Способ очистки фенольных соединений

 

О П И СА Н И Е

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик

Зависимое от авт, свидетельства №

Заявлено 13.Х11,1971 (№ 1723311i23-4) с присоединением заявки №

Приоритет

Опубликовано 11.Ч11.1973. Бюллетень № 30

Дата опубликования описания 28.XII.1973

М, Кл. С 07с1 7/20

Гасударственный иомитет

Совета Министров СССР оо делам изобретений и открытий

УДК 547.978.4.05 (088.8) Авторы изобретения

И. И. Мониава, К. Г. Микаберидзе, Э. П. Кемертелидзе, В. С. Асатиани и М. А. Бокучава

Институт фармакохимии им. И. Г. Кутателадзе

Заявитель

СПОСОБ ОЧИСТКИ ФЕНОЛЪНЫХ СОЕДИНЕНИЙ

Изобретение относится к новому способу очистки фенольных соединений, на пример катехинов или флавоноидов, обладающих широким спектром терапевтического действия.

Известен способ очистки флавоноидов, заключающийся в том, что экстракт суммы фл авоноидов из растительного сырья в виде бензольного раствора наносят на водонасыщенный сефадекс, элюируют сумму флавоноидов этилацетатом и разделяют ее на том же сефадексе с помощью органических растворителей с нарастающей полярностью. Согласно известному способу для очистки фенольных соединений используется дорогостоящий адсорбент неотечественсного производства.

Цель изобретения — упрощение процесса очистки фенольных соединений.

Предлагается применять для очистки феlioJlbllblx соединений вместо дрогостоящего сефадекса более доступный и дешевый адсорбент — крахмал в виде манной крупы.

Для очистки фенольных соединений предлагаемым способом используют способность крахмала набухать в воде подобно гельадсорбентам. Обычная крахмальная мука для этих целей не пригодна, так как ее зерна слишком мелки, при набухачии легко слипаются и не обладают проницаемостью. Манная крупа, образующаяся при сортовом помоле пшеницы, состоит из 84% крахмала, имеет довольно крупные зерна, фактически представляет собой крахмал в другом агрегатном состоянии и является доступным и удобным адсорбентом для очистки катехинов или флавоноидов.

5 В витамине Р, получен ном из сортового материала чайного растения, содержание действующих веществ — комплекса катехинов— составляет 37%, а в желтом красителей чая—

25 — 28%.

10 Чтобы повысить активность применяемого в медицине витамина P и получить комплекс катехинов из желтого красителя чая, необходимо очистить их от сопутствующих веществ.

Согласно предлагаемому апосооу манная

15 крупа после набухания в водноМ растворе объекта переносится на колонку. Катехины илн флавоноиды из колонки элюируются этилацетатом, а сопутствующие вещества остаются на а дс о р бе нте.

20 В случае витамина P до выделения катехинов колонку для удаления хлорофилла промывают неполярн ыми,растворителями.

На фиг. 1 — 3 приведены результаты бумажно-хроматографического анализа с использо25 ванием системы растворителей и-бутанол-ледяная уксусная кислота — вода (40: 12: 28).

На хроматограммах обозначены пятна только катехинов. Как в исходных объектах I, так и в полученных продуктах 2, проявляются

3Q одни и те же катехины или флавоноиды. Этот

Тираж 523

Подписное

Изд. № 1726

Заказ 330!j9

Типография, пр. Сапунова, 2 факт указывает на то, что при применении предлагаемого способа очистки фенольных соединений из колонки элюируется весь комплекс катехинов или флавоноидов, находящихся в препарате, а на адсорбенте остаются балластные вещества.

Под балластными веществами подразумеваются все содержащиеся в препарате соединения некатехи новой природы, хлорофилл, белковые.вещества, сахара и др. 10

С целью установления состава сопутствующих веществ проводили идентификацию с помощью бумажно-хроматографического анализа полученной чистой суммы катехинов и водно-спиртовых извлечений использованных адсорбентов, Хлорофилл на хроматограммах проявляется визуально, белки и аминокислоты обнаруживаются 0,5%-ным спиртовым раствором нингидрина, сахара — анилипфталатом или и-нафтолом, флавоноиды — раствором едкой щелочи, катехины — 1%-ным раствором винилина в концентрированной НС1.

Пример 1. Сумма катехинов из торгового препарата витамина P.

100 г витамина P растворяют в 250 м.г во- 25 ды, перемешивают с 650 г манной крупы и оставляют при периодическом перемешивании на 0,5 час. Набухший в растворе объекта адсорбент переносят на колонку (d — 7 см) и промывают 1 л бензола, После этого катехи- 30 ны из нее элюируют этилацетатом. Элюат сгущают, катехины осаждают хлороформом и высушивают. Получается бледно-сероватого цвета аморфный порошок в количестве 33 г, содер>кащий весь комплекс катехинов, нахо- 35 дящихся в исходном сырье (фиг. 1). Таким образом выход суммы катехинов составляет

85%. Чистота полученного продукта 94,7%.

Коэффициент чистоты 4,4.

Пример 2. Сумма катехинов из желтого 40 красителя чая.

100 г желтого красителя чая растворяют в

250 мл воды, перемешивают с 650 г манной крупы и оставляют при периодическом перемешивании н а 0,5 час. Набухший в растворе объекта адсорбент переносят на колонку (d — 7 см) и элюацню катехинов .проводят этилацетатом. Элюат сгущают и катехины осаждагот хлороформом. Выпавшую при этом сумму катехинов отделяют с)>ильтрацией и высуигивают. Получается белый аморфный порошок в количестве 24 г, в котором находится весь комплекс катехинов, содержащихся в исхочном сырье (фиг. 2), с чистотой 94%. Примесью являются флавоноиды. Коэффициент чистоты 4,25.

Таким образом из желтого красител я чая получают примерно 24% суммы катехинов, что соответствует 96% от содер>кащегося в исходном сырье комплекса катехинов.

Пример 3. Сумма флавоноидов из цветов Onobrychis kachetica — экспарцета кахетинского.

300 г измельченных цветов О. Kashetica экстрагируют 80%-ным спиртом. Из экстракта спирт отгоняют, водный остаток перемешивают с 800 г манной крупы и оставляют на

0,5 час. Набухший в растворе объекта крахмал переносят на колонку (d — 7 см) и элюирование флавоноидов из колонки проводят таким >ке образом, как в случае очистки комплекса катехинов желтого красителя чая.

Элюат, который содержит очищенную сумму флавоноидов, сгущают, флавоноиды осаждают четыреххлористым углеродом. Осадок отфильтровывают и высушивают под вакуумом.

При этом получают бледно-желтый аморфный порошок, в количестве 9,1 г, содср>кащий всю сумму флавоноидов О. Kachetica в чистом виде (фиг. 3) при содержании флавоноидов в растительном сырье 3,5%.

Предмет изобретения

Способ очистки фенольных соединений, например катехинов или <)>лавоноидов, на адсорбенте, г>т.гичаюгг4ггггся тем, что, с целью упрощения процесса, в качестве адсорбента применяют манную крупу.