Способ определения железа в сыворотке крови

 

(72) Авторы изобретения

А.Б.Абакаров и О.A.Tàòàtâ

Дагестанский государственный университет им. В.И.Ленина

/ (71) Заявитеяь (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЖЕЛЕЗА В СЫВОРОТКЕ

КРОВИ

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической диагностике.

Известен способ определения железа в сыворотке крови путем минерализации пробы в смеси азотной кислоты и перекиси водорода с последующим добавлением в реакционную смесь органического реагента и фотометрирования полученного окрашенного комплекса (1).

Однако известный способ длителен по времени и не позволяет точно определить железо в сыворотке крови.

Цель изобретения — ускорение и по1S вышение точности способа.

Эта цель достигается тем, что способ определения железа в сыворотке крови осуществляют путем минерализации пробы в смеси азотной кислоты и переки20 си водорода с последующим добавлением в реакционную смесь органического реагента и фотометрирования полученного окрашенного комплекса, в качествв органического реагента используют 5,8-оксихинолиндиоксим..

Способ осуществляется следующим образом.

В фарфоровый стакан на 25 мл вносят 1 мл сыворотки, прибавляют 2 мл бидистиллированной воды, 2 мл концент рированной азотной кислоты, 3 мл 30 ного раствора перекиси водорода, накрывают часовым стеклом и кипятят на электрической плитке с асбестовой прокладкой. Когда смесь выпарится до 1-2 мл, прибавляют 2 мл перекиси водорода и 1 мл кислоты, кипячение продолжают до полного выпаривания под накрытым стеклом, а далее без стекла - досуха. Добавляют 3 мл

0,01 н. раствора HCl и выпаривают до 1-1 5 мл, охлаждают, добавляют

1 мл 104-ного раствора тиомочевины и по истечение 5 мин добавляют 1,Омл

0,063-ного раствора 5,8-хинолиндиоксима и 7. мл буферного раствора.

90832

Результаты определения предлагаемым способом, мкг 4

Время, необходимое на 6 проб, мин

Результаты определения известным способом, мкг 4

Время, необходимое на определение 6 проб, мин

138

130

135

137

140

140

128

135

127

126

139

140

131

ycp = 138,2 + 2,02 уср = 129,5 + 3,5

ВНИИПИ Заказ 676/4 Тираж 7Щ Подписное

Филиал ППП "Патент", г.Ужгород, ул.Проектная,4

Весь объем количественно переносят в градуированную пробирку и доводят до 6 мл буферным раствором.

Необходимое количество буферного раствора сначала прибавляют в стакан и ополоснув его, присоединяют с общим объемом. Экстинкцию измеряют на фотоэлектрокалориметре при фиолетовом светофильтре при длине волны

400 нм в кювете с толщиной слоя 10мм 10 относительно контрольной пробы.

Для приготовления контрольной пробы смешивают 1,5 мл 0,01 н. раствора НС1, 1,0 мл 0,06 -ного раствора

5,8-хинолиндиоксима и объем доводят 15 до 6 мл буферным раствором.

Отдельно готовят стандартную пробу и измеряют экстинкцию ее при ех же условиях относительно контрольной

Предлагаемый cnocob оЬладает высокой чувствительностью, обеспечивает высокую точность и значительно сокращается время определения с 140 до

90 мин. формула изобретения

Способ определения железа в сыворотке крови путем минерализации пробы в смеси азотной кислоты и перекиси водорода с последующим добавлением в реакционную смесь органического

2 4 пробы к 1 мл рабочего стандартного раствора (с концентрацией железа

1 мкг), прибавляют 1 мл 10 -нога раствора тимочевины и далее продолжают известным способом.

Расчет производят по формуле

С,, мкгд = А /А . 100, где A „ - оптическая плотность исследуемой пробы, Ac - то же самое для стандартной пробы, С „ - содержание железа в исследуемой пробе, мкг 4;

100 — коэффициент для выражения содержания железа в мкг .

Результаты определения железа в сыворотке крови предлагаемым и известным способами представлены в таблице. реагента и фотометрирования полученного окрашенного комплекса, о т л ич а ю шийся тем, что, с целью ускорения и повышения точности способа, в качестве органического реагента используют 5,8-оксихинолиндиоксим.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Асатиани В.С. Биохимический анализ. Тбилиси, 1962, с. 33-38.