Способ отслоения пленки-подложки при изготовлении препаратов для электронной микроскопии

 

Союз Советскик

Социалистических

Республик

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВ ИТИЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. сеид-ву— (22) Заявлено 143.279 (21) 2852006/18-25 с присоединением заявкм Йо(23) Приоритет

Опубликовано 300881. Бюллетень М 32

Дата опубликования описания 300 881 51)М. Кл.з

С 01 Н 1/28

Государстееииый комитет

СССР по делам изобретений и открытий (5З) ЮК 537. 533. .35 (088.8) (72) Авторы изобретения

Е.Б. Медвецкий и Л.В. Кейсевич

Киевский научно-исследовательский институт клинической и экспериментальной хирургии и Киевский институт усовершенствования вражьей (71) Заявители (54) СПОСОБ ОТСЛОЕНИЯ ПЛЕНКИ-ПОДЛОЖКИ

ПРИ ИЗГОТОВЛЕНИИ ПРЕПАРАТОВ

ДЛЯ ЭЛЕКТРОННОЙ МИКРОСКОПИИ

Изобретение относится к электрон ной микроскопии и может быть использовано для приготовления биологических препаратов.

Одним из важнейших этапов подготовки ультратонких срезов к исследованию является их укладка на опорной сетке. Если срез поместить непосредственно на сетку, он под влиянием сил поверхностного натяжения оседает на ее трабекулы, из-за чего площадь среза сетки используется неполностью.

Кроме того, в процессе просмотра возникает дрейф среза, что снижает ка- 1 чество электронограмм. Для борьбы с этим явлением применяют пленки-nogложки из коллодия (нитроцеллюлоэы), кварца, напиленного углерода, но наибольшее распространение получили плен-20 ки из формвара (поливинилформальдегида), так как они более устойчивы к внешним воздействиям и дают меньше артефактов. Благодаря пленке-подложке, расположенной между опорной сеткой и срезом, становится возможным поместить на одну сетку несколько срезов, рациональнее использовать ее площадь, предотвратить дрейф и деформацию срезов 1) .. 36

Наиболее близким к предлагаемому является способ, состоящий в том, что для получения пленки-подложки непосредственно перед употреблением готовят 1%-ный раствор формвара в дихлорэтане и наливают его в цилиндрический сосуд с притертой крьшкой. 3атем берут обычное стекло, в течение нескольких минут выдерживают его в парах растворителя над поверхностью раствора, погружают его в раствор, извлекают, просушивают на воздухе, образовавшуюся при этом на поверхности стекла пленку иэ формвара подрезают с краев и отсланвают путем погружения стекла с пленкой в воду, причем если отслоение происходит, пленка остается на поверхности воды 2) .

Однако известный способ отслоения пленки-подложки имеет существенные недостатки, заключающиеся в том, что отслоение удается осуществить далеко не во всех случаях, что значительно усложняет процесс, увеличивает расход формвара и увеличивает брак. Кроме того, необходимо каждый раз готовить свежий раствор формва- . ра, тщательно контролируя и подбирая его концентрацию, при,этом для облегчения отслоения пленки-подложки

859862

Формула изобретения

Составитель B.. Гаврюшин

Редактор Ю. Середа Техред А. Савка Корректор М. Коста

Эаказ 7536/64 Тираж 907 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал П!1П "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4 приходится специально испольэовать

1 стекла с неровной поверхностью, что ухудшает качество пленки-подложки.

Цель изобретения — упрощение способа и уменьшение брака.

Указанная цель достигается тем, что при осуществлении способа отслоения пленки-подложки при изготовлении препаратов путем погружения стекла с нанесенной пленкой-подложкой в жидкость, в качестве жидкости используют 0,5-1,5Ъ-ный раствор фтористого натрия в 0,5-1,5%-ной соляной кислбте

Пример. В цилиндрический сосуд с притертой пробкой наливают

60 мл 1%-ного раствора формвара в дихлорэтане (хлороформе) . Химически чистое, сухое стекло с зеркальной поверхностью захватывают на край длин ным зажимом, не менее 2 мин выдерживают в парах дихлорэтаьа (хлороформа) над поверхностью раствора формвара, на 10 с погружают стекло в этот раствор, вынимают, в течение 5 мин просушивают на воздухе и в вертикальном положении медленно погружают стекло с образовавшейся íà его поверхности пленкой из формвара в ранее приготовленный 1Ъ-ный раствор фтористого натрия в 1Ъ-ной соляной кислоте. При этом происходит быстрое и полное отслоение пленки из формвара со стекла на поверхность раствора, откуда ее переносят в чашку Петри, заполненную дистиллированной водой для дальнейшей работы.

При указанных концентрациях растворов достигаются наилучшие результаты. При использовании слабых растворов процесс отслоения резко замедляется, а в случае сильных растворов наблюдается фрагментация и частичное растворение пленки-подложки.

Поэтому при отклонениях от указанных пределов .концентраций пленка становится непригодной для дальнейшей работы. установлено также, что длительность хранения раствора формвара и колебания его концентрации в пределах

0,3-1% существенного влияния на качество пленки-подложки не оказывают.

Это способствует значительной экономии раствора формвара и снижению тре-!

0 бований к точности его приготовления.

Применение предлагаемого способа позволяет заметно снизить брак препаратов и сократить время на их приготовление, а также повысить качество

35 пленки-пОдложки за счет использования стекол с чистой зеркальной поверхностью.

Способ отслоения пленки-подложки при изготовлении препаратов для электронной микроскопии путем погружения стекла с нанесенной пленкой-подложкой в жидкость, о т л и ч а ю щ и й— с я тем, что, с целью упрощения способа и уменьшения брака, в качестве жидкости используют 0,5-1,5%-ный раствор фтористого натрия в 0,5 -1,5%-ной

З() соляной кислоте.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Техника электронной микроскопии.

Под редакцией Д. Кэя. Пер. с англ .

М., "Мир", с. 86-100.

2. Васичев Б.Н. Электроннозондовый микроанализ тонких пленок. М., "Металлургия", 1977, с. 223 (прототип),