Способ определения димедрола в биологических объектах
(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ДИИЕДРОЛА В БИОЛОГИ4ЕСКИХ
ОБЪЕКТАХ
Изобретение относится к аналити" ческой химии и касается определения димедрола.
Известен способ определения димед-. рола в биологических объектах путем обработки пробы концентрированной серной кислотой с последующим фотометрированием-полученного раствора (lj .
Однако известный способ обладает недостаточно высокой чувствительнос.тью.
1Ю
Цель изобретения - повышение чувствительности способа.
Поставленная цель достигается тем, 35 что согласно способу определения ди;. медрола в биологических объектах, осуществляемому путем обработки пробы концентрированной серной кислотой с последующим фотометрированием полученного раствора, в пробу дополнительно вносят диметилформамид:и по флуоресценции полученной смеси определяют концентрацию димедрола.
Пример 1. Определение димедро ла в 13-ном растворе. К l мл 13-ного раствора из ампулы приливают 9 мл концентрированной серной кислоты, перемешивают. К 1 мл полученного раствора осторожно приливают 9 мл диметил юрмамида, перемешивают переворачиванием и замеряют интенсивность, флуоресценции. Содержание димедрола
- рассчитывают по стандартному образцу, для приготовления которого к
1 мл водного раствора димедрола с содержанием препарата 10000(мкг/мл) приливают осторожно 9 мл концентрированной .серной кислоты и 1 мл полученного раствора разбавляют 9 мп диметилформамида. Измеряют интенсив" ность флуоресценции одновременно с исследуемыми образцами. По результатам этих измерений рассчитывают содержание димедрола в анализируемой пробе. Результаты флуореметрического определения димедрола в 1Ф растворе представлены в табл. 1.
930123
Т а б л и ц а 1
Найдено димедрола
0,090
0,094.-90
0,092
90
90
0,091
О, 090
Табл ица 2 айдено димедрола о калибровочному рафику, мкг/мл
Из расчета на
1 таблетку, гр
О 155
0,149
0,149
45,0
0,045
46,0
0,046
0,152
46,0
0,046
46,0
0,144
0,046
0,046
46,0
0,150
По калибровочному графику (мкгlмл) Пример 2. Определение димедрола в таблетках 0,05. зо
Точную навеску мелкоизмельченных таблеток, равную 0,15, растворяют в
l0 мл дистиллированной "воды. К 1 мп данного раствора приливают осторожно 9 мл концентрированной, серной кис- з лоты, тщательно перемешивают. К l мл полученного раствора добавляют 9 мл . диметилформамида и замеряют интенсивность флуоресценции. Содержание димедНавеска таблеток мелкоизмельченных, гр
В 14-ном растворе (гр/мл) О, 090
0,090
0,088 .0,090
0,098 рола определяют по стандартному раствору, для приготовления которого к
1 мл водного раствора димедрола с содержанием препарата 5000 мкгlмл приливают 9 мл концентрированной серной кислоты, перемешивают. К 1 мл полученного раствора прибавляют 9 мл диметилформамида и флуориметрируют одновременно с растворами исследуемых образцов. Результаты флуориметрического определения димедрола в таблетках 0.,05 представлены в табл. 2.
48,0 О, 048
930123
Продолжение табл. айдено димедрола о калибровочному рафику, мкг/мл
Из расчета на
1 таблетку, гр
45,0
0,147
О, 045
0,153
0,046
46,0
О, 151
0,047
47,0
Т а б л и ц а 3
В 1 мл сыворотки, мкг/мл
455,0
45,5
442,0
44,2
42,8
428,0
428,0
442, О.
428,0
42,8
44,2
42,8
400,0
414,0
428,0
40,0
41,4
42,8
442,0
Навеска таблеток мелкоизмельченных, rp
Пример 3. Определение димед" рола в сыворотке крови., 5 мл исследуемой оксалатной кро" ви помещают в центрифужную кювету и 2© центрифугируют в течение 20 мин при
8 тыс об/мин. К 1 мл. центрифугата в делительной воронке прибавляют 1 мп
53-ного раствора едкого натрия и
10 мл гексана и перемешивают в течение. 15 мин. Верхний слой отделяют в чашку для выпаривания. Зкстракционирование повторяют. Гексан выпаривают на водяной бане при температуре не выше 60 С. К сухому остатку приливают
1 мл концентрированной серной кисло" ты, перемешивают стеклянной палочкой, добавляют 9 мл диметилформамида и переносят в кювету флуориметра. ФлуоПо калибровочному графику, мкг/мл риметрируют раствор одновременно со стандартными образцами. Количество димедрола в исследуемой пробе определяют по калибровочному графику, для построения которого к 1 мп вод" . ного раствора димедрола с содержанием препарата 10 000 мкгlмл пРиливают
9 мл концентрированной серной кислоты, перемешивают. К 1,0;0,5 и 0,1 мл данного раствора соответственно приливают 9,0; 9,5 и 9,9 мл диметилформамида. Стандартные образцы флуориметрируют одновременно с исследуемыми растворами. По результатам флуори-. метрии строят калибровочный график.
Результаты определения содержания димедрола в сыворотке крови отражено в табЛ-. 3.
0123 8 со стандартными образцами. Количество димедрола в моче определяют по калибровочному графику, для построения которого к 1 мп водного стандартного раствора димедрола, с содержанием препарата 10 000 мкг/мп, прибавляют 9 мл концентрированной серной кислоты, перемешивают переворачиванием осторожно. К 1, 0,5 и 0,1 мл полученной
10 смеси приливают соответственно-9,0
9,5 9,9 мл диметилформамида и флуориментрировать одновременно с опытными образцами. По результатам измерений строят калибровочный график. Результаt ты определения димедрола в моче приведены в табл. 4.
Табл ица 4
7 93
Il p и м е р 4. Определение димед- рола в моче.
Найдено димедрола в моче, мкг/мл
По калибровочному графику В 1 мл мочи
40,0
400,0
44,0
440,0
42,0
420,0
420,0
42,0
4Р,5
405,0
45,1
451, О
45,0
450,0
420,0
42,0
44,0
440,0
420,0
Формула изобретения
Способ определения димедрола в биологических объектах путем обработки пробы концентрированной серной
50 кислотой с последующим фотометрироввнием полученного раствора, о т л и"
ВНИИПИ Заказ 3457/56 Тираж ЯЯ Подписное
Ю филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4
К 1 мл мочи в делительной воронке
1 приливают 10 мл гексана и встряхива" ют 10 мин. Дают отстояться до полно" го разделения фаз. Верхний слой отделяют в фарфоровую чашку дпя выпари-. вания. Экстрагирование повторяют. Выпаривают гексан в чашке на водяной бане при температуре не более 60 С, К сухому остатку приливают 1 мл концентрированной серной кислоТы, тщательно перемешиваюТ стеклянной палочкой, добавляют 9 мл димегилформамида и флуориметрируют одновременно, 42,0
Предлагаемый способ позволяет по-.,: высить чувствительность до мкг/мл по сравнению с известной 5 мкг/мл.
7 . ч а ю щ и " с я тем, что, с целью по"., вышения чувствительности способа, в пробу дополнительно вносят диметилформамид и по флуоресценции полученной смеси определяют концентрацию димедрола.
Источники информации, принятые во внимание при экспертизе
1. Государственная фармакопея
СССР. И., 1978, (Изд. 10-е), с. 254256.
