Способ очистки биологических жидкостей,содержащих белок

 

Союз Советских

Социалистических

Республик

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

<11>880442

К АВТОРСКОМУ СВИ ЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 0?0130 (23) 2887935/23-26 с присоединением заявки М (23) Приоритет

Опубликовано 151181. Бюллетень Н9 42

Дата опубликования описания 15 ° 11. 81 (53)М. КлЗ

В 01 D .13/00

Государственный комитет

СССР, но делам изобретений и открытий (53) УДК 66.066-278>

:532.711 (088.8) химико-технологический институт нм. Д.И.Менделеева (54) СПОСОБ ОЧИСТКИ БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЕИ, СОДЕРЖАЩИX БЕЛОК

Изобретение относится к способу разделения жидких смесей с помощью полупроницаемых мембран и может быть использовано в биологии для очистки растворов, содержащих белки, в медицине при очистке крови и других биологических жидкостей от эндогенных и экэогенных ядов.

Известны способы очистки биологических жидкостей методом диализа (1) и методом мембранной экстракции (2) .

Методы заключаются в том, что с одной стороны к полупроницаемой мембране подводится очищаемая биологическая жидкость, а с другой стороны — 15 диализирующий раствор либо экстрагент, Вследствие разности химических потенциалов растворенного вещества в очищаемой жидкости и диалиэирующем растворе (экстрагенте) растворенное ве- 20 щество проходит через мембрану иэ одной фазы в другую.

Однако названные методы не всегда эффективны из-за разрушения структу- 25 ры макромолекул и форменных элементов биологических жидкостей при контакте с мембраной. Под разрушением структуры понимается коагуляция молекул белка, разрушение лейкоцитов и 30 других форменных элементов крови, гемолиз °

Известен способ очистки биологических жидкостей, содержащих белок; включающий контактирование биологической жидкости с одной стороной полупроницаемой мембраны и пропускание экстрагента с противоположной стороны полупроницаемой мембраны (3) .

Недостаток этого способа также заключается в возможности прямого контакта белковых молекул и форменных элементов биологических жидкостей с.материалом мембраны. Необходим способ, позволяющий исключить непосредственный контакт белковых молекул и форменных элементов с материалом мембраны, что дало бы возможность проводить экстракцию из биологических жидкостей с сохранением структуры ее компонентов.

Цель изобретения — предотвращение нарушения структуры компонентов обрабатываемой биологической жидкости.

Поставленная цель достигается тем, что на полупроницаемую мембрану осаждают путем создания на ней перепада давлений предварительно скоагулированный белок.

880442

Формула изобретения

Составитель A.Свитцов

Редактор К.Волощук Техред Т.Маточка Корректор Л.Бокшан

Эаказ 9791/9

Тираж 709 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, К-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент, r. Ужгород, ул. Проектная, 4

Раствор со скоагулироваиным белком продавливают через обрабатываемую мембрану, причем скоагулированные частицы, размеры которых больше диаметров пор мембраны, осаждаются на поверхности мембраны, образуя пористую пленку. Структура этой пленки зависит от количества скоагулированно» го белка, осажденного на мембране, и от величины приложенного давления °

Причины улучшения заключаются в том, что после описанной обработки мем- о браны исключается контакт белка биологической жидкости с поверхностью мембраны. При контакте белка биологической жидкости со скоагулированным белком, нанесенным на поверх-, 1$ ность мембраны, дальнейшая коагуля" ция белка из раствора не происходит.

Пример. В качестве мембраны для экстракции валериановой кислотой мочевины из плазмы крови собаки ис- .щ пользуют лавсановые мембраны толщиной 10 мкм и диаметром пор 0,2 мкм на установке, состоящей из двух вертикально расположенных камер, разделенных полупроницаемой мембраной с

Ф площадью 25 см . Перед экстракцией в верхнюю камеру вводят 25 мл плазмы с предварительно скоагулированным белком (белок коагулируют добавлением в плазму 0,1 мл валериановой кислоты) и отфильтровывают раствор через мембрану при перепаде давлений

30 ат в течение 20 мин. (Перепад давлений создают сжатым азотом). После фильтрации образовавшуюся пленку коагулированного белка промывают 35

50 мл физиологического раствора при том же давлении в течение 20 мин.

После промывки в вернюю камеру вводят 10 мл плазмы, предназначенной для экстракции, в нижнюю — 10 мл gg зкстрагента. Момент выпадения белка в объеме плазмы определяют методом светорассеивания с использованием

ФЭК-56 М. Выпадение белка в плазме начинается через 30 мин после начала . экстракции. За это время степень извлечения мочевины достигает 40% (содержание мочевины в плазме до экстракции 59 мг/100 мг плазмы, после экстракции 35 мг/100 мг плазмы) .

Параллельно проводят опыты по определению степени экстракции мочевины валериановой кислотой из плазмы крови собаки с мембраной, не.обработанной предварительно описанным способом. Степень извлечения мочевины за 30 мин достигает 40%, полная коагуляция белка в растворе наступает практически мгновенно.

Таким образом, как видно из приведенных данных, предложенный метод позволяет при той же степени извлечения экстрагируемого вещества избежать разрушение белка биологической жидкости.

Способ очистки биологических жидкостей, содержащих белок, включающий контактирование биологической жидкости с одной стороны полупроницаемой мембраны, пропускание экстрагента с противоположной стороны полупроницаемой мембраны, о т л и ч а ю щ и й" с я тем, что, с целью предотвращения нарушения структуры компонентов, на полупроницаемую мембрану осаждают путем создания на ней перепада давления предварительно скоагулированный белок.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Патент США Р 3953329,кл. 21022, опублик. 1976.

2. Патент США Р 3956112,кл. 21022 опублик. 1976.

3. Canadion Journal of Physiology

and Pharmacology. 1967, V.45, р. 705-715 °