Способ калибровки полярографической кислородной ячейки

 

Союз Советских

Социалистических

Республик

<ц697925 (61) Дополнительное к авт. сеид-ву (22) Заявлено 01.0677 (21) 2491286/23-26 с присоединением заявки Ио (23) Приоритет

Опубликовано 151179- Бюллетень М 42

Дата опубликования описания 17.11,79 (51)М. Кл.

G 01 Лт 31/16

С 01 В 13/00

Государственный комитет

СССР по делам изобретений и открытий (- з) УДК 543,253:

:5л6.21(ORB,R) (72) Авторы

ИЗОбрЕтЕНИя M ° И. Зеленский и Г.А, Могилева

Всесоюзный ордена Ленина и ордена Дружбы народов (71) ЗаяВИтЕЛЬ научно-исследовательский институт растениеводства им. Н. И. Вавилова (54) СПОСОБ КАЛИБРОВКИ ПОЛЯРОГРАФИЧЕСКОЙ

КИСЛОРОДНОЙ ЯЧЕЙКИ

Изобретение относится к области аналитической химии, а именно к полярографическому определению кислорода, и касается .калибровки, то

5 есть определения чувствительности полярографической ячейки по кислороду °

Способ позволяет по измеренным величинам токов ячейки рассчитывать аб- 1О солютное значение содержания кислорода и водном растворе и может быть использован при исследовании процессо9 фотосинтеза и дыхания в суспенэиях микроорганизмов и клеточных органелл,а также во всех тех случаях,где необходимо непрерывное измерение концентрации кислорода в водных растворах.

ИзвестеН способ калибровки полярографических кислородных ячеек с использованием в качестве титранта восстановленного никотинамид-аденин-динуклеотида (NADH) Взаимодействие добавляемого восстановителя с растворенным кислородом проводится в присутствии медиатора - феназинметосульфата (PMS) н фермента = каталазы (1), Недостатком известного способа является высокая стоимость реагентов и сложность процесса, обусловленная как многокомпонентностью системы, так и тем, что титрование растворенного кислорода восстановленным NADH. про.водится в присутствии каталазы, активность которой меняется при хранении.

Изменение активности фермента может оказывать влияние на результаты титрования.

С целью упрощения процесса и повышения надежности калибровки предлагается в качестве титранта использовать раствор аскорбиновой кислоты, а титрование проводить при рН реакционной среды равном 10-12.

Способ осуществляется следующим образом.

В герметизированной реакционной, камере, где концентрация кислорода, растворенного в среде, непрерынно измеряется с помощью полярограйической ячейки, производится титрование кислорода точным раствором аскорбиноной кислоты, Среду для калибровки предварительно подводят к рй 10-12 добавлением нескольких капель 2 н. КОН и насыщают кислородом при температуре опыта.

Операцию насыщения проводят в отдельном сосуде путем пропускания потока б 97925

Формула изобретения

Составитель А, Жаворонкова редактор Т, Девятко Техред Э. Чужик Корректор М. Вигула

Заказ 6920/32 Тираж 1073 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035„ Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 воэд-ха от микрокомпрессора МК-2 через капилляр, погруженный в раствор. Реакционную камеру заполняют средой так, чтобы не оставалось пузырьков газа, вводят в нее носик микробюретки, проводят герметизацию, включают перемешивание и термостатируют с точностью + О, 1 С.

Титрование проводят Раствором аскорбиновой кислоты-5 10 М. Точный.

-Э титр раствора определяют перед каждым опытом. Цля определения титра аскорбиновой кислоты ее раствором титруют раствор йода, образующийся при взаимодействии иодистогo калия и йодата калия в щелочной среде, Окончание титрования устанавливают по исчезнованию синего окрашивания растворимого крахмала., специально добавленного в качестве индикатора.

КЛО +5КЛ+3H SO =ЗЛ +ЗК SO+ 3H О

ЗС Н О + З˄— ЗС Н О +6

В конические колбы на 50 мп кали;вают по 2 мл раствора КЛО (6 10 N приготовлен пс точной йавеске), добавляют по 0,5 мл серной кислоты

0,5 н, и по 10 мг сухого йодистого калия, После появления бурого окрашивания от выделившегося йода в колбочки,цобавляют по 1-2 капли растВоримогo крахмала H THTp5 IoT из мик робюретки раствором аскорбиновой кислоты до исчез нов eIt ия синего окрашивания. итр аскорбиновой кислоты рассчитывают по формуле

>" >>к о, Ax л„„.= >

asc где М вЂ” молярная концентраций приготовленного раствора йодата1 †объ раствора йсдата; 4(j

Ч вЂ” объем добавленного раствора

KDO3

AS> аскорбиновой кислоты.

Пример, Навеску О, 0107 r йодата растворяют в мерной колбе на 100мл.

При определении титра на 2 мл раствора КОО (5 10 М) пошло 0,7.мл раствора аскорбиновой кислоты.

Титр равен:

5 10 2,0 5

ТМ Г вЂ” = 4,3 10 5

При добавлении каждой порции аскорбиновой кислоты (0,05 мл) происходит связывание эквимолярного количества кислорода, что приводит к понижению амперометрического тока после каждой добавки на 0,2 мкй, Объем реакционной камеры 5 мл. Концентрация кислорода после введения одной добавки изменяется на

4(0 ) >>>< < >< < 0 — 4,g 10 М=45мкМ

4,3 10 0,05 уклл. отсюда чувствительность ячейки — = 0,00465 мк А/мк M 0

И 0>2 мкА

t1 (0,) 43мкМ

2 > где а(О ), — изменение концентрации кислорода, V — объем реакционной камеры;

e i — изменение амперометрического тока после введения добавки аскорбиновой кислоты;

S — чувствительность ячейки.

Таким образом, титрование растворенного кислорода раствором аскорбиновой кислоты в условиях, исключающих доступ кислорода воздуха, при РЯ раствора 10-12 обеспечивает достижение поставленной цели — быстрое и стехиометрическое (1:1) связывание кислорода и возможность сопоставления изменения его концентрации с изменением полярографического тока, т.е. проведение калибровки.

Способ калибровки полярографической кислородной ячейки путем титрования реакционной среды, содержащей: кислород непосредственно в реакционной камере с использованием органического титранта,о т л и ч а ю ш и йс я тем, что, с целью упрощения процесса и повышения надежности калибровки, в качестве титранта используют раствор аскорбиновой кислоты и титрование проводят при рй среды 10-.12.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Robinson Т., Cooper 7. М-AnaIyt. Hiochem, 1970, 33, 390-399 (прототип).