вариантах осуществления, уровень PD-L1 экспрессии (белка и/или мРНК) с помощью злокачественных клеток и/или с помощью инфильтрирующих иммунных клеток в опухоли определяют как "сверхэкспрессируемый" или "повышенный" на основании сравнения с уровнем экспрессии PD-L1 (белка и/или мРНК) с помощью подходящего контроля. Например, контрольный уровень экспрессии белка или мРНК PD-L1 может представлять собой уровень, количественно определенный в незлокачественных клетках того же типа или в срезе из соответствующей нормальной ткани.

В предпочтительном варианте осуществления, эффективность терапевтической комбинации согласно изобретению предсказывают с помощью значений экспрессии PD-L1 в опухолевых образцах. Иммуногистохимию с анти-PD-L1 первичными антителами можно осуществлять на серийных срезах фиксированных формалином и заделанным в парафин образцов от пациентов, леченных с применением анти-PD-L1 антитела, такого как авелумаб.

Настоящее раскрытие также обеспечивает набор для определения того, будет ли комбинация согласно изобретению подходящей для терапевтического лечения злокачественного новообразования у пациента, включающий средства для определения уровня белка PD-L1, или уровня экспрессии его РНК, в образце, выделенном от пациента, и инструкции для применения. В другом аспекте, набор дополнительно включает авелумаб для иммунотерапии. В другом аспекте изобретения, определение высокого уровня PD-L1 указывает на повышенный PFS или OS, когда пациента лечат с применением терапевтической комбинации согласно изобретению. В одном варианте осуществления набора, средства для определения уровня белка PD-L1 представляют собой антитела со специфическим связыванием с PD-L1, соответственно.

В еще другом аспекте, изобретение обеспечивает способ рекламирования анти-PD-L1 антитела в комбинации с ингибитором ДНК-ПК, где анти-PD-L1 антитело содержит тяжелую цепь, которая содержит три гипервариабельных участка, имеющих аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и легкую цепь, которая содержит три гипервариабельных участка, имеющих аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 4, 5 и 6, включающий промотирование, для целевой аудитории, применения комбинации для лечения субъекта со злокачественным новообразованием, на основании PD-L1 экспрессии в образцах, взятых у субъекта. Промотирование можно осуществлять с помощью любых доступных средств. В некоторых вариантах осуществления, промотирование включает листок-вкладыш, сопровождающий коммерческий препарат терапевтической комбинации согласно изобретению. Промотирование также может представлять собой листок-вкладыш, сопровождающий коммерческий препарат анти-PD-L1 антитела, ингибитора ДНК-ПК или другого лекарственного средства (когда лечение представляет собой терапию с применением терапевтической комбинации согласно изобретению и дополнительного лекарственного средства). Промотирование может представлять собой письменную или словесную коммуникацию с лечащим врачом или медицинским работником. В некоторых вариантах осуществления, промотирование представляет собой листок-вкладыш, где листок-вкладыш обеспечивает инструкции для получения терапии с применением терапевтической комбинации согласно изобретению после измерения уровней экспрессии PD-L1, и в некоторых вариантах осуществления, в комбинации с другим лекарственным средством. В некоторых вариантах осуществления, промотирование сопровождается лечением пациента с применением терапевтической комбинации согласно изобретению с или без другого лекарственного средства. В некоторых вариантах осуществления, листок-вкладыш указывает на то, что терапевтическую комбинацию согласно изобретению применяют для лечения пациента, если образец злокачественного новообразования пациента характеризуется высокими уровнями PD-L1 биомаркера. В некоторых вариантах осуществления, листок-вкладыш указывает на то, что терапевтическую комбинацию согласно изобретению не используют для лечения пациента, если образец злокачественного новообразования пациента экспрессирует низкие уровни PD-L1 биомаркера. В некоторых вариантах осуществления, высокий уровень PD-L1 биомаркера обозначает измеряемый уровень PD-L1, который коррелирует с вероятностью повышенного PFS и/или OS, если пациента лечат с применением терапевтической комбинации согласно изобретению, и наоборот. В некоторых вариантах осуществления, PFS и/или OS снижен относительно пациента, которые не получал лечения с применением терапевтической комбинации согласно изобретению. В некоторых вариантах осуществления, промотирование представляет собой листок-вкладыш, где листок-вкладыш обеспечивает инструкции для получения терапии с применением авелумаба в комбинации с ингибитором ДНК-ПК после первых измеряемых уровней PD-L1. В некоторых вариантах осуществления, промотирование сопровождается лечением пациента с применением авелумаба в комбинации с ингибитором ДНК-ПК с или без другого лекарственного средства. Описаны другие методы рекламирования и инструктирования или бизнес-методы, применимые в соответствии с изобретением (для других лекарственных средств и биомаркеров), например, в US 2012/0089541.

Предшествующее раскрытие настоящего описания, охватывающее терапевтическую комбинацию, включая способы ее применения, и все их аспекты и варианты осуществления, предыдущего раздела, озаглавленного "Терапевтическая комбинация и способ ее применения" являются действующими и применимыми без ограничений способов и наборов, и их аспектов и вариантов осуществления, настоящего раздела, озаглавленного "Дальнейшие диагностические, предиктивные, прогностические и/или терапевтические способы", если это является подходящим.

Все ссылки, процитированные в настоящей заявке, таким образом включены в раскрытие согласно настоящего изобретению.

Следует понимать, что это изобретение не ограничивается специфическими молекулами, фармацевтическими композициями, применениями и способами, раскрытыми в настоящей заявке, которые, как таковые, несомненно, могут изменяться. Также следует понимать, что терминология, которая используется в настоящей заявке, предназначена только для описания конкретных вариантов осуществления и не предназначена для ограничения объема настоящего изобретения, который определяется только формулой изобретения. Техники, которые необходимы в соответствии с изобретением, подробно описаны в описании. Другие техники, которые не описаны подробно, соответствуют известным стандартным методами, которые хорошо известны квалифицированным специалистам в данной области техники, или методам, которые описаны более подробно в процитированных ссылках, патентных заявках или стандартной литературе. При условии, что никаких других данных не представлено в описании, они используются только в качестве примеров, и они не считаются необходимыми в соответствии с изобретением, но они могут быть заменены на другие подходящие инструменты и биологические материалы.

Несмотря на то, что методы и материалы, аналогичные или эквивалентные тем, которые описаны в настоящей заявке, могут быть использованы в практике или тестировании настоящего изобретения, подходящие примеры описаны ниже. В этих примерах используются стандартные реагенты и буферы, которые не содержат загрязнителей (при практическом использовании) применяют. Примеры в особенности следует рассматривать как такие, которые не ограничивают явно продемонстрированные комбинации характерных признаков, но проиллюстрированные характерные признаки могут быть неограниченно снова комбинированы, при условии, что техническая задача, лежащая в основе изобретение, решена. Аналогичным образом, характерные признаки любого пункта формулы изобретения могут быть комбинированы с характерными признаками одного или нескольких других пунктов. Настоящее изобретение, которое было описано кратко и подробно, иллюстрируется и не ограничивается следующими примерами.

Примеры

Пример 1: ингибитор ДНК-ПК в комбинации с авелумабом

Возможности комбинации М3814 (Соединение 1) и Авелумаба тщательно изучали у мышей, используя модель мышиной опухоли ободочной кишки МС38. Эта модель предоставляет возможность использования иммунокомпетентных мышей, необходимое требование для исследования опосредованного Т-клетками противоопухолевого эффекта авелумаба. Условия эксперимента включали индукцию МС38 опухолей у C57BL6/N мышей путем инъекции 1×10⁶ опухолевых клеток в правый бок животных. За ростом опухоли наблюдали в динамике путем измерения длины и ширины с помощью штангенциркуля. Когда опухоли достигали среднего размера 50-100 мм³, мышей разделяли на 4 леченные группы по 10 животных в каждой и лечение начинали. Этот день обозначали как день 0. Группа 1 получала лечение с применением наполнителя. Группа 2 получала М3814 перорально один раз в сутки в дозе 150 мг/кг в объеме 10 мл/кг. Группа 3 получала авелумаб внутривенно один раз в сутки в дозе 400 мкг/мышь в объеме 5 мл/кг в дни 3, 6 и 9. Группа 4 получала М3814 перорально один раз в сутки в дозе 150 мг/кг в объеме 10 мл/кг и авелумаб внутривенно один раз в сутки в дозе 400 мкг/мышь в объеме 5 мл/кг в дни 3, 6 и 9.

В результате исследования, комбинированное лечение с применением М3814 и авелумаба было существенно лучше любой из монотерапевтических лечений (Фигура 3). Оценка Каплана-Мейера данных свидетельствовала о том, что среднее время опухолей в соответствующих леченных группах, необходимое для удвоение в размере, по сравнению с их исходным объемом в день 0, составляло 6 дней для Группы 1, 10 дней для Группы 2, 13 дней для Группы 3, и 20 дней для Группы 4. Соответствующие значения Т/С, рассчитанные в день 13, составляли 47% для Группы 2, 60% для Группы 3, и 21% для Группы 4. Лечение было в целом хорошо переносимым.

Пример 2: Ингибитор ДНК-ПК в комбинации с авелумабом и лучевой терапией Возможности комбинации М3814 (Соединение 1), авелумаба и лучевой терапии тщательно изучали у мышей, используя модель мышиной опухоли ободочной кишки МС38. Эта модель предоставляет возможность использования иммунокомпетентных мышей, необходимое требование для исследования опосредованного Т-клетками противоопухолевого эффекта авелумаба. Условия эксперимента включали индукцию МС38 опухолей у C57BL6/N мышей путем инъекции 1×10⁶ опухолевых клеток в правый бок животных. За ростом опухоли наблюдали в динамике путем измерения длины и ширины с помощью штангенциркуля. Когда опухоли достигали среднего размера 50-100 мм³, мышей разделяли на 4 леченные группы по 10 животных в каждой и начинали лечение. Этот день обозначали как день 0. Группа 1 получала ионизирующее излучение (IR) в суточной дозе 2 Гр в течение 5 последовательных дней и лечение с применением наполнителя. Группа 2 получала IR в суточной дозе 2 Гр в течение 5 последовательных дней и М3814 перорально один раз в сутки в дозе 100 мг/кг в объеме 10 мл/кг в течение 5 последовательных дней, 30 минут перед каждой фракцией IR. Группа 3 получала IR в суточной дозе 2 Гр в течение 5 последовательных дней и авелумаб внутривенно один раз в сутки в дозе 400 мкг/мышь в объеме 5 мл/кг в дни 8,11 и 14. Группа 4 получала IR в суточной дозе 2 Гр в течение 5 последовательных дней и М3814 перорально один раз в сутки в дозе 100 мг/кг в объеме 10 мл/кг в течение 5 последовательных дней, 30 минут перед каждой фракцией IR и авелумаб внутривенно один раз в сутки в дозе 400 мкг/мышь в объеме 5 мл/кг в дни 8, 11 и 14.

В результате исследования комбинированное лечение с применением М3814, авелумаба и IR было значительно лучше по сравнению с М3814 и IR, а также авелумабом и IR (Фигура 4). Оценка Каплана-Мейера данных свидетельствовала о том, что среднее время опухолей в соответствующих леченных группах, необходимое для удвоение в размере, по сравнению с их исходным объемом в день 0, составляло 10 дней для Группы 1, 21 день для Группы 2, 10 дней для Группы 3, и не достигали для Группы 4 при окончании исследования в День 28, поскольку 60% животных не достигали соответствующего объема опухоли. Лечение было в целом хорошо переносимым.

Пример 3: Исследование комбинации с ингибитором ДНК-ПК и авелумабом

Этот пример иллюстрирует клиническое исследование для оценки безопасности, эффективности, фармакокинетики и фармакодинамики ингибитора ДНК-ПК (М3814) в комбинации с авелумабом (MSB0010718C) у пациентов с ранее леченным MSI низким/ MSS стабильным CRC.

Это исследование представляет собой открытое, многоцентровое исследование с повышением дозы, созданное для оценки максимально переносимой дозы (MTD) и выбора рекомендуемой дозы 2 фазы (RP2D) ДНК-ПКи при введении в комбинации с авелумабом. Как только оценивали MTD для ДНК-ПКи, вводимых в комбинации с авелумабом (исследование по подбору дозы), открывают фазу терапии препаратом в дозе, достигнутой во время фазы повышения дозы препарата до максимально переносимой, для дальнейшей характеристики комбинации по показателям профиль безопасности, противоопухолевая активность, фармакокинетика, фармакодинамика и модуляция биомаркера. Схема протокола представлена в Таблице 1.

В фазе подбора дозы будут оценивать MTD и RP2D у пациентов с CRC, которые ранее получали системную терапию в связи с прогрессирующим заболеванием, включая бевацизумаб, цетуксимаб, 5-фторурацил, иринотекан и оксалиплатин. При определении дозы будут придерживаться классической 3+3 схемы с вплоть до 5 тестируемых потенциальных уровней дозирования (DL), представленных в Таблице 1.

Фаза повышения дозы будет приводить к идентификации повышенной тестируемой дозы для ДНК-ПКи в комбинации с авелумабом у пациентов с CRC, которые ранее получали системную терапию в связи с их прогрессирующим заболеванием. Повышенная тестируемая доза будет представлять собой либо MTD (то есть наивысшая доза ДНК-ПКи при введении в комбинации с авелумабом, связанная с проявлением DLT у <33% пациентов) или RP2D, то есть, наибольшая тестируемая доза, которая задекларирована как безопасная и переносимая исследователями и спонсором. Как только идентифицируют повышенную тестируемую дозу, то открывают фазу терапии препаратом в дозе, достигнутой во время фазы повышения дозы препарата до максимально переносимой, и будут оценивать ДНК-ПКи в комбинации с авелумабом на вплоть до приблизительно 20-40 пациентов с ранее леченным CRC в одной специфической группе заболеваний и ранее леченных пациентов с SCLC.

Критерии включения: Гистологически или цитологически подтвержденный прогрессирующий MSI низкий /MSS стабильный CRC (группа 1) или SCLC (группа 2). Обязательно задокументированный, зафиксированный в формалине, заделанный в парафин (FFPE) блок опухолевой ткани из иссеченного образца первичной опухоли (все пациенты). Только для дополнительной когорты, обязательная биопсия опухоли de-novo из локально рекуррентного или метастатического очага, за исключением случаев, когда получен при процедуре, осуществленной в течение 6 месяцев включения в исследование и если пациент не получал интервенционного системного противоракового лечения. По меньшей мере один измеряемый очаг поражения, как определено с помощью RECIST версии 1.1. Возраст ≥18 лет. Показатель общего состояния согласно Восточной объединенной онкологической группе (ECOG) 0 или 1. Достаточная функция костного мозга, функций почек и печени. Количество пациентов, задействованных в фазу подбора дозы, будет зависеть от наблюдаемого профиля безопасности, и количества тестируемых уровней дозирования. Рассчитывали, что вплоть до приблизительно 95 пациентов (включая фазу подбора дозы и фазу терапии препаратом в дозе, достигнутой во время фазы повышения дозы препарата до максимально переносимой) будет задействовано в исследование.

Исследуемое лечение: ДНК-ПКи будут вводить перорально (РО) два раза в сутки (BID) независимо от приема пищи, согласно непрерывной схеме дозирования. Авелумаб будут вводить в виде 1-часовой внутривенной инфузии (в/в, IV) каждые две недели (Q2W). Для всех пациентов, лечение с применением исследуемых лекарственных средств может продолжаться до тех пор, пока не будет подтверждено прогрессирование заболевания, отказ пациента, невозможность последующего наблюдения из-за утраты связи с пациентом, неприемлемую токсичность, или исследование будет остановлено спонсором, не зависимо от того, какое из них наступит первым. Для минимизирования реакций, связанных с инфузией авелумаба, может быть введена схема премедикации, включающая от 25 до 50 мг в/в или перорального эквивалента дифенгидрамина и 650 мг в/в или перорального эквивалента ацетаминофена/парацетамола (как принято в местной практике) приблизительно за 30-60 минут перед каждой дозой авелумаба. Это может быть модифицировано на основании местных стандартов лечения и рекомендаций, при необходимости.

Оценка опухоли: Противоопухолевая активность будет оценена с помощью радиологических оценок опухолей с интервалами 6 недель, используя RECIST версию 1.1. Полные и частичные ответы будет подтверждены на повторных изображениях по меньшей мере через 4 недели после исходной документации. Через 6-12 месяцев от включения в исследование, оценки опухолей будут осуществлять с меньшей частотой, то есть, через 12-ти недельные интервалы. Дополнительно, радиологические оценки опухолей также будут осуществлять каждый раз, когда подозревают прогрессирование заболевания (например, симптоматическое истощение), и во время окончания лечения/отмены (если оно не осуществлено в течение предшествующих 6 недель). Если радиологическая визуализация показывает PD, то оценку опухоли следует повторять по меньшей мере ≥4 недель позже для подтверждения PD. Сканирования с помощью компьютерной томографии головного мозга (СТ) или магнитно-резонансной томографии (MRI) необходимы на момент включения в исследование и если предполагают метастазирование в головной мозг. Сканирование костей скелета (остеосцинтиграфия) или позитронно-эмиссионная томография 18 фтордеоксиглюкозы/СТ (18FDG-PET/CT) необходимы на момент включения в исследование, затем каждые 16 недель, только если метастазы в кости присутствуют на момент включения в исследование. В других случаях, визуализация костей необходима только в тех ситуациях, если предполагаются новые метастазы в костях. Визуализация костей также необходима во время подтверждения CR для пациентов, которые имели метастазы в кости.

Оценки Фармакокинетики/Иммуногенности: Образцы ПК/иммуногенности будут отобраны.

Оценки поисковых биомаркеров: Ключевой задачей анализов биомаркеров, которую осуществляют в настоящем исследовании, является исследование биомаркеров, которые потенциально прогностические для преимущества лечения с применением комбинации ДНК-ПКи и авелумаба. Дополнительно, исследования биомаркеров биообразцов опухоли и крови будут осуществлять для помощи дальнейшего понимания механизма действия ДНК-ПКи в комбинации с авелумабом, а также потенциальных механизмов резистентности. Биообразцы опухоли из архивных проб ткани и метастатических поражений будут исследовать для анализа кандидатных маркеров ДНК, РНК или белков, или релевантных особенностей маркеров, для их способности идентифицировать тех пациентов, которые наиболее вероятно получат преимущества от лечения с применением исследуемых лекарственных средств. Маркеры, которые могут анализировать, включают, но не ограничиваясь только ими, количественное определение PD-L1 экспрессии инфильтрирующих опухоли CD8+ Т лимфоцитов и последовательности гена рецептора Т-клеток. Необязательные биопсии опухолей, полученные при прогрессировании заболевания, будут использоваться для исследования приобретенных механизмов резистентности. Подходящими являются только образцы пункционной биопсии или эксцизионной биопсии, или резекционные образцы.

Периферическая кровь: Пробы будут храниться в виде цельной крови, сыворотки и плазмы в биобанке для оценки поисковых биомаркеров, если это не запрещено местными нормативными актами или решением Институционального наблюдательного совета или Комитета по этике. Образцы можно использовать для идентификации или характеристики маркеров клеток, ДНК, РНК или белков, которые известны или предполагаются релевантными для механизмов действия, или развития резистентности на ДНК-ПКи и авелумаб. Они включают биомаркеры, которые могут помощью идентифицировать тех пациентов, которые могут получить предпочтительное преимущество от лечения с применением авелумаба в комбинации с ДНК-ПКи, включая, но не ограничиваясь только ими, биомаркеры, связанные с противоопухолевым иммунным ответом или модуляцией мишени, такие как растворимый VEGF-A, IL-8, IFNγ и/или тканевой FoxP3, PD-1 и PD-L2. Биообразцы следует отбирать до введения дозы и в одно и то же время в качестве ПК образцов во всех возможных случаях.

Пример 4: Исследование комбинации, включающей ДНК-ПКи, авелумаб и химиотерапия

Этот пример иллюстрирует клиническое исследование для оценки безопасности, эффективности, фармакокинетики и фармакодинамики ДНК-ПКи (М3814) и авелумаб (MSB0010718C) в комбинации с этопозидом (трехкомпонентная комбинация - группа 1), и цисплатином и этопозидом (четырехкомпонентная комбинация группа 2) у пациентов с SCLC. В некоторых случаях, цисплатин может быть заменен на карбоплатин, тогда как цисплатин/карбоплатин обозначаются как препарат платины в этом Примере.

Это исследование представляет собой открытое, многоцентровое исследование с повышением дозы, созданное для оценки максимально переносимой дозы (MTD) и выбора рекомендуемой дозы 2 фазы (RP2D) ДНК-ПКи при введении в комбинации как составной компонент трехкомпонентной комбинации или как составной компонент четырехкомпонентной комбинации. Как только оценили MTD и/или RP2D ДНК-ПКи, вводимого в комбинации с авелумабом и этопозидом (исследование по подбору дозы), будут открывать фазу терапии препаратом в дозе, достигнутой во время фазы повышения дозы препарата до максимально переносимой для дальнейшей характеристики комбинации по показателям профиль безопасности, противоопухолевая активность, фармакокинетика, фармакодинамика и модуляция биомаркера. После завершения повышения дозы трехкомпонентной комбинации, будут начинать повышение дозы четырехкомпонентной комбинации. Схема протокола представлена в Таблице 2а или 2b.

В фазе подбора дозы будут оценивать MTD и/или RP2D у пациентов с SCLC распространенным заболеванием, которые ранее получали системную терапию в связи с прогрессирующим заболеванием, включая карбоплатин/цисплатин в комбинации с этопозидом или иринотеканом. При определении дозы будут придерживаться классической 3+3 схемы с вплоть до 5 тестируемых потенциальных уровней дозирования (DL), представленных в Таблице 2а или 2b.

Фаза повышения дозы будет приводить к идентификации повышенной тестируемой дозы для ДНК-ПКи в комбинации с авелумабом и этопозидом у пациентов с SCLC, которые ранее получали системную терапию в связи с их прогрессирующим заболеванием. Повышенная тестируемая доза будет представлять собой либо MTD (то есть, наивысшая доза ДНК-ПКи при введении в комбинации с авелумабом и этопозидом, связанная с проявлением DLT у <33% пациентов) или RP2D, то есть, наибольшая тестируемая доза, которая задекларирована как безопасная и переносимая исследователями и спонсором.

Как только идентифицируют повышенную тестируемую дозу, будут открывать фазу терапии препаратом в дозе, достигнутой во время фазы повышения дозы препарата до максимально переносимой, и ДНК-ПКи в комбинации с авелумабом и этопозидом будут оценивать на вплоть до приблизительно 20-40 пациентов с ранее леченным SCLC. После завершения повышения дозы трехкомпонентной комбинации, сходную схему будут использовать для оценки ДНК-ПКи, авелумаба, этопозида и цисплатина у пациентов с ранее нелеченным SCLC ED.

Критерии включения: Гистологически или цитологически подтвержденный SCLC. Обязательно задокументированный, зафиксированный в формалине, заделанный в парафин (FFPE) блок опухолевой ткани из иссеченного образца первичной опухоли (все пациенты). Только для группы 1 дополнительная когорта, обязательная биопсия опухоли de-novo из локально рекуррентного или метастатического очага, за исключением случаев, когда получен при процедуре, осуществленной в течение 6 месяцев включения в исследование и если пациент не получал интервенционного системного противоракового лечения. По меньшей мере один измеряемый очаг поражения, как определено с помощью RECIST версии 1.1. Возраст ≥18 лет. Показатель общего состояния согласно Восточной объединенной онкологической группе (ECOG) 0 или 1. Достаточная функция костного мозга, функций почек и печени. Количество пациентов, задействованных в фазу подбора дозы, будет зависеть от наблюдаемого профиля безопасности, и количества тестируемых уровней дозирования. Рассчитывали, что вплоть до приблизительно 95 пациентов (включая фазу подбора дозы и фазу терапии препаратом в дозе, достигнутой во время фазы повышения дозы препарата до максимально переносимой) будет задействовано в исследование.

Исследуемое лечение: ДНК-ПКи будут вводить перорально (РО) два раза в сутки (BID) независимо от приема пищи, согласно непрерывной схеме дозирования. Авелумаб будут вводить в виде 1-часовой внутривенной инфузии (в/в, IV) каждые две недели (Q2W). Этопозид будут вводить IV или перорально в дни 1, 2 и 3 повторяли каждую третью неделю. Препарат платины будут вводить в День 1 каждой третьей недели. Для всех пациентов в группе 1, лечение с применением исследуемых лекарственных средств может продолжаться до тех пор, пока не будет подтверждено прогрессирование заболевания, отказ пациента, невозможность последующего наблюдения из-за утраты связи с пациентом, неприемлемую токсичность, или исследование будет остановлено спонсором, не зависимо от того, какое из них наступит первым. В группе 2, для пациентов без PD будут останавливать лечения через 6 циклов. Пациенты с частичной или полной ремиссией могут получать облучение грудной клетки и или профилактическое краниальное облучение в соответствии с правилами, принятыми в учреждении. Через 6 циклов химиотерапии, всем пациентам без прогрессирующего заболевания можно вводить авелумаб отдельно или в комбинации с ДНК-ПКи в качестве поддерживающего лечения до прогрессирования. Для минимизирования реакций, связанных с инфузией авелумаба, может быть введена схема премедикации, включающая от 25 до 50 мг в/в или перорального эквивалента дифенгидрамина и 650 мг в/в или перорального эквивалента ацетаминофена/парацетамола (как принято в местной практике) приблизительно за 30-60 минут перед каждой дозой авелумаба. Это может быть модифицировано на основании местных стандартов лечения и рекомендаций, при необходимости.

Оценка опухоли: Противоопухолевая активность будет оценена с помощью радиологических оценок опухолей с интервалами 6 недель, используя RECIST версию 1.1. Полные и частичные ответы будет подтверждены на повторных изображениях по меньшей мере через 4 недели после исходной документации. Через 6-12 месяцев от включения в исследование, оценки опухолей будут осуществлять с меньшей частотой, то есть, через 12-ти недельные интервалы. Дополнительно, радиологические оценки опухолей также будут осуществлять каждый раз, когда подозревают прогрессирование заболевания, и во время окончания лечения/отмены (если оно не осуществлено в течение предшествующих 6 недель). Если радиологическая визуализация показывает PD, то оценку опухоли следует повторять по меньшей мере ≥4 недель позже для подтверждения PD. Сканирования с помощью компьютерной томографии головного мозга (СТ) или магнитно-резонансной томографии (MRI) необходимы на момент включения в исследование и если предполагают метастазирование в головной мозг. Сканирование костей скелета (остеосцинтиграфия) или позитронно-эмиссионная томография 18фтордеоксиглюкозы/СТ (18FDG-PET/CT) необходимы на момент включения в исследование, затем каждые 16 недель, только если метастазы в кости присутствуют на момент включения в исследование. В других случаях, визуализация костей необходима только в тех ситуациях, если предполагаются новые метастазы в костях. Визуализация костей также необходима во время подтверждения CR для пациентов, которые имели метастазы в кости.

Оценки Фармакокинетики/Иммуногенности: Образцы ПК/иммуногенности будут отобраны.

Оценки поисковых биомаркеров: Ключевой задачей анализов биомаркеров, которую осуществляют в настоящем исследовании, является исследование биомаркеров, которые потенциально прогностические для преимущества лечения с применением комбинации ДНК-ПКи и авелумаба. Дополнительно, исследования биомаркеров биообразцов опухоли и крови будут осуществлять для помощи дальнейшего понимания механизма действия ДНК-ПКи в комбинации с авелумабом, а также потенциальных механизмов резистентности. Биообразцы опухоли из архивных проб ткани и метастатических поражений будут исследовать для анализа кандидатных маркеров ДНК, РНК или белков, или релевантных особенностей маркеров, для их способности идентифицировать тех пациентов, которые наиболее вероятно получат преимущества от лечения с применением исследуемых лекарственных средств. Маркеры, которые могут анализировать, включают, но не ограничиваясь только ими, количественное определение PD-L1 экспрессии инфильтрирующих опухоли CD8+ Т лимфоцитов и последовательности гена рецептора Т-клеток. Необязательные биопсии опухолей, полученные при прогрессировании заболевания, будут использоваться для исследования приобретенных механизмов резистентности. Подходящими являются только образцы пункционной биопсии или эксцизионной биопсии, или резекционные образцы.

Периферическая кровь: Пробы будут храниться в виде цельной крови, сыворотки и плазмы в биобанке для оценки поисковых биомаркеров, если это не запрещено местными нормативными актами или решением Институционального наблюдательного совета или Комитета по этике. Образцы можно использовать для идентификации или характеристики маркеров клеток, ДНК, РНК или белков, которые известны или предполагаются релевантными для механизмов действия, или развития резистентности на ДНК-ПКи и авелумаб, которые вводили в комбинации с этопозидом или этопозидом/препаратом платины. Они включают биомаркеры, которые могут помощью идентифицировать тех пациентов, которые могут получить предпочтительное преимущество от лечения с применением авелумаба в комбинации с ДНК-ПКи, включая, но не ограничиваясь только ими, биомаркеры, связанные с противоопухолевым иммунным ответом или модуляцией мишени, такие как растворимый VEGF-A, IL-8, IFNγ и/или тканевой FoxP3, PD-1 и PD-L2. Биообразцы следует отбирать до введения дозы и в одно и то же время в качестве ПК образцов во всех возможных случаях.

Пример 5: Исследование комбинации с ДНК-ПКи, авелумабом и лучевой терапией с или без химиотерапии

Этот пример иллюстрирует клиническое исследование для оценки безопасности, эффективности, фармакокинетики и фармакодинамики ДНК-ПКи (М3814) и авелумаба (MSB0010718C) в комбинации с лучевой терапией (RT) (трехкомпонентная комбинация - группа 1) и химио-лучевой терапией (CRT) (четырехкомпонентная комбинация группа 2) у пациентов с SCCHN или другими злокачественными новообразованиями, например, рак пищевода. Фоновой химиотерапией для CRT часто является цисплатин отдельно, но его также можно комбинировать с другими лекарственными средствами, такими как, но не ограничиваясь только ими, 5-фторурацил.

Это исследование представляет собой открытое, многоцентровое исследование с повышением дозы, созданное для определения максимально переносимой дозы (MTD) и выбранной рекомендуемой дозы 2 фазы (RP2D) ДНК-ПКи при введении в комбинации как составной компонент трехкомпонентной комбинации или как составной компонент четырехкомпонентной комбинации. Как только оценили MTD и/или RP2D ДНК-ПКи, вводимого в комбинации с авелумабом и RT (исследование по подбору дозы), открывали фазу терапии препаратом в дозе, достигнутой во время фазы повышения дозы препарата до максимально переносимой для дальнейшей характеристики комбинации по показателям профиль безопасности, противоопухолевая активность, фармакокинетика, фармакодинамика и модуляция биомаркера. После завершения повышения дозы трехкомпонентной комбинации, начинали повышение дозы четырехкомпонентной комбинации (CRT). Схема протокола представлена в Таблице 3а или 3b.

В фазе подбора дозы будут оценивать MTD и RP2D (группа 1) у пациентов со злокачественными новообразованиями, локализованными супра-диафрагмально, леченных с применением фракционированного RT, осуществляемого с целью излечения тех пациентов, которые ранее не получали системной терапии. При определении дозы будут придерживаться классической 3+3 схемы с вплоть до 5 тестируемых потенциальных уровней дозирования (DL), представленных в Таблице 3а или 3b.

Фаза повышения дозы будет приводить к идентификации повышенной тестируемой дозы для ДНК-ПКи в комбинации с авелумабом и RT у пациентов с SCCHN, которые ранее не получали системной терапии в связи с их заболеванием. Повышенная тестируемая доза будет представлять собой либо MTD (то есть, наивысшая доза ДНК-ПКи при введении в комбинации с авелумабом и RT, связанная с проявлением DLT у <33% пациентов) или RP2D, то есть наибольшая тестируемая доза, которая задекларирована как безопасная и переносимая исследователями и спонсором. Как только идентифицируют повышенную тестируемую дозу, то будут открывать фазу терапии препаратом в дозе, достигнутой во время фазы повышения дозы препарата до максимально переносимой, и ДНК-ПКи в комбинации с авелумабом и RT будут оценивать на вплоть до приблизительно 20-40 пациентов с ранее нелеченным SCCHN. После завершения RT повышения дозы комбинации, сходную схему будут использовать для оценки ДНК-ПКи, авелумаба и CRT у пациентов с ранее нелеченным SCCHN.

Критерии включения: Гистологически или цитологически подтвержденные супра-диафрагмальное заболевание в части повышения дозы и нелеченный SCCHN в части лечения с применением максимально переносимой дозы, определенной в ходе этапа повышения доз. Обязательно задокументированный, зафиксированный в формалине, заделанный в парафин (FFPE) блок опухолевой ткани из иссеченного образца первичной опухоли (все пациенты). По меньшей мере один измеряемый очаг поражения, как определено с помощью RECIST версии 1.1. Возраст ≥18 лет. Показатель общего состояния согласно Восточной объединенной онкологической группе (ECOG) 0 или 1. Достаточная функция костного мозга, функций почек и печени. Количество пациентов, задействованных в фазу подбора дозы, будет зависеть от наблюдаемого профиля безопасности, и количества тестируемых уровней дозирования. Рассчитывали, что вплоть до приблизительно 95 пациентов (препаратом в дозе, достигнутой во время фазы повышения дозы препарата до максимально переносимой) будет задействовано в исследование.

Исследуемое лечение: ДНК-ПКи будут вводить перорально (РО) один раз в сутки (QD) независимо от приема пищи, согласно непрерывной схеме дозирования. Авелумаб будут вводить в виде 1-часовой внутривенной инфузии (в/в, IV) каждые две недели (Q2W). RT будут вводить в виде ежедневных фракций 2 Грей (Гр) 5 раз в неделю в течение 6-7 недель. Тем не менее, также можно использовать другие фракционированные схемы и дозы для фракций. Во всех случаях, ДНК-ПКи будут вводить за 1-2 часа перед RT. Для всех пациентов, можно вводить авелумаб отдельно или в комбинации с ДНК-ПКи в качестве поддержания до прогрессирования. Для минимизирования реакций, связанных с инфузией авелумаба, может быть введена схема премедикации, включающая от 25 до 50 мг в/в или перорального эквивалента дифенгидрамина и 650 мг в/в или перорального эквивалента ацетаминофена/парацетамола (как принято в местной практике) приблизительно за 30-60 минут перед каждой дозой авелумаба. Это может быть модифицировано на основании местных стандартов лечения и рекомендаций, при необходимости.

Оценка опухоли: Противоопухолевая активность будет оценена с помощью радиологических оценок опухолей с интервалами 6 недель, используя RECIST версию 1.1. Полные и частичные ответы будет подтверждены на повторных изображениях по меньшей мере через 4 недели после исходной документации. Через 6-12 месяцев от включения в исследование, оценки опухолей будут осуществлять с меньшей частотой, то есть, через 12-ти недельные интервалы. Дополнительно, радиологические оценки опухолей также будут осуществлять каждый раз, когда подозревают прогрессирование заболевания, и во время окончания лечения/отмены (если оно не осуществлено в течение предшествующих 6 недель). Если радиологическая визуализация показывает PD, то оценку опухоли следует повторять по меньшей мере ≥4 недель позже для подтверждения PD. Сканирования с помощью компьютерной томографии головного мозга (СТ) или магнитно-резонансной томографии (MRI) необходимы на момент включения в исследование и если предполагают метастазирование в головной мозг.

Сканирование костей скелета (остеосцинтиграфия) или позитронно-эмиссионная томография 18фтордеоксиглюкозы/СТ (18FDG-PET/CT) необходимы на момент включения в исследование, затем каждые 16 недель, только если метастазы в кости присутствуют на момент включения в исследование. В других случаях, визуализация костей необходима только в тех ситуациях, если предполагаются новые метастазы в костях. Визуализация костей также необходима во время подтверждения CR для пациентов, которые имели метастазы в кости.

Оценки Фармакокинетики/Иммуногенности: Образцы ПК/иммуногенности будут отобраны.

Оценки поисковых биомаркеров: Ключевой задачей анализов биомаркеров, которую осуществляют в настоящем исследовании, является исследование биомаркеров, которые потенциально прогностические для преимущества лечения с применением комбинации ДНК-ПКи и авелумаба. Дополнительно, исследования биомаркеров биообразцов опухоли и крови будут осуществлять для помощи дальнейшего понимания механизма действия ДНК-ПКи в комбинации с авелумабом, а также потенциальных механизмов резистентности. Биообразцы опухоли из архивных проб ткани и метастатических поражений будут исследовать для анализа кандидатных маркеров ДНК, РНК или белков, или релевантных особенностей маркеров, для их способности идентифицировать тех пациентов, которые наиболее вероятно получат преимущества от лечения с применением исследуемых лекарственных средств. Маркеры, которые могут анализировать, включают, но не ограничиваясь только ими, количественное определение PD-L1 экспрессии инфильтрирующих опухоли CD8+ Т лимфоцитов и

последовательности гена рецептора Т-клеток. Необязательные биопсии опухолей, полученные при прогрессировании заболевания, будут использоваться для исследования приобретенных механизмов резистентности. Подходящими являются только образцы пункционной биопсии или эксцизионной биопсии, или резекционные образцы.

Периферическая кровь: Пробы будут храниться в виде цельной крови, сыворотки и плазмы в биобанке для оценки поисковых биомаркеров, если это не запрещено местными нормативными актами или решением Институционального наблюдательного совета или Комитета по этике. Образцы можно использовать для идентификации или характеристики маркеров клеток, ДНК, РНК или белков, которые известны или предполагаются релевантными для механизмов действия, или развития резистентности на ДНК-ПКи и авелумаб, которые вводили в комбинации с этопозидом или этопозидом/препаратом платины. Они включают биомаркеры, которые могут помощью идентифицировать тех пациентов, которые могут получить предпочтительное преимущество от лечения с применением авелумаба в комбинации с ДНК-ПКи, включая, но не ограничиваясь только ими, биомаркеры, связанные с противоопухолевым иммунным ответом или модуляцией мишени, такие как растворимый VEGF-A, IL-8, IFNγ и/или тканевой FoxP3, PD-1 и PD-L2. Биообразцы следует отбирать до введения дозы и в одно и то же время в качестве ПК образцов во всех возможных случаях.

Пример 6: Пояснение механизма действия

Как указано выше, но не желая ограничиваться какой-либо конкретной теорией, ингибитор ДНК-ПК, М3814, потенциально и селективно блокирует один из двух основных путей для репарации двухцепочечных разрывов ДНК (ДЦРД, DDSB) и действует синергически с ионизирующим излучением (IR) и химиотерапией.

Получены экспериментальные данные, свидетельствующие о том, что путем ингибирования каталитической активности ДНК-ПК в присутствии DDSB, М3814 одновременно подавляется репарация ДНК и отрицательный регуляторный сигнал передается на ATM, что приводит к усилению активации ATM-зависимых путей передачи сигналов, включая CHK2 и р53-зависимую остановку клеточного цикла. Комбинированное лечение пролиферирующих р53 злокачественных клеток дикого типа (А549, А375, Н460) с применением единичной дозы ионизирующего излучения (2-5 Гр) и длительная экспозиция с применением М3814 индуцирует полную блокаду клеточного цикла. В течение 4-7 дней лечения клетки приобретают типичный фенотип старения с большой /плоской морфологией и окрашиванием β-Gal. Визуализация живых клеток и BrdU мечение в А549 клетках демонстрирует, что этот фенотип необратим после удаления М3814, в отличие от полностью обратимого подобного старению фенотипа, вызываемого селективной р53 активацией с помощью MDM2 ингибитора Nutlin-3а. Изогенные р53-нулевые А549 клетки теряют способность полностью останавливать их клеточный цикл, подтверждая роль р53 в индукции старения.

Анализ мРНК от индуцированных IR/M3814 стареющих А549 и A375 клеток с помощью панели Nanostring PanCancer Immune продемонстрировал активацию большой группы генов от нескольких путем иммунного ответа, включая интерферон, цитокин/хемокин и комплемент. Восемнадцать генов обычно были повышенно регулированы в >3-150 раз по сравнению с контролями. Эти существенные изменения с генной экспрессии выстраиваются постепенно и коррелируют с развитием фенотипа старения. Несколько белков из индуцированного поднабора анализировали в клеточной среде (Meso Scale Discovery) и подтверждали, что они секретируются стареющими клетками при отсутствии М3814. Культуральная среда из индуцированных М3814 стареющих клеток продемонстрировала повышенный иммуномодулирующий эффект на РВМС-производные иммунные клетки человека путем живой визуализации.

Не желая ограничиваться какой-либо конкретной теорией, полагают, что наблюдения способности М3814 существенно усиливать АТМ/р53/CHK2-зависимую остановку клеточного цикла в ответ на повреждение DDSB и эффективно индуцировать длительное преждевременное старению с сильных иммуномодуляторным секретирующим фенотипом обеспечивает дальнейшее пояснения для преимущество комбинированного подхода для радио-иммунотерапии злокачественного новообразования в соответствии с изобретением.

Пример 7: Исследование комбинации с ДНК-ПКи и авелумабом с или без лучевой терапии (паллиативная доза)

Этот пример иллюстрирует клиническое исследование, состоящее из двух частей 2: Группы Части А для оценки безопасности, эффективности, фармакокинетики и фармакодинамики ДНК-ПКи (М3814) и авелумаба (MSB0010718C) (двухкомпонентная комбинация), и Группы Части В для оценки безопасности, эффективности, фармакокинетики и фармакодинамики ДНК-ПКи (М3814) в комбинации с авелумабом (MSB0010718C) и лучевой терапией (RT) (трехкомпонентная комбинация).

Это исследование представляет собой открытое, многоцентровое исследование с повышением дозы, созданное для определения максимально переносимой дозы (MTD) и/или рекомендуемой дозы 2 фазы (RP2D) ДНК-ПКи при введении в комбинации как составной компонент двухкомпонентной комбинаций и как составной компонент трехкомпонентной комбинации. Как только оценили MTD и/или RP2D ДНК-ПКи, введенного в комбинации с авелумабом и определили RT, будут потенциально открывать фазу терапии препаратом в дозе, достигнутой во время фазы повышения дозы препарата до максимально переносимой для дальнейшей характеристики комбинации по показателям профиль безопасности, противоопухолевая активность, фармакокинетика, фармакодинамика и модуляция биомаркера у выбранной популяции пациентов (то есть, леченный ранее метастатический NSCLC, которые не получали ранее ингибиторов контрольных точек, или с предварительно леченным метастатическим NSCLC, нечувствительным к ингибиторам контрольных точек). Схема протокола представлена в Таблице 4.

В Части А Фазы подбора дозы будут определять MTD и/или RP2D ДНК-ПКи в комбинации с авелумабом у пациентов с прогрессирующими или метастатическими солидными опухолями, тогда как в Части В будут определять MTD и/или RP2D ДНК-ПКи в комбинации с авелумабом и паллиативной RT у пациентов с прогрессирующими или метастатическими солидными опухолями с первичными или метастатическими поражениями в легких и приемлемые для фракционированной RT. При определении дозы будут придерживаться байесовской схемы с вплоть до 4 уровнями потенциальных доз (DL) ДНК-ПКи, тестируемых для каждой части.

Фаза повышения дозы будет приводить к идентификации повышенной тестируемой дозы для ДНК-ПКи в комбинации с авелумабом (Часть А) и в комбинации с авелумабом и RT (Часть В). Повышенная тестируемая доза будет представлять собой либо MTD (то есть, наивысшая доза ДНК-ПКи при введении в комбинации с авелумабом (Часть А) и с авелумабом и RT (Часть В) и/или RP2D, то есть наибольшая тестируемая доза, которая задекларирована как безопасная и переносимая исследователями и спонсором. Как только идентифицируют повышенную тестируемую дозу, потенциально будут открывать фазу терапии препаратом в дозе, достигнутой во время фазы повышения дозы препарата до максимально переносимой, и ДНК-ПКи в комбинации с авелумабом и RT будут оценивать на вплоть до приблизительно 20-40 пациентов с ранее леченным метастатическим NSCLC (Группа 1), и ДНК-ПКи в комбинации с авелумабом будет оценивать для ранее леченных SCLC-ED и CRC MSI низким или MSS стабильным приблизительно у 20-40 пациентов для каждой группа (Группы 2 и 3).

Критерии включения: Гистологически или цитологически подтвержденный прогрессирующий метастатический NSCLC, пригодный для лучевой терапии (группа 1), MSI низкий /MSS стабильный CRC (группа 2) или SCLC (группа 3). Обязательно задокументированный, зафиксированный в формалине, заделанный в парафин (FFPE) блок опухолевой ткани из иссеченного образца первичной опухоли (все пациенты). Только для дополнительной когорты, обязательная биопсия опухоли de-novo из локально рекуррентного или метастатического очага, за исключением случаев, когда получен при процедуре, осуществленной в течение 6 месяцев включения в исследование и если пациент не получал интервенционного системного противоракового лечения. По меньшей мере один измеряемый очаг поражения, как определено с помощью RECIST версии 1.1. Возраст ≥18 лет. Показатель общего состояния согласно Восточной объединенной онкологической группе (ECOG) 0 или 1. Достаточная функция костного мозга, функций почек и печени. Количество пациентов, задействованных в фазу подбора дозы, будет зависеть от наблюдаемого профиля безопасности, и количества тестируемых уровней дозирования. Рассчитывали, что вплоть до приблизительно 95 пациентов (включая фазу подбора дозы и фазу терапии препаратом в дозе, достигнутой во время фазы повышения дозы препарата до максимально переносимой) будет задействовано в исследование.

Исследуемое лечение: ДНК-ПКи будут вводить перорально (РО) один раз в сутки (QD) для Группы 1 и два раза в сутки (BID), согласно непрерывной схеме дозирования. Авелумаб будут вводить в виде 1-часовой внутривенной инфузии (IV) в фиксированной дозе 800 мг каждые две недели (Q2W). Для всех пациентов, лечение с применением исследуемых лекарственных средств может продолжаться до тех пор, пока не будет подтверждено прогрессирование заболевания, отказ пациента, невозможность последующего наблюдения из-за утраты связи с пациентом, неприемлемую токсичность, или исследование будет остановлено спонсором, не зависимо от того, какое из них наступит первым. Для минимизирования реакций, связанных с инфузией авелумаба, может быть введена схема премедикации, включающая от 25 до 50 мг в/в или перорального эквивалента дифенгидрамина и 650 мг IV или пероральный эквивалент ацетаминофен/ парацетамол (как принято в местной практике) приблизительно за 30-60 минут перед каждой дозой авелумаба. Это может быть модифицировано на основании местных стандартов лечения и рекомендаций, при необходимости.

Оценка опухоли: Противоопухолевая активность будет оценена с помощью радиологических оценок опухолей с интервалами 6 недель, используя RECIST версию 1.1. Полные и частичные ответы будет подтверждены на повторных изображениях по меньшей мере через 4 недели после исходной документации. Через 6-12 месяцев от включения в исследование, оценки опухолей будут осуществлять с меньшей частотой, то есть, через 12-ти недельные интервалы. Дополнительно, радиологические оценки опухолей также будут осуществлять каждый раз, когда подозревают прогрессирование заболевания (например, симптоматическое истощение), и во время окончания лечения/отмены (если оно не осуществлено в течение предшествующих 6 недель). Если радиологическая визуализация показывает PD, то оценку опухоли следует повторять по меньшей мере ≥4 недель позже для подтверждения PD. Сканирования с помощью компьютерной томографии головного мозга (СТ) или магнитно-резонансной томографии (MRI) необходимы на момент включения в исследование и если предполагают метастазирование в головной мозг. Сканирование костей скелета (остеосцинтиграфия) или позитронно-эмиссионная томография 18фтордеоксиглюкозы/СТ (18FDG-PET/CT) необходимы на момент включения в исследование, затем каждые 16 недель, только если метастазы в кости присутствуют на момент включения в исследование. В других случаях, визуализация костей необходима только в тех ситуациях, если предполагаются новые метастазы в костях. Визуализация костей также необходима во время подтверждения CR для пациентов, которые имели метастазы в кости.

Оценки Фармакокинетики/Иммуногенности: Образцы ПК/иммуногенности будут отобраны.

Оценки поисковых биомаркеров: Ключевой задачей анализов биомаркеров, которую осуществляют в настоящем исследовании, является исследование биомаркеров, которые потенциально прогностические для преимущества лечения с применением комбинации ДНК-ПКи и авелумаба. Дополнительно, исследования биомаркеров биообразцов опухоли и крови будут осуществлять для помощи дальнейшего понимания механизма действия ДНК-ПКи в комбинации с авелумабом, а также потенциальных механизмов резистентности. Биообразцы опухоли из архивных проб ткани и метастатических поражений будут исследовать для анализа кандидатных маркеров ДНК, РНК или белков, или релевантных особенностей маркеров, для их способности идентифицировать тех пациентов, которые наиболее вероятно получат преимущества от лечения с применением исследуемых лекарственных средств. Маркеры, которые могут анализировать, включают, но не ограничиваясь только ими, количественное определение PD-L1 экспрессии инфильтрирующих опухоли CD8+ Т лимфоцитов и последовательности гена рецептора Т-клеток. Необязательные биопсии опухолей, полученные при прогрессировании заболевания, будут использоваться для исследования приобретенных механизмов резистентности. Подходящими являются только образцы пункционной биопсии или эксцизионной биопсии, или резекционные образцы.

Периферическая кровь: Пробы будут храниться в виде цельной крови, сыворотки и плазмы в биобанке для оценки поисковых биомаркеров, если это не запрещено местными нормативными актами или решением Институционального наблюдательного совета или Комитета по этике. Образцы можно использовать для идентификации или характеристики маркеров клеток, ДНК, РНК или белков, которые известны или предполагаются релевантными для механизмов действия, или развития резистентности на ДНК-ПКи и авелумаб. Они включают биомаркеры, которые могут помощью идентифицировать тех пациентов, которые могут получить предпочтительное преимущество от лечения с применением авелумаба в комбинации с ДНК-ПКи, включая, но не ограничиваясь только ими, биомаркеры, связанные с противоопухолевым иммунным ответом или модуляцией мишени, такие как растворимый VEGF-A, IL-8, IFNγ и/или тканевой FoxP3, PD-1 и PD-L2. Биообразцы следует отбирать до введения дозы и в одно и то же время в качестве ПК образцов во всех возможных случаях.

--->

ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> МЕРК ПАТЕНТ ГМБХ,

ПФАЙЗЕР ИНК.

<120> КОМБИНАЦИЯ АНТИ-PD-L1 АНТИТЕЛА И ИНГИБИТОРА ДНК-ПК ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ

ЗЛОКАЧЕСТВЕННОГО НОВООБРАЗОВАНИЯ

<130> P 17/087

<160> 9

<170> PatentIn версия 3.5

<210> 1

<211> 5

<212> белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> из библиотеки Fab человека

<400> 1

Ser Tyr Ile Met Met

1 5

<210> 2

<211> 17

<212> белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> из библиотеки Fab человека

<400> 2

Ser Ile Tyr Pro Ser Gly Gly Ile Thr Phe Tyr Ala Asp Thr Val Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 3

<211> 11

<212> белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> из библиотеки Fab человека

<400> 3

Ile Lys Leu Gly Thr Val Thr Thr Val Asp Tyr

1 5 10

<210> 4 2

<211> 14

<212> белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> из библиотеки Fab человека

<400> 4

Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser

1 5 10

<210> 5

<211> 7

<212> белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> из библиотеки Fab человека

<400> 5

Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser

1 5

<210> 6

<211> 10

<212> белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> из библиотеки Fab человека

<400> 6

Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Arg Val

1 5 10

<210> 7

<211> 450

<212> белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> из библиотеки Fab человека

<400> 7

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Ile Met Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45 3

Ser Ser Ile Tyr Pro Ser Gly Gly Ile Thr Phe Tyr Ala Asp Thr Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ile Lys Leu Gly Thr Val Thr Thr Val Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val

115 120 125

Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala

130 135 140

Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser

145 150 155 160

Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val

165 170 175

Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro

180 185 190

Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys

195 200 205

Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp

210 215 220

Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly

225 230 235 240

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile

245 250 255

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu

260 265 270

Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His

275 280 285 4

Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg

290 295 300

Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys

305 310 315 320

Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu

325 330 335

Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr

340 345 350

Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu

355 360 365

Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp

370 375 380

Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val

385 390 395 400

Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp

405 410 415

Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His

420 425 430

Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro

435 440 445

Gly Lys

450

<210> 8

<211> 449

<212> белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> из библиотеки Fab человека

<400> 8

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30 5

Ile Met Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Ser Ile Tyr Pro Ser Gly Gly Ile Thr Phe Tyr Ala Asp Thr Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ile Lys Leu Gly Thr Val Thr Thr Val Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val

115 120 125

Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala

130 135 140

Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser

145 150 155 160

Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val

165 170 175

Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro

180 185 190

Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys

195 200 205

Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp

210 215 220

Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly

225 230 235 240

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile

245 250 255

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu

260 265 270 6

Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His

275 280 285

Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg

290 295 300

Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys

305 310 315 320

Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu

325 330 335

Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr

340 345 350

Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu

355 360 365

Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp

370 375 380

Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val

385 390 395 400

Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp

405 410 415

Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His

420 425 430

Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro

435 440 445

Gly

<210> 9

<211> 216

<212> белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> из библиотеки Fab человека

<400> 9

Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln

1 5 10 15 7

Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr

20 25 30

Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu

35 40 45

Met Ile Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu

65 70 75 80

Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser

85 90 95

Ser Thr Arg Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly Gln

100 105 110

Pro Lys Ala Asn Pro Thr Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu

115 120 125

Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr

130 135 140

Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Gly Ser Pro Val Lys

145 150 155 160

Ala Gly Val Glu Thr Thr Lys Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr

165 170 175

Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His

180 185 190

Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys

195 200 205

Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser

210 215

<---

1. Способ лечения злокачественного новообразования у субъекта, который в этом нуждается, включающий введение субъекту анти-PD-L1 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, и ингибитора ДНК-ПК, где анти-PDL1 антитело содержит тяжелую цепь, которая содержит три гипервариабельных участка, имеющих аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и легкую цепь, которая содержит три гипервариабельных участка, имеющих аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 4, 5 и 6, где ингибитор ДНК-ПК представляет собой (S)-[2-хлор-4-фтор-5-(7-морфолин-4-ил-хиназолин-4-ил)-фенил]-(6-метоксипиридазин-3-ил)-метанол или его фармацевтически приемлемую соль.

2. Способ по п. 1, где анти-PD-L1 антитело содержит тяжелую цепь, имеющую аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 7 или 8, и легкую цепь, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9.

3. Способ по п. 1, где анти-PD-L1 антитело представляет собой авелумаб.

4. Способ по п. 1, где злокачественное новообразование выбирают из злокачественного новообразования легких, головы и шеи, ободочной кишки, нейроэндокринной системы, мезенхимы, молочной железы, яичников, поджелудочной железы, и их гистологических подтипов, пищевода, эндометрия, предстательной железы, шейки матки, головного мозга и мочевого пузыря, предпочтительно немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), плоскоклеточной карциномы головы и шеи (SCCHN) или рака ободочной и прямой кишки (CRC).

5. Способ по п. 1, где анти-PD-L1 антитело и ингибитор ДНК-ПК вводят в терапии первой линии злокачественного новообразования.

6. Способ по п. 1, где субъекта подвергают по меньшей мере одному циклу предшествующей противораковой терапии; где, необязательно, злокачественное новообразование является резистентным или становится резистентным к предшествующей терапии.

7. Способ по п. 6, где злокачественное новообразование выбирают из группы, включающей леченный ранее рецидивирующий метастатический NSCLC, неоперабельный местнораспространенный NSCLC, SCLC, непригодный для системного лечения, леченный ранее рецидивирующий или метастатический SCCHN, рекуррентный SCCHN, пригодный для повторного облучения, и леченный ранее метастатический рак ободочной и прямой кишки (mCRC) с нестабильным низким микросателлитным статусом (MSI-L) или со стабильным микросателлитным статусом (MSS).

8. Способ по п. 1, который дополнительно включает проведение химиотерапии (CT), лучевой терапии (RT), или химиотерапии и лучевой терапии (CRT) субъекту.

9. Способ по п. 8, где химиотерапию выбирают из группы, включающей этопозид, доксорубицин, топотекан, иринотекан, фторурацил, препарат платины, антрациклин и их комбинацию.

10. Способ по п. 8, в котором осуществляют лучевую терапию; где, необязательно, лучевая терапия включает приблизительно 35-70 Гр / 20-35 фракций.

11. Способ по п. 1, который включает основную фазу, необязательно с последующей поддерживающей фазой после завершения основной фазы.

12. Способ по п. 11, где анти-PD-L1 антитело и ингибитор ДНК-ПК вводят одновременно либо в основной или поддерживающей фазе и необязательно неодновременно в другой фазе, или анти-PD-L1 антитело и ингибитор ДНК-ПК вводят неодновременно в основной и поддерживающей фазе.

13. Способ по п. 12, где основная фаза включает введение ингибитора ДНК-ПК отдельно или одновременно с одной или несколькими терапиями, выбранными из группы анти-PD-L1 антитела, химиотерапии и лучевой терапии; где, необязательно, поддерживающая фаза включает введение анти-PD-L1 антитела отдельно или одновременно с ингибитором ДНК-ПК, или ни одним из анти-PD-L1 антитела, и ингибитора ДНК-ПК.

14. Способ по пп. 7, 9 и 13, где основная фаза включает одновременное введение анти-PD-L1 антитела, ингибитора ДНК-ПК, иринотекана и фторурацила, и где злокачественное новообразование представляет собой mCRC MSI-L.

15. Способ по пп. 4 и 13, где основная фаза включает одновременное введение ингибитора ДНК-ПК и лучевой терапии или химиолучевой терапии, где поддерживающая фаза включает введение анти-PD-L1 антитела после завершения основной фазы, и где злокачественное новообразование представляет собой NSCLC или SCCHN.

16. Способ по пп. 4 и 13, где основная фаза включает одновременное введение анти-PD-L1 антитела, ингибитора ДНК-ПК и лучевую терапию, и где злокачественное новообразование представляет собой NSCLC или SCCHN.

17. Фармацевтическая композиция для лечения злокачественных новообразований, содержащая анти-PD-L1 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, ингибитор ДНК-ПК, который представляет собой (S)-[2-хлор-4-фтор-5-(7-морфолин-4-ил-хиназолин-4-ил)-фенил]-(6-метоксипиридазин-3-ил)-метанол или его фармацевтически приемлемую соль, и по меньшей мере фармацевтически приемлемый наполнитель или адъювант, где анти-PD-L1 антитело содержит тяжелую цепь, которая содержит три гипервариабельных участка, имеющих аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и легкую цепь, которая содержит три гипервариабельных участка, имеющих аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 4, 5 и 6, и где действующие вещества содержатся в эффективных количествах.

18. Комбинация для лечения злокачественных новообразований, содержащая анти-PD-L1 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, и ингибитор ДНК-ПК, который представляет собой (S)-[2-хлор-4-фтор-5-(7-морфолин-4-ил-хиназолин-4-ил)-фенил]-(6-метоксипиридазин-3-ил)-метанол или его фармацевтически приемлемую соль, где анти-PD-L1 антитело содержит тяжелую цепь, которая содержит три гипервариабельных участка, имеющих аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и легкую цепь, которая содержит три гипервариабельных участка, имеющих аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 4, 5 и 6, и где анти-PD-L1 антитело и ингибитор ДНК-ПК вводятся в одной или раздельных единичных дозированных формах.

19. Применение комбинации в качестве лекарственного средства для лечения злокачественных новообразований, включающей анти-PD-L1 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, и ингибитор ДНК-ПК, который представляет собой (S)-[2-хлор-4-фтор-5-(7-морфолин-4-ил-хиназолин-4-ил)-фенил]-(6-метоксипиридазин-3-ил)-метанол или его фармацевтически приемлемую соль, где анти-PD-L1 антитело содержит тяжелую цепь, которая содержит три гипервариабельных участка, имеющих аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и легкую цепь, которая содержит три гипервариабельных участка, имеющих аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 4, 5 и 6.

20. Набор для лечения злокачественных новообразований, содержащий анти-PDL1 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, и ингибитор ДНК-ПК, который представляет собой (S)-[2-хлор-4-фтор-5-(7-морфолин-4-ил-хиназолин-4-ил)-фенил]-(6-метоксипиридазин-3-ил)-метанол или его фармацевтически приемлемую соль, и листок-вкладыш, включающий инструкции для применения анти-PD-L1 антитела и ингибитора ДНК-ПК для лечения или задержки прогрессирования злокачественного новообразования у субъекта, где анти-PD-L1 антитело содержит тяжелую цепь, которая содержит три гипервариабельных участка, имеющих аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и легкую цепь, которая содержит три гипервариабельных участка, имеющих аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 4, 5 и 6; где, необязательно, набор содержит первый контейнер, второй контейнер и листок-вкладыш, где первый контейнер содержит по меньшей мере одну дозу лекарственного средства, включающего анти-PD-L1 антитело, второй контейнер содержит по меньшей мере одну дозу лекарственного средства, включающего ингибитор ДНК-ПК, и листок-вкладыш содержит инструкции для лечения субъекта от злокачественного новообразования с использованием лекарственных средств; где, также необязательно, инструкции указывают, что лекарственные средства предназначены для применения для лечения субъекта, имеющего злокачественное новообразование, которое тестировано как положительное относительно PD-L1 экспрессии с помощью иммуногистохимического исследования.