Способ диагностики лептоспироза
Союз Советских
Социалистииеских
Республик
ОПИСАНИЯ
ИЗОБРЕтен Ия к втоеском свидетельству
Зависимое от авт. свидетельства №вЂ”
Заявлено 04.Vill.1969 (№ 1355816!30-15) с ир!!соедине>ц!еа! заявки ¹â€”
При<>ритет—
Он бликовано 18.IV.1973. Бюллетень № 19
М.Кл, G Oln 33/16
А 61k 23 00
Государственный комитет
Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий
УДК 616.9.986.7 (088.8) Дата опубликования описания 4.IX.1973
Авторы !!зобрсген! я
Н. Г. Балашов и В. Н, Родина
Заявитель
СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ЛЕПТОСПИРОЗА
Изобретение относится к способам диагностики заболеваний сельскохозяйственных >кивотных, например лептоспироза.
Известны способы диагностики лептоспирозя у животных реакцией мш<роагглютинации лн- 5 зиса. Реакцию проводят с сывороткой крови, взятой из яремной вены.
Однако при взятии крови животные могут быть травмированы и на эт.. операцию затрачивают много времени. 10
Предложенный способ /II!агностики лептоспироза у животных реакцией микроагглютинации лизиса отличается тем, что реакцию микроагглютинации лизиса осущсствля!от с плазмой спермы животных, 15
В сперме зараженных животных появляются агглютинины и лизины.
Для реакции применяют нельну!о свежеполученную сперму, которую для отделения спермиев от плазмы ставят в холодильник при 2 — 5 20 не менее чем па 3 час или цептрифугируют в течение 10 — 15 !тин. при 3,5 — -4 тыс. об|!тин. Берут 0,2 лл верхнего слоя центрифугата или отстоявшейся плазмы спермы и добавляют к
1,8 .ил физиологического раствора, делают пос- 25 ледовательные разведения 1;20, 1:40, 1:80 1:160, 1:320 и т. д.
Для реакции берут по 0,1 лтл (2 капли) каждого разведения плазмы и добавляют 0,1 «ял атигена. Антигепом служит шести — десятиднев- 30 ная культура лептоспир (не менее 50 лептоспир в поле зрения микроскопа) с хорошим ростом без феномена самоагглютинации. В контрольну!о пробирку добавляют по 0,1 >!тл антигена и физиологического раствора. После добавления янтигена пробирки осторожно встряхивают и ставят в термостат при 35,5
0,5 ня 2 час.
Результаты реакц!!!! уч!!тывают под микроскопом в те.!ном поле. Из каждой пробирки готовят «раздавленную каплю» и рассматривают се под микроскопом. Устанавливают фе номен лизиса и агглютинации по наличию
«паучков» (склеиванию лептоспир между собой по 3 — 10 и более экземпляров) .
Для изучения динамики титра в сперме по сравнению с сывороткой крови 13 взрослых кроликов зара>кают четырехсуточной культурой штамма 1 роп!опа «Манихино» с концентрацией 80 — 90 лептоспир в поле зрения микроскопа. Культуру вводят подкожно и
B0i тр!!брюшт!!IIIQ (10 — 40 лтл !<3>I<30>i KoIlTp0ëüíüï|è являются кролики, которым вводят внутрибрюшннно и подкожно по 20 >ттл среды с добавлением сыворотки крови для выращивания лептоспир. Наблюдение ведут пос:!с заражения на протя>!<ен!!I! полутора лет, одновременно исследуют по реакции микроаггнотиняции лизиса титр антител в сыворотке крови и плазме спермы. Интервалы исследован!!й в первые два месяца 10 дней, далее 378765 I1mp aemumen 163840 81 У2 204 .0 24 5 120 256, 2В 20 .38 4У 66 7У У5 100 11 3 12.3 163 113У 746 Реи тспг zapanveuuu Составитель P. Махиюк Техред Л. Грачева Корректор T. Гревцова Редактор T. Шагова Заказ 1930 Изд. № 491 Тираж 755 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Мгшистров СССР по делам изобретений и открытий Москва, 1К-35, Раушская наб., д. 4/5 Мытищинская типография.30 дней. Антитела в плазме спермы. появля1отся почти одновременно с антителами в сыворотке крови. На двадцатый день после заражения титр антител в сыворотке крови и плазме спермы 1:2560 — 1:44580. Титр в крови и сперме и тридцать пятому дню достигали максимума (в разведении до 178.240), который удерживался до пятидесятого — пятьдесят пятого дня. Затем как в сыворотке крови, так и в плазме спермы титр антител уменьшался. У одного из кроликов десять месяцев после заражения титр антител в сыворотке крови и плазме спермы снижается до 1:320, а через двенадцать месяцев — в сыворотке крови он был равен 1:40, а в плазме спермы — отрицательный. У друг11х опытных животьп1х наблюдают расхожд1-ние титра 1 — 2 разведения и сторону уменьшения его в плазме спсрмы по сравнению с сывороткой крови. Д1шамика накопления и угасания титра 5 агглютининов в сыворотке кров11 и плазме спермы представлена на диаграмме (см. чертеж: — титр сыворотки крови,- — титр плазмы спермы). Предмет изобретения Способ диагностики лептоспироза реакцией микроагглютинации лизиса, от.111 ча1огчийса тем, что, с целью исключения травмирования животных при взятии крови 15 сокращения 15 времени на установление диагноза, реакцию микроагглютинации лизиса осуществляют. с плазмой спермы животных.
