Способ количественного определения глауцина гидрохлорида
Союз Соватскин
Социалистических
Республик
3Ъеударстынный камнтвт
СССР но двлак нзобрвтвннй
v дтвймтнн (72) Авторы изобретения
А. А. Хабаров и Л. П. Хабарова
Курский государственный медицинский институт (71) Заявитель (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ KOHUEHTPAUHH ГЛАУБИНА
ГИДРОХЛОРИЙА
Изобретение относится к аналитической химии, Известен способ определения глауцина гидрохлорида в порошке, заключающийся в том, что измеряют поглощение в ульт5 рафиолетовой области при длине волны
300 нм и по величине оптической плот, ности вычисляют содержание глауцина ., гидрохлорида в порошке (1 ).
Однако известный способ обладает не- о достаточной избирательной способностью для определения его в биологическом материале, Наиболее близким к предлагаемому является способ определения концентра ции глауцина гидрохлорида в биологическом материале,включающий извлечение его иэ пробы и спектральное измерение j2).
Однако чувствительность известно- 20 го способа низкая и составляет всего
20 мкг/мл.
Бель изобретения - повышение чувствительности способа.
Поставленная цель достигается тем, что прн осуществлении способа определения концентрации глауцина гидрохлорида в биологическом материале, включающего извлечение его из пробы и спектральное измерение, пробу обрабатывают
40-60%-ным раствором серной кислоты и 5-10%-ным раствором перманганата калия, далее добавляют 30%-ный раствор перекиси водорода, измеряют флуоресценцию полученного раствора при длине волны 476 нм с длиной волны возбуждающего света 361 нм и по величине интенсивности флуоресценции определяют концентрацию глауцина в пробе.
Пример 1. Определение глауцина гидрохлорида в таблетках по 0,05 г.
Точную навеску (0,05) порошка мелко измельченной таблетки помешают в мерную колбу на 100 мл, прибавляют
60-70 мл дистиллированной воды и встряхивают 3-5 мин. Затем дистиллированной водой доводят до метки. К 1 мл данного раствора прибавляют 8,8 мл дистиллиро3 9780 ванной воды, 0,1 мл 50%-ного,мствора серной киспоты, 0,05 мл 5%-ного раствора перманганата калия, перемешивают и прибавляют через 2 мин 0„05 мл 30%ного раствора перекиси водорода и перемешивают. Интенсивность флуоресценции испытуемых образцов измеряют по отношению к стандартному раствору глауцина гидрохлорида с содержанием его 20мкг/мп,, для чего к 8,8 мл стандартного раство-, Пример 2. Определение глауцина гидрокпорида в крови и моче. 20 К 1 мл мочи или плазмы крови прибавляют 2 мл буферного раствора с рН 10,65-1 1,05 мл бензола, перемешивают в течение 5 мин, центрифугируют 3 мин при 3000 об/мин. Бензольный слой сливают в выпаривательпую чашку,экстрагирование повторяют. Бензол выпаривают на водяной бане досуха. К остатку прибавляют 9,8 мл дистиллированной воды, 0,1 мл 50%-ного раствора серной кислоты,0,05 мл 3 10%-ного раствора перманганата калия, перемешивают, через 2 мин прибавляют . 0,05 мл 30%-ного раствора перекиси so-, дорода, перемешивают и флуориметрируют по отношению и стандартным pBcTBopGM 35 с содержанием 1,5 мл или 10 мкг/мл глауцина гидрохлорида, к 9,8 мл которых прибаьпяют 0,1 мл 50%-ного раствора серной кислоты, 0,05 мл 10%-ного раст- вора перманганата калия, перемешивают 40 и фпуориметрируют одновременно с иссле-„ луемыми растворами. В табл, 1 приведена зависимость интенсивности фпуоресценции глауцина гидрохлорида от концентрации перманганата 45 калия, В табл. 2 приведена зависимость интенсивности фпуоресценции глауцина гидрохлорида с перманганатом калия от концентрации серной кислоты. В табл. 3 приведена зависимость интенсивности фпуоресценции глауцина гидрохлорида с перманганатом калия в сернокислой среде от времени добавления перекиси водорода 45 4 В табл. 5 приведены результаты фпуориметрического определения глауцйна гкд рохлорида в таблетках по 0,05 r Предлагаемый способ ь 80 раз чувствительнее известного, что дает возможность определять глауцин гидрохпорид в биологическом материале. Таблица 1 Концентрация раствора перманганата калия, % Относительная интенcBBHocTb фпу эре цен ции 0,1 38 0,5 3,0 5,0 lO,0 Таблица 2 0,05 0,10 87 0,20 0,25 Таблица3 84 90 120 В табл. 4 приведена зависимость интенсивности фпуоресценции от концентрации глауцина гидрохлорида 180 978045 10 10 10 10 10 19 18 18 10 27 27 36 0,2 0,02 0,03 О,Э 0,4 19 35 35 0,04 43 28 44 0,05 37 53 52 45 61 60 53 69 68 81 78 76 70 86 . 84 0,06 0,6 0,07 0,7 0,08 0,8 0909 0,9 09 10 1,0 59 60 10 50 Х 0,0499 ** 16-10 4 0,77 0,78 0,82 0,90 0,93 0,97 0,99 0,96 0,97 001 0,11 0,0312 0,0325 0,0327 0,0329. 0,0353 0,0357 0,0368 0,0372 0,0374 0,0376 Э 15 4 20 5 25 6 30 7 35 8 40 9 45 0,048 1 0,0469 0,0490 0,0503 0,0496 0,0507 0,051 3 0,0525 0,0503 0,0502 Таблица 4 Та бли ца 5 Е - 10 10 4 I а 0,0499+ 11 10 7 9780 Формула изобретения Способ определения концентрации гла уцина гидрохлорида в биологическом материаде, включающий извлечение его из З пробы и спектральное измерение, о та и ч а ю шийся тем, что, с цельк повышения чувствительности способа, пробу обрабатывают 40-60%-ным раствором серн< и кислоты и 5-10%-ным раствором 10 перманганата калия, дадее добавляют 30%-ный раствор перекиси водорода, измеряют флуоресценцию полученного раствора при дпине волны 476 нм с длиной 45 8 волны возбуждающего света 361 нм, и по вепичине интенсивности флуоресценций определяют концентрацию глауцина в пробе. Источники информации принятые во внимание при экспертизе 1. Маслова Т, A. Спектрофотометрический метод определения гидрокиори-да глауцина. — "Фармацея, 1974, 23., N 6, с. 54-55. 2. Методика количественного определения глауцина в траве мачка желтого, -=, "Фармацея", 1974. 14 4, с. 68, Составитель; С. Малютина Редактор H. Стащишина Техред E.Хааритончик Корректор Г. Огар Заказ 9206/59 Тираж 887 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5 Филиал ППП Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4
