Способ получения культуры клеток

 

О П И С АН,И Е

ИЗОБРЕТЕНИЯ 737457

Союз Советск ни

Социалистические

Республик

К A8TOPCROhAY СВИДЕТЕЛЬСТВУ (6l ) Дополнительное к авт. свнд-ву (22) Заявлено 1 1.07.75 (21) 21709 ). 8/28-13 (51) М. Кл, с присоединением заявки ¹ (23) Приоритет

С 12 К 9100

Государственный камитет до делам иаобретеиий и еткрытий

Опубликовано 30.05.80. Бюллетень № 20 (5 ) УДК 578 683 (088.8) Дата опубликования описания 03.066,80 (72) Авторы изобретения

Г. А. Красников, 3. П. Наумец и Н. Н. Соса

Украинский ордена Трудового Красного Знамени научноисследовательский институт экспериментальной ветеринарии (7I) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КУЛЬТУРЫ КЛЕТОК

Изобретение относится к области вирусологии и касается получения клеточных культур.

Известен способ получения культуры клеток путем вырашивания ее на предметной поверхности с последуюшим съемом полученной клеточной культуры

$1). В качестве поверхности для вырашивания культуры используют стекло, керамику, пластмассу. !

О

Однако известный способ сложен в осушествлении, поскольку используемые поверхности либо представляют собой бьюшийся материал - стекло, либо являются дорогостояшими материалами—

15 кварцевое стекло, керамика, пластмасса.

Целью изобретения является упрошение способа.

Эта дель достигается тем, что культуру клеток выращивают на гофрированной поверхности алюминиевой фольги.

Алюминиевая фольга — безвредный субстрат, не растворяется под воздей2 ствием дезсредств, хороший проводник тепла и электрического .тока, легко поддается гофрировке, что дает воэможность повысить полезную плошадь при вырашивании клеток.

Способ иллюстрируется следуюшим примером.

Алюминиевую фольгу, используемую в пишевой промышленности, прокатывают валиками с рельефной поверхностью.

Алюминиевую емкость рти пластины подвергают моечным процедурам в хорошо обезжириваюшнх растворах, например в

1%-ном растворе тринатрийфосфата, промывают в теплой водопроводной воде, споласкивают 1-2 раза в 0,01 Ь-ном растворе соляной кислоты, 4-5 раз в водопроводной воде и 4-5 раз в дистиллированной воде. Стерипиэуют сухим жаром при 180-200 С в течение 1,52,0 ч. На алюминиевой фольге можно получать органные, первично-трипсинизи ро ванные культуры клеток млекопитаюших и птиц. В качестве питательной среды щ Формула изобретения

Способ получения культуры клеток путем выращивания ее в жидкой питательной среде на предметной поверхности с последующим съемом полученной клеточной культуры, отличающийся тем, что, с целью ут рощения способа, культуру клеток выращивают на гофрированной поверхности алюминиевой фольги.

3 737 используют среду 199, Игла и др. Для посева используют взвесь клеток в питательной среде, которую вносят в соответствующие емкости, и выращивают при

37 С. Контроль роста клеток осуществляют путем измерения величины рН.

Клетки, выросшие на алюминиевой фольге, окрашивают краскамн Романовского-Гимза, спиртовым раствором фуксина, раствором гематоксилин-эозина. Фольга окраску не воспринимает.

Для снятия клеток с поверхности алюминиевой фольги используют раствор версена 0,002%. При этом из сосудов, удаляется питательная среда и вносится достаточное количество версена. Выдерживают в термостате при 37 С до появб ления белых конгломератов клеток в растворе (10-15 мин.). Затем легким движением раствора смывают с фольги оставшиеся клетки. Взвесь клеток в версене центрифугируют 10 мин. при

5QO об/мин. Надосадочную жидкость удаляют, клетки суспензируют в свежей

457 4. питательной среде для нового посева.

Использование алюминиевой фольги в способе получения клеточных культур позволяет повысить выход клеток, упростить

5 и удешевить получение клеточных культур, а также дает возможность изучать действие на них экстремальных условий.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Патент США И 3850748, кл. 195-1.8, опублик. 1974.

Составитель Г. Смирнова

Редактор Т. Морозова Техред И. Асталощ Корректор Г. Назарова

Заказ 2603/8 Тираж 522 Подписное

QHHNFIH Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113О35, Москва, Ж-З5, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4