Способ получения экспериментальной модели болезни накопления типа гоше

 

О П И С А Н И Е пц 544988

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 17.11.75 (21) 2190057/13 с присоединением заявки № (23) Приоритет

Опубликовано 30.01.77. Бюллетень № 4

Дата опубликования описания 09.03.77 (51) М. Кл.". С 09В 23/00

Государственный комитет

Совета Министров СССР ло делам изобретений и открытий (53) УДК 615.475(088.8) (72) Авторы изобретения (71) Заявитель

Л. А. Седова и В. П. Теодорович

Ленинградский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ МОДЕЛИ

БОЛЕЗНИ НАКОПЛЕНИЯ ТИПА ГОШЕ

Изобретение относится к области медицины, а именно к гематологии.

В научной и патентной литературе экспериментальной модели болезни Гоше не описано.

Целью изобретения является получение патологических изменений в ретикулогистпоцитарных клетках различных органов, аналогичных изменениям в этих органах при болезни

Гоше.

Для этого по предлагаемому способу животным вьодят внутривенно или внутрпбрюппшно эмульсию перфтортрибутиламина в дозе не менее 5 мл/кг.

Предварительно перфтортрибутиламин эмульгируют прп помощи ультразвука в присутствии низкомолекулярных синтетических полимеров ил и других поверхност Io-а ктивных веществ. Содержание перфтортрибутпламина в эмульсии 20 об. %, размер частиц 0,5 мкм.

Доза вводимой эмульсии перфтортриоутиламина должна быть не менее 5 мл/«r. Оптимальным вариантом является доза 15 мл/кг, которую вводят либо дробно в течение одной недели, либо однократно. Выраженные признаки болезни накопления появляются уже через месяц после введения эмульсии п сохраняются на протяхкении всей жизни животного.

Модель отработана в эксперименте на 50 крысах и 8 кроликах.

Эмульсию перфтортрпбутплампна вводят животным внутривенно по следующей схеме: по 5 мл/кг 4 раза в течение месяца (всего

20 мл/кг) — 33 крысам; по 7,5 мл/кг 2 раза в течение недели (всего

15 мл/кг) — 6 крысам; по 5 мл/кг однократно — 6 крысам;

IIo 5 мл/кг однократно — 8 кроликам.

10 Ту же эмульсио в дозе 20 мл/кг вводят внутрибрюшинно 5 крысам.

)Кпвотных забивают в различные сроки после первой инъекции исследуемого вещества: через 10, 20 дней, 1, 3, 6 месяцев, 1 год и

15 1,5 года. У всех животных определяют весовые отношечпя печени и селезенки к весу тела, проводят гистологическое и гпстохимпческое исследование печени, селезенки, лимфатически.; узлов, костного мозга, почек, лег20 кого.

Кусо IIIII opi aiioii фик«1;руют и форма IIIIIO и готовят замороженные и парафиновые срезы, которые окрашивают гематоксилинзозином, Суданом III, сульфатом нильским голубым. Б.ioxIIKIII Icciillii cocTBB отложений в li,IQTках Гоше определяют методом Gle v Р. Н Lee

R. E.

Гистологическое изучение органов крыс кроликов, которым вводили эмульсию пср30 фтортрибутиламина, свидетельствует о зако544988

Формула изобретения

Составитель С. Малютина

Тскрсд Е. Петрова

Корректор Л. Брахнииа

Редактор H. Хубларова

Заказ 215/19 Изд. КО 143 Тираж 589 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, )K,-35, Раушская иаб., д. 4/5

Типография, ир. Сапунова, 2 номерном, стойком, системном поражении ретикулогистиоцитарного аппарата.

В селезенке, печени, лимфатических узлах, костном мозге у всех животных было отмечено появление большого количества клеток со светлой, широкой цитоплазмой, имеющей ячеистослоистый рисунок. Ядра удлиненной, круглой, иногда бугристой формы расположе11ы чаще эксцентрично. Иногда клетки содержат

lIo два и более ядер. Наряду с отдельно лежащими патологическими клетками отмечают большое количество клеток, расположс1шых в виде синцития довольно обширных размеров.

Морфологически клетки имеют сходство с патологическими клетками, характерными для керазинового ретикулеза — болезни Гоше.

Биохимическое определение состава отложений в описанных клетках, выделенных из селезенки подопытных крыс, показало, что содержание цереброзида в них почти в 2 раза больше, чем в селезенке здоровых крыс (150 у в опыте против 84 у в контроле) .

Описанные морфологические изменения в органах наблюдались у всех подопытных животных независимо от способа введения эмульсии перфтортрибутиламина. Различие в морфологической реакции па введенное вещество отмечалось только через 10 суток после введения крысам эмульсии перфтортрибутиламина в разных дозах — 5 мл/кг и 15 мл/кг. В указанный срок клетки типа Гоше наблюдались только в органах животных, которым была введена большая доза (15 мл/кг) . Однако через 1 месяц клетки типа Гоше появлялись у всех животных независимо от дозы вводимой эмульсии. В более позднис сроки наблюдения

4 (3 месяца, полгода, 1 год и 1,5 года) установлено прогрессирующее увеличение числа клеток типа Гоше, что указывает на непрерывность, динамичность патологического процесса.

5 Разрастание измененных ретикулогистиоцитарных клеток в печени и селезенке приводит к достоверному (Р(0,1 и Р(,0,001) увеличению весовых индексов этих органов, особенно селезенки. Весовой индекс для печени в среднем равен 6,2 против 5,2 в норме, весовой ип1декс для селезенки — 1,4 в опыте против 0,5 в контроле.

На основании гистологических, гистохимических и биохимических 1н следований сделано заключение о воспроизведении экспериментальной модели болезни накопления типа

Гоше.

Предлагаемый способ получения экспериментальной модели болезни накопления типа

Гоше даст возможность прош1киуть во внутриклеточные аномалии обмена веществ и в структуру и функции измененных клеток и будет способствовать разработке методов и средств лечения.

Способ получения экспериментальной модели болезни накопления типа Гоше, отл и3О ч а ю щи йся тем, что, с целью получения патологических изменений и ретикулоп1стиоцитарных клетках различных органов, аиалоп1чHhIx изменениям в этих органах при болезн1

Гоше, животным вводят внутривенно или

35 внутрибрюшинно эмульсию перфтор1риoутиламина в дозе ие менее 5 м,l/êã.