Штамм клубеньковых бактерий сои rнizовiuм jароniсuм 629 @ 187 (вниисхм)-активный симбоитический азотфиксатор

 

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик

« «939547 (6! ) Дополнительное к авт. свнд-ву(22) Заявлено 05. 01.81(21) 3232824/30-15 с присоединением заявки М— (23) Приоритет—

Опубликовано 30. 06. 82. Бюллетень М 24 (53)М. Кл.

С 12 N 1/20 т1теударстмнный квинтет

СССР вв делан изобретений и открытий (53) УДК 576.851. .155 (088.8) Дата опубликования описания 30. 06. 82

А.Т. Новикова, Г.А. Бондаренко, А.В. Хотянович и А.И. Позднякова (72) Авторы изобретения

l т

Всесоюзный научно-исследовательский институт сельскохозяйственной микробиологии (71) Заявитель (4) ШТАММ КЛУБЕН6КОВЫХ БАКТЕРИЙ СОИ RHIZQBIUM

JAPONIGN 629 (87) (ВНИИСХМ) - AKTHBHHA

СИМБИОТИЧЕСКИЙ АЗОТФИКСАТОР

Изобретение относится к микробиологическим средствам повышения урожайности бобовых культур и представляет собой новый штамм клубенько" вых бактерий сои Rhizobium jagonicum 629+, (87), предназначенный для промышленного изготовления препаратов клубеньковых бактерий под сою.

Известен бактериальный препарат нитрагин на основе использования симбиотических азотфиксирующих микроорганизмов - клубеньковых бактерий - широко применяемый для повы- . шения урожайности бобовых культур 1 1).

Однако в известном препарате т5 недостаточно хорошие технологические свойства, т.е. пригодность для промышленного изготовления препаратов клубеньковых бактерий.

Известен штамм клчбеньковых бактерий сои Rhizobium japonicum б46, который в настоящее время используется для изготовления нитрагина f 2).

Недостаток известного штамма— относительно невысокая азотфиксирующая активность и конкурентная способность.

Цель изобретения - получение штамма клубеньковых бактерий сои с более высокой азотфиксирующей активностью и конкурентной способностью в сравнении с известным штаммом для получения более высокого урожая зерна сои с повышенным содержанием в нем белка, одновременно обладающего хорошей технологичностью при массовом производстве препарата.

C%

Ятамм ИпгоЬипп japonicum 629 (87) является высокоэффективным симбиотическим азотфиксатором.

Хранится в коллекции клубеньковых бактерий Всесоюзного научно-исследовательского института сельскохозяйственной микробиологии в r.Ëåнинграде и имеет регистрационный номер 629 се

3 93954

Бактерии штамма 629 (87 ) выделены из клубеньков сои сорта Смена, произраставшей на бурой луговой почве

Приморского края. Растут на питательных средах следующего состава: s люпиновый агар, г/л: К НР04 0,5 .

КНаРО. 0,5; И О 0,2; WCe0,2; СаО,, 0,1; (Н4,) ИоО следы, маннит 20,0; люпиновая мука 10,0," агар 20,0; рН. среды 6,8-7,0. Гороховый агар, г/л: горох 100,0, сахароза 20,0, агар

20,0 рН среды 6,8,-7,0.

Иорфолого-культуральные признаки.

Величина клеток пятисуточной культуры на люпиновом агаре 2,0- )5

5,0х1,0-1,3 мк. Палочки в молодом возрасте подвижные, монотрихи. Бактероиды - такие же палочки,,как и клетки в молодом возрасте, лишь значительно крупнее. Иедленнорасту- 20 щая культура. Штрих на люпиновом агаре обильный, умеренно слизистый, белый. Колонин на гороховом агаре на 7-8-ой день мелкие, круглые выпуклые, слизистые, белые, до 1,5 мм25 в диаметре. физиолого-биохимические признаки.

Иолоко с лакмусом не пентонизирует; подщелачивает. Желатину не разжижает. Аэроб, оптимум температуры зв

7 4

26-28 С. Оптимальное значение рН

6,8-7,0.

Отношение к углеводам.

Хорошо используют лактозу, мальтозу, рамнозу, сорбит, маннит, сахарозу> слабее — глюкозу, декстрин, галактоэу; очень слабо - ксилозу.

Не усваивают клетчатку и крахмал.

Отношение к источникам азота.

Растут на средах с аммонийными и аэотнокислыми солями. Иаксимальный рост достигается в присутствии аминокислот глицина и тирозина.

На ИПА бактерии не растут.

Серологическая характеристика..

Бактерии имеют антигены серогруп-i пы 617. Признаки штамма устойчивы.

Штамм не патогенен. Пересевается один раз в 6 месяцев и хранится о на люпиновом агаре при Й-5 С.

Азотфиксирующая активность штамма 629о (87) определяется по высоте урожая и содержанию в нем белка в полевых опытах. Географической сети опытов с нитрагином в 19751978 г.г. В схему каждого опыта включен в качестве эталона штамм 646.

Результаты этих исследований представлены в табл.l.

939547

CV

>.О м

СМ ш .;1

- 3

- . -0.

С0 м -.т

О0 сч м

- 2 О л л сч

М -0-а О ш. л л л сч м о м л х

2i

Э о с с4 о

° е а

О LA

CV - 1" N ш

С > со м о л

С

°

m м е л о

С:>

° О ш е — С > л л л м в ш ш м л

СМ л

0О

С 4 .О ш м

СЧ

S о и с м

СМ ш лл

Я Се ) С0 м л м

C>I л е, л. 00 л

CD ш О

° л

Cjl c

СМ

0 1 л

С е 1

CD ш

СМ

СС

1 Ig о х

m u

СС а сп

-з.

g>

1 Ig

СЭ Z

=1 х о

СО Л

Z - Л

S СЧ

Се>

01 IL а С0

0I о

1 Ю сх л

X O а

ID K

X >О

1 Z о

E

Ig

1>Х

Х

Ig

1о

IZ:

:1

Iо

С

Е с ч

0I с

0) E о

X

1э

X о о

Iз с о

Сс.

IQ

Х

1Б с о х и х о

)X и х

Ig

С0 х и

ji а

ЬС

Ig

Ф

Z о

С:

>S СО

S а 01

Cg хш

Щ

tQ 01

>ХС л X

I2 С0

О 1

Z> .0 С

Z O

0) сс

>) .Л

1.о Х

1Y е е

С>Ъ

-1 СО Л =1- m СО л л л е о л СО О >,О 1О â€” . м м м сч м м сч О -т .ш >О с4 м Ch е л ° л л л о ш ш ш т сч сч

K т

Ю

>Х

X Z

V >X

)Х S

X X о о о о х а С0

0I и а

1В

N м ш О л сО о и

tg

Cf 3 Х о е

I- 01

З Z

1- Ig с0 оа с0 О

Cg>YO

0I 6

z m

ct сои

0I S 01 а асч

С Э

Повышение сбора белкас ra по сравнению со штаммом

646, кг

Валовой сбор белка с гектара, кг

Прибавка урожая

Содержание белка в зерне,4

Урожай зерна, ц/га по сравнению со штаммом 646, ц/га по отношению к контролю, ц/га

Без инокуляции контроль

586

36,6

16,0

Инокуляция штаммом 646 21,9

42,0

920

5,0

Инокуляция штаммом

1074

629О(87 ) 154

8,8

24,8.2,9 18,1 43,3 тара, чем при использовании штам ма 646.

Эффегтивность нитра гина (гамма ризоторфина,)изготовленного на штамме 629+(87), проверена в производ. ственных условиях Крымской области в 1979 г. Урожай зерна сои при применении этого штамма на площади

260 га выше на 1,5 ц, а чистый доход больше на 32,56 рубля с гекФормула изобретения

Штамм клубеньковых бактерий сои

Rhi zobium. 1яроп слп 629% 871 (ВПИИСХН)активный симбиотический аэотфикса7 939547 8

Как видно иэ табл. 1, предлагаемый вами дает высокие титры при выра2 d(8

Э штамм 629 (87) отличается от извест- - щивании на жидких регламентных ного штамма 646 более высокой актив- средах и в торфяной культуре ф преностью азотфиксации. При инокуляции парат ризоторфии7. Бактерии штамма сои бактериями штамма 629 (87) уро- g 629 (87) хорошо сохраняются в. жай зерна повышается на 7,3 ц/ra, торфяном препарате при его длительчто на 3,1 ц/га или 17,34 выше, ном хранении. Изложенное показывает чем. при использовании штамма 646. возможность использования штамма

Содержание белка в зерне сои, бакте- 629ш(87) для промышленного изго.риэованной предлагаемым штаммом, на 10 товления препаратов клубеньковых бак1,6 выше, чем при применении иэвест- терий под сою. ного штамма.

Бактерии штамма 629 (87 ) обладают

В течение 5 лет предлагаемый более высокой конкурентной способ- штамм 6290(87)испытывался на Крымностью, чем бактерии штамма 646: ской сельскохозяйственной опытной при смешанной инокуляции сои этими станции. Урожай зерна сои, семена штаммами 853 клубеньков на корнях которой обрабатывали штаммом 629О растений образуют бактерии предла- (87), в среднем на 2,9 ц/га выше, гаемого штамма. Они имеют также чем при применении штамма 646. При широкий спектр инокуляции, так этом содержание белка в зерне сои как вступают в эффективный симбиоз выше на 1,34, В результате валовой с различными сортами сои. сбор белка с гектара посева с приШтамм 629 с1 (87 ) характеризуется менением инокуляции штаммом 629 высокими технологическими свойст- (07 ) увеличился на 154 кг (табл.2).

Табли ца 2

Урожай зерна и валовой сбор белка при инокуляции сои штаммами Rhizobium jaionicufii 646 и 629С (87) на Крымской сельскохозяйственной опытной станции за 1975-1979 r.г. (среднее из 5 опытов) тор, предназначен для промышленного изготовления препаратов клубень ковых бактерий под сою. Хранится в коллекции клубеньковых бактерий

Всесоюзного научно-исследовательского института сельскохозяйственной микробиологии в г.Ленинграде под номером 629О.

939547

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Дорсинский Л.М. Клубеньковые бактерии и нитрагин. Л., "Колос", 1970, с.51, 123.

2. Авторское свидетельство СССР

И 491695, кл. С 12 К 1/00.

Составитель А. Грачев

Т М. Тепер Ко екто E. з 599/ р 505 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, N-35, Раушская наб., д. 4/5 филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная,