Способ определения биологической активности холерного токсина

 

Союз Советских

Социалистических

Республик

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

< >889700 (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 090779 (21) 2794325/28-13 с присоединением заявки М (23) Приоритет—

Опубликовано 15.12.81. Бюллетеиь Н9 46

Дата опубликования описания 15.1 81 (51)М. Кл.з

С 12 И 1/00.

Государственный комитет

СССР яо делам изобретений и открытий (53) УДК 615. 372 (088.8) (72) Авторы

Н. К. Первухина, A. М. Голубев, P. P. Рамаева (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ.

ХОЛЕРНОГО ТОКСИНА

Изобретение относится к медицине, а именно к бактериальной токсикологии.

Известен способ определения био- логической активности холерного токсина путем -введения исследуемой пробы животному с последующим исследованием содержимого кишечника 11).

Однако известный способ не обеспечивает воэможности выявить количественные и качественные изменения конкретно в каждом из отделов кишечника, что снижает точность полученных результатов.

Целью изобретения является повышение точности способа.

Эта цель достигается.тем, что согласно способу определения биологической активности холерного токсина, осуществляющемуся путем введения исследуемой пробы животному с последующим исследованием содержимого кишечника, пробу вводят внутривенно, изолируют различные отделы кишечника и определяют в его содержимом индекс накопления жидкости, концентрацию ионов натрия, калия и хлора и по увеличения индекса накопления жидкости, повышению концентрации натрия, калия, хлора в двенадцатиперстной, подвздошной и тощей кишках, появлению гиперсекреции в энтероцитах слизистой оболочки этих отделов кишечника определяют биологическую активность холерных токсинов.

Способ осуществляют следующим образом.

Животным вводят токсичы (холероген или холерный эндотоксин) парентерально, в разные сроки интоксикации после вскрытия брктаной полости лигатурами, отделяют отрезки тонкого и толстого кишечника в соответст15 вии с анатомическим строением, выявленные изменения количества и концентрации ионов водорода, калия, натрия, хлора, бикарбонатов, белка содержимого каждого отдела кишечни20 ка сопоставляют е паточистологическими нарушениями и содержанием медиаторов в его стенке.

Пример 1. При внутривенном введении кристаллического холерного энтероксина в дозе 2 мг/кг к.ассы животного получены следующие показатели увеличения индекса накопления жидкости и содержания натрия, калия и хлора s ней по сравнению с

889700

Индекс накопления жидкости мг/см . 83

Концентрация ионов, мэкв/л натрия 59 калия 3,8 хлора 38,2.15, 9

55,9 67, 3

Составитель Ю. Алмазов

Редактор М. Петрова Техред Т. Маточка Корректор В.Синицкая ч каз 10898/44 Тираж 531 Подписное.

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений.и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5 филиал ППП "Патент", г. У>хгород, ул. Проектная, 4 контролем, которые приняты за эталонные.

Ичдекс накопле- Контроль ния жидкости, мг/см

420 62

Концентрация ионов, Контроль мэкв/л натрия 148 57,2 калия 6,8 . 3,7 хлора 56,8 38,1

Пример 2. При внутривенноМ введении холерного. токсина серии A (условное обозначение), полученного в дозе 0,5 мл/кг массы кролика, получейы .следующие показатели в сравнении с контролем.

Эталон, %

Индекс накопления (очищенный жидкости, холерный энмг/см теротоксин)

280 66,7

Концентрацйя ионов, мэкв/л натрия 88 59,5 калия 5,5 80,9 хлора 44,8 78,9

Пример 3. При внутривенном введении холерного, токсина серии В, полученного .в дозе 0,5 мл/кг массы кролика,. получены следующие показатели в сравнении с эталонными.

Эталон, Ъ .(очищенный холерный энтероксин)

19,8

Как видно из данных, приведенных в примерах, при сопоставлении индекса накопления жидкости и содержания ионов натрия, калия, хлора при внутривенном введении холерного энтеротоксина серии A и В в дозе 0,5 мл на 1 кг массы кролика с эталонными показателями дает воэможность оценить их биологическую активность в процентном отношении и заключить, что биологическая активность энтеротоксина серии А выше, чем в серии В.

Предлагаемый способ внутривенного введения холерных..токсинов дает возможность оценивать результаты уже через 3-5 ч и является более точным по сравнению с известным, так как исключает воэможность дополнительного накопления >хидкости в ки15 шечнике вследствие оперативного воздействия. Способ применен в трех сериях опытов на 120 кроликах и 65 сирийских хомяках.

20 формула изобретения

Способ определения. биологической активности холерного токсина путем введения исследуемой пробй >хивотному с последующим исследованием. содержимого кишечника, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью повышения точности способа, пробу вводят .внутривенно, изолируют различные отделы кишечника и определяют .в его содер30 жимом индекс накопления жидкости, концентрацию ионов натрия, калия и хлора и по. увеличению индекса накопления жидкости, .повышению .концентрации натрия, калия, хлора в двенадца35 типерстной, подвздошной.и тощей кишках, появлению гиперсекреции в энтероцитах. слизистой оболочки этих отделов кишеЧника определяют биологическую активность холерных токсинов.

10 Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Ungar. Studies on cholera toxin and anti toxin. G. Yen .»>i crobi ol o, т. 64, 9 1, 1970, с. 1-10.