Способ получения псевдотрисахаридов или их солей

 

О ПiNCАН И Е

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ

Союз Советских

Социалистических

Республик

<">685158 (61) Дополнительный к патенту (22) Заявлено 06.08.74 (21) 2051819/23-04 (23) Приоритет — (32) 190374 (3 I ) 452600 (33) CIIJA (51) М. Кл.

С 07 Н 3/06

/! A 61 К 31/715

Госуяарс1венний комн ег

CГCP

IIct нел IM ианбретеиий и игирытий (53) УЛК 547. 8. 07 (088 ° 8) Опубликовано 0509.79. Бюллетень Ж ЗЗ. Дата опубликования описания 0509.79

Иностранцы

Марвин Джозеф Вейнстейн (США),Питер Джон Ловелл

Дэниелс (Великобритания);Джерапьд Говард Вагман, Раймонд Теста, Элен Кит Мзллемс (США), Джон Джессен

Райт (Австралия) и Татт ан ахалли Лакшмин арайен

Нагабушан (Кан ада) (72) Авторы изобретения

Иностранная фирма Шерико ЛТД (1. )вейц ария) (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПСЕВДОТРИСАХАРИДОВ

ИЛИ ИХ СОЛЕИ и У вЂ” радикал формулы

Изобретение относится к способу получения новых псевдотрисахаридов, обладающих ценными фармакологическими свойствами.

Основанный на известной реакции взаимодействия аминов с карбонилсодержащими соединениями (1), предлагаемый способ получения псевдотрисахаридов общей формулы

Сн

СН2 КН2

ОН (в 1=И=СН,Х10 гентамицине В,) (в 1 К СН Х=

2 гентамицине В1 ), КН2 2 кнсн х

Т О Уз 2 (1) СК2кн2

15 3 О

1 г

ВН2

ЫН2

20 (в 1=и=сн2х= гентамицине С г ), (a 1=Ы=СН2 X= гентамицине С1а ), где Ча, Хг и Юб — водород;

Ч6 — гидроксил;

Z — ради кал формулы

НЗС

ХН2

685158 (в 1=!Ч=СН Х= гентамицине С ), ин (ЧНЦ ( (в 1-N=CHZX= гентамицине С а), (Н20Ц

2 (в 1 — "1ч=СН Х= гептамицине CZg ), НЗ

1(Н 2 (в 1 "N--Сну Х= ген т амици н е Х ), CH21ЧН2

МН2 (в 1 =И=СН X вердамицин е), и У вЂ” ради к ал формул

СН2ОН (в 1 (Ч-CHZ Х=си з омицине), СН МН

СН2)ЧН

""г

1ЧК 2

1Ч112

{в 1=1Ч=СН Х= антибиотике

1-20В), (y 1=N=CHgX= гентамицине), (в 1=И=С1 Х=

-антибиотике

66-40B), (в 1=N=CHZX= антибиотике J=20A) C1i 23 HCHg

ОН

>Н2 35 (в 1=И=СН1Х= антибиотике G=52), (e 1=N=CHZX= антибиотике

G=4 18), С 2 2

ОН

3li 2

0li или где VZ, V5, WZ и Х5 имеют вышеуказанные значения; радикал Формулы

ОН2ОН и У вЂ” ради кал формулы

СН,НН2 (в 1N=CHgX= тобрамицине, или где Vg,, V5, Х2и Х5 имеют вышеукзанные знаЧения;

Š— радикал формулы и У вЂ” радикал формулы в 1=И-„СН2 X антибиотйке 66-40D), или где VZ, Ч5, WZ и W имеют вышеуказанные значения;

Z — радикал формулы или где Z — ради к ал формулы и у — радикал формулы Z,и Х5 — водород и Хл и V5 гидро45 ксил (в 1=N=CHzX мутамицине.1), или

Ч Х р V5 и Х5 ВОДОРОД (в 1=И

=СН Х=мутамицине 2), или

Wg и W5 - ВОДОРОД и

50 VZ и V5 — гидроксил (в 1=1Ч=СН Х-мутамицине 4), или

W< Чр и 1" 5 ВОДОРОД и

V6. — амино (в 1-N-CHZX-мутамицине 5), ИЛИ WZ i VZ р V5 ВОДОРОД И

55 Х5 гидроксил (в 1=(Ч=СН Х мутамицине 6), X — водород, алкил,алкенил с одной двойной связью, оксиалкил, аминоалкил, Иалкиламиноалкил, аминоокси@» алкил, И алкиламинооксиалкил, причем указанные алифатические радикалы имеют 1-7 атомов углерода и, если они замещены аминогруппой и гидроксилом, то содержат эти заместители у Различных атомов углерода, циклоалб 85158 кил с 3-6 атомами углерода, циклоалкилалкил с 3-6 атомами углероца в цикле и 1-3 атомами углерода в боковой цепи, прйчем общее число атомов углерода не должно превышать 7,фенил, . бензил или толил,или их солей, заключается в том, что соединение общей формулы

М5 О!

Z новление с образованием 1-И-алкил-4, 6-ди- (аминогликозил) -1, 3-диаминоциклитола протекает при комнатной температуре на воздухе, хотя можно проводить реакцию в атмосфере инерт5 ного газа, например аргона или азота.

По данным TCX реакция заканчивается обычно через 30 мин.

1 Н V

Из подходящих восстановителей мо2 2 гут быть названы диалкиламинобораны, Y-О

Н2 например диметил- и диэтиламиноборан, У5 2 (П) предпочтительно морфолиноборан;цианборгидриды тетраалкиламмония, например цианборгидрид тетрабутиламмонияр боргидриды щелочных металлов, например боргидрид натрия, предпочтительно в которой цианборгидриды щелочного металла, нау,Z,×Z, V5, W> и W5 имеют вышеука- пример цианборгидрид лития или натрия. ванные значения, причем в любом поло- Реакцию обычно ведут в протонном женин, кроме положения 1, соединение растворителе, например в низшем алкаможет содержать аминогруппы, защищен- ноле, предпочтительно в воде или водные трифторацетилом, трет-. бутоксикар- о ном низшем алканоле, например водном бонилом и карбобензилоксилом, подвер- метаноле, водном этаноле, но можно гают взаимодействию с альдегидом фор- также применять другие смешивающиеся мулы О с водой растворители, например диме-. х - с (й} тилформамид, гексаметилфосфортриамид, 1

Н 2 тетрагидрофуран и диметиловый эфир где Х имеет указанное выше для Х зна- этиленгликоля. чение, однако любая аминогруппа за- В некоторых случаях применяют апрощищена ацетилом или фталилом, в при- тонные растворители, например тетра.сутствии восстановителя-диалкилами- гидрофуран, когда в качестве восстаноборана, цианборгидрида тетраалкил- 30 новителя используют морфолинобс.ран. аммония, цианборгидрида или боргид- Для получения кислотно-аддитивных рида щелочного металла, в среде солей 4,б-ди-(аминогликозил)-1,3инертного растворителя, при рН 1-II и -диаминоциклитола используют любую при температуре от -20 С до темпера- органическую кислоту, например уксустуры кипения растворителя с последу- 3 ную, трифторуксусную, п-толуолсульфоющим удалением содержащихся в молеку- новую кислоту, или неорганическую ле защитных групп и выделением целево- кислоту, например соляную, серную, ro продукта в свободном виде или в фосфорную, азотную кислоту. Очень виде соли. выгодно использовать серную кислоту.

Обычно процесс проводят при рН 2-5, 0 Чаще всего кислоту, например серпредпочтительно 2,5-3,5, при комнат- ную, добавляют к раствору или суспенной температуре, а в качестве соеди- зии 4,б-ди-(аминогликозил)-1,3-диаминения формулы 11используют соединение ноциклитола, например сизомицина, в с незащищенными группами, например протонном растворителе, например воде. сизомицин, а в качестве альдегида В качестве альдегидов используют

;формулы III — ацетальдегид. линейные и разветвленные алифатичесСоли данных соединений получают из- кие альдегиды, например формальдегид, :вестными способами, например нейтра- ацетальдегид, н-пропанель, н-бутаналь, лиэацией свободного основания соответ- 2-метилпропаналь, н-пентаналь, 2ствующей кислотой примерно до рН 5. -метилбутаналь, З-метилбутаналь, 2,2Для этой цели можно использовать та- о -диметилпропаналь, н-гексаналь, 2кие кислоты, как соляная, серная, ;этилбутан аль, н-гептан аль и н-октафосфорная, азотная, бромистоводород- наль, пропеналь, 2-метилпропеналь, ная, уксусная, пропионовая, яблочная, 2-бутеналь, 2-метил-2 -бутеналь, 2аскорбиновая, лимонная. -этил-2-гексеналь; циклические альКислотно-аддитивные соли l N= CHZX55 дегиды, например циклопропан-, цикло=4,б-ди(аминогликозил)-1,3-диамино- пентан-, циклогексанкарбальдегид, циклитолов представляют собой белые циклопентанацетальдегид; бензальдегитвердые вещества, которые растворимы ды, о-, м- и п-толуолкарбальдегиды и в воде, труднорастворимы в большин- фенилацетальдегидыр оксизамещенные стве полярных растворителей и нераст- Я линейные и разветвленные алифатичесворимы в неполярных растворителях. кие альде гиды, например 5-оксипентаСелективная конденсация 1-амино- наль, 2-окси- З-метилбутаналь, 2-окси группы в 1-N-незамещенном 4,6-ди- — 2-метилпропан аль, 4-оксибутан аль, -(аминогликозил) -1 3-диаминациклитоле 2-оксипропаналь и 8-оксиоктаналь;

I с альдегидом и одновременное восста- gg аминозамещенные линейные и разветвлен685158 ные алифатические альдегиды, например

5-аминопентаналь, 2-аминопропаналь, 3-.аминопропаналь, 5-аминобутаналь,,н.и но"-З-метилбутаналь, 8-аминооктан;. яь и их моно-N-àã килпроизводные; з.".Пнo — и оксизамещенные линейные и 5 разветвленные алифатические альдегиды, например 2-окси-5-аминопентаналь, 3-окси-3-метил-4-аминобутаналь, 2-окси-4-аминобутаналь, 2-окси-3-аминопропаналь, ? -окси-2-метил-3-аминопропаналь, 2-амино-3-оксиоктаналь и их моно-N-алкилпроизводные.

Можно .=пользовать любой энантиомер (если альдегид содержит асимметрический атом углерода) или рацемическую смесь альдегидов, получая соответствующие диастереоизмеры или их смеси.

При использовании 1-N-незамещенного 4,6-ди-(аминогликозил)-1,3-диаминоциклитола рекомендуется до проведения реакции защищать аминогруппы, например ацильной группой, такой, как ацетамидо- или фталимидогруппа, и затем удалять защитную группу в полученном соединении. 25

Х орошо также 3 ащищат ь гидроксильную группу в оксизамещенных альдегидах, но это не обязательно.

Можно также применять ацеталь или полуацеталь альдегида, который в кис- 30 лой среде образует альдегид.

Общая методика проведения реакции.

Раствор (рН 2) 1-N-незамещенного

4,б-ди-(аминогликозил) — 1,3-диаминоциклитола, например сизомицина или З5 вердамицина, в протонном растворителе, предпочтительно в воде, подкисляют кислотой, обычно разбавленной серной кислотой, до рН 5 (кислотноаддитивная соль обычно содержит 1 зк- 40 вивалент кислоты на каждую аминогруппу

4,б-ди-(аминогликозил) — 1,3-диамино-. циклитола, например на 1 моль сизомицина приходится 2,5 моль серной кислоты). Затем добавляют альдегид, например ацетальдегид, пропаналь или бутаналь, взятый в большом молярном избытке (по крайней мере 1 молярный эквивалент) и через 5 мин добавляют примерно 1 молярный эквивалент восстановителя, предпочтительно цианборгид- 50 рида щелочного металла, обычно цианборгидрида натрия.

По данным ТСХ реакция заканчивается через 30 мин с получением соответствующего 1-N-СН2Х- 4,б-ди-(аминогли- 5 козил)-1,3-ди-аминоциклитола, например

1-N-этилсизомицина или 1-N-этилвердамицина. Полученное соединение выделяют и очищают известными способами, например осаждением, экстрак- Ц) цией предпочтительно хромотографией, Процесс протекает в одном сосуде с образованием в качестве основного продукта моно-N-замещенного производ- g5 ного, например 1-N-этилсизомицина.

В данном способе 1-аминогруппу, связанную с вторичным атомом углерода, обы гно алкилируют, предпочтительно посредством других аминогрупп, связанных с первичным и другим вторичным атомами углерода в исходном 4,б-дивЂ(аминогликозил)-1,3-диаминоциклитол".

В качестве исходных продуктов можно использовать частично N-замещенные

4,б-ди-(аминогликозил)-1,3-диаминоциклитолы.

Обычно защищают наиболее реакционноспособную группу CHZNH2 в положении б.

Сизомицин может быть защищен в положении б; 2, б или 2, З,б

Другие защитные группы могут быть

rl мостиковыми группами в положении 3

Н

4, например карбонил в 4, б-ди- (аминогликозил) -1, З-диаминоциклитолах, в которых 3-амино- и 4-оксигруппы находятся в цис-положении относительно друг друга.

При использовании 1-N-незамещенного 4,б-ди-(аминогликозил) -1,3-диаминоциклитола, в котором аминогруппа в положении б защищена (например, 6-N-трет-бутоксикарбонилсизомицин), или 1-N-незамещенного 4,б-ди-(аминогликозил) — 1,3-диаминоциклитола, в котором аминогруппа в положении 2, 3

I защищена (например, 2, 3 -ди-N-трифторацетилгептамицин С1), получают соответствующее частично N-защищенное 1-N-замещенное производное (на-! пример, 1-N-этил-б -N-трет-бутоксиу I карбонилсизомицин и 1-N-этил-2,3

-ди-N-трифторацетилгентамицин CJ), из которого после удаления защитных групп известными способами получают целевые 1-N-CHZX-соединения (например, 1-N-этилсизомицин и 1-N-этилгентамицин Ст соответственно).

Примерами защитных групп являются бензил, 4-нитробензил, трифенилметил, 2,4-динитрофенил, ацил, такой, как ацетил, пропионил и бензоил, алкоксикарбонил, такой, как метоксикарбонил, этоксикарбонил, 2,2,2-трихлорэтоксикарбонил, трет-бутоксикарбонил и 2-йодэтоксикарбонил, арилалкоксикарбонил, такой,как карбобензилоксил и 4-метоксибензилоксикарбонил.

Обычно применяют защитную группу в виде производного имидазола и азида кислоты или сложных эфиров, таких, как этилтиолтрифторацетат, N-бензилоксикарбонилоксисукцин-имид или п-нитрофенилтрихлорэтилкарбонат.

Во всех примерах, кроме специально оговоренных случаев, используют основную ионообменную смолу — амбер,лит 1RA 401S в ОН-форме, а в качестве элюента при хроматографии на силикагеле нижнюю фазу системы хлороформ,метанол- 7Ъ-ная гидроокись аммония (2:1:1) .

685158

Пример 1. К раствору 5 г матографируют на 140 r силикагеля, сизомицина в 250 мл воды добавляют элюаты, содержащие 1-N-(н-бутил)—

1е н,серную кислоту до рН 5, прибавля- сизомицин (по данным ТСХ), Упаривают ют 2 мл ацетальдегида, размешивают в вакууме и получают j-N- (н-бутил)10 мин, прибавляют О, 85 r цианборгид- сизомицин, Ы) =+129 (с-О, ЗВ, вода) . рида натрия, перемешивают при комнат- 5 Масс-спектр, m/е: 504 (М+1), 127, Мой температуре в течение 15 мин, 160, 182, 201, 256, концентрируют в вакууме до 100 мл, 327, 345, 360, 373, 388, 418, 428. обрабатывают смолой, лиофилизируют, При замене ацетальдегида на 2-этилостаток, содержащий 1-N-зтилсизоми- бутаналь, получают 1-ф-(p-этилбутил)— цин, хроматографируют на 200 г сили- fQ -сизомицин, Я) =+121 (с-0,4%, вода). кагеля, целевые элюаты (по данным Масс-спектр, m/е: 532 (М+1) 127, TCX) концентрируют в вакууме, остаток. 160, 210, 229, 256, 275, 355, 373, содержащий 1-N-этилсизомицин (1,25 г), 388, 401, 406, 416, 446, 456. хроматографируют на 100 r силикагеля, K раствору 3 г сизомицина в 120 мл элюируя смесью хлороформ-метанол- 1 воды добавляют 1 н.серную кислоту

-3,5%-ная гидроокись аммония (1:2:1), до рН "., приливают 60 мл диметилформцелевые элюаты (по данным ТСХ) про- амида и раствор 2 г 4-фталимидобутапУскают через колонну с ионообменной,наля в 10 мл диметилформамида, пересмолой и лиофилизируют, получая мешивают 10 мин и добавляют 420 мг

1-N-этилсизомицин (О, 54 r), (Я,) -+164 цианборгидрида натрия. (с О,ЗЪ, вода) . Через 20 мин выливают в 1 л беэМасс-спектр,m/е: 476 (М+1) 127, водного метанола, размешивают, от154, 160, 173, 191 201 219, 256 фильтровывают сульфат 1-Й-((f-фталими299, 317, 332, 345, 350, 360, 378; добутил)-сизомицина, растворяют его

390,400. в воде и пропускают через колонну

Вместо 1 н.серной кислоты можно 25 со смолой. Упаривают в вакууме, остадобавлять другие кислоты, например ток хроматографируют на силикагеле, Уксусную, трифторуксусную, толуол- целевые элюаты упаривают и получают 1 сульфоновую, соляную, фосфорную или,1-N-(dг-фталимидобутил)-сизомицин. азотную кислоту. Цианборгидрид нат- К О, S г 1-N- (д-фталимидобутил)— рия можно заменить эквивалентным 30 сизомицина добавляют 5 мл 6%-ного количеством других восстановителей, этанольного раствора гидразингидрата например морфолинобораном, цианбор- и в течение 3 ч нагревают до кипения гидридом тетрабутиламмони я или бор- с обратным холодильником, выливают гидридом натрия. в большое количество тетрагидрофураК раствору 4,64 r сизомицина Я5 на и.отфильтровывают 1-N-(()-аминобув 180 мл воды добавляют 1 н. серную тилсизомицин) . кислоту до рН 5, приливают 1,2 мл Кроме того, это соединение можно

37Ъ-ного формальдегида, перемешивают получать следующим образом.

10 мин, прибавляют 460 мг цианбор- 5 г диэтилацеталя 4-ацетамидобу.гидрида натрия, раствор пропускают 40 тиРальдегида РаствоРЯют в 75 мп дисчерез колонну со смолой и лиофилизи- тиллированной воды и 5 мл 1 н. серруют. Остаток хроматографируют на ной кислоты, выдерживают при комнатсиликагеле, элюаты, содержащие в ос- ной температуре до завершения гидролиНоВНоМ 1-N-метилсизомицин (по данным за (по данным ТСХ), нейтрализуют биТСХ), упаривают в вакууме и получают карбонатом натрия, насыщают хлоридом

1-N-метилсизомицин, (() +153 (c — .натрия и экстрагируют хлороформом.

0,3%, вода). Экстракты дистиллируют, получая остаМасс-спектр, m/е: 462 (М+1), 127, ток, содержащий 4-.ацетамидобутираль140, 159, 160, 177, 187, 2О5, 256, дегид, который можно использовать

285, 303, 318, 331, 336, 346, 376, без очистки.

386., 5О К 3 r сизомицина в 120 мл дистиллиПри обработке сульфата сизомицина рованной воды добавляют 0,1 н.серную в воде пропаналем и цианборгидридом кислоту до рН 5, прибавляют б г полунатрия поскучают 1-N- (н-пропил) -сизоченного 4-ацетамидобутиральдегида и мицин, (4) =+140 (с-О, ЗЪ, вода) . б 0 через 10 мин 600 r цианборгидрида

Масс-спектр,m/å: 490 (М+1), 127, 55 .натрия.

160, 168, 187, 205, 215, 233, 256, Через 2 ч раствор концентрируют

313, 331,346,359, 364, 374, 404, 414. до небольшого объема, выливают в меК раствору 3 г сизомицина в 200 мл танол,осадок отфильтровывают,раствоводы добавляют 1 н. серную кислоту до ряют в воде и пропускают через колонрН 3,5, приливают 1,5 мл н-бутаналя, 6Q ну со смолой, элюат упаривают„остаток перемешивают 10 мин, добавляют 450 мг хроматографируют на силикагеле, элюат цианборгидрида натрия, перемешивают упаривают и получают 1-N- (d -ацетамидо1 ч, концентрируют в вакууме до бутил)-сизомнцин.

100 мл, пропускают через колонну со 1-N- (J-ацетамидобутил ) -сизомицин смолой и лиофилизируют. Остаток хро- $5 в течение 3 ч при 100 с обрабаты685 l5ß

12 нают 10Ъ-ной гидроокисью калия, нейтрализуют, пропуская через колонну со смолой амберлит 1РТ-50 и злюируют

2 н.гидроокисью аммония. клюат концентрируют, остаток растворяют в воде и диофилизируют, .получая 1-N-(d;àìèíîáóòèë)-сизомицин, (d)p -+109 (с-О,ЗЪ, вода) .

Масс-спектр, m!e: 519 (M+1), 127, 160, 197, 216, 234, 244, 256, 262, 342, 360, 375, 388, 393, 403,443. т 1 — (3-аминопропил) -сизомицин Ы)

26

-+127 (c-O,ЗЪ, вода) .

Масс-спектр-,m/åE 504 (М+1), 160

202, 220, 230, 248, 256, 328, 346, 361, 374, 379, 389, 407, 419 и 429.

Пример 2. Как в примере 1, сизомицин в воде обрабатывают 1 н. серной кислотой и 2-(N-метилацетамидо)-ацетальдегидом, затем цианборгидридом натрия, получая 1-N-(ф-(N- 2О

-метилацетамидо)-этил)-сизомицин, который обрабатывают 10Ъ-ной гидроокисью натрия и течение 3 ч при 100 С, пропускают через колонну со смолой амберлит 1РС-50 и элюируют 2 М гид- 25 роокисью аммония. Элюаты концентрируют в вакууме до 100 мл, лиофилизируют и получают 1-N-(ф-метиламиноэтил)-сизомицин.

Аналогично примеру 1 к водному 30 раствору сизомицина добавляют 0,1 н. .серную кислоту до рН 5. обрабатывают р-ацетамидоацетальдегидом и цианборгидридом натрия. Получают 1-N-(p-ацетамидозтил)-сизомицин, который гидро- З5 лизуют 10Ъ-ной гидроокисью калия и получают 1-N-(p-аминоэтил)-сизомицин.

Масс-спектр, m/е: 491 (М+1), 160, 169,206, 216, 234, 256, 283, 314, 325, 334,347, 360, 370, 375, 405, 415 . 40

Если вместоф-ацетамидоацетальдегида применяют II -ацетамидопропаналь, образуется 1-N- (g -ацетамидопропил)—

-сизомицин, из которого после гидролиза 10Ъ-ной гидроокисью калия получают 1-N- Q -аминопропил)-сизомицин.

Пример 3. К 5 г гентамицина

С д в 125 мл воды добавляют 1 í.серную кислоту до рН 5,2, прибавляют 50

2 мл ацетальдегида, размешивают 5 мин, добавляют 1 г цианборгидрида натрия, перемешивают при комнатной температуре н течение ЗО мин, концентрируют н вакууме до 75 мл, пропускают через 55 колонну со смолой, лиофилизируют и остаток, содержащий 1-N-этилгептамицин Czg, хроматографируют на 200 г силикагеля. Целевые элюаты (по данным TCX) концентрируют н вакууме, 6О остаток, содержащий 1-N-этилгентамицнн С1< (0,95 r), хроматографируют на 100 r силикагеля, элюируя смесью хлороформ-метанол вЂ,5Ъ-ная гидроОкись аммония (1:2:1) ° 65

Однородные (по данным ТСХ) элюаты обрабатывают смолой, лиофилизируют и получают 1-N-этилгентамицин С z Q. (0,42 г), (д{) -+118 (с — О,ЗЪ, вода) .

Масс-спектр, m/å - 478 (М+1), 129, 154, 160, 173, 191, 201, 219, 258, 301, 317, 319, 329, 332, 347, 350, 360, 378 и 402.

Вместо 1 н.серной кислоты можно брать другие кислоты, например, уксусную, п-толуолсульфононую, трифторуксусную, соляную, форфорную или азотную кислоту.

Пример 4. К 0,5 г вердамицина в 65 мл воды добавляют 1 н. .серную кислоту до рН 4,9 приливают

0,2 мл ацетальдегида, перемешивают

5 мин, добавляют 65 мг цианборгидрида натрия, концентрируют н вакууме до

10 мл и, размешивая, выливают н

50 мл метанола. Осадок, содержащий

1-N-.ýòèëâердамицин, хроматографируют на 100 г силикагеля, элюируя смесью хлороформ-метанол-3,5Ъ-ная гидроокись аммония (1:2:1).Целевые элюаты (по данным ТСХ) упаривают в вакууме, остаток, содержащий 1-N-этилвердамицин, хроматографируют на 7 г силикагеля, упаривают в вакууме и получают 1-И-этилвердамицин (50 мл).

Масс-спектр, m/å: 490 (M+1), 141, 154, 160, 173, 191, 201, 219, 270, 313, 317, (W) 331, 332, 341, Çll, 357, 359, 360, 378, 390, 414.

Вместо ацетальдегида можно использовать формальдегид, н-пропаналь,,н" бутаналь, н-октаналь, оксиацетальдегид, 4-оксибутаналь и фенилацетальдегид. Получают 1-N-метилвердамицин и

1-N-(н-пропил)-вердамицин (lа), (()р—

/б

+122 {c-O,ЗЪ, вода) 1-N- (н-бутил)—

-вердамицин (lб), () = +12 (с-О, ЗЪ, нода), 1-N-(9-оксиэтил)-нердамицин, 1-N-(Cp-оксибутил)-вердамицин и 1-Ит

-фенилэтилвердамицин.

Масс-спектр la, m/е: 528 (М+1), 141, 160, 168, 187, 205, 215, 233, 270, 346, 355, 373, 504, Nacc-спектр, leE, m/е: 518 (М+1), 141, 160, 182, 201, 219, 247, 270, 341, 360, 378, 387> 388, 418, 442.

Пример 5. К 5 г гентамицина

С н 250 мл воды добавляют 1 н.серную кислоту до рН 5, обрабатывают ацетальдегидом и цианборгидридом натрия и пол2учают 1-N-этилгентамицин Сz, ((Л = +114 (с-О,ЗЪ, вода).

Масс-спектр, m/е: 506 (М+1), 154, 157, 160, 173, 191 201,219,286, 317, 329 (W), 347, 350, 360, 375, 230.

Используя нместо ацетальдегида формальдегид, н-пропаналь, н-бутаналь, н-октаналь, оксиацетальдегид, 4-оксибутаналь, бензальдегид и фенилацетальдегид получают 1-N-метилгентамицин CZ (lв), 1-N-(н-пропил)-гентамицин Cri 1-N-{н-бутил)-гентамицин С;, 13

685158

Т-N-(н-октил)-гентамицин С, 1-N†(ф-оксиэтил)-гентамицин С1(lг), (;() =+98, О (с-О, ЗЪ, вода), 1-N- (д-оксибутил) -гентамицин С1, 1-N- (фенилэтил)-гентамицин С4(1д) (d.l а

= +99,4 (с-О,ЗЪ, вода), и 1-N-бен- 5 зилуентамицин CZ (le), т.пл. 83-86 С, (g) = +90 (с-О,ЗЪ, вода).

Масс-спектр lв, m/е: 491 (М+)

416, 384, 364, 61, 346,343, 336, 333, 318,315,303, 286, 187,177, 160, 159, 157.

Масс-спектр lг, m/е: 522 (М+1)

446, 404, 394, 391,376, 373, 366,363, 348, 345, 333, 286, 231, 217, 207, 189, 160, 157.

ИК-спектр (KBi ), см : 3300 и

1060.

Nacc-спектр lд, m/е: 582 (М+1), 506, 464, 454, 451, 436, 433 426, 408, 405 (W) 393, 295, 286. 277, 267 249 160 157 20

ИК-спектр (КВ ), см : 330, 1050, 1030.

Масс-спектр lе, m/е: 568 (М+1)

440, 437, 412, 394, 379, 281, 263, 253, 235, 160, 157. 25

Если вместо ацетальдегида применяют S-ф-окси-((-фталимидобутанол, то получают 1-N-(S-окси-К-фталимидобутил)-гентамицин С>. После обработки этанольным раствором гидра- Ç() зингидрата получают 1-N-(S-g-амино-) -оксибууил)-гентамицин С<, т.пл.93 98 С; (а(.1; — +72,4 (с-0,35Ъ, вода).

Масс-спектр, m/å: 565 (М+1), 528, 516, 490, 437, 434, 410. 397, 278, 35

250, 232, 160, 157.

Пример 6. 875 мг антибиотика

G=52 растворяют в 40 мл дистиллированной воды и добавляют 1 н .серную кислоту до рН3,5, приливают 0,7 мл ацет- 40 альдегида, размешивают 10 мин и добавляют 100 мг цианборгидрида натрия.

По окончании реакции (весь антибиотик G-52 прореагировал по данным

ТСХ через 10 мин) концентрируют раствор в вакууме при 35-40 С до

10 мл, пропускают через колонну со смолой и лиофилизируют.

Остаток, содержащий 1-N-этил-антибиотик G-52, хроматографируют на силикагеле, целевые элюаты (по данным ТСХ) концентрируют в вакууме и получают 65 мг остатка, содержащего

1-N-этил-антибиотик 6-52.

Нечеткие фракции предыдущей хроматографии хроматографируют на силикагеле, элюируя нижней фазой системы хлороформ-метанол-7Ъ-ная гидроокись аммония (1:2:1), и получают еще

35 мг остатка, содержащего 1-N-этил- 60

-антибиотик Q-52.Эти остатки пропускают через кОлонну со смолой, лиофилизируют и получают 90 мг 1-И-этил-антибиотика G-52, (c() = +122,1 (с-0,33, вода) .

Масс-спектр, m/е: 490 (М+11, 14!, 154, 160, 173, 191, 201, 219, 2/0, 313, 317 (W) 331, 332, 341, 350, 359, 360, 378, 390, 414.

Аналогично получают следующие соединения: ь

1-N-Этилгентамицин В, (с(.)

+119, 7 (нода) .

Ф

Масс-спектр, m/е: 380 (MHJ 352, 334, 378, 350, 332, 219, 191, 173.

Д-N-Этил-антибиотик 1-20В,, (й.)р =+112,5 (вода).

Масс-спектр, m/е: 524 (М +1) 154, 160, 173, 175, 190, 201, 219, 304, 317, 332, 333, 350, 360. о

1-N-Этилмутамицин 2, т ..пл. 80-84 С.

Масс-спектр, m/е: 459, 384, 329, 316, 311, 301, 283, 185, 175, 160, 142, 127.

1-N-Этилмутамицин 6, т.пл. 118122 С (разл.).

Масс-спектр, m/е: 475 (М+1), 476.

Моносахариды (m/е 160,127)

2-Дезоксистрептамины (m/å 219, 201, 191, 171)

Дисахариды (m/е 365, 317, 299, 378, 350, 322)

Пример 7. 240 мг 2,3-ди-N-трифтарацетилгентамицина Ст растворяют в 10 мл смеси вода-метанол (2:1)„ добавляют 1 н.серную кислоту до рН

3,5, приливают 0,19 мл ацетальдегида, перемешивают 10 мин, прибавляют

27 мг цианкарбоната натрия и перемешивают 10 мин.

Упаривают в вакууме, остаток, содержащий 1-N-этил-2, 3-ди-N-трифторацетилгентамицин С, растворяют н

50 мл концентрированной гидроокиси аммония и выдерживают 24 ч при комнатной температуре.

Смесь упаринают н вакууме, остаток хроматографируют на 12 г силикагеля, элюируя нижней фазой смеси хлороформметанол-103-ная гидроокись аммония (2:1:1), Целевые фракции(по данным

ТСХ) упаривают в вакууме и получают 1-N-этилгентамицин Cr (80 мг). б-трет-Бутоксикарбонилсизомицин н водном метаноле обрабатывают серной кислотой, затем ацетальдегидом и цианборгидридом натрия, ныдерживают 30 мин при комнатной температуре, упаривают

/ н вакууме и получают 1-Н-этил-6-N-трет-бутоксикарбонилсизомицин. Растворяют его в трифторуксусной кислоте, выдерживают 10 мин, добавляют избыток безводного метанола, осадок хроматографируют на силикагеле, элюируя нижней фазой смеси хлороформ-метанол10%-ная гидроокись аммония (2:1:1), и получают l-N-этилсизомицин. ,е

К 5 r 3-N-4-О-карбонилсизомицина в 300 мл дистиллированной воды добавляют 1 н.серную кислотУ до рН

2,5, приливают 2 мл 37%-ного формаль,дегида и через 10 мин раствор 500 мг цианборгидрида натрия н 5 мл воды.

685158

16

НСН2Х (Ц

ОК

Си

СН2WК2

ОН (в 1=N=CH2Х» гентамицине В), (в 1Ы-СН2 Х= гентамицине В1 ), СН

СКАН

С К21(К2

НН2

Через 1 ч раствор упаривают в вакууме наполовину, добавляют 1 н. гидроокись натрия до рН 11 и упаривают досуха.

Ос..атон экстрагируют метанолом (3".

4х100мл), экстракты разбавляют равным объемом хлороформа, фильтруют, упаривают досуха и получают 1-N t".åòèëн

3-i1-4-0-карбонилсизомицин. Этот продукт обрабатывают 10 --ной гидроокисью о калия в течение 5 ч при 100 С, охлаждают, пропускают через колонну со ð смолой амберлит 18С-50 в Н -форме, элюируют 2 н. гидроокисью аммония, элюат концентрируют и лиофилизируют, полу H 1-N метилсизомицин.

Хроматографируют сырой продукт на

300 r силикагеля и получают 1-N-метилсизомицин, (g) = +153 (с-О,ЗЪ, вода).

Масс-спектр, m/е: 462 (М+1), 127, 140, 159, 160, 177, 187, 205,256, 285, 303, 318, 331, (W) 346, 376, 386.

К 1 г водного раствора вердамицина 20 добавляют карбонат натрия до рН 8-9, прикапывают раствор 5 r и-нитрофенил хлоркарбоната в 25 мл диметилфиормамида, перемешивают 3 ч, поддерживая рН 8-9 добавлением большого коли- 25 чества раствора карбоната натрия. Перемешивают еще 16 ч при рН 8-9, упаривают в вакууме, остаток несколько раз экстрагируют горячим хлороформом, упаривают экстракты и остаток хрома- 30 тографируют на 100 г силикагеля, элюируя нижней фазой смеси хлороформ-метанол-концентрированная гидроокись аммония (2:1:1). Целевые элюаты (по данным ТСХ) Упдривают и получают 35

Л (! вердамицин -3, 4-N О-оксазолидон.

Полученное соединение в воде обрабатывают серной кислотой, формальдегидом и цианборгидридом натрия

4 -N,О-оксазолидон. ю(О, 2 г 1-N-метилвердамицин-3 4-N,0-оксизолидона растворяют в 10 мл

2 н. раствора гидроокиси натрия, на- 45 гревают 5 ч до кипения с обратным холодильником, нейтрализуют уксусной кислотой и упаривают. Остаток хроматографируют на 10 г силикагеля, элюируя нижней фазой смеси хлороформметанол-15%-ная гидроокись аммония (2:1:1).

Пример 8. 5,0 r 1-N-этилсизомицина растворяют в 25 мп воды, приливают 1 н.серную кислоту до рН

4,5, при сильном размешивании выливают в 300 мл метанола, перемешивают

10-20 мин и фильтруют. Осадок промывают метанолом и сушат в вакууме при о

60 С, получая сульфат 1-N-этилсизомицина. 60

Аналогично получают другие сульФаты.

5, О 1-N-zz rraepza u a растворяют в 25 мл воды, подкисляют 2 н. соляной кислотой до рН 5, лиофилизируют и 65 пблучают гидрохлорид 1-N-этилвердамицина.

Подобным образом получают другие гидрохлориды.

Пример 9. Повторяют пример

1, но 1 н.серную. кислоту добавляют до рН 1. Выход 1-N" ýòèëñèçîìèöèíà 0,11 г (2Ъ).

Пример 10. Повторяют пример 1, но к раствору 5 г сизомицина в 250 мп воды не добавляют серной кислоты. рН среды 11. Выход 1-N-этилсизомицина 0,13 г (2%) .

Пример 11. К раствору 5 r сизомицина в 200 мл безводного метанола добавляют 1 н ° серную кислоту до рН добавляют 2 мл ацетальдегида, размешивают 10 мин, добавляют 0,85 г цианборгидрида натрия и охлаждают до -20 С, перемешивают при -20 С в течение 25 мин, переработку смеси и очистку осуществляют, как в примере

1. Выход 1-N-этилсизомицина 0,28 г (5 ) °

Пример 12. Повторяют пример

5, но реакцию.провоцят в среде 10 мл метанола при температуре кипения растворителя. Выход 1-N ýòèëãåíòàìèöèíà С2

65 мг (32%). Строение полученных соединений подтверждено данными ЯМРспектроскопии.

Формула изобретения !

Способ получения псевдотрисахарндов общей формулы

11Н2У2

W5 О

z гда Vg,, Wg u Ws - Водород;

Vg — Гидрок сил;

Š— радикал формулы и У вЂ” р ади к ал формулы

685158

18 (в 1И=СН, Х= гентамицине С О ), Н30 (в 1 11=СН2 Х ген т амици н е Ст ), СН3

МН2 (в 1=И=СН2Х=

reHTBMHIJHHe С2), 3 2

ХН2 (в 1.-NCHZ Х= гентамициче С (1),lQ

СН20П

ОН

2 (в =1=И=СН2Х= гентамицине Х2 ), C+2 H2 20 (в 1=N=CHZX гентамицине Су), СН3

ОН

МН2

2(Н2 (в 1=И=СНАМ Х= вердамицине), (в 1=N=CHZ Х=сиэомицине), сн

СН21(Н2

СН20Н

0 зо „,3СИ2 NH2

NH2

NH2 (в 1=N=CH X= гентамицине) (в 1=И=СНАМ Х= антибиотике

JI-20B), (в 1=Ы=СН Х= антибиотике

Jl-20А)

0 121 Н Н3

CH

Н0

КН2

ОН (в 1=И=.СН Х антибиотике

G-418), имеют выше(в 1=-ыСН2Х= антибиотике G-52), У вЂ” ради к ал формулы

СНРН2

0Н20Н

ОН

МН2 или где VZ 5, Й и указанные значения;

Z — радикал формулы и У вЂ” радикал формулы

СН2МН2 (в 1=М=СН2 Х=тобрамицине), или где VZ, Vq, W., Х3 имеют вышеуказанные значения;

Š— радикал формулы и У вЂ” радикал формулы

NH2 (в 1NСНX= антибиотике 66-400), или где VZ V5 К2 u Wg имеют вышеуказанные значения;

Z — радикал формулы

25 и У вЂ” радикал формулы (B 1-Н=CH Х=

Я антибиотике бб40В), или где Z — радикал формулы

2 Н2 и Ч2 и Ъ3 — водород и Х2 и Иу — гидроксил (в 1=N=CHg Х=мутамицине 1), или

55 Vg, W2 р Ч3 и Х3 — вОДОрОД (В 1 N

=CH2 Х=мутамици не 2 ), или W2 и Wg водород и Ч2 u Vg — гидроксил (в 1=N

=Сн Х=мутамицине 4), или

W, Ъ и И3 — водород и Ч — амино

g) (в 1 NCHp Х мутамицине 5), или

W V u V — вОдОРОД и И3- ГиДроксил

2i 2 (в 1=N=CHz Хмутамицине 6);

Х вЂ” водород, алкил, алкенил с одной двойной свяэьй, оксиалкил, аминоалкил, N-алкиламиноалкил, аминооксиалкил, 685158

NH) Vg

И2 (й) 15

Nr5 0

Составитель Г.Коннова

Техред М.Петко Корректор М.Пожо

Редактор Т.Шарганова

Заказ 5156/58 Тираж 513 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д.4/5

Филиал ППП Патент, г.ужгород, ул.Проектная,4

N-алкиламинооксиалкил, причем указанные алифатические радикалы имеют 1-7 атомов углерода и, если они замещены аминогруппой и гидроксилом, то содержат эти заместители у различных атомов углерода, циклоалкил с 3-6 атомами уг- 5 лерода, циклоалкилалкил с 3-6 атомами углерода в цикле и 1-3 атомами углерода в боковой цепи, причем общее число атомов углерода не должно превышать

7, фенил,бензил или толил, или их солей, отличающийся тем, что соединение общей формулы где У, Е, VZ 75, Х, Х5 имеют вышеуказанные значения, причем в любом положении, кроме положения 1, соединение может содержать аминоэащитные группы, выбранные из группы трифторацетила, трет-бутоксикарбонила и карбобензилоксила, подвергают взаимодействию с альдегидом общей формулы

0 х — 5 Ф (11! )

K 30 где Х имеет укаэанные выше для Х значения, однако любая аминогруппа защищена ацетилом или фталилом, в присутствии восстановителя-диалкиламиноборана, цианборгидрида тетра.алкиламмония, цианборгидрида или боргидрида щелочного металла, в среде инертного растворителя при рН 1-11 и при температуре от -20 С до температуры кипения растворителя с последующим удалением содержащихся в молекуле защитных групп и выделением целевого продукта в свободном виде или в виде соли.

2. Способ по п.1, о т л и ч а юшийся тем, что процесс проводят при рН 2-5.

3. Способ по пп.1 и 2, о т л и; ч а ю шийся тем, что процесс проводят при рН 2,5-3,5.

4. Способ по пп.1-3, о т л и ч аю шийся тем, что процесс проводят при комнатной температуре.

5.Способ по пп.1-4, о т л и ч а юшийся тем, что используют соединение формулы II с незамещенными группами.

6. Способ по пп.1-5, о т л и ч а— ю шийся тем, что в качестве соединения формулы II используют сизомицин, а в качестве соединения формулы

III-ацетальдегид.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Патент CIQA 9 3780018, кл. С 07 Н 3/06, 1973.