Питательная среда для выращивания штамма хаnтномораs самреsтris 8162-продуцента гетерополисахарида

 

О П И С А Н И Е 18И844

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Сони Советских

Социалистических реслуолик (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 15.08.79 (21) 2817413/28-13 (51)М.Кл а С 12 N1/20 с присоединением заявки— (23) Приоритет—

1есударственвый комитет

СССР ио делам изобретений н открытий (53) УДК 632.937 (,088.8) (43) Опубликовано ЗО.О1.82. Бюллетень № 4 (45) Дата опубликования описания 30.01.82 (72) Авторы изобретения

М. С. Матышевская, P. И. Гвоздяк, И. И. Майко, М. И. Липкес, Г. Я. Дедусенко и Н. М. Колодкова (71) Заявитель Ордена Трудового Красного Знамени институт микробиологии и вирусологии им. Д. К. Заболотного

АН УССР . (54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫРАЩИВАНИЯ

ШТАММА XANTHON10NAS CAMPESTRIS

8162-ПРОДУЦЕНТА ГЕТЕРОПОЛИСАХАРИДА

1 2

Кормовая меласса 1,5 — 2,5

Калий фосфорнокислый .двузамещенный 0,1 — 0,15

Фумаровая кислота .0,065 — 0,13

Вода Остальное, Изобретение относится к промышленной микробиологии и касается питательной . среды для культивирования бактерий рода

Xanthomonas.

Для биосинтеза гетерополисахарнда 5 ксантомонасами ферментационный процесс должен проходить при определенных составе и рН питательной среды, а такжепродолжительности культивирования и температуре.

Известна питательная среда для выращивания бактерий рода Xanthornonas, содержащая углеводы и фосфат калия, а также препарат Stimuflav в качестве источ- ника азота 111. )5

Однако эта среда является дорогостоящей и сложной из-за необходимости внесения дополнительного источника:азота и ,асептической подтитровки в процессе ферментации. 20

Известна также питательная среДа для выращивания штамма-продуцента тетерополисахарида, содержащая глюкозу нли мелассу в качестве источника углерода и гидролизат казеина как источник азота12).

Выход полисахарида на этой среде составляет 4,5 — 5,0 г/л.

Цель изобретения — увеличение выхода гетерополиоахарида.

Это достигается тем, что в питательную среду, содержащую кормовую мелассу и воду, дополнительно вводят фумаровую кислоту в качестве стимулятора биосинтеза и калий фосфорнокислый двузамещенный при следующем соотношении компонентов, об. :

Штамм-продуцент Xanthomonas eam- .

pestris 8162 выделен из растения-хозяина (капусты) и хранится в музее культур отдела фитопатогенных бактерий ордена

Трудового Красного Знамени Института микробиологии и вирусологии им. Д, К. Заболотного АН УССР.

Примеры получения гетерополисахарида.

Пример 1, (контрольно патенту

GIIIA) . Использовали среду Leach et а1. следующего состава: глюкоза 15 г, КН2Р04 1 г, MgSO4 7НеО 0,05 r, NaC03

1,1 r, фумаровая кислота 1,3 r, 1 ео($04)в

0,2 мг, LnSO4 0,2 мг, MnS04 0,1 мг, дистиллированная вода 1000 мл. Инокуляг, 811844

Формула изобретения

Составитель М, Ларина

Техред Л. Куклина

Корректор С. Файн

Редактор Е. Хейфиц

Заказ 21/31 Изд. № 105 Тираж 504 Подписное

НПО «Поиск» Государственного комитета СССР по делам изобретений, и открытий

113035, Москва, %-35, Раушская наб., д. 4/5

Тип. Харьк. фнл, пред. «Патент» выращенный на этой среде, вносили в ферментационную среду того же состава в количестве 7%. Выращивание вели при 28 С с принудительной аэрацией в течение 72 ч, затем осаждали гетерополисахарид из культуральной жидкости этанолом, очищали ацетоном и сушили на воздухе. Выход гетероволисахарида составлял 4,5 — 5,0 г/л, :вязкость 0,4%-ного раствора — 27 сП.

Пример 2. Использовали среду следующего состава: меласса 2,5о/„фумаровая кислота 0,065 /, КзНРО4 0,1 /о. Трехсуточную культуру вносили в ферментационную среду этого состава в количестве 3%. Выра щивание проводили при 25 С с принудительной аэрацией в течение 72 н, гетерополисахарид осаждали 3 объемами этанола 96, очищали ацетоном и сушили на воздухе. Выход гетерополисахарида составлял 9,1 г/л, вязкость 0,4о/, раствора—

30 сП.

Пример 3. Состав среды: меласса

2,5о/о, фумаровая кислота 0,.13%, К2НРО4

0„1/о. Инокулят вносили в количестве 3%, выращивали при 28 С с принудительной аэрацией в течение 72 ч. Гетерополисахарид осаждали 3 объемами этанола, очищали ацетоном, сушили на воздухе. Выход его составлял 6,3 г/л, вязкость 0,4% раствора — 41 сП.

Пример 4. Состав среды: меласса

1Д фумаровая кислота 0,065 /о, К2НРО

0,1%. Посевной материал вносили в ферментационную среду в количестве 3%, выращивакие вели при 28 С с принудительной аэра цией в течение 72 ч. Гетерополисахарид осаждали 3 объемами этанола, очищали:ацетоном, сушили на воздухе. Выход его составлял 11,2 г/л, вязкость 0,4% раствора — 43 сП.

Таким образом, предлагаемая схема обеспечивает получение гетерополисахарида (до 1,1% от объема среды), сходного с препаратом аналогичного происхождения под названием «кельцан» (Ц, применяющимся за рубежом при бурении нефтяных скважин, при вторичной добыче нефти, а также во многих других областях (сельском хозяйстве, полиграфии, теистильной

10 и парфюмерной промышленности, при изготовлении бездымного пороха и др.), и позволяет увеличить выход гетерополисахарида по сравнению с известной, на которой выращивают данный продуцент, до

9 г/л против 4,5 — 5,0 г/л.

Питательная среда для выращивания

20 штамма Xanthomonas campestris 8162-продуцента гетерополисахарида, содержащая кормовую мелассу и воду, о т л и ч а ющ а я с я тем, что, с целью увеличения выхода гетерополисахарида, она дополни25 тельно содержит фумаровую кислоту в качестве стимулятора биосинтеза и калий фосфориокислый двузамещенный при следующем соотношении компонентов, об. %..

Кормовая меласса 1,5 — 2,5

30 Калий фосфорнокислый двузамещенный 0,1 — 0,15

Фумаровая кислота 0,065 — 0,13

Вода Остальное.

35 Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:

1. Патент США № 3020207, кл. 195-31, опублик. 1962.

2. Авторское свидетельство СССР

40 № 595379, кл. С 12 К 3/00, 1976 (прототип) .