Способ консервирования крови

 

Союз Советских, Социалистических

Республик

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

493059

К ПАТЕНТ У (61) Дрполнительвый z патенту(22) Заявлено 03.I0.72 (21) I843330/28-I3 (32) Приоритет OI.Ï.È (3I) I94652 (33) США (51) М. Кл. А 6Ik 27/IO

Государственный комитет

Совета Министров СССР ио делам изобретений и открытий (43) Опубликоваио25, П,75 Бюллетень М 43 (53) УДК 6I5,387-0?2 (088.8) (45) Дата опубликования описания,оЛ28

Иностранцы

Джон Майкл Брэйн и Фред Герман Дейндорфер (США) Иностранная фирма

Р1) »»"" Америнан Хоспитал Саплай Корпорейшн"(США) СПОСОБ КОНСЕРВИРОВАНИЯ КРОВИ (54) 20

Изобретение относится н области гематологии.

Известен способ консервирования нрови путем добавления н крови консервирующих растворов, содержащих антиноагулянты.

Однако такой способ не обеспечивает длительного хранения крови., С целью увеличения срока хранения крови,по предложенному способу добавляют также дигидрооксиацетон в ноличестве 20-I00 мр1 на I л крови.

В качестве антиноагулянтов используют раствор антиноагулянта цитрата декстрозы (АЦД) и раствор антиноагулянта цитрата фосфата денстрозы (ЦЩц). Антиноагулянт цитрата декстрозы является стерильным раствором лимонной ниолоты, цитрата натрия и декстрозы в воде, пригодной для инъекции. Лимонная кислота и цитрат натрия обеспечивают ионы цитрата для предотвращения ноагуляции крови, а денстроза служит главным источником знергии для красных кровяных клеток .

В санкционированных рецептурах АЦД

I,84 г декстрозы предусматривается на 500 мл цельной крови. Денстроэу в атом растворе рассчитывают на основе моногидрата денстрозы, но денстрозу могут добавлять в безводной форме при использования I,68 г безводной денстрозы на 500 мл крови.

Раствор антиноагулянта ЦФДявляется стерильным, пригодным для инъекций водным раствором лимонной . кислоты, цитрата натрия, бифосфата натрия и денстрозы. Лимонная кислота и цитрат натрия обеспечивают ионы цитрата для предотвращения ноагуляции. Декстроза является моногидратной, ее смешивают в количестве, соответствующем I.,79 r на 500 мл крови, или

I,63 г, если ее добавляют в виде

Ф . безводной деь строзы.

При использовании водных антияоагулянтных растворов сахара (а именно

АЦД и U4g для подмешивания я свеже= собранной крови крове-антияоагулянтные растворы хранят под охлаждением, но без замораживания (при температуре

I-6 С). При таяих условиях хранения красные кровяные клетки остаются жизнеспособными до 2I дня.

Дигидрооясиацетон вводят в раствор антикоагулянта первоначально с целы увеличения или поддержания содержания

2,3-дифосфоглицерат (ДФГ) я свежеообранной крови. Янгидрооксиацетон не является токсичным, он безопасен

I для вливания в количествах, необходимых для этой. цели.

Дигидрооксиацетон можно испольэо= вать в комбинации с аденином или пируватом (соль или эфир пировино= градной кислоты) или инозином. Желаемая комбинация добавок включает дигидрооясиацетон с аденином и пиру-. ватом, или дигидрооьсиацетон с аде нином, инозином и пируватом. При таких комбинациях яая уровни АТФ, так и уровни 2,3-дифосфоглицерат могут улучшаться в течение I-21 дня хранения или может увеличиваться время хранения от I .до 3 недель (общее время хранения 28-42 дня при I-6 (;)., Для сбора и консервации крови применяют санкционированные виды контейнеров, стеьлннные или пластмассовые контейнеры.

Раствор антияоагулянта внутри контейнера содержит антикоагулирующее вещество для предотвращения аоегуляции крови и источник сахарной энергии для красных кровяных клеток . Ис= точнияом сахарной энергии красных кровяных клеток является декстроза, ! но могут использовать фруктозу, ман= нозу, галаятозу. Количество применяемой деястрозы может быть I,7-I,9 r на

500 мл крови. Но можно применять де=гидрооясиацетон в достаточной концентрации яая дополнительный или альтернативный источник энергии для красных о кровяных клеток.

Блоя сбора и яонсервации должен содержать 5-IO ммолей дегидрооксиацетона на I л крови. Если контейнер

15 объемом на 500 мл крови, то необходимо вводить раствор антияоагулянта не более. чем 50 мл дегидрооксиацетона .

Там,, где дегидрооясиацетон используется для поддержания 2,3-Д4Т и обеспечивается источник сахарной энергии, то дегидрооясиацетон применяют в количестве 30 мМ на I л ярови.

Но содержание декстрозы или эквивален нopo сахара в gGcTEopB антикоагу30 лянта может снижаться. Поэтому количество сахара ограничивается до 2,0 г моногидрата декстрозы íà I л крови, дегидрооясиацетон вводят в количестве

20-I00 мМ на I л крови.

Дегидрооясиацетон может испольэо40 ваться в комбинации с инодином, пируватом или аденином. Подходящие количества этих веществ нриведены в таблице, cl5

Количество

/ л раствора нтияоагулянт

75 мл) 0,5 л крови

5-I00

5-I00

О,I-20

О,I-I,Î

3,45-69

I0,8-5I,8

0,09-I8,0

О,П-I Ю

Дигидрооксиацетон

Иноэив

Пируват натрия

Аденин

Могут использоваться другие источниии ионов пирувата . !!римером являет65 ся пирувиновая (пировиноградная) яислота, рН растворов антикоагулянта может быть около 5 для АЦД и 5,5 для

ПЩ, Однако для более широкого интервала может применяться рН.„ например, .!

493059 до 9 (особенно выше 7). Дегидроонси-! ацетон добавляют и свежей ирови немедленно после сбора свежей нрови .

Одновременно с отбором нрови и немедленно после введения ее в ионтейнер с ней смешивают от 5 до 50 мМ дегидроонсиацетона на I л крови.

Дегидрооисиацетон должен быть растворен в стерильном растворе, таном кан стерильная вода или водный раствор антииоагулянта, содержащий денстрозу или другие ингредиенты. Смесь нрови с дегидроонсиацетоном затем хранят при температуре ниже 10 С, а именно от 1 до 6 С, она может храниться в течение 2I дня.

В ионце этого периода времени нровь будет содержать значительно больше 2,3-ДДТ, чем ировь, сохраняемая при тех же условиях, но без дегидрооксиацетона . Кровь может храниться дольше 2I дня, причем она будет лучше по начеству в отношении содержания

2,3-Д7Т, чем ировь, сохраняемая стандартным способом (применение антииоагулянтных цитрат — денстрозовых растворов или антиноагулянтных цитрат-фосфат-денстрозовых растворов ).

Пример I . Безводную лимонную иислоту (7,3 r), дигидрат цитрата натрия (22,0 r) моногидрат денстрозы (24,5 г ) и дигидрооисиацетон (I2,0 r ) растворяют в пригодной для инъеиций воде (800 мл), раствор доводят водой до I л и фильтруют через фильтр с размером пор 0,8 мМ. Раствор в полости или сосуде для крови в отношении

75 мл раствора на 500 мл ирови, подлежащей сбору, стерилизуют в автоилаве при ?16 С в течение 20 мин.

Пример 2 . Дигидрат цитрата натрия (3I,О r), моногидрат бифосфата натрия (0,04I г), гептагидрат двуосновного фосфата натрия (0,344 г), моногидрат денстрозы (25,5 r.) и дигидроонсиацетон (I2,9 г) растворяют в пригодной для инъекций воде (800 мл) и раствор доводят водой до I л и стерилизуют фильтрацией через фильтр с размерами 0,22 мим. Применяя асептичес,5 иие методы, раствор помещают в стерильную полость или сосуд для ирови (причем 70 мл раствора добавляли на

1о иаждые 500 мл крови, подлежащей сбору).

Пример 3. Используют те же приемы, что в примерах I и 2,,но н водному раствору добавляют 5I,8 г аденина.

Пример 4. Используют те же приемы, что в примерах I-З, но н водному раствору добавляют 9 r пирувата натрия.

Пример 5. Используют те же м5 приемы, что в примерах I-4, но н раствору добавляют дополнительно 22,I г дигидрооисиацетона, а денстрозу не добавляют.

Пример 6. Используя приемы, описанные выше, дигидроацетон можно вводить в другие антиноагулянты, АЦД или ЦЯЩ-аденин.

Использование АЦД и Qg>3,ñ аденином может продлить время хранения до

4о 35-42 дней, исходя из выживания эритроцитов сп и о, но при этом уровни ДГРГ слегна уменьшаются по сравне45 нию с АЦД и ЯРА. Обычный уровень аденина равняется 0,5 мМ на литр нрови.

АЦД (или ЦЩО рН 6-8 с аденином или без него. Сохранение рН выше 6

1 или 7 (щелочной рН 7-9) способствует поддержанию Д РГ. Уровень АТФ падает в течение первой недели (или двух недель) хранения.

Добавка пирувата помогает предотвратить падение АТФ. Обычным уровнем пирувата является O,I мм на литр нрови, это поддерживает уровень ДУГ на три недели.

Инозин поддерживает уровни ЮТ

65 примерно на 4 недели. Концентрация инозина равняется IO-?5 мМ на I л крови. Инозин при более низном уровне т может таиже добавляться н ирови после

493059

Составитель С МаЛютина

Редактор АБеР техреЯодусушина корректор 3Яиеита

Изд. № /gpss Тиран 559 Подписное

Заказ

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

Москва, М(-35 Раушская наб„д. 4/5

ППП „Патент" Москва, Г-59, Бережковская наГ>., 24

2-3 недель хранения. Аденин может добавляться в начале хранения.

Инозин и.пируват, действуя совместно, поддерживают ДФ1 уровни на 5 недель.

Пример 7. ЦФД-аденин-аскорбат-дигидроок сиацетон.

Дигидрат цитрата натрия (30,8 r), безводная декстроза (23,2 г), дигидрооксиацетон (I4,7 r), аденин (0,55 r), аскорбиновая кислота (8,I г) и моногидрат бифосфата натрия (2,22 r) растворяют в пригодной для инъекций воде (800 мл) и раствор доводят водой до I л, его стерилизуют фильтрацией через стерильный фильтр (0,22 мкм).

Используя асептические методы, 70.мл раствора помещают в стерильные полости для сбора 500 мл крови. Полости упаковывают в металлические банки под азотом. Рецептуры для стерилизации нагревом без разрушения аскорбата и дигидрооксиацетона разделяют на две части, которые устойчивы к автоклаву. Перед вытягиванием крови две части вновь соединяют, используя пластмассовые полости, соединяемые пластмассовыми трубочками. Одна из этих полостей находится в ведущей трубке линии емкостью I5 мл. Другая является полостью для сбора крови емкостью 500 мл.

Дигидрат цитрата натрия (38,3 г), аденин (0,68 г), аскорбиновая кислота (II,I г) и моногидрат бифосфата натрия (2,76 r) растворяют в пригодной для инъекций воде (800 мл) и раствор доводят водой до I ; 56,4 мл помещают ю в полость для крови емкостью 500 мл.

Раствор для наполнения I5 мл ведущей трубки приготавливают путем раст15 ворения безводной декстрозы (I05,6 г) и дигидрооксиацетона (0,69 г) в пригодной для инъекций воде (800 мл); раствор доводят водой до I-л;рН

3,8-4,2. I5,4 мл помещают в полость и выдерживают в автоклаве 20 мин при

П6 С, затем охлаждают в воде и помещают в металлическую банку под азотом.

Комбинация аскорбиновой кислоты и дигидрооксиацетона повышает или подзо держивает содержание 2,3-Д1Ф красных кровяных клеток до удовлетворительной степени.

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Способ консервирования крови путем добавления к крови консервирующего раствора, отличающийся тем, что, с целью увеличения срока хранения крови, добавляют также дигидрооксиацетон в количестве 20-IOÎ мМ на литр крови.