Патенты автора Мартынов Александр Игоревич (RU)

Изобретение относится к области биохимии, генной инженерии и биотехнологии, в частности к способу получения конъюгата рекомбинантного аналога интерферона бета 1b с полимером олигосахаридной природы. Настоящий способ включает получение рекомбинатного аналога интерферона бета 1b, соединенного с белком-стабилизатором тиоредоксином через сайт расщепления энтерокиназой, хроматографическую очистку полученного аналога, его конъюгацию с полимером олигосахаридной природы, гидролиз ферментом энтерокиназой, выделение полученного конъюгата и его очистку. Указанный способ отличается тем, что полимером олигосахаридной природы является D3000-7(Sa-Sp)-(Sp-M), в котором D3000 - диальдегид декстран, (Sa-Sp) - Neu5Ac-Lactose-N(CH)-CH(2)-CH(2)-NH(2), (Sp-M) - малеимид-CH(2)-NH(2), и рекомбинатный аналог интерферона бета 1b оптимизирован для экспрессии в клетках Е. coli. Настоящее изобретение позволяет получать конъюгат рекомбинантного аналога интерферона бета 1b с полимером олигосахаридной природы с высоким выходом. 12 ил., 7 пр.

Предложенное изобретение относится к области биотехнологии. Предложен способ получения гибридного белка на основе рекомбинантного аналога интерферона гамма, обладающего противовирусной активностью. Предложенный способ включает конъюгацию рекомбинантного аналога интерферона гамма, представленного последовательностью SEQ ID NO: 1, с полимером олигосахаридной природы D3000-7(Sa-Sp)-(Sp-M), имеющим строение, представленное на фиг. 8, где D3000 - диальдегид декстран, (Sa-Sp) - Neu5Ac-Lactose-N(CH)-CH(2)-CH(2)-NH(2), (Sp-M) - Малеимид-СН(2)-NH(2), очистку полученного конъюгированного рекомбинантного белка аналога интерферона гамма от неконъюгированных компонентов методами HPLC с гельфильтрационным сорбентом Sephacryl S400 с выходом конечного продукта, содержащего примеси не более 1,2% от общей массы продукта. 16 ил., 2 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к способу очистки рекомбинантного белка - аналога интерферона альфа-17, представленного последовательностью SEQ ID NO: 1. Получают растворимую фракцию слитого рекомбинантного белка с белком стабилизатором тиоредоксином из штамма-продуцента Escherichia coli BL21(DE3), трансфицированного плазмидной ДНК рЕТ-32а, несущей ген, представленный последовательностью SEQ ID NO 2. Осуществляют хроматографическую очистку на металл-аффинном сорбенте с применением Ni-Sepharose. Далее проводят гидролиз слитого рекомбинантного белка ферментом энтерокиназой, инкубируя 1 час при 37°C. Осуществляют денатурацию примесей при нагревании до 64°C в течение 60 мин. Проводят FPLC очистку на ионообменном сорбенте SP-Sepharose и обратнофазовую HPLC очистку целевого рекомбинантного белка на колонке Superdex 75. Изобретение позволяет значительно обогатить целевой продукт, приводит к его однородности и хроматографической чистоте более 99%. 15 ил., 6 пр.

Изобретение относится к биотехнологии и медицине, а именно к способу выделения рекомбинантного белка, содержащего в своем составе последовательности миелопептидов и представленного последовательностью SEQ ID NO:1. Плазмидной ДНК pET-32a/REC-MP, несущей ген, представленный последовательностью SEQ ID NO:2, трансформируют компетентные бактериальные клетки штамма Escherichia coli BL21(DE3) для получения растворимой фракции слитого белка тиоредоксин/REC-MP. Далее на металл-аффинном сорбенте с применением носителя Ni-Sepharose осуществляют очистку слитого белка. Затем слитый белок гидролизуют ферментом энтерокиназой-F, инкубируя 1 час при 37°С. Осуществляют денатурацию примесей при нагревании до 74°С в течение 60 мин. Осуществляют FPLC очистку целевого рекомбинантного белка на ионообменном сорбенте с носителем SP-Sepharose и обратнофазовую HPLC очистку на колонке Kromasil 100С18. Изобретение позволяет повысить экспрессию целевого белка до 60-80% от общего объема клеточного лизата, а также повысить эффективность очистки белка, приводящей к однородности и практически к 100% хроматографической чистоте получаемого продукта. 10 ил., 3 табл., 6 пр.

Изобретение относится к области медицины, в частности к иммунологии и молекулярной биологии, и предназначено для лечения аллергий. Предложен способ получения молекулярных конструкций, обладающих иммунорегуляторными свойствами, содержащих антигенные эпитопы актуальных аллергенов и сигнальный пептид орнитиндекарбоксилаза (ODCsig). Осуществляют получение гена, кодирующего белок-аллерген с помощью клонирования, отбор последовательностей ODCsig, клонирование ДНК-последовательностей, кодирующих сигнальные пептиды ODCsig, создание химерного гена и ДНК-конструкций для экспрессии химерных белков-аллергенов в бактериальных клетках. Изобретение обеспечивает специфическую иммунотерапию пациентов с аллергией. 10 ил., 2 табл., 15 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к рекомбинантному получению белков человека, и может быть использовано для получения рекомбинантного белка аналога интерферона альфа-17. Нуклеотидная последовательность, кодирующая рекомбинантный белок - аналог интерферона альфа-17, оптимизирована для экспрессии в клетках Е. coli за счет использования кодонов, оптимальных для данной бактерии. Нуклеотидная последовательность клонирована в плазмиды рЕТ30а и рЕТ32а, которые использованы для получения штаммов-продуцентов Е. coli. Изобретение позволяет экспрессировать с эффективностью более 50% аналог интерферона альфа-17 с активностью в системе MDBK/VSV 2,1*109 Ед/мкмоль. 3 н.п. ф-лы, 6 ил., 3 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к рекомбинантному получению интерферонов, и может быть использовано для получения рекомбинантного белка - аналога интерферона бета. Нуклеотидная последовательность, кодирующая рекомбинантный белок - аналог интерферона бета, оптимизирована для экспрессии в клетках Е. coli. Клетку Е. coli BL-30-B, предназначенную для продукции рекомбинантного белка интерферона бета, получают путем трансформации клеток E. coli BL(DE3) плазмидой рЕТ30а, содержащей указанную нуклеиновую кислоту. Клетку Е. coli BL-32-B, предназначенную для продукции рекомбинантного белка интерферона бета, получают путем трансформации клеток E. coli BL(DE3) плазмидой рЕТ32а, содержащей указанную нуклеиновую кислоту. Изобретение позволяет получить рекомбинантный белок - аналог интерферона бета с биологической активностью 1,8⋅109 Ед/мкмоль в системе A549/VSV. 3 н.п. ф-лы, 5 ил., 9 табл., 9 пр.

Изобретение относится к медицине, в частности к иммунологии, и может использоваться для прогнозирования характера течения хронического рецидивирующего афтозного стоматита путем оценки мукозального иммунитета. Способ включает определение бактерицидной активности образца слюны (БАС) методом проточной цитофлюориметрии. При значениях БАС равных 65,7% и выше прогнозируют течение заболевания как благоприятное, а при величине БАС равной 37,0% и ниже - как течение, осложненное эрозиями слизистой оболочки рта. Изобретение дает возможность выявления группы стоматологических пациентов с предрасположенностью к осложнениям эрозиями слизистой оболочки рта при хроническом рецидивирующем афтозном стоматите. 2 табл., 1 пр., 1 ил.

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для прогнозирования развития аллергического ринита. Для этого проводят оценку экспрессии генов дифференцировочных факторов субпопуляций Т-хелперов: Tbet, GATA3, RORC. Рассчитывают величину 2-ΔΔCt по формуле: , где 2-ΔΔCt - суммарный уровень экспрессии соответствующих генов в изучаемой фракции мононуклеаров, Ctк - номер порогового цикла в контроле, Cto - номер порогового цикла в опыте, В2М - ген β2-микроглобулина, Х - исследуемый ген, при значениях для Tbet, равных 2,56 и ниже, для GATA3, равных 8,92 и более, для RORC, равных 3,72 и более, прогнозируют развитие аллергического ринита. Использование данного способа позволяет прогнозировать развитие аллергического ринита под влияниям компонентов вредных производственных факторов и природных пыльцевых аллергенов. 1 ил., 4 табл., 5 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к аллергологии и иммунологии, и может быть использовано при дифференциальной диагностике гиперреактивности (ГР) к яду пчел. Для этого выявляют в анамнезе пациента контакта с пчелой Apis mellifera. Определяют уровень общего IgE, уровень специфичного IgE к яду пчелы, гистамина, лейкотриенов, базальной триптазы, экспрессии CD63+ и CD203c при контакте базофилов крови с аллергенами яда пчелы, гистамина, лейкотриенов. При наличии в анамнезе контакта с пчелой Apis mellifera с последующими реакциями различной степени тяжести, уровне общего IgE более 100 МЕ/мл, уровне специфических IgE более 0,7 МЕ/мл, CD63+ более 10%, CD203c более 10%, уровне лейкотриенов более 200 пкг/мл, уровне гистаминолиберации от 10±3,2% до 50±5,3%, повышенном уровне базальной триптазы диагностируют IgE-опосредованную реакцию. При наличии в анамнезе контакта с пчелой Apis mellifera с последующими реакциями различной степени тяжести, уровне общего IgE менее 100 МЕ/мл, уровне специфических IgE менее 0,7 МЕ/мл, CD63+ менее 10%, CD203c более 10%, уровне лейкотриенов менее 200 пкг/мл, уровне гистаминолиберации до 15%, нормальном уровне базальной триптазы диагностируют не IgE-опосредованную реакцию. Разработанный комплексный метод позволяет осуществить дифдиагностику истинных и псевдоаллергических реакций на яд пчел, что в последующем позволит назначить адекватное специфическое лечение с учетом формирования блокирующих (защитных) антител. 2 пр., 3 табл.

Изобретение относится к области медицины, а именно к аллергологии и иммунологии, и может быть использовано при дифференциальной диагностике гиперреактивности (ГР) к яду пчел. Для этого выявляют в анамнезе пациента контакта с пчелой Apis mellifera. Определяют уровень общего IgE, уровень специфичного IgE к яду пчелы, гистамина, лейкотриенов, базальной триптазы, экспрессии CD63+ и CD203c при контакте базофилов крови с аллергенами яда пчелы, гистамина, лейкотриенов. При наличии в анамнезе контакта с пчелой Apis mellifera с последующими реакциями различной степени тяжести, уровне общего IgE более 100 МЕ/мл, уровне специфических IgE более 0,7 МЕ/мл, CD63+ более 10%, CD203c более 10%, уровне лейкотриенов более 200 пкг/мл, уровне гистаминолиберации от 10±3,2% до 50±5,3%, повышенном уровне базальной триптазы диагностируют IgE-опосредованную реакцию. При наличии в анамнезе контакта с пчелой Apis mellifera с последующими реакциями различной степени тяжести, уровне общего IgE менее 100 МЕ/мл, уровне специфических IgE менее 0,7 МЕ/мл, CD63+ менее 10%, CD203c более 10%, уровне лейкотриенов менее 200 пкг/мл, уровне гистаминолиберации до 15%, нормальном уровне базальной триптазы диагностируют не IgE-опосредованную реакцию. Разработанный комплексный метод позволяет осуществить дифдиагностику истинных и псевдоаллергических реакций на яд пчел, что в последующем позволит назначить адекватное специфическое лечение с учетом формирования блокирующих (защитных) антител. 2 пр., 3 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к способу получения рекомбинантного биологически активного пептида на основе пептидов, входящих в состав миелопида. Представленный способ включает трансфекцию клеток Escherichia coli BL21 (DE3) плазмидной ДНК рЕТ30а, несущей ген, представленный последовательностью ATGGGTCGTGGCTTCTTAGGCTTTCCAACTGGCCGTGGTCTGGTGGTGTATCCATGGGGTCGTGGTCTGGTGTGCTATCCGCAAGGTCGTGGCTTCCGTCCACGCATCATGACTCCAGGCCGCGGCTTTCTGGGCTTCCCGACCACTGGTCGTCTCGTTGTGTACCCGTGGACCGGCCGCCTGGTTTGTTACCCACAGACGGGTCGCTTTCGCCCGCGTATTATGACGCCGTAA, кодирующий рекомбинантный белок, культивирование полученного штамма с индукцией экспрессии белка добавлением IPTG, лизирование, включающее обработку клеток ультразвуковым дезинтегратором с получением супернатанта, очистку супернатанта на Q-Sepharose и SP-Sepharose, объединение фракций, содержащих целевой продукт. Предложенный способ может быть использован при производстве и применении лекарственных субстанций на основе смеси биологически активных пептидов. 5 ил., 2 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к получению рекомбинантного белка, содержащего в своем составе последовательности миелопептидов, и может быть использовано для лечения вторичных иммунодефицитов. Рекомбинантный белок (REC-MP) конструируют чередованием коротких активных миелопептидов МП-1 (FLGFPT), МП-2 (LVVYPW), МП-3 (LVCYPQ) и МП-4 (FRPRMTP), перемежающихся сайтами распознавания тромбином и урокиназой. Изобретение позволяет повысить эффективность лечения вторичных иммунодефицитов путем более выраженной стимуляции антителообразования, увеличения количества В-лимфоцитов, экспрессирующих на своей поверхности CD25 и CD69. 4 з.п. ф-лы, 4 ил., 2 табл., 6 пр.

Изобретение относится к медицинской технике, а именно к средствам инструментальных методов медицинских исследований, и может быть использовано для контроля дыхательных функций организма. Технический результат, достигаемый изобретением, заключается в получении достоверных количественных измерений. Устройство для определения влажности и температуры выдыхаемого человеком воздуха содержит термостат определенного внутреннего объема с автоматическим поддержанием заданной внутренней температуры, связанную с термостатом камеру переменного калиброванного объема выдыхаемого человеком воздуха, расположенную внутри термостата двухклапанную камеру и размещенный внутри нее датчик измерения температуры, размещенный в термостате датчик влажности воздуха, установленные в термостате клапаны и вентилятор для быстрого перемешивания внутреннего и поступающего в него выдыхаемого человеком воздуха, при этом датчики измерения температуры и влажности связаны с регистрирующим блоком и блоком обработки информации. 9 ил.

Изобретение относится к области медицины, а именно к иммунологии и аллергологии, и может быть использовано для лечения аллергии к клещам домашней пыли. Для этого получают аллерготропин методом химической конъюгации аллергоида и синтетического высокомолекулярного иммуномодулятора - Полиоксидония. Алерготропин содержит 1000±200 PNU аллергоида клещей домашней пыли Dermatophagoides pteronyssinus или Dermatophagoides farinae и 6,25±1,25 мг Полиоксидония. Получение аллерготропинов на основе аллергоидных форм аллергенов клещей домашней пыли Dermatophagoides pteronyssinus и Dermatophagoides farina, обладающих, по сравнению с нативным аллергеном, более выраженными иммуногенными и гипосенсибилизирующими свойствами, позволяет провести эффективное лечение аллергии методом АСИТ. 2 пр., 2 табл., 2 ил.

Изобретение относится к комплексному инъекционному препарату для лечения поллинозов методом АСИТ. Указанный препарат получают путем простого смешивания аллергоида пыльцы березы и мурамилпептида без проведения химической конъюгации составляющих, причем на дозу в 1000 PNU аллергоида добавляют 2 мг мурамилпептида. Заявленное изобретение обеспечивает значительное усиление иммунного ответа и стимулирует высокий уровень выработки специфических IgG-антител, а также позволяет сократить курс лечения поллинозов, что уменьшает возможность осложнений. 1 ил., 2 табл.

Группа изобретений относится к медицине. Способ регистрации заключается в том, что устанавливают в зоне измерений датчик, содержащий чувствительный элемент с нанесенным на него сорбирующим слоем, при этом в качестве чувствительного элемента датчика используют вещество, способное обратимо сорбировать и десорбировать вещества внешней среды, в процессе измерения производят периодические импульсные циклические воздействия источником энергии на чувствительный элемент с нанесенным на него сорбирующим слоем для принудительного изменения его термодинамических параметров, изменяя с заданной частотой термодинамические параметры датчика и локальную температуру поверхности датчика, регистрируют изменение электрического напряжения на нем, по полученным данным определяют коэффициент, характеризующий изменение энергетического показателя живого организма. Устройство для регистрации состоит из держателя, закрепленного на нем датчика, в свою очередь содержащего чувствительный элемент с предварительно обработанной тлеющим разрядом в вакууме рабочей поверхностью и нанесенным на нее сорбирующим слоем, связанный с датчиком преобразователь для перевода сигналов датчика в измеряемое изменение электрического напряжения, регистратор, источник энергии и связанный с ним генератор периодических импульсных сигналов, служащие для принудительного воздействия и изменения термодинамических параметров датчика. В части способа изготовления чувствительного элемента датчика, для придания адгезионных свойств рабочей поверхности чувствительного элемента ее предварительно обрабатывают тлеющим разрядом в вакууме, затем чувствительный элемент помещают в коллоидный раствор веществ, образующих сорбирующий слой, после чего производят осаждение, например, центрифугированием, для создания сорбирующего слоя, затем производят термическую обработку чувствительного элемента с нанесенным на него сорбирующим слоем для закрепления последнего на рабочей поверхности чувствительного элемента, после чего проводят контроль толщины и качества получаемого сорбирующего слоя методами оптической и электронной микроскопии. В части второго варианта способа изготовления чувствительного элемента датчика, для придания адгезионных свойств рабочей поверхности чувствительного элемента ее предварительно обрабатывают тлеющим разрядом в вакууме, затем наносят на нее слой гелеобразных веществ, образующих сорбирующий слой, затем производят быструю полимеризацию в парах кислот и высушивают, после чего проводят контроль толщины и качества получаемого сорбирующего слоя методами оптической и электронной микроскопии. Группа изобретений позволяет прогнозировать изменения общего состояния биологического объекта. 4 н. и 1 з.п. ф-лы, 2 ил.

Группа изобретений относится к медицине. Способ регистрации заключается в том, что устанавливают в зоне измерений датчик, содержащий чувствительный элемент с нанесенным на него сорбирующим слоем, при этом в качестве чувствительного элемента датчика используют вещество, способное обратимо сорбировать и десорбировать вещества внешней среды, в процессе измерения производят периодические импульсные циклические воздействия источником энергии на чувствительный элемент с нанесенным на него сорбирующим слоем для принудительного изменения его термодинамических параметров, изменяя с заданной частотой термодинамические параметры датчика и локальную температуру поверхности датчика, регистрируют изменение электрического напряжения на нем, по полученным данным определяют коэффициент, характеризующий изменение энергетического показателя живого организма. Устройство для регистрации состоит из держателя, закрепленного на нем датчика, в свою очередь содержащего чувствительный элемент с предварительно обработанной тлеющим разрядом в вакууме рабочей поверхностью и нанесенным на нее сорбирующим слоем, связанный с датчиком преобразователь для перевода сигналов датчика в измеряемое изменение электрического напряжения, регистратор, источник энергии и связанный с ним генератор периодических импульсных сигналов, служащие для принудительного воздействия и изменения термодинамических параметров датчика. В части способа изготовления чувствительного элемента датчика, для придания адгезионных свойств рабочей поверхности чувствительного элемента ее предварительно обрабатывают тлеющим разрядом в вакууме, затем чувствительный элемент помещают в коллоидный раствор веществ, образующих сорбирующий слой, после чего производят осаждение, например, центрифугированием, для создания сорбирующего слоя, затем производят термическую обработку чувствительного элемента с нанесенным на него сорбирующим слоем для закрепления последнего на рабочей поверхности чувствительного элемента, после чего проводят контроль толщины и качества получаемого сорбирующего слоя методами оптической и электронной микроскопии. В части второго варианта способа изготовления чувствительного элемента датчика, для придания адгезионных свойств рабочей поверхности чувствительного элемента ее предварительно обрабатывают тлеющим разрядом в вакууме, затем наносят на нее слой гелеобразных веществ, образующих сорбирующий слой, затем производят быструю полимеризацию в парах кислот и высушивают, после чего проводят контроль толщины и качества получаемого сорбирующего слоя методами оптической и электронной микроскопии. Группа изобретений позволяет прогнозировать изменения общего состояния биологического объекта. 4 н. и 1 з.п. ф-лы, 2 ил.

Группа изобретений относится к медицине. Способ регистрации заключается в том, что устанавливают в зоне измерений датчик, содержащий чувствительный элемент с нанесенным на него сорбирующим слоем, при этом в качестве чувствительного элемента датчика используют вещество, способное обратимо сорбировать и десорбировать вещества внешней среды, в процессе измерения производят периодические импульсные циклические воздействия источником энергии на чувствительный элемент с нанесенным на него сорбирующим слоем для принудительного изменения его термодинамических параметров, изменяя с заданной частотой термодинамические параметры датчика и локальную температуру поверхности датчика, регистрируют изменение электрического напряжения на нем, по полученным данным определяют коэффициент, характеризующий изменение энергетического показателя живого организма. Устройство для регистрации состоит из держателя, закрепленного на нем датчика, в свою очередь содержащего чувствительный элемент с предварительно обработанной тлеющим разрядом в вакууме рабочей поверхностью и нанесенным на нее сорбирующим слоем, связанный с датчиком преобразователь для перевода сигналов датчика в измеряемое изменение электрического напряжения, регистратор, источник энергии и связанный с ним генератор периодических импульсных сигналов, служащие для принудительного воздействия и изменения термодинамических параметров датчика. В части способа изготовления чувствительного элемента датчика, для придания адгезионных свойств рабочей поверхности чувствительного элемента ее предварительно обрабатывают тлеющим разрядом в вакууме, затем чувствительный элемент помещают в коллоидный раствор веществ, образующих сорбирующий слой, после чего производят осаждение, например, центрифугированием, для создания сорбирующего слоя, затем производят термическую обработку чувствительного элемента с нанесенным на него сорбирующим слоем для закрепления последнего на рабочей поверхности чувствительного элемента, после чего проводят контроль толщины и качества получаемого сорбирующего слоя методами оптической и электронной микроскопии. В части второго варианта способа изготовления чувствительного элемента датчика, для придания адгезионных свойств рабочей поверхности чувствительного элемента ее предварительно обрабатывают тлеющим разрядом в вакууме, затем наносят на нее слой гелеобразных веществ, образующих сорбирующий слой, затем производят быструю полимеризацию в парах кислот и высушивают, после чего проводят контроль толщины и качества получаемого сорбирующего слоя методами оптической и электронной микроскопии. Группа изобретений позволяет прогнозировать изменения общего состояния биологического объекта. 4 н. и 1 з.п. ф-лы, 2 ил.

Изобретение относится к медицинской технике, а именно к устройствам для определения концентрации иммуноактивных объектов в пробах биологических жидкостей

Изобретение относится к медицинской технике и может быть использовано для экспресс-исследования биологических жидкостей с использованием реакции агглютинации иммуноактивных частиц
Мы будем признательны, если вы окажете нашему проекту финансовую поддержку!

 


Наверх