Устройство для выявления белковых фракций

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

Союз Советскик

Социалистических

Республик

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. сеид-ву— (22) Заявлено 13.08 ° 80 (21) 2970913/28 13 t5$) М. Кл.3 с присоединением заявки ¹A 61 В 10/00

Государственный комитет

СССР ио делам изобретений и открытий (23) Приоритет,—

Опубликовано 230882. Бюллетень ¹31

Дата опубликован".я описания 230882 (531 УДК 616-089. .23(088.8) (72) Автор изобретения

Г.С.Попик

Одесский научно-исследовательский инсти Ят"., курортологии (71) Заявитель (54) УСТРОЙстВО,Цля ВЫНВЛения БелкОВЫХ

ФРАКЦИЙ

Изобретение относится к медицинской технике, предназначено для разделения белков и выявления белковых фракций методом электрофореза в агаровом геле, может применяться в общеклинических и биохимических лабораториях.

Наиболее близким к изобретению по технической сущности является устройство для выявления белковых фракций, содержащее камеру с ваннами для буферного электрофоретического раствора, соединенными электродами с блоком питания, и приспособление для размещения белков на агаре.

Приспособление для размещения белков на агаре в известном устройстве представляет собой предметные стекла (1).

В этом устройстве существенными недостатками являются необходимость проведения электрофореза белков на поддерживающих стеклянных предметных пластинках, покрытых агар-агаром, большая трудоемкость подготовки предметных стекол для проведения электрофореза белков, большая трудоемкость обработки предметных стекол .после проведения электрофореза, невозможность окрашивания полученных образцов на рамке для разделения белков.

Целью изобретения является ускорение выявления фракций и уменьшение расхода агара.

Для достижения этой цели в устройстве для выявления белковых Фракций, содержащем камеру с ваннами для буферного электролитического раствора, соединенными электродами с блоками питания, и приспособление для размещения белков, последнее представляет собой прямдугольную кювету, на дне которой с внутренней стороны выполнены продольные и поперечные бороздки для разделения его на секции, размеры которых соответствуют площади, занимаемой фракциями белка при разделении его в электростатическом поле.

На фиг.1 представлено устройство для выявления белковых фракций; на фиг.2 — то же, вид сверху; на фиг.3приспособление для размещения белков на агаре; на фиг.4 — разрез А-A на фиг. 3.

Устройство для выявления белковых фракций содержит камеру, состоящую из прямоугольного основания 1 с бортиками 2, на котором по обе стороны

952219 установлены две подвижные ванны 3.

Каждая ванна 3 разделена на два отсека перегородкой 4, не доходящей до дна, нижний конец которой погружен в углубление, ограниченное перегородками 5 и заполненное агаром. В ваннах 5

3 установлены электроды 6, соединенные с источником питаиия. На боковых сторонах 7 ванн 3, обращенных друг к другу, имеются вырезы 8, которые расположены в верхней части и одина- lO ково удалены от краев этих сторон.

В этих вырезах 8 установлено приспособление для размещения белков на агаре, которое представляет собой, прямоугольную кювету 9, на плоском дне которой с внутренней стороны выпол,нены пересекающиеся под прямым углом продольные и поперечные бороздки соответственно 10 и 11 для разделения его на секции 12.

Глубина бороздок 1,0-1,5 мм, ширина 1,0-1,5 мм. Размеры секций 12 соответствуют площади, занимаемой фракциями белка при разделении его в электростатическом поле. Кювета с помощью бумажного мостика соединяется с электрофоретическими ваннами 3..

Устройство снабжено зажимным прчспособлением в виде болта 13 с гай-, 30 кой 14.

Устройство работает следующим образом.

Электрофоретические ванны 3 заполняют буферным раствором до необ — 5 ходимого уровня. Поверхность кюветы

9 заливают расплавленным 1%-ным агаром, температура 50-52 С. После застывания агара по середине каждого матричного поля штампом пробивают лунку. В.каждую лунку вводят 0,02 мл исследуемого белка. Торцовые стороны слоя агара в прямоугольной кювете соединяют при помощи бумажного мостика с буферным раствором, находящим"ся в ваннах. Электрофоретические ван-ны 3 закрываются крышкой. Кювета 9 также закрывается крышкой, которая плотно прилегает к стенкам ванн 3 .

Помещенная под крышку кюветы 9 фильтровальная бумага препятствует попа- 5О данию испаряющегося буфера на поверхность агара. Буферные растворы соединяют посредством электродов с источником питания, напряжением 220210 В. Длительность разделения бел- 55 ков 2,0-2,5 ч. После окончания разI деления на фракции исследуемых образцов белка выключают источник питания и извлекают кювету 9. Окрашивание агаровой пленки проводят в кювете по всей плоскости инкубационным раствором в условиях термостата при 37-38ОС, длительностью 120130 мин. По окончании окрашивания агаровая пленка в кювете 9 промывается дистиллированной водой в течение

60-65 мин, скальпелем пленка агара разрезается по бороздам кюветы и затем полоски агара погружают в 4%-ный раствор уксусной кислоты на 3 ч. Затем полоски агаровой пленки помещают на стекло и высушивают в сушильном шкафу при 50-52оС в течение 2 ч. Готовые агаровые пленки, содержащие разделенные белковые фракции, могут исследоваться на денситомере и долго храниться.

Преимущества предлагаемого устройства заключаются в уменьшении сроков исследования с 45-48 ч до 10-12 ч, уменьшается брак агаровых пленок, который наблюдается в известном устройстве из-за деформации агарового покрытия предметных стекол, уменьшается расход агара с 2,3-2,5 г на одно исследование при известном устройстве до 0,04-0,05 г.

Формула и з обретения

Устройство для выявления белковых фракций, содержащее камеру с ваннами для буферного электролитического раствора, соединенными электродами с блоками питания, и приспособление для размещения белков на агаре, о тл и ч а ю щ е е с я тем, что, с целью ускорения выявления фракций и уменьшения расхода агара, приспособление для размещения белков представляет собой прямоугольную кювету, на дне которой с внутренней стороны выполнены продольные и поперечные бороздки для разделения его на секции, размеры которых соответствуют площади, занимаемой фракциями белка при разделении его в электростати" ческом поле.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Прибор для электрофореза ПЭФ-3 изготавливаемый Фрунзенским заводом медаппаратуры Паспорт Я1 11.540.016, заводской номер 4875, 1977.

952219

Фиа1

Фиг. 3

ФАР

ВНИИПИ Закаэ 6001/б

Тираж 714 Подписное

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная,4