Способ определения состояния иммунитета к кори
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕН ИЯ и АВТ©РАЙКОМУ СВИДВТИЛЬСТВУ
"" 435299
Союз Советских
Социалистич1вских
Р@спубпик (61) Зависимое от авт. свидетечьства— (22) Заявлено 01.11.71 (21) 1712515/31-16 с присоединением заявки №вЂ” (32) Приоритет—
Опубликовано 15.02.74. Бюллетень № 6
Дата опубликования описания 18.09.74 (51) М .С
Гссударстввннв|й камитвт
Свввта Министрав СССР па двлвм изабрвтвний и аткрытий (53) УДК 576.8.077 (088.8) BATg
CQ$ "(ô 37lg3 (72) Авторы изобретения
Л. М. Трубина, 3. Ф. Яковенко и Е. М. Захарченко
Одесский научно-исследовательский институт вирусологии и эпидемиологии им. И. И. Мечникова (71) Заявитель (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОСТОЯНИЯ
ИММУНИТЕТА К КОРИ
Изобретение относится к области медицины и касается способов .определения состояния иммунитета к кори.
Известен способ определения состояния иммунитета к кори путем определения титра вирусспецифических антител в крови привитых. Однако наличие антител в крови не отражает истинного состояния иммунитета к кори.
Целью предлагаемого способа является повышение продолжительности индикации состояния иммунитета.
Поставленная цель достигается тем, что из крови выделяют лейкоциты, воздействуют на них гомологичным вирусом и определяют их способность синтезировать интерферон.
Для получения лейкоцитарного интерферона готовят культуру или взвесь лейкоцитов. Из прокола пальца в стерильную пробирку, содержащую 0,2 — 0,3 мл раствора гепарика (400 — 500 ед/мл), собирают
0,5 — 0,7 ял крови. После отстаивания в течение 1 — 1,5 час при комнатной температуре надосадочный слой нлазмы с лейкоцитами переносят в центрифужные пробирки и лейкоциты отделяют от плазмы центрифугирова нием при 1000 об/мин в течение 10 — 12 мин.
Осадок лейкоцитов соединяют с вирусом кори (штамм СССР— 58) из расчета 1 — 5 ТЦД50 вируса на 1 лейкоцит. После полуторачасово2 го контакта при 37 С осадок лейкоцитов ресуспенди руют в питательной среде 199 с 10% бычьей сыворотки и добавляют 3 — 4 капли осадка эритроцитов.
Для приготовления культуры лейкоцитов к полученной взвеси добавляют еще фитогемагглютинин плп солевой экстрат фасоли.
Содержимое флаконов встряхивают сразу же после соединения всех ингредиентов, а за10 тем черз 30 янн, 24, 48 и 72 час инкубирования при 37 С.
На третьи сутки пз культуры или взвеси лейкоцитов выделяют жидкую фазу, обрабатывают ее 40 /o- but раствором соляной кислоis ты до рН 2,0 — 2,5, а через 1 — 3 суток восстанавливают рН до 7,0 — 7,3 с помощью 40%-ного раствора едкого патра.
Для титрования интерферона двукратные разведения его по 0,5 л|л разливают в пеницил20 линовые флаконы с монослоем клеток рН или первичных фибробластов человека, посеянных за 3 суток до начала тптрования в объеме
1,5 лил по 100 — 150 тыс. клеток. Через 6 час инкубации интерферон сливают и в каждый
25 флакон вносят по 1,5 л«л поддерживающей среды, содержащей в 1,5 ял вирус осповакцины в дозе, которая через 24 час на монослое клеток образует от 30 до 60 бляшек. Через
24 час среду пз флаконов сливают, а моноs0 слой окрашивают фуксином Циля в разведе415299
Предмет изобретения
Составитель С. Щенева
Тскред Г. Васильева
Корректор М. Лейзерман
Редактор Л. Новожилова
Заказ 3070 Изд. М 1288 Тираж 45б Подписное
ЦНИИПИ Государственного комитета Совета М|шпстров CCCP по делам изобретений и открытий
Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Загорская типография
3 нии 1: 2 — 1: 4 в течение 2 — 5 мин, ополаскивают водой и производят подсчет бляшек.
1 рупные и мелкие бляшки отчетливо выступают на красном фоне неповрежденных клеток. За титр интерферона принимают та .егo наибольшее разведение, которое подавляет на
50о/о размножение вируса по сравнению с контрольным и необработанным интерфероном.
Способ бпределения состояния иммунитета к кори путем исследования крови, отличаю.3.. д ойся тем, нто..с целью повышения продолжительности индикации состояния иммунитета, выделяют лейкоциты, воздействуют на них гомологичным вирусом и определяют их способность синтезировать интерферон.
