Способ получения нуклеозид-5"-дифосфатов
Союз Советских
Социалистических
Республик
ОП ИСАНИЕ
ИЗОЬ ИтИНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (») 558924 (61) Дополнительное к авт. свид-ву (51) М. Кл
С 07 Н 19/10 (22) Заявлено14.05.74 (21) 2027851/04 с присоединением заявки № (23) Приоритет (43) Опубликовано 25.05.77.бюллетень № 19 (45) Дата опубликования описания05,08.77
Гасударственный комитет
Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий (53) УДК 547,692..02 (088,8) (72) Авторы изобретения
С. Н. Загребельный, Е. B. Ярмопинская, l1. Г. Кнорре и В. Ф.Зарытова
Новосибирский институт органической химии Сибирского отдепения
АН СССР и Специальное конструкторско-технопо ическое бюро биопогических активных веществ (71) Заявители (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ НУКЛЕОЗИД-5-ДИФОСФАТОВ
Изобретение относится к усовершенствованию способа попучения соединений, которые применяют в биохимии при исследовании синтеза нуклеиновых киспот и при и попьзовании ферментативных систем.
Известен способ попучения нуклеозид-5 -!
-дифосфатов путем превращения нукпеизид-5«монофосфатов в более реакционно-способ-! 4В ные нУкпеозид-5-фосфомоРфопиды, обработ ки их трибутипаммониевой сопью ортофосфор-(О ной кислоты в диметипсупьфоксиде и последующей очистки целевого продукта хроматографией на анионообменных смопах. Нукпео-! зид-5-фосфоморфопиды получают при температуре 80-90 С в течение 4 час взаимо- б ( действием нукпеозид-5-монофосфатов и морфопина в среде дицикпогексипкарбодиимида, воды и трет:-бутипового спирта.
К основным недостаткам известного способа относится проведение процесса попу- О ( чения нукпеозид-5-фосфоморфопидов при теь о пературе 80-90 С, а также испопьзование на этой стадии в качестве конденсирующего агента дорогостоящего дицикпогексипкарбодиимида, обпадающего сильно выраженными аппергенными свойствами" и вспедствие етого требующего применения специальных средств зашиты.
Дпя упр ошения пр оцесса предлагается способ, по которому в реакцию с морфопином вводят активное мсномерное производное ! нукпеозид-5-монофосфата. Его попучают путем взаимодействия аципированного нуклеозид-5-монофосфата с и-толуолсульфохлоридом в смеси пиридина и ацетонитрипа при комнатной температуре. Добавление к реакционной смеси 10-кратного избытка морф>пина приводит к копичественному образоваI нию нукпеозид-5-фосфоморфопида, Поспедую( щее получение нукпеозид-5-дифосфата проводят известным способом.
Пример. Синтез уридин-5-диофосфата.
1 r 3-2-0-диацетилуридин-5-фосфата ( и 1,140 r а -толуолсульфохлорида выдерживают и течение 45 мин при комнатной температуре в 12 мп смеси: ацетонитрип и пиридин (2:l), поспе чего добавляют к
3, 1 мп морфопина. Из реакционной смеси отбирают апиквоту, обрабатывают концент»
pHpoBBHHblM аммиаком в течение 1 часа
558924
Составитепь В. Жестков
Редактор Н. Йаиипович "ехред А. Демьянова Корректор П. Макаревич
Заказ 1615/83 Тираж 553 Подписное
11НИИПИ Государственнного комитета Совета Министров СССР пв делам изобретений и открытий
113035, МФосква, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Филиал ППП Патент, г. Ужгород, уп. Проектная, 4 и хроматографируют на бумаге в системе этаноп- 1 М.ацетат аммония (5:2). Результаты анапиза показывают количественное образование уридин- фосфоморфолида. Затем реакционную смесь упаривают до попучения масла на ротационном испарителе,уцариваютсбензолом (ЗхЗОмл) для удаления следов пиридина добавляют 10 ммолей трибутипаммониевой сопи ортофосфорной кислоты в диметипсуцьфоксиде. Реакционную смесь о
:термостатируют в течение 18 час при 37 С, затем высаживают в 200 мп смеси: ацетонконцентрированный аммиа к (100:1). Выпавший осадок фипьтруют, промывают ацетоном (Зх50 мп), растворяют в 20 мп З,М аммиа ка, через час аммиак удапяют упариванием на ротационном испаритепе; продукт растворяют в 20 мп воды и хроматографируют на копонке с анионообменной смопой. ДЭАЭмопсепектом (100 мп) в пинейном градиен- 20 те концентраций бикарбоната аммония (О0,5 М). Объем эппюата 800 мп, скорость епюции 100 мп/час. Фракции основного пика объединяют, концентрируют и удапяют бикарбонат аммония упариванием водой 25 (Зх50 мп). Попученный маспообразный осадок растворяют в 5 мл воды и высаживают в ацетон (100 мп). Замаслившийся осадок промывают ацетоном, затем растирают B спирте до попучения осадка. Осадок сушат в вакууме над Р> О>. Анапиз проводят методом хроматографии на бумаге в системе изомаспяная киспота — концентрированный аммиак — вода (66:1:33}. Продукт хроматографически однородный, выход 80%, содержание нукпеотидного материала 80-90%.
Ф ормупа изобре тения
Способ попучения нукпеозид-5-дифосфатов, включающий попучение нукпеозид-5-фосфоморфолидов с обработкой последних трибутипаммониевой солью ортофосфорной киспоты в диметипсульфоксиде с последую щим выдепением целевого продукта, о тпичающийся. тем,что,сцепью
I упрощения процесса, нукпеозид-5-фосфоморфопид получают последовательной обра боткой аципированного нукпеозид-5-фосфаI та л -толуолсульфохлоридоми морфопином.
