Способ получения производных аминогликозидаминоциклитола

 

О П И С А Н И Е „„952109

ИЗОБРЕТЕН Ия

Союз Советскик

Соцналмстическик Республик

К ПАТЕНТУ (61) Дополнительный к патенту

3 (51) М. Кл. (22) Заявлено 110377 (21) 2458602/23-04

С 07 H 15/04

//А 61 К 31/71 (23) Приоритет — (») 11. 03. 76

Государственный комитет (31) 09859/76 (13) Вели кобри тани я

Опубликовано 15. 08. 82 Бюллетень М 30 ло делам наооретеннй н открытий (53) "ДК 547,455. . 07 (088. 8) Дата опубликования описания 17.08.82

Иностранцы

Стефан Жеро, Даниель Мерсье, Ален Олеске (Франция) (72) Авторы изобретения е:Сь-ер

Иностранная фирма

"Лябаз С.А" (франция) (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ

АМИНОГЛИКОЗИДАМИНОЦИКЛИТОЛА

Изобретение относится к способам получения новых аминогликозидаминоциклитольных производных, обладающих антибиотической активностью.

Цель изобретения - получение новых, полезных соединений, расширяющих арсенал средств воздействия на живой организм.

Поставленная цель достигается путем микробиологического синтеза последних,.основанного на методе биоконверсии, заключающемся в введении соответствующего диаминоциклитола . или псевдосахарида в антибиотик с использованием штамма мутанта fi )

Согласно предлагаемому способу можно получить новые производные аминоциклитола общей формулы о с ® где Й,1 и R различны и представляют собои Водород или -CH>NH»

R выбирают иэ груйпы, состоящей из

Ч! у О

НО

2Щ

@о W,O " Лж 6 нц

08 (А) (5) где R - анино или оксигруппа;

К4 - Н-11Н или Н-МНСН, сн где 116 - водород или метилрадикал или их фармацевтически приемлемых кислотно-аддитивных солей, ° Предлагаемый способ заключается в том, что деоксистрептамин - отрицательный мутант микроорганизма о

Streptomyces культивируют при 28-30 С на питательной среде, содержащей источник углевода, источник ассимилируемого азота и микроэлементов в

3 9521 присутствии соединения общей формулы

Nl е

30 нн

Х или его кислотно" аддитивные соли, где Х и J - водород, или Х означает

ОН, J означает группу формулы о

ЮО где Ry Имеет приведенные значения, причем деоксистрегистамин - отрицательный мутант Streptomyces представляет собой 0-Streptomyces fradial

АТСС21401 или 0"Streptomyces rimosus го вида paramomycinus ATCC21484, если питательная среда содержит соединение формулы 11, в которой Х и I имеют одинаковые значения, и D-Streptomyces

rimosus вида paramomycinus АТСС21484,2s если среда содержит соединение формулы 11, в которой Х и У имеют различные значения, Целевой продукт выделяют в виде основания или в виде фармакологически приемлемой соли. Зо

Согласно предлагаемЬму способу по-. лучают антибиотик в форме свободного основания независимо от того, присутствует ли диаминоциклитол формулы 11 в виде свободного основания или в Форме соли. Если желательно использовать полученный в результате антибиотик в виде соли, достаточно провести реакцию с подходящей органической или неорганической кислотой, например серной, с получением фармацевтически применимой соли присоединения кислоты.

Соединения формулы 1 могут существовать в форме эпймеров и смеси укаэанных эпимеров.

Соединения изобретения имеют химические структуры, которые подобны структурам неомицина или паромицина.

По этой причине соединения формулы 1 будут обозначены далее как производные неомицина или паромомицина следующим образом: 6-деоксинеомицин В, если g,q представляет собой водород, R " СН ЙН, à к- rpynny А, в которой представляет собой КН, 6-де55 оксинеомицин С, если Rq представляет собой СН ЙН), К " водород, a R —rpynny A, в которой РЪ представляет собой ЧН ;(смесь этих двух эпимеров, полученная по предлагаемому способу, обозначается далее как 6-деоксинеомици ); 6-деоксипаромомицин 1, если

R q представляет собой водород, 1

СН ЙН, а к - группу А, в которой R представляет собой ОН; 6-деоксипарамомицин 11, если Rq представляет собой

СН,ИН, R> - водород, а Й - rpyn" у А, в которой Р3 представляет собой ОН (смесь этих двух эпимеров, полученная по предлагаемому способу) далее называется б-деэоксипаромоми-. цин).

) (Смесь 3,4 -дидеоксинеомицина и

его производных обозначает неразделенную комбинацию соединений, в кото" рой И и R, являющиеся различными, представляют собой водород или СН gН, а R - группу В.

Термин "неомицин" используется

0 для обозначения смеси неомицина В и неомицина С, которая получается при культивировании S t reptomyces f radi а! l

Аналогичным образом название ппаромомицин" используется для обозначения смеси паромомицина 1 и паромомицина 11, которую получают при культивации Streptomyces rimosus формы рагапкнпус1паз, Производные аминогликозидаминоциклитола обладают значительной антибиотической активностью, которая делает их полезными для лечения болезней, вызываемых ростом патогенных бактерий, таких как Eschirichia coli, Proteus mirab1ls, Staphylococcus

aureus Sarcina lulеа, К1ebsiаllа edwarolэ1i Shigella sonnei Salmonella

Lyphimurium.

В ходе исследований, проводимых с соединениями, было обнаружено, что

) смесь 3.,4 -дидеоксинеомицина и его производных обладает отчетливой антибиотической активностью против организмов, которые являются устойчивыми к действию других аминоглинозид-аминоциклитольных антибиотиков, в особенности к действию неомицина и гентамицина. Так, смесь 3,4 -дидеоксиl неомицина и его производных активна против штаммов Escher i chi а со1i, которые устойчивы к действию гентамицина и неомицина посредством 2"аденилирующего энзима и 3 -фосфорилирующего

l энэима соответственно.

Микроорганизмы, используемые согласно предлагаемому способу, представляют собой 0-Streptomyces fradial

9521

АТСС21401 и 0-S t reptomyces r imosus форму paramomyci nus ATCC21484 (1 1.

D-Streptomyces fradial АТСС 21401 используется для получения 6-деоксинеомицина, а О-Streptomyces rimosus фор- 5 ма paramomycinus ATCC21484 - для получения 6-деоксипаромомицина и смеси !!.

3,4 -дидеоксинеомицина и его производных.

Таким образом, если питательная среда содержит соединение формулы 11, в которой X и У имеют одинаковые значения, то деоксистрептамин - отрицательный мутант Streptomyces представляет собой О-Streptomyces fradial

АТСС21401 или 0-Streptomyces rimosus вида paramomycinus АТСС21484, а если среда содержит соединение формулы 11, в которой X и У имеют различные значения, то микроорганизмом является ?o

D-Streptomyces rimosus вида paramomyciflUs °

Процесс обычно осуществляют следующим образом.

Микроорганизм выращивают при 28- 25

30 С в питательной среде, имеющей значение рН 7,2-7,5 и содержащей питательные элементы, выбранные из глюкозы, гидролизат.в казеина, (ЙН1) НРО

MqS0q 7Н 0, FeS0 7Н, 0, CuS04 5Н>0, зо

СаСО . Затем добавляют в другую питательную среду для роста, содержащую диаминоциклитол формулы 11 в виде свободного основания или соли присо- единения кислоты и питательные вещест55 ва, выбранные из группы, содержащей соевую муку, дрожжевой экстракт, ЙаС1, СаСО3 и глюкозу, при значении рН 7,27,3. Культурную среду инкубируют при

28-30 С при встряхивании и хорошей 4о адрации в течение по крайней мере, 5 дней до достижения оптммального по,лучения требуемого б-деоксинеомицина, 6-Деоксипаромомицина или смеси 3,4 дидеоксинеомицина и его производных. 4>

6-Деоксинеомицин В, 6-деоксинеомицин С, 6-деоксипаромомицин 1.и 6-деоксипаромомицин 11 могут быть получены из 6-деоксинеомицина и 6-деоксипаромомицина соответственно, . например, путем их выделения с помощью бумажной хроматограпии. Изомеры, составляющие у / смесь 3,4 -дидеоксимеомицина и его ирои з водных т акже мо гут быт ь разделены традиционными способами.

Соединение формулы 11, в которой X и У означают водород, называемое далее 2,4-дидеоксистрептомин представляет собой известное соединение. Оно может быть получено гидрированием в присутствии катализатора, например никеля Рэнея, 1D=(1,3,5/2) = 1,5-диаэидо-2,3-циклогексан-диола, получен" ного иэ 1Ь =-1,5"ди-0-тоэил- 1,2,5/3= циклогексантетрола и азида натрия, Соединение формулы 11, где X означает ОН, а У является радикалом формулы я называемое далее смесью гептаминов, может быть получено из промышленного гентамицинсульфата.

Аминогликозид - аминоциклитоль" ные производные демонстрируют значительную антибиотическую активность, Такая антибактериальная активность против различных испытуемых организмов иллюстрируется следующими данными.

Антибактериальная активность 6"деоксинеомицина и б-деоксипаромомицина, Аминогликоэид - аминоциклитольные произ водные и спытыв ают. на антибиотическую активность путем добавления измеренных количеств изучаемого соединения в стерильной воде к питательному агару. Затем агар, содержащий увеличивающиеся концентрации испытуемого соединения, переливают в чаши

Петри, в каждую из которых механически с помощью мультиинокулятора добавляют несколько различных организмов, которые предварительно выращивают в соответствующей среде и хранят при с

-20 Г в смеси питательная среда/глицерин в соотношении 1:1. Чаши инкубируют при 37 С в течение 14 ч и затем изучают рост.

Концентрацию антибиотика, которая ингибирует рост бактерий, обозначают как "минимальная ингибирующая концентрация" или М.1.С.

Полученные результаты приведены в табл. 1 в сравнении с:действием неомицина и паромомицина в сульфатной форме.

Значения, приведенные в табл. 1 и 2, соответствуют количеству свобод ного основания.

Эти результаты показывают;-что удаление гидроксильной группы из шестого положения аминоциклитольного фрагмента неомицина, что соответствует б-деоксинеомицину, незначительно

7 9521 изменяет общую антибактериальную активность неомицина.

Антибактериальная активность 6-деоксинеомицина против Escherichia coli

W3110 имеет более высокое значение, s чем для неомицина.

Активность 6-деоксинеомицина В и

6"деоксинеомицина С.

Антибактериальную активность 6-де- . оксинеомицина В и 6-деоксинеомицина С10 испытывают описанным способом, исполь- эуя йри этом в качестве питательной среды О.S.Т. агар, и И.1.С. отмечают в сравнении со значениями для неомицина и 6-деоксинеомицина. Полученные 13 результаты приведены в табл. 2..

Из полученных результатов видно, что 6"деоксинеомицин В в некоторой степени менее активен чем неомиt

20 цин В, но что 6-деоксинеомицин С более активен, чем неомицин С.

Активность смеси 3,4 -дидеоксинео) I мицина и его производных.

Антибактериальную активность смеу Р 25 си 3,4 -дидеоксинеомицина и его про . иэводных определяют в соответствии с описанной методикой. 0-Streptomyces

rimosus формы paramomycinus ATCC 21484 инкубируют при 30 С в чашке с питао тельным агаром, содержащим 5@ ìãlìë смеси гентаминов формулы i11. Через три дня чашу загружают агаром, засе.янным испытуемым организмом, и производство антибиотика демонстрируют зоной ннгнонроввннв вокруг ззгврго. myces. Такую зону измеряют и сравнивают с зоной контрольного опыта, полученного при использовании одного, питательного агара.

Для сравнения аналогичное испытание осуществляют с концентрацией неамина 50 мг/мл в качестве добавки в питательный агар вместо сме и гентаминов формулы 111 и также при использова- нии D-Streptomycer r imosus АТСС 21484. 4$

Установлено, что полученный антибиотик представляет собой неомицин.

Полученные результаты приведены в табл. 3.

Приведенные значения показывают, 54

1 I что смесь 3,4 -дидеоксинеомицина и его производных является активной против организмов, устойчивых к действию неомицина. Организм E.Coli PT2 также устойчив к действию гентамицина.

Для терапевтического использования соединения согласно предлагаемому способу могут применяться в виде фар

0,025

До объема

100 мл

Культуры инкубируют в ЭрленмейероВских колбах при 28-30 С на роторном встряхивателе при хорошей аэрации.

Вырабатывание 6-деоксинеомицина начинается через 2 дня и становится оптимальным через 5 дней.

09 8 . мацевтической или ветеринарной композиции с единичной дозой, соответствующей требуемому виду применения, причем композиция включает в качестве актив-

Ного инградиента по крайней мере одно соединение согласно изобретению совместно с фармацевтическим носителем или наполнителем. Для орального применения композиция может иметь, например, форму покрытых или непокрытых таблеток, твердой или мягкой желатиновой капсулы, суспензии или сиропа.

Такая композиция может выполняться в виде свечей для ректального или ва гинального применения, раствора или суспенэии для парентврального применения, крема или мази для наружного применения, Пример 1. Получение 6-деоксинеомицинового основания и его сульфата. а) 6-Деоксинеомицин в виде свобоДного основания 0-Streptomyces fradiа!

АТСС 21401 выращивают в колбе в течение 48. ч, предварительно установив рН 7,2-7,3, на следующей среде, r:

Глюкоза 1

Гидролиэат казвина 1 (нн4) НРО 1 и9ьод 7н,о 0t05

FeS0 7Н О 0,005

CuS0 5Н О 0,005

СаС Од, 1

Вода До объема

100 мл

Такую культуру встряхивают и поддерживают при 28 С в течение указанн@го периода времени. 103 прививочного материала этой культуры затем добавЮ ляют, предварительно установив рН

7,2-7,3, в следующую питательную сре дур

Глюкоза 1

Соевая мука - 2,5

Дрожжевой экстракт 0,5

NaCT 0,5

СаСО . 0,2

2,4-Дидеоксистрептамин дигидрохлорид

Вода

952109

Контрольные культуры, содержащие

2,4-дидеоксистрептамин дигидрохлорида не производят б-деоксинеомицин.

Культуральную среду затем центрифу гируют и всплывную жидкость пе рели - 5, вают через колонку, содержащую слабоислотную1 карбоксильную (полиметакри— овую) катионообменную смолу средней пористости (Amber 1 i te РС-50, Amber11te - торговое наименование) в аммониевой форме.

Эту операцию проводят дважды для, экстрагирования 6-деоксинеомицина и непревращенного 2,4-дидеоксистрепт» амин дигидрохлорида. Колонку промыв ают водой и 6- де о к си не о ми ц и н элюи руют 2 н. раствором гидроокиси аммония в воде. Элюат концентрируют в вакууме в роторном испарителе и затем пропускают через колонку с Sep- 20

hadev G-10. Элюирование 0,1 М раствором гидроокиси аммония дает 6-деокси неомицин в первых фракциях и 2,4-дидеоксистрептамин дигидрохлорида в по,следующих фракциях.

10

Согласно этому способу получают

6-деоксинеомицин в виде свободного основания, который имеет активность

83 единицы (1 единица = 1 мг/мл неоми-З0 цина ). Это соответствует введению в 6"деоксинеомицин, полученный таким . образом, приблизительно 22 2,4-ди". деоксистрептамин дигидрохлорида, который использовали вначале.

Это значение представляет максимальную активность, и дальнейшее ин. кубирование не приводит в результате к увеличению количества 6-деоксинеомицина. 40

В качестве альтернативного процесса сырой 6-деоксинеомицин очищают бумажной хроматографией на Ватманской бумаге N ЗИМ, осуществляют проявле45 ние. раствором метанол/гидроокись ам" мания в соотношении 4/1. Положение

6-деоксинеомицина визуально определяют. с использованием 0,253-ного раство- ра гипохлорита натрия в воде, затем абсолютного этанола и далее 13-ным раствором крахмала и 14-ным раствором иодида калия в воде с сушкой воздухом между применением каждого из,реагентов.

Rf 6-деоксинеомицина .0,30.

Rf для неомицина, 2"деоксистрепт" амина и 2,4"дидеоксистрептамина в той же системе растворителей составляет

Неомицин 0,26

2-Деоксистрептамин 0,58

2,4-Дидеоксистрептамин 0,62 б) 6-Деоксинеомицин сульфат.

6"Деоксинеомицин, полученный описанным путем, превращают в .его сульфат па реакции с эквивалентным количеством разбавленной серной кислоты.

/ 0 4 6-деоксинеомицин сульфата о

+43 (с = 1,0, вода). в) Структура 6-деоксинеомицина.

Структуру антибиотического соединения формулы 1 в виде свободного основания определяют сравнением с природным антибиотиком неомицином, который получают при инкубировании 2-деоксистрептамина в соответствующей среде. (6"Деоксинеомицин далее называют соединением Х ).

В результате метанолиза неомицина и соединения Х с помощью 104-ного раствора НС1 в метаноле в течение 2 ч в результате кипячения с обратным холодильником получают два основных продукта, один из которых соответствует метилнеобиосаминид и вырабатыва ется обоими веществами.

Другой продукт, который далее Raзывают Z, .различен для двух антибио" тиков, причем соединение Z иэ неомицина мигрирует в меньшей степени, чем продукт Z из соединения Х; при хроматографическом анализе при использовании в качестве элюента систе мы метанол/раствор гидроокиси аммониА в соотношении 4/1.

Подтверждение структуры каждого вещества 2 получают масспектрометричес» ким анализом пер".триметил" силильных производных.

Хотя молекулярные ионы получены не были, спектры соединения Е из нео- мицина и соединения Z из соединения Х были очень похожими за исключением тога, что два .пика из спектра первого соединения (m/å 343 и 460) были сдви нуты на 88 массовых единиц ниже у по- следнего соединения (m/е с 255 и 572) .

Это соответствует потере OS1(CH ) 3 и замещению водородом. .Таким образом, структура соединения Z иэ неомицина соответствует неамину, а структура 2 иэ соединения Х - 6"деоксинеамину.

Ацетилирование обоих соединений

2 в метаноле с последующим кислотным гидролиэом 3 н. раствором хлористо12

952109

11 водородной кислоты при нагревании с обратным хоаодильником в течение 10 ч, давало в каждом случае два основных продукта.

В результате бумажной хроматографии оказалось, что один из этих Rp0дуктов представляет одно и то же вещество в обоих случаях независимо от того, получают ли его из вещества соответствующего неомицину или из вещества Z, соответствующего соединению Х. Это соединение представляет собой 2,6-диамино-2,6-дидеокси-З-глю" козу. Другие два продукта, как было установлено хроматографическим ана- 1 лизом, идентичны 2-деоксистрептамину иэ неамина и 2,4-дидеоксистрептамину иэ деоксинеамина..

Эти результаты приводят к заключе- нию, что соединение X соответствует 1о б-деоксинеомицину. г) Разделение 6-деоксинеомицина на 6-деоксинеомицин В и 6-деоксинеомицин С.

6"Деоксинеомицин, полученный на стадии а разделяют на 6-деоксинеомицин В и 6"деоксинеомицин С путем .бумажной хроматографии при использовании в качестве растворителя смеси третбутанол/бутанол 6,5 н. раствор зо гидроокиси аммония/метанол в Эоотно" шении 3:16:6:1.

6"Деоксинеомицин В и 6-деоксинеомицин С разделяют на бумаге с испавьзованием описанного способа.

При использовании системы растворителей, представляющей собой метанол и гидроокись аммония в соотношении

4 к 1 на ЭИИ Ватманской хроматографической бумаге, значения Rg для б-де-,4 оксинеомицина В и С определяют по сравнению с соответствующими эпимерами неомицина и получают следующие результаты:

6-Деоксинеомицин В 0,29

6"Деоксинеомицин С 0,21 йеомицин В 0,25

Неомицин С 0,165

Пример 2. Получение 6-деоксипароиомицина и его эпимеров 1 и 11.

В колбе выращивают Streptomyces формы paramomycines ATCC 21484 в те" чение 2-3 дней, установив предварительно рН 7,5, в следующей среде, г:

Соевая мука

Гидролизат каэеина 0,25

СаСО3 0 5

Глюкоза 1 йа(:! 0,5

0,167

До объема

100 мл

Культуру встряхивают и поддерживают при 20 С в течение указанного промежутка времени. Затем 103 прививочного материала этой культуры добавляют в среду, идентичную описанной, но содержащую дополнительно 0,025 г

2,4-дидеоксистрептамин дигидрохлорида

Культуры инкубируют в Эрленмейровских колбах при 28-30 С и роторном встряхивателе при хорошей аэрации, Последующие операции по получению и разделению 6-деоксипаромомицина в точности такие, как описаны в примере 1.

Очистка бумажной хроматографией при тех же условиях, что описаны в примере 1, показывает, что к для

6.-деоксипаромомицина составляет 0,30.

Для сравнения можно отметить, что для паромомицина, определенное таким же хроматографическим анализом, составляет 0,27.

При использовании системы раство рителей, состоящей из метанола и гидроокиси аммония в соотношении 4:1 на ЭИИ Ватманской хроматографической бумаге, определяют значения R g для

6"деоксипаромомицинов 1 и 11 в сравнении с соответствующими эпимерами паромвмицина и получают следующие результаты:

6"Деоксипаромомицин 1 0, 34

6-Деоксипаромомицин 11 0,275

Паромомицин 1 0,3

Паромомицин 11 0,22

t (Пример 3, Получение смеси

3,4 -дидеоксинеомицина и еro производных. а) Смесь гентаминов. Ее получают из выпускаемого промышленностью гентамицинсульфата. Эту соль вначале превращают в ее свободное основание и выпаривают с получением масла. Раствор соляной кислоты в метаноле, полученный добавлением хлористоводородной кислоты к сухому метанолу, добавляют к этому маслу и полученный в результате раствор нагревают с обратным холодильником в течение 2 ч. Иетаноль" ный раствор соляной кислоты удаляют в вакууме, а полученное в результате масло разбавляют небольшим количеством воды и пропускают через колонку с

Amberlite 1RA 400 с получением свободного основания желаемых гентаминов.

Полученные таким образом различные

Т а б л и ц а 1

Количество, требуемое для предотврвщения роста, мг/мл

Микроорганизм

Неоми- 6-Деокси Паромо- 6-Деоксицин неомицин мицин паромомицин

5,0 40

1+25 20

1,25 20

5,0 40

2,5 40

1,25

5,0

3,75

Shi ge1 l a sonne i

С631978

2,5 3,75

-2 в 5

2 5

5,0

13 9521 фракции собирают, выпаривают досуха, разделяют на метилгарозаминид и смешанные гентамины с помощью хроматографирования на силикагеле с использованием в качестве растворителя сме- си метанол /хлороформ f гидооокись аммония в соотношении 1:1:1. После такого хроматографического разделе" ния метилгарозаминид дает R 0,8, а смесь гентаминов 0,2. 0 б) Смесь 3,4 -дидеоксинеомицина и его производных, В колбе выращивают 0-Streptomyces

rimosus формы paramomycinus АТСС 21484 в течение двух-трех дней, предвари- l5 тельно установив рН 7,5, на следующей среде, г:

Соевая мука 1

Гидролизат казеина 0,25

СаСО 0,5 20

Глюкоза 1

МаС1 0 5

NHgC1 0,167

Культуру встряхивают и поддерживают при 28 С в течение указанного периг5 ода времени. Затем 104 прививочной материал этой культуры добавляют к среде, идентичной указвыной, содержа-..

Escherichia coli

W 3110 2,5

Proteus mirabi1is 5,0

Staphylococcus aureus 2,5

Sarcena lutea 2 5 2,5

Klebsiella edwardsii 7,5

Salmonella typhimurium LT2 5,0

09 14 щей дополнительно 50 мг смеси гентаминов и полученной заранее, устанавли- ., вая при этом рН 7,2.

Культуры инкубируют в Эрлеймейеров" ских колбах при 30 С на роторном встряхивателе при хорошей аэрации в тетечение 5 дней, )

Сырую смесь 3,4 -дидеоксинео)вцина я его производных, полученную таким образом, очищают бумажной хроматографией на ЭММ Ватманской бумаге, используя для проявления раствор метанол/гидроокись аммония в соотношении

4:l. Положение смеси 3,4 -дидеокси) с

) неомицина и его производных определяют визуально с использованием 0,2Qного раствора гипохлорита натрия в воде, затем абсолютного этанола и затем 13 растворимого крахмала и 13 иодида калия в воде при сушке воздухом между применением каждого из реагентов.

Rf смеси 3,,4 -дидеоксинеомицина и его производных составляет 0,25 (at смеси гентаминов формулы Ш при идентичном хроматографическом анализе. составляет 0,5-0,7) .

952109

Таблица 2

Количество, требуемое для предотвращения роста, мг/мл

Ми кроор гани зм

Неоми Неоми- Неомицин цин В . цин С

6-Деоксинеомицин

Escherichia col i

Bristol

2 5

2 5

Ptoteus mirabllis

Staphylococcus aureus 0,62 0,62

2 5

40

Salmonella typhi

2,5 2,5

5 20

Таблиц а 3

Зона ингибирования, мм, когда в питательный агар добавляют

Микроорганизм без добавок неамин смесь гентаминов формулы Ш

Escherich.iв col! РТ

Э

Escherichia coli

ML 1629

Escher chia coli

М1 1410

Escherichia coli

lR 66

rye R u R - различны и представляют

1 собой водород или -CH2 HH g выбиоают из группы, состоящей из

Формула изобретения

1. Способ получения производных аминогликозидаминоциклитола общей формулы (НО ион с

Р О

НН

HAN

Π---—

/..4

Н(1 Он

0,62 : 0,62

1,25

6-Деокси 6"Деоксинеомицин неомицин

В С

952109 18 дород, иги Х - ОН, У - группа, имеющая формулу R

5 где R - водород или метилрадикал, . или их Фармакологически приамлемыя кислотно-аддитивных солей, о т л ич а ю шийся тем, что деоксистреп, 10 тамин - отрицательный мутант микроор- ганизма Streptomyces культивируют при

28-30 С на питательной среде, содержащей источник углевода, источник ассимилируемого азота и микроэлементов в присутствии соединения фориулы 11

15 или его кислотно-аддитивные соли, где Х и У оба представляют собой во17

Ф где Rq - амино или оксигруппа;

К --СН-йИ или -СН-NHCH

Ъ 5 СИ "ã > где Rg имеет ЩУиведенные значения, причем деоксистрептамин - отрицатель" ный мутант Streptomyces представляет собой D"Streptomyces fradial АТСС 21401 или 0-Streptomyees гimosus вида para"

momycinus АТСС21484, если питательная среда содержит соединение формулы !i, в которой Х и У имеют одинаковые знач иения, и Р-Streptomyces rimosus вида

paramomycinus ATCC21484, если среда содержит соединение формулы Ii, i ко торой Х и У имеют различные значения, с последующим выделением целевого продукта в виде основания или в виде фармакологически приемлемой соли.

Источники информации, принятые во внимание приэакспертизе

1. Патент США Р 36б9838, кл. 195-29, опублик. 1972.

Составитель Г ° Коннова

Редактор Л. Алексеенко Техреду. Рейвес. Корректор " ° Дем4ик

Заказ 59о9/81 Тираж 385 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений ятоткрытий

Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная,