Способ определение скорости синтеза аденозинтрифосфата (атф) и восстановленной формы никотинамидадениндинуклеотидфосфата (надф.н2) хлоропластами растения на свету

 

й= f .: о-l,; fичесхай о1Маи@тока Й1ЬД

Союз Советских

Социалистических

Уеспублик

ОП КСАН ИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (11) 484838, (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) ЗаЯвлено 13.02.7 (21) 1994979/30-15 (о1Ц лл 1 л А 01 7У00 с присоединением заявки № (23) Приоритет

Государственный комитет

Соаета Миниотроа СССР ао делам изооретений и открытий (43) Опубликовано 25.09.756юллетеиь И 35

Ю (45) Дата опубликования описания 25.11.7 (53) УДК 58.002:$12. .014,44:541 .143 (088.8) (72) Автор . изобретения

Б. В. Корж (П) Заявитель (54 ) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СКОРОСТИ СИНТЕЗА АДЕНОЗИН»:

ТРИФОСФАТА (АТФ) И ВОССТАНОВЛЕННОЙ ФОРМЫ НИКОТИНАМИДАДЕНИНДИНУКЛЕОТИДФОСФАТА (НАДФ H2) .

ХЦ@РОПЛАСТАМИ РАСТЕНИЯ НА СВЕТУ

ЗО (А +А )С вЂ” А + Ц с с в

Изобретение относится к физиологии растений и может быть использовано в исследовательской работе по обшей ботанике и в сельском хозяйстве.

Известны способы измерения скорости синтеза АТФ и НАДФ Н2 хлоропластами растения на свету по бйофизическим показателям, таким,как. биолюминэсценция, фосфоресценция, по изменению рН и т.д.

Однако при выделении хлоропластов из листьев растения хлоропласты повреждаются, а изменение их функциональной активности при этом не.удается, что искажает достоверность полученных экспериментальных данных.

Предлагаемый способ определения ско-. рости синтеза АТФ и НАДФ Н хлороплас2 тами растения на свету позволяет проводить определение на целых, неотделенных от растения листьях, в результате чего повышаются точность и достоверность полученных экспериментальных данных, а также быстрота выполнения определения.

По предлагаемому способу определяют количество фотосинтетически поглощенных ) 2 растением молекул углекислоты (СО ) в условиях импульсного освещения на целых, неотделанных от растения листьях. Длительность световой экспозиции составляет 0,05-0,70 сек и темновой 0,20-0,70 сек.

Существо способа заключается в том, что измеряют истинную скорость поглощения углекислоты (СО ) в условиях имщ пульсного освещения в момент световой экспозиции, для чего бпредепяют скорости наблюдаемого поглощения СО за один период, состоящий из единичной световой и темновой экспозиции, и скорость выделе15 ния СО в короткую темновую экспозицию (не более 1,0 сек). В этом случае, истинные окорости поглощения СО в момент све товой экспозиции определяют по формуле:; где А - истинная скорость поглощения с 2 рб СО, мг дм час, Составитель М Феде ов

РедактоР О Кузнецова ТехРед И.КаРандашова КоРРектоР ll.ÁÐàõíèíà заказ ЯЯ, g g Изд. K JgQ Тираж Подписное

1П-1ИИГ!1! Государственного комитета Совета Министров СССР но делам изобретений и открытий

Москва, 113035, Раушская наб., 4

11реднриятне «Патент», Москва, Г-59, Бережковская наб., 24

А - скорость газообмена СО в темно вую экспозицию, А U<, мг/дм час, т

А - скорость наблюдаемого газообмев на в условиях импульсного освещения, мг/дм час, б и (- длительность единичной темт новой и световой экспозиций, сек.

Если учесть, что при фотосинтетичес ком поглощении одной молекулы СО ис2 пользуется три молекулы АТФ и две мо- !0 лекулы НАДФ Н, то скорость образования

1АТФ определяют как

МАТФ а для НАДФ Н как НАДФ Н

2 где К вЂ” поправка на уровень восстановления СО

А — скорость поглощения CQ2 мк моль. с

Пример. Определение скорости синтеза АТФ и НАДФ.Н хлоропластами лис2 та озимой пшеницы в фазе начала выхода в трубку.

Неотделенный лист. растения помещают в камеру-прищепку, в которой автоматически о поддерживаюв температуру листа 25-26 С, освещенность 30,0-30,6 тыс. лк. Лист подвергают импульсному освещению, длительность световой и темновой экспозиций которого соответственно равна $ -0,43 с сек и t, -0,42 сек с точностью до 2-3%. т

Измеления показывают, что А =3,7,0 мг в .

СО /дм час, А =14,7 мг Со /дм час. 35

Ь т .,корость фотосинтетического восстановления СО в момент световой экспозиции опррреляем по уравнению :

А= 04 14 +17 0 42

+ 17,0 + с е

2, + «4,7 = 62 мгlдм .час или 1428мкмоль СО /дм час, из чего скорость синтеза АТ4 цри К=1 g =За1428=4284

АТФ 2 мкмоль АТФ/дм час. Скорость синтеза НАДФ-Н

Я

НАДФ Н =2 1428=2856 мкмоль ! НАДФ Н /дм час.

Предмет изобретения

1. Способ определения скорости синтеза аденозинтрифосфата { ТФ) и восстановленной формы никотинамидадениндинук». леотидфосфата (НАДФ Н ) хлоропластами

2 растения.на свету по биофизическому ноказателю, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и достоверности определения, а также удобст ва и быстроты вы..олнения, определяют количество фотосинтетически поглощенных растением молекул углекислоты (СО ) в

2 условиях импульсного освещения на целых, неотделенных от растения листьях.

2. Способ по п.1, о т л и ч а ю— шийся тем, что длительность световой экспозиции составляет 0,05-0,70 сек и темновой 0,20-0,70 сек.