Способ получения препарата хищных грибов

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

Союз Советских

Социалистических

Республик

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Зависимое от авт. свидетельства №

Заявлено 02.XI.1970 (№ 1487256/30-15) с присоединением заявки ¹

Приоритет

Опубликовано 09.Х.1972. Бюллетень № 30

Дата опубликования описания 15.XI.1972

М. Кл. А 01п 15i00

Комитет по делам кзсбретений и открытий при Совете Министров вопр

УДК 632.937.3 (088.8) Авторы изобретения

В. С. Косовец, Н. В. Мацкевич, В. Б. Удалова, А. М. Боровкова, P. М. Рыкалева, В. И. Белокурская и Ю. А. Шлепетене

Всесоюзный ордена Трудового Красного Знамени институт гельминтологии им. К. И, Скрябина

Заявитель

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА ХИЩНЫХ ГРИБОВ

Изобретение относится к технологии производства препарата нематофаговых хищных грибов.

Известные способы для достижения этой цели предусматривают использование в качесгве питательного субстрата отжимов сахарного тростника, пшеничных отрубей, древесных опилок, овсяной и ячменной соломы, листового перегноя, навоза, отходов текстильной промышленности, земляного ореха, овсяной шелухи и других органических материалов.

Известен также способ, при котором для выращивания хищных грибов применяют зерно различных культур, всевозможные органические субстраты и свежий навоз. При использовании навоза как питательного субстрата метод выращивания этих грибов заключается в том, что исходную (в пробирках) и маточную (в колбах) культуры, отобранные по признаку высокой эффективности в уничтожении нематод, воспроизводят на агаризованной среде, а сам препарат — на стерилизованном навозе.

Однако при выращивании препарата хищных грибов этим способом навоз в свежем виде недостаточно богат азотом и углеродом.

Содержание азота в нем не превышает 3,5 "/о (на сухой вес), который представлен, в основном, различными минеральными соединениями. Для питания же хищных грибов нужен органический азот в виде белка. Углеводы как источник углерода в свежем навозе представлены в основном клетчаткой, которая не разлагается или трудно разлагается хищными грибами. В связи с обедненностью питательными веществами хищные грибы недостаточно интенсивно растут на стерилизованном свежем навозе.

Для промежуточного размножения (маточ10 ная культура) по существующей методике используют агаровую среду, которая позволяет утилизировать только поверхностный слой, но не объем субстрата.

Предлагается способ получения препарата

15 хищHhIx грибов, при котором для выращива-ния маточной культуры используют разваренное зерно злаков, например пшеницы. С целью получения более активного препарата н снижения его стоимости в разваренное зерно зла20 ков добавляют сухой размельченный торф,- а последующее культивирование грибов ведут на промытом в воде и растворе щелочи компосте, приготовленном нз конского навоза и соломы с добавлением азотных и фосфорных

25 удобрений.

Исходные (пробнрочные) культуры хищных грибов выращивают и сохраняют на пептоннокукурузном агаре, %: глюкоза 1, NBC1 0,5, СаСОз 0,05, пептон 0,5, кукурузный экстракт

30 0,5, агар — агар 2. !

353697

Применение в качестве питательного субстрата для маточной культуры разваренного зерна пшенищы позволяет использовать весь объем зерна, и следовательно, получать из одной емкости большое количество спор, необходимых для инокуляции.

Таблчца 1

Максимальное количество цнст на 1 см корня, Вес клубней с одного куста, %

Сорт

Характеристика препарата

Название опыта картофеля

Кг

Кг

132,2

105,6

39,1

73,1

101,8

79,6

92,9

92,9

88,7

101,9

115,8

125,6

191,2

197,2

222,6

188,0

Вегетационный опыт М 1

Пнрмунес

Антинема

Штамм 11-к

11

Штамм XIX 4/27

Штамм XIX 4/27

Штамм 11-к

Вегетационный опыт М 2

Полевой опыт

Пир мунес

IIр н м еч а н не. К вЂ” контроль без внесения препарата, Кг — контроль с внесением автоклавнрованного препаратаа.

Маточный материал воспроизводят в конических колбах на субстрате из разваренного зерна, которое приготовляют следующим способом: на 1 кг целого пшеничного зерна добавляют 80 г сухого размельченного торфа, 70 г 5 технического мела, 1,15 л водопроводной воды.

Зерно варят под текучим паром в течение

2 час с перемешиванием через каждые 30 мин.

Сваренное зерно засыпают в конические колбы на половину их объема, закрывают ватными 10 пробками, которые обертывают пергаментной бумагой. Колбы с зерном стерилизуют при

1 ать 1 час. После этого зерно встряхивают и используют по назначению. Приготовленный таким способом субстрат имеет рН 7,2 — 7,4. 15

Отдельные зерна не слипаются, и хищные грибы на этом субстрате растут относительно быстро, осваивая весь его объем.

Для приготовления легко усваемого гриба- 20 ми субстрата из конского навоза необходимо иметь исходную смесь с содержанием 60 об. о/о соломы озимых зерновых культур и 40 об. % фекалий лошадей, которую укладывают в бурт. При укладке в бурт на 1 мз добавляют 25 следующие компоненты (по действующему началу), кг: азот 0,5, РгОв 0,25, известь или мел

6 — 7. Смесь увлажняют водой до полного насыщения. Когда температура в бурте на глубине 30 — 40 сн от поверхности достигнет 40 — ": 30

45 С, производят первое перетряхивание. Последующие два перетряхивания производят с интервалом в четверо суток. На третий день после третьего перетряхивания компост промывают в воде, а затем в щелочном растворе, 35 рН 7,9 — 8,2. После промывания из компоста под прессом удаляют избыточную влагу. Затем компост дробят и подсушивают до 58—

62%. При необходимости дробление повторяют. В конце обработки субстрат имеет рН 7,4 40 и следующий состав, %. азот (белковый) не менее 2,5, азот (общий) 4,5 — 5, углерод (на сухой вес) около 85. Отношение азот: углерод

1: 20.

Инокуляцию маточных колб проводят споровой суспензией из расчета 500 — 750 тыс. конидий (в 30 нл воды) на 1 кг зернового субстрата. Инокуляцию конечных емкостей—

2,0 — 2,1 млн конидий (в 20 лл воды) на 1 кг субстрата из конского навоза, который набивают в банки объемом 2 л из расчета 750—

800 г. Для убодства инокуляции в центре массы субстрата делают глубокий канал (прививочное отверстие). Банку закрывают металлической крышечкой с отверстием, куда вставляют ватную пробку. Затем банки с питательным субстратом стерилизуют в автоклаве 2 час при

2,5 ати. Охлажденные банки используют для инокуляции.

Хищные грибы выращивают при 24 С. В конце выращивания (седьмой-десятый день после инокуляции) банки помещают в условия рассеяннного солнечного света для усиления спорообразования. Оценку качества препарата хищных грибов производят по существующим методам лабораторной оценки.

При апробации препарата хищных грибов, выращенных предлагаемым способом, получены положительные результаты на Литовском опорном пункте Всесоюзного института гельминтологии им. К. И. Скрябина в опытах с картофельной нематодой (табл. 1), в условиях закрытого грунта в совхозе «Тепличный» и в Главном ботаническом саду АН СССР— с галловой нематодой огурцов (табл. 2 и 3).

Таким образом, предлагаемый способ дает возможность получать стандартизированный и дешевый питательный субстрат из конского навоза, который обеспечивает интенсивный рост и спорообразование хищных грибов.

353697

Таблица 2

Интенсивность инвазии, оо

Экстенсивность инвазип, среднеарифметические значения (М + 5х) галлов на одно растение минимальные и максимальные значения к-ва галлов на одно растение

Варианты опыта

1 — 5

52,8

Живой препарат штамма XIX 4/27

Живой препарат штамма XIX

1 — 9

75,9

Простерилизованный препарат в той же дозе

Контроль (без внесения препарата) 1 — 12

93,4

3 — 12

100,0

Таблица 3

Предмет изобретения

Среднее число галлов на одно растение, Доза препарата от веса почвы, %

Штамм

Кг

II-к

XIX 4/27

II-к

XIX 4/27

26,4

7,6

5,2

44,1

5

23,1

195,8

Составитель В. Косовец

Техред А. Камышникова

Редактор Б. Пинчук

Корректор Л Царькова

Заказ 3756/4 Изд. № 1492 Тираж 406 Подписное

ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР

Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2

3,6 0,22

4,2 0,36

5,2 0,55

7,2 0,68

Способ получения прспарата кпщныч грибов, включающий и выращивание в маточной

5 культуре, содержащей разваренное зерно злаков, например пшеницы, от,гпчающийся тем, что, с целью получения более активного препарата и снижения его стоимости, в разваренное зерно добавляют сукой размсльчеипый

10 торф, а последующее культивирование грибов ведут на промытом в воде и растворе щелочи компосте, приготовленном из конского навоза и соломы с добавлением азотнык и фосфорными удобрений.